279 绵马鳞毛蕨中的山柰酚乙酰鼠李糖苷及其对HIV-1逆转录酶的作用

山柰酚对2型糖尿病小鼠骨骼肌PI3K-AKT-GLUT4信号通路的影响

目的:探讨山柰酚对KKAy小鼠骨骼肌PI3K/AKT/GLUT4信号通路的影响.方法:以自发型2型糖尿病KKAy小鼠为动物模型,通过对糖尿病小鼠进行为期6周的山柰酚灌胃给药治疗,利用生化、免疫组织化学及免疫印迹法等检验方法,检测PI3K-AKT-GLUT4信号通路重要靶点的表达,探讨山柰酚改善糖尿病KKAy小鼠骨骼肌胰岛素敏感性及对胰岛素信号转导通路PI3K-AKT-GLUT4的影响.结果:山柰酚具有显著降低KKAy小鼠体重、空腹血糖、随机血糖的作用,ITT实验结果说明:山柰酚能够显著降低胰岛素注射30 min时的血糖,显著降低ITT曲线下面积,改善胰岛素抵抗.此外,山柰酚能够显著上调KKAy小鼠骨骼肌PI3K、AKT、GLUT4基因的表达,能够上调AKT、GLUT4蛋白的表达.结论:山柰酚具有显著降低KKAy小鼠血糖、体重的作用,能够改善胰岛素抵抗,其作用机制可能与上调骨骼肌PI3K-AKT-GLUT4信号通路有关.

三七酚类成分特征图谱质量表征关联评价研究

采用HPLC-PDA法建立三七酚类成分特征图谱,筛选9个特征峰并通过相对保留时间表征其质量关联性,同时测定对羟基苯甲酸、槲皮素、山柰酚、异鼠李素含量,以对羟基苯甲酸为对照表征酚酸类含量,采用分光光度法测定三七中总酚含量,从而对三七酚类成分含量及其相对比值进行质量表征,然后对三七中各酚类成分含量进行关联分析,从而发现各成分含量的关联性、质量分布规律性,同时将不同批次的药材与经过药效验证的参比药材进行关联度分析,结合关联度分析,筛选出质量优佳三七药材;运用本方法可全面精确的控制和评价三七的质量.

山柰酚抵抗对乙酰氨基酚引起的肝细胞损伤研究

目的:探究山柰酚(KA)抵抗对乙酰氨基酚(APAP)诱导的肝细胞损伤的作用.方法:CCK-8法检测KA对肝细胞活性的影响,检测细胞LDH释放比率确定APAP诱导肝细胞损伤模型的浓度和时间;CCK-8法检测肝细胞活性,检测肝细胞释放的LDH,观察肝细胞形态评估KA对对乙酰氨基酚诱导肝细胞损伤的影响;Western Blot检测p-JNK、JNK、EndoG蛋白表达.结果:本研究采用5 mmol/L APAP诱导肝细胞24 h建立药物肝损伤细胞模型.与APAP组比较,KA组肝细胞细胞的形态明显改善,凋亡细胞明显减少(P<0.01),LDH释放比率明显下降(P<0.001),Western Blot结果表明经KA治疗后,肝p-JNK和Endo G蛋白表达明显下调.结论:该研究表明KA通过抑制p-JNK和Endo G来抵抗APAP诱导肝细胞凋亡以达到肝细胞的保护作用.

HPLC测定急性子中总黄酮的含量

目的:建立HPLC测定急性子中总黄酮含量的方法.方法:采用Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm)；流动相甲醇-0.4％磷酸水(55∶45),检测波长365 nm,柱温30℃,流速1.0 mL· min-1.结果:槲皮素、山柰酚、异鼠李素的线性范围分别为0.111 2～0.5560(r=0.9994),0.007 711 ～0.023 23(r =0.999 4),0.006 69～0.033 45 μg(r=0.999 2)；平均加样回收率分别为98.5％(RSD 1.3％,n=6),97.3％(RSD 1.7％,n=6),97.6％ (RSD 1.6％,n=6).结论:该方法准确度高,重复性好,可用于急性子中总黄酮的含量测定.

