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E-钙粘附素和DNA含量与胃癌侵袭、转移的相关性研究
目的探讨E-钙粘附素(E-cadherin,)在胃癌组织中的表达和癌细胞核DNA含量与胃癌侵袭、转移的相关性.方法应用免疫组织化学S-P法对83例胃癌组织、25例正常胃组织进行E-cadherin表达的测定,同时以经典的Feulgen染色法及图象分析技术对癌细胞DNA含量进行测定,分析与胃癌侵袭转移之间的关系.结果正常胃粘膜E-cadherin呈强阳性表达,胃癌组织中E-cadherin表达率明显减低为16.9%(14/83).E-cadherin表达减低与胃癌细胞分化差、浸润深度、生长方式、淋巴结转移密切相关(P＜0.05);而与TNM分期及肿瘤大小未见明显相关性.DNA指数在胃癌组织和正常胃组织中分别为1.47±0.23和0.97±0.15,胃癌组织的DNA指数明显高于正常胃组织(P＜0.01),DNA指数与胃癌的分化程度、浸润深度、生长方式、淋巴结转移相关(P＜0.01),而与TNM分期和肿瘤大小无明显相关性.胃癌中E-cadherin表达与DNA含量呈负相关.结论 E-cadherin表达和DNA含量与胃癌侵袭转移密切相关,二者在癌组织中水平的变化是胃癌细胞重要的恶性生物学特征,对其检测有助于对胃癌患者的转移及预后作出判断.
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分时同步循环半定量RT-PCR检测胃癌细胞E-钙粘附素表达的方法学建立
目的:探索建立分时同步循环法分管半定量RT-PCR体系,并检测不同分化程度胃癌细胞中E-钙粘附素的相对表达量.方法:以胃癌细胞株HGC-27、MKN45、SCG-790为标本,抽提总RNA,合成第一链cDNA,优化PCR反应条件,建立分时同步循环法分管半定量RT-PCR反应体系,检测比较E-Cad的相对表达量.结果:采用LoTemp PCR全息反应液优化,退火温度为85℃,循环数为33,分时同步循环数为8.检测得胃癌细胞的E-Cad表达量与分化程度成负相关,符合试验预期.结论:分时同步循环法分管半定量RT-PCR能克服同管竞争及平台期对试验的影响,理论上减少了试验误差,可以用以胃癌细胞E-Cad表达量的初步检测.
关键词： 分时同步循环法分管半定量RT-PCR 胃癌 E-钙粘附素 -
钙粘附素及连环素表达与乳腺癌转移及预后的关系
目的:了解乳腺癌E-钙粘附素、连环素-α,-β的表达改变与转移及预后的关系.方法:采用免疫组织化学染色、病理组织学,对105例乳腺癌患者术后定期随访,统计学分析.结果:105例乳腺癌三种粘附分子组化染色减弱和消失频率为E-钙粘附素56%,连环素-α 64%,连环素-β 43%,与正常及非典型增生组差别明显,P值均小于0.001单因素分析未能找到E-钙粘附素与转移及预后的联系,但证明连环素-α和-β表达下降分别与癌分化程度及与转移、预后相关,P＜0.05和P＜0.01.三种粘附分子中E-钙粘附素与连环素-α的表达有平行关系,双阳性组的转移率明显低于一种蛋白表达下降组,P＜0.05.COX多因素分析三种粘附蛋白表达均未能成为独立影响乳腺癌预后的因素结论:E-钙粘附素、连环素-α,-β表达的免疫组化反应在乳腺癌呈下降的总趋势,E-钙粘附素与连环素-α的表达有平行关系,双阳性者转移率明显低.在三者之中连环素-β表达下降与癌转移及病程进展有明显相关性,预后相对差在考虑用细胞间粘附体系为判断乳腺癌预后指标时必须对该三种分子作综合检测.
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Snail与肿瘤
目的:对Snail的结构、功能、与E-钙粘附素的相关性,以及与肿瘤发生、转移的关系和可能作用机制作一综述.方法:收集、查阅大量国内外有关的文献.结果与结论:Snail是一个锌指转录因子,在胚胎发生、细胞分化及肿瘤的侵袭和转移中,均抑制E-钙粘附素的表达,因此,Snail与肿瘤的发生、演进关系密切.
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E-钙粘附素和β-链接蛋白在胃癌组织中的表达及意义
目的:探讨上皮细胞粘附分子E-钙粘附索(E-CD)和β-链接蛋白(β-CA)在胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系.方法:采用免疫组化技术对80例手术切除的新鲜胃癌组织及癌周正常组织标本进行E-CD和β-CA表达情况检测,并同时行腹腔脱落癌细胞学检查.结果:胃癌组织E-CD和β-CA的表迭降低或缺失率分别为78.75%(63/80)和61.25%(49/80);在浸润型、未分化型、弥漫状生长、有淋巴结转移及Ⅲ、Ⅳ期胃癌中,E-CD和β-CA表达明显降低或缺失(P<0.01);在策膜分型中的腱状、多彩弥漫型和浸润深度中的se、si及腹腔脱落癌细胞阳性病例中,E-CD和β-CA表达亦明显降低或缺失(P<0.05).结论:E-CD和β-CA联合检测对评估胃癌浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、装膜受侵及腹腔腹膜转移等情况具有较大意义.
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肾脏缺血再灌注损伤E-钙粘附素的表达研究
目的 探讨肾脏缺血再灌注损伤时E-钙粘附素(E-cadherin)的变化.方法 2006年1月至6月对解放军肾脏病研究所暨肾病重点实验室利用ATP耗竭剂抗霉素A建立的犬集合管上皮细胞(MDCK)缺血模型进行体外实验;体内实验使用双侧肾动脉钳闭法建立大鼠缺血再灌注损伤模型.PAS染色了解肾脏病理改变;E-cadherin免疫组化了解E-cadherin的定位和表达;Western bolt检测E-cadherin的蛋白表达.结果 正常MDCK细胞E-cadherin在细胞膜表达,ATP耗竭4 h E-cadherin表达极性消失,主要在细胞质表达.肾组织免疫组化显示,假手术组E-cadherin主要表达在肾小管上皮细胞基底膜侧;缺血肾脏组E-cadherin的表达极性消失,空泡变性的肾小管上皮细胞基底膜侧E-cadherin表达明显减少,主要在细胞质表达;而在脱落的肾小管上皮细胞只表达于细胞质.肾组织Western bolt显示,假手术组E-cadherin为120ku条带,缺血45min 120ku条带减弱,出现明显的80ku条带,缺血60min 120ku条带几乎检测不出,而主要表现为80ku条带.结论 体内体外实验均证实,肾脏缺血再灌注损伤时E-cadherin的定位、蛋白表达量发生明显变化,并出现时间依赖性E-cadherin降解,使上皮细胞的极性和细胞间连接受损,部分解释了肾脏缺血再灌注损伤时上皮细胞脱落的原因.
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E-钙粘附素在人胃癌裸鼠异种移植瘤中的表达
目的 探讨E-钙粘附素(E-cadherin,E-CD)在胃癌裸鼠肝、肺、胰腺三种不同移植瘤组织中的表达;同时观察胃癌GASL细胞系在体外肝、肺、胰腺不同组织上的粘附情况.方法 ①分别将人胃腺癌细胞株GASL在体外与裸小鼠肝、肺、胰腺三种不同组织进行共同孵育24 h,观察其在各种组织上的粘附情况;②利用免疫组织化学技术S-P法检测肝、肺、胰腺移植瘤组织中癌细胞E-CD的表达.结果 肝、肺、胰腺移植瘤组织中癌细胞E-CD的阳性表达率分别为(23.8±4.9)％、0％、和(21.7±6.5)％,肝、胰腺与肺组织移植瘤比较,差异有统计学意义(P＜0.01),且E-CD阳性细胞分布在肿瘤边缘与周围组织或间质相连处.同时体外粘附实验也证明癌细胞对肝组织的粘附性高于肺和胰腺组织(P＜0.05).结论 ①E-CD的表达下调与胃癌侵袭和转移密切相关;②不同组织微环境对肿瘤细胞的侵袭表型具有决定性影响.
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胃癌的浸润、转移与E-钙粘附素-粘连素系统失活
E-钙粘附素-粘连素系统是上皮细胞间紧密连接的分子基础,其功能失活与源于上皮的癌肿的浸润与转移密切相关.本文综述该系统失活在胃癌发生发展中的作用.
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肝外胆管癌术后预后的多因素回归分析
目的:探讨影响肝外胆管癌术后生存的预后因素.方法:采用Cox比例风险模型,选择临床因素及E-钙粘附素(E-cd)及基质金属蛋白酶(MMP-9),进行多因素回归分析.结果:全组1年生存率为44.2%,3年生存率为23.1%,5年生存率为9.6%;单因素分析显示:肿块大小、TNM分期、浸润转移、手术方式、E-cd、MMP-9与肝外胆管癌术后预后显著相关(P＜0.01);Cox多因素回归分析显示:E-cd和MMP-9的表达是影响胆管癌术后预后的重要因素,可作为判断预后的独立指标(P＜0.05).结论:E-cd和MMP-9的表达是影响胆管癌术后预后的独立因素.