RP-HPLC同时测定不同产地路边青药材中4种活性成分的含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定路边青药材中咖啡酸、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-葡萄糖苷、山柰酚含量的方法.方法:采用Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.5％甲酸水溶液梯度洗脱,流速0.8 mL· min-1,柱温25℃,检测波长340 nm.结果:咖啡酸、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-葡萄糖苷、山柰酚分别在0.045～1.130,0.095 ～2.370,0.105 ～2.635,0.041 ～1.030 μg线性关系良好,平均加样回收率(n=6)分别为99.0％,98.5％,97.7％,100.7％,RSD分别为1.0％,0.9％,1.0％,1.6％.结论:该方法简便、快捷,重复性好,可用于路边青药材的质量控制.

HPLC测定小槐花药材中山柰酚的含量

目的:建立高效液相色谱法测定小槐花药材中山柰酚的含量的方法.方法:样品用甲醇-25％盐酸(4∶1)混合溶液回流提取1.5h,用Thermo BDS Hyped C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱分离,以乙腈-0.2％磷酸溶液(30∶70)为流动相,流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,检测波长368 nm,进样量10 μL,以外标法定量.结果:山奈酚进样量在18.94 ～ 189.4ng与峰面积值呈现良好的线性关系(r=0.999 6),平均回收率为105.5％,RSD 1.2％ (n =6).结论:该法操作简便,结果准确可靠,重复性及稳定性良好,可作为控制小槐花药材质量的方法.

UPLC-MS/MS同时测定谷红注射液中7种有效成分

目的:建立同时测定谷红注射液中乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素含量的方法.方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法.Phenomenex Kinetex C18色谱柱(2.1 mm ×50 mm,5μm),流动相乙腈-0.1％甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.5 mL·min-1;质谱采用正负离子同时监测,多反应监测模式(MRM),进样量5μL.结果:谷红注射液中乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素质量浓度线性范围分别在10.36～663.0,0.500 0 ～ 32.00,0.047 8 ～3.059,0.200 0 ～ 12.80,0.032 4 ～2.074,0.675 0 ～43.20,0.142 5 ～9.120 μg·L-1线性关系良好;平均加样回收率分别为97.0％ ～ 99.2％,RSD ＜3.4％ (n =6);7种成分在3批样品中的质量浓度依次为乙酰谷酰胺28.5 ～32.4 g·L-1,羟基红花黄色素A 1.02～1.23 g·L-1,芦丁14.3 ～ 17.6 mg·L-1,紫丁香苷101 ～ 123 mg·L-1,山柰素12.1 ～14.9 μg·L-1,山柰酚0.138 ～0.155 mg·L-1,槲皮素73.4 ～95.6μg·L-1.结论:该方法简、快速、高效、准确、可靠,适用于同时测定乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素7种有效成分,为该制剂建立更全面的质量控制方法提供依据.

金花茶叶中3种黄酮苷元的含量测定

目的:建立同时测定金花茶叶中槲皮素、木犀草素和山柰酚含量的高效液相色谱方法.方法:采用Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)；以甲醇-0 6％磷酸(52:48)为流动相等度洗脱；流速1 mL· min-1；柱温25 ℃;检测波长365 nm.结果:槲皮素、木犀草素和山柰酚分别在3.3～16.7,2.7～28.8,4.1～14.7 mg·L-1峰面积和质量浓度线性关系良好(r≥0.9992),平均加样回收率分别为98.00％,99.06％,98.11％,RSD分别为1.27％,0 62％,0.94％.结论:所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于金花茶叶质量控制.

HPLC测定绿茶浸出液灌胃动脉粥样硬化大鼠血浆中4个有效成分的含量

目的:建立HPLC测定绿茶浸出液中没食子酸、咖啡因、表儿茶素没食子酸酯、山柰酚在动脉粥样硬化大鼠体内的血药浓度,为动脉粥样硬化的治疗提供参考.方法:动脉粥样硬化大鼠灌胃绿茶浸出液后,分别在不同时间点取血,采用依利特Hypersil ODS2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇(A)-0.03％磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0 ～ 30 min,10％ ～43％ A;30 ～43 min,43％～45％ A;43～ 44 min,45％ ～ 51％ A;44～60 min,51％ ～ 53％ A;60～ 70 min,53％ ～ 90％ A),流速0.7 mL·min-1,检测波长278 nm的色谱条件进样分折.结果:没食子酸、咖啡因、表儿茶素没食子酸酯、山柰酚分别在0.255 ～20.40,0.430 ～86.00,0.245 ～19.60,0.270～21.60 mg·L-1内呈良好线性关系,日内和日间精密度RSD均＜9.0％,提取回收率和方法回收率都＞87％;酸化后主要药代动力学参数药时曲线下面积(AUC0-t)分别为(8.902±1.235),(198.5±12.5),(7.367±0.412),(4.426±0.251) mg·h·L-1,表观分布容积(Vd)分别为(0.990±0.134),(1.409±0.201),(0.501±0.243),(0.029±0.009) L·kg-1,达峰时间(Tmax)均为1.5h.结论:该方法对所测成分的分离度好,适用于测定绿茶浸出液中4个有效成分的血药浓度,为临床预防此类疾病提供一定理论依据.

藏族药榜嘎质量标准分析

目的:建立榜嘎药材的质量控制方法和标准,为有效控制该药材的质量提供参考.方法:参照《中国药典》2015年版四部通则相关方法,对榜嘎药材的水分、总灰分、醇溶性浸出物进行测定;以盐酸阿替新为指标,采用紫外-可见分光光度法测定榜嘎中总生物碱的含量,检测波长408 nm.以槲皮素和山柰酚为检测指标,利用HPLC测定榜嘎中总黄酮醇苷的含量,流动相甲醇-0.1％甲酸水溶液(51:49),检测波长366 nm.结果:17批榜嘎药材测定结果显示榜嘎药材中水分、灰分、醇溶性浸出物、总生物碱和总黄酮醇苷质量分数分别为7.23％ ～ 10.20％,5.94％ ～ 18.60％,11.30％ ～29.40％,0.39％～1.99％,0.42％ ～ 3.09％.结论:建立的方法简便可行、重复性好,可用于榜嘎药材的质量控制.

八角茴香药材质量标准研究

目的:制定八角茴香的质量标准,为药用植物资源的开发利用提供科学依据.方法:采用定性鉴定方法和含量测定技术开展八角茴香药材质量标准研究.结果:对10个不同产地八角茴香的浸出物、总灰分和酸不溶灰分进行了测定;同时对其活性成分莽草酸和山柰酚进行了薄层定性鉴别,并对莽草酸进行了HPLC定量研究.结论:研究所得方法简便,准确,可有效控制八角茴香药材的质量.

HPLC法同时测定雪松果中槲皮素、山柰酚和异鼠李素的含量

目的:建立同时测定雪松果中槲皮素、山柰酚和异鼠李素含量的高效液相色谱(HPLC)法.方法:雪松果用60％甲醇回流提取,提取液加10％盐酸水解.采用Agilent TC-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为[甲醇-0.1％磷酸(50∶50)]-[乙腈-0.1％磷酸(40∶60)](80∶ 20),流速1.0mL/min,检测波长360nm,柱温为25℃.结果:雪松果中槲皮素和异鼠李素在0.2-2.4μg/mL、山柰酚在0.6-7.0μg/mL浓度范围内呈良好线性关系(r≥0.9991),加样回收率RSD(n=6)依次为2.86％、1.24％、1.61％.雪松果中槲皮素、山奈酚和异鼠李素的含量依次为0.054、0.301、0.161mg/g.结论:该方法简单、快速、高效,可用于雪松果中3个黄酮类化合物的含量测定.

HPLC同时测定石韦中绿原酸、槲皮素和山柰酚含量

目的：建立高效液相色谱法同时分离测定石韦中绿原酸、槲皮素、山柰酚3种有效成分的方法。方法采用Phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；以甲醇-乙酸(pH＝3.0)作为流动相,梯度洗脱；流速：1.0 mL/min；紫外检测波长：254 nm；柱温：35℃。结果绿原酸、槲皮素、山柰酚分别在0.00024～3.00μg(r＝0.9999)、0.00016～2.00μg(r＝0.9999)、0.00016～2.00μg(r＝0.9999)范围内呈良好的线性关系,低检测限(S/N＝3)依次为3.29、0.43、0.33 ng/mL,平均回收率分别为97.73%、98.07%、96.92%。结论本方法操作简单、准确、灵敏度高,为石韦中绿原酸、槲皮素、山柰酚的测定及分离提供了依据。

高效液相色谱法同时测定赶黄草中槲皮素和山柰酚含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定赶黄草中槲皮素和山柰酚含量的方法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为 Kromasil C18柱（4.0 mm×250 mm，5.0μm），流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（50∶50），流速1.0 mL/min，检测波长360 nm，检测温度为室温。结果槲皮素、山柰酚分别在0.1056～2.1120μg 和0.0236～0.472μg 范围内具有良好线性关系，平均回收率分别为98.46%（RSD＝2.29%）和98.17%（RSD＝1.99%）。结论该法准确、灵敏，可用于赶黄草中槲皮素和山柰酚的含量测定。

RP-HPLC同时测定山西地产海红果中4种黄酮成分的含量

目的:建立RP-HPLC同时测定山西地产海红果中芦丁、金丝桃苷、槲皮素和山柰酚的含量.方法:采用HypersilC_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min~(-1);检测波长360 nm;柱温为25℃.结果:芦丁、金丝桃苷、槲皮素和山柰酚线性范围分别为1.87～46.67,6.40～160.0,3.33～83.33,0.80～20.00 mg·L~(-1);平均回收率(n=6)分别为99.2%(RSD 2.9%),98.2%(RSD 1.9%),97.4%(RSD 2.3%),97.2%(RSD 1.3%).结论:该方法简便快速,结果准确可靠,可用于评价海红果的药用价值.

中药地菍癈的化学成分研究

目的:研究中药地癈中的有效成分.方法:溶剂萃取及各种色谱技术分离纯化,经UV,IR,1H-NMR,13C-NMR,MS以及化学方法鉴定了它们的结构.结果:分离得到5种单体化合物,分别是正十六酸(I)、槲皮素(Ⅱ)、广寄生苷(Ⅲ)、没食子酸(Ⅳ)、山柰酚(V).结论:这些成分均为首次从该植物中分离得到.

野马追中黄酮类成分的研究

目的:对野马追的醋酸乙酯提取部位进行黄酮类成分研究.方法:溶剂提取和硅胶色谱法进行分离,理化性质和光谱数据鉴定结构.结果:从野马追中分离得到6种黄酮类化合物,鉴定为:棕矢车菊素(jaceosidin)(Ⅰ)、山柰酚(kaempferol)(Ⅱ)、槲皮素(quceritin)(Ⅲ)、黄芪苷(astragalin)(Ⅳ)、三叶豆苷(trifolin)(Ⅴ)、金丝桃苷(hypersoide)(Ⅵ).结论:化合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ均为首次从野马追中分离得到.

山柰酚拮抗血小板活化因子与其受体结合的作用

目的:观察山柰酚对氚标记的血小板活化因子与血小板膜上受体结合作用的影响,试图证明该药为一新型血小板激活因子(PAF)受体拮抗剂.方法:以放射配基结合试验观察[3H]PAF与家兔血小板受体的特异性结合;分光光度法测定PAF诱发的血小板黏附强度;Fura-2荧光分光光度法测定PAF介导的兔多形核白细胞(PMNs)内钙离子浓度的升高.结果:山柰酚可浓度依赖地抑制1,2,4 nmol·L-1[3H]PAF与血小板受体的特异性结合,IG50分别为30.8,74.6,92.0μmol·L-1;该药可明显抑制PAF诱发的兔血小板黏附及PMNs内游离钙升高,且均呈明显的量效关系,其抑制血小板黏附的IC50为65μmol·L-1.结论:山柰酚具抗PAF的作用,为一新的PAF受体拮抗剂.

RP-HPLC测定几种花类药材黄酮含量

目的:为充分利用花类药材,建立马蔺花、桃花、月季等15种花类药材中黄酮含量测定的RP-HPLC方法,并比较它们的含量.方法:花类药材用甲醇提取,反相高效液相色谱法分析药材中槲皮素、山柰酚、异鼠李素3种黄酮苷元.结果:采用Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇-0.1%磷酸(50:50)为流动相,可使3种黄酮苷元达到基线分离,其中马蔺花含槲皮素1.536%,桃花含山柰酚0.572%,茶花含异鼠李素0.029%,皆为听测样品中高.结论:本实验首次采用RP-HPLC法测定这15种花类药材的总黄酮含量,本方法操作简便,快速,准确,可作为黄酮的定量分析方法.