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上皮性卵巢癌CDH1基因启动子甲基化和蛋白表达的关系及意义
目的:检测上皮性卵巢癌组织中上皮型钙粘附素基因(CDH1基因)启动子区甲基化分布情况,分析其与上皮性钙粘附素蛋白表达的关系,探讨启动子甲基化对于蛋白表达的影响和意义.方法:应用甲基化特异的PCR(MSP)检测38例正常卵巢上皮和80例上皮性卵巢癌组织中CDH1基因启动子区甲基化,采用免疫组织化学方法检测上述标本中E-cadherin表达的情况,并结合肿瘤的生物学行为进行分析.结果:E-cadherin在上皮性卵巢恶性肿瘤中表达明显降低(P＜0.05);34例CDH1基因启动子甲基化全部出现在卵巢癌组,有淋巴结转移组中甲基化频率明显高于无淋巴结转移组(26/35vs 8/45,P＜0.05);卵巢癌组织中有CDH1基因启动子甲基化者,E-cadherin表达明显低于无甲基化者(P＜0.05).结论:E-cadherin表达降低与上皮性卵巢癌转移关系密切,CDH1基因启动子区甲基化可能是导致E-cadherin表达蛋白表达减低的重要原因之一.
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Survivin及E-cadherin在子宫腺肌病中的表达及相关性
目的 观察凋亡抑制基因生存素(Survivin)和E-钙粘附素(E-cadherin)在子宫腺肌病的表达及其相关性.方法 以兰州市妇幼保健院2013年5月至2014年3月68例子宫病变患者为研究对象应用免疫组化EnVision二步法,检测38例子宫腺肌病病灶及在位内膜组织中Survivin及E-cadherin蛋白的表达,并与30例无症状肌瘤患者的正常子宫内膜组织进行对照;应用Western blot法检测Survivin及E-cadherin在子宫腺肌病病灶与正常内膜的表达.统计学分析以α=0.05为检验水准,当采用R×C表x2检验的分割法时,检验水准调整为α'=0.0125.结果 子宫腺肌病病灶组织中,Survivin蛋白的阳性表达率(89.47％)明显高于在位内膜(55.26％)及正常内膜(6.67％,P均＜0.0125).腺肌病病灶组织中E-cadherin蛋白阳性表达率(47.37％)明显低于在位内膜(71.05％)及正常内膜(96.67％,P均＜0.0125).腺肌病病灶中Survivin和E-cadherin表达呈线性负相关(r=-0.988,P＜0.01);Western blot结果显示Survivin蛋白在腺肌病病灶的相对表达量明显高于正常内膜,E-cadherin在腺肌病病灶的相对表达量明显低于正常内膜.结论 Survivin及E-cadherin可能与子宫腺肌病的发生、发展有关.
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胃癌组织中E-CD和UPA的表达及临床病理学评价
目的:探讨胃癌浸润、转移中细胞粘附分子ECD和基质分解酶UPA所发生的功能性改变及其与胃癌生物学行为的关系.方法:采用免疫组化SABC法对42例胃癌标本的ECD、UPA表达情况进行研究,分析了其与临床病理因素的关系及内在联系.结果:ECD在42例胃癌中阴性表达为66.7%(28例),UPA阳性率为64.3%(27例),ECD减低的表达,UPA的高表达与胃癌的高侵袭力、淋巴结转移、组织低分化和病理分期升高有关,且ECD(-)/UPA(+)组较之ECD(+)/UPA(-)组有明显的恶性生物学行为.结论:ECD表达减低和UPA的高表达均提示胃癌具恶性生物学行为,ECD/UPA共表达对胃癌生物学行为评估有重要意义.
关键词： 胃癌 E-钙粘附素 尿激酶型纤溶酶原激活物 生物学行为 -
E-钙粘附素和连接素在舌癌中的表达及其意义
[目的]探讨舌癌中E-钙粘附素、α-连接素和β-连接素的表达及临床意义.[方法]采用经病理证实的初诊舌癌病人45例.所有标本均制作HE染色片和采用SP法免疫组化检测α-连接素,β-连接素和E-钙粘附素,以Speiser标准判断阳性表达.[结果]α-连接素、β-连接素及E-钙粘附素在舌癌中阳性率分别为71.11%,71.11%和64.44%.α-连接素、β-连接素及E-钙粘附素的高分化鳞癌、有淋巴结转移的阳性表达均高于中、低分化鳞癌和无淋巴结转移者(P＜0.05).α-连接素和β-连接素及E-钙粘附素阳性表达在临床Ⅲ、Ⅳ期的表达比Ⅰ和Ⅱ期显著降低(P＜0.05).[结论]E-钙粘附素、α-连接素和β-连接素在舌癌中的表达有明显的相关性,三项指标可为一整体联合检测,与舌癌病理分级、转移、预后密切相关,对判断舌癌恶性程度,转移和预后的指标有参考意义.
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白黎芦醇对肝纤维化大鼠肝组织E-钙粘附素表达的干预作用
目的 研究E-钙粘附素在不同肝纤维化阶段的表达情况以及在抗肝纤维化中药单体白黎芦醇干预下表达的变化.方法 制备大鼠肝纤维化模型,分别给予小(40mg·kg-1)、中(120mg·kg-1)和大剂量(200mg·k-1)白黎芦醇处理,取肝组织检测E-钙粘附素、转化生长因子β(TGF-β)、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1)1 mRNA水平;采用放射免疫法检测血清HA和pc Ⅲ水平.结果 正常组大鼠肝组织E-钙粘附素呈低水平(0.515±0.02)表达,而随着肝纤维化的进展,其水平增加,其中在12周时,肝组织E-钙粘附素m RNA水平(0.878±0.03)明显高于中剂量(0.755±0.24)和大剂量白黎芦醇处理组(0.763±0.21,P＜0.01);在大鼠肝纤维化进展过程中,肝组织 HMP-1和TGF-β mRNA水平不断增加.结论 E-钙粘附素在不同阶段肝纤维化大鼠肝组织均有表达,且随着纤维化程度的加重而表达增强.白黎芦醇可以明显改善大鼠肝纤维化程度,并减少E-钙粘附素mRNA水平.
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胆管癌组织中E-钙粘附素的表达及其临床意义
目的 探讨E-钙粘附素(E-cadherin,E-cd)在胆管癌发展中的作用及与胆管癌浸润、转移和预后的关系.方法 应用免疫组织化学法(S-P法)对52例经手术和病理证实的胆管癌及10例经手术切除的正常胆管壁标本进行E-cd蛋白检测.结果 1.E-cd表达在胆管癌组织、癌旁组织及正常胆管上皮组织阳性率分别为36.5%(19/52396%(30/31)和100%(10/10),有显著性差异(P＜0.01);2.在52例胆管癌组织中,E-cd表达减弱分别与肿瘤的病理分级、TNM分期、浸润和转移及手术方式有关(P＜0.05),而与患者性别、年龄、肿块部位及大小无关(P＜0.05);3.E-cd表达阳性患者一年生存率明显高于阴性者(P＜0.01).结论 E-cd表达与胆管癌发展、浸润和转移密切相关,检测E-cd的表达有助于胆管癌转移潜能和预后的判断.
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E-钙粘附素的研究进展
E-钙粘附素(E-Cadherin,E-cad)是粘附分子中钙离子依赖的细胞粘附素家族(Ca2+-dependent cell adhesion molecule family)中的一员,对维持正常上皮细胞形态和结构完整性起着重要作用.本文就E-cad的结构、功能、调控等方面作一综述.
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E-钙粘附素/β-连环素复合体对孕鼠神经干细胞迁移和归巢的影响
[目的]干细胞的微环境是影响干细跑行为的关键因素之一,微环境中的粘附分子E-钙粘附素是其重要组成部分,在微环境中扮演重要角色,它功能的发挥离不开β-连环素,常作为一种复合体研究他们的功能.本课题采用实时定量PCR技术测量神经干细胞在原代和传代4～6代后E-钙粘附素和β-连环素的表达量是否有所变化,同时在蛋白表达水平借助流式细胞技术测量β-连环素相应的表达变化,进而判断这两种粘附分子在神经干细胞的传代过程中有何影响,为神经干细胞的迁移、植入的研究打下基础.[方法]孕鼠神经干细胞若干,为了说明前后实验细胞均为神经干细胞,本实验在取得细胞之时,立刻取少量神经干细胞行特异性Nestin染色,证明其并未分化.取一部分进行实时定量PCR检测E-钙粘附素和β-连环素的含量,毕竟这是在RNA水平借助实时定量PCR来测量的,为了佐证本结论,在蛋白水平借助流式细胞计数测量β-连环素的含量变化,β-连环素是一种胞浆蛋白,在细胞核内也有少量的表达,且核内核外保持一种动态的平衡,β-连环素处于E-钙粘附素/β-连环素复合体的核心部位,它表达的变化也间接体现了E-钙粘附素/β-连环素复合体的变化.剩余的继续培养,保持传代不分化,传代4～6代,即2周左右,再一次重复前面的操作,统计前后的结果有无差别.[结果]原代及传代培养形成的克隆球进行神经干细胞特异性抗体巢蛋白(Nestin)免疫荧光染色时发绿色荧光,呈阳性反应.应用实时定量PCR技术发现神经干细胞传4～6代后,E-钙粘附素和β-连环素的含量明显增多,且差别具有统计学意义(P＜0.05);相应的流式细胞技术测量β-cat的含量变化,发现β-连环素的含量也明显增多,且差别同样具有统计学意义(P＜0.01).[结论]试验中神经干细胞在传代的过程中,不论是在RNA层面还是在蛋白层面,粘附分子的表达均有提高,作者认为E-钙粘附素/β-连环素复合体的含量变化对神经干细跑传代中保持神经干细胞的稳定性起着一定作用,为进一步研究神经干细胞粘附分子对神经干细胞的迁移、增殖、分化、归巢和成熟的研究以及后续的临床应用提供了实验数据.
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胃癌组织中E-钙粘附素和血管内皮生长因子的表达
目的:探讨E-钙粘附素(E-cadherin)和血管内皮生长因子(VEGF)表达与胃癌发生、发展的关系,评价E-cadherin和 VEGF在胃癌浸润转移及预后判断中的作用.方法:采用SABC免疫组化染色方法,检测20例正常胃粘膜和60例胃癌手术切除标本的E-cadherin 和 VEGF的表达情况.结果:正常胃粘膜中E-cadherin全部表达,胃癌组织中阳性率为25%,E-cadherin与浸润深度及淋巴结转移相关(P<0.05);正常胃粘膜中VEGF均无表达,胃癌组织阳性率为61.7%,VEGF的表达与浸润深度及淋巴结转移显著相关(P<0.01);E-cadherin 表达和 VEGF表达无显著相关性(P＞0.05). 结论:E-cadherin和 VEGF表达与胃癌的浸润转移密切相关,检测E-cadherin 和 VEGF表达有助于胃癌转移及预后判断.
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宫颈鳞癌组织中E-钙粘附素的表达
目的:探讨宫颈鳞癌组织中E-钙粘附素(E-cad)的表达及其临床意义.方法:应用SP免疫组化法观察12例正常宫颈上皮、46例宫颈鳞癌和22例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织中E-cad的表达.结果:从正常宫颈→CIN→宫颈鳞癌组织,E-cad阳性表达率分别为100%,63.6%和28.2%,差异有统计学意义(χ2=41.16,P＜0.01).宫颈鳞癌病理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级E-cad阳性表达率分别为57.14%、25.00%和6.25%,差异有统计学意义(x2=10.70,P＜0.05),无淋巴结转移者阳性率30.77%,高于有淋巴结转移者的18.18%(χ2=13.33,P＜0.001),临床Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期阳性表达率之间差异无统计学意义(χ2=1.748,P＞0.05).结论:E-cad在宫颈鳞癌的发生发展过程中发挥了重要作用,有望成为判断宫颈鳞癌恶性程度、转移及预后的重要指标.
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E-钙粘附素、β-连环素和基质金属蛋白酶-7在肾母细胞瘤中的表达及意义
目的 探讨粘附连接复合体中E-钙粘附素和β-连环素(E-cadherin/β-catenin)以及相关基因基质金属蛋白酶-7(MMP-7)在肾母细胞瘤中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学方法,对经过石蜡包埋的30例肾母细胞瘤和9例非肿瘤肾组织标本进行检测.结果 E-cadherin在肾母细胞瘤组织中有表达缺失且在预后良好型组(FH)中的表达高于预后不良型组(UH),差异有统计学意义(P＜0.05).β-catenin、MMP-7在非肿瘤肾组织中低表达,两者在肾母细胞瘤组织中高表达,在Ⅲ～Ⅳ期组织中表达高于Ⅰ～Ⅱ期,两者在FH组中和UH组中的表达差异有统计学意义(P＜0.05),且β-catenin与MMP-7的表达水平呈正相关(r=0.66,P＜0.01).结论 E-cadherin蛋白的阳性表达缺失参与了肾母细胞瘤的恶性转化,而β-catenin和MMP-7的阳性表达促进了肾母细胞瘤的侵袭转移.
