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上调miR-34c-5p对鼻咽癌细胞HONE-1增殖和侵袭的影响
目的：探讨上调miR-34c-5p对鼻咽癌细胞HONE-1增殖和转移能力的影响。方法利用定量PCR分析miR-34c-5p在鼻咽癌细胞株HONE-1和正常鼻咽细胞株NP69中的表达情况；利用克隆形成实验和Transwell实验分析上调miR-34c-5p表达对miR-34c-5p mimic转染组、miR-34c-5p对照序列组和未处理组增殖和侵袭能力的影响。结果 miR-34c-5p在鼻咽癌细胞株HONE-1的表达水平低于正常鼻咽细胞株NP69；miR-34c-5p mimic转染组鼻咽癌细胞HONE-1的克隆形成和侵袭能力明显低于miR-34c-5p对照序列组和未处理组（均P＜0.05）。结论 miR-34c-5p的下调与鼻咽癌的生物学功能增殖和侵袭能力相关，是鼻咽癌治疗的潜在靶点。
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上调miR-34c抑制胶质瘤细胞的迁移及侵袭
目的：研究miR-34c对人脑胶质瘤细胞株U251和U87的迁移和侵袭的影响。方法应用脂质体将miR-34c导入胶质瘤细胞株U251和U87后，应用定量PCR验证转染效果，应用Transwell小室检测细胞迁移、侵袭能力变化。结果在U87和U251细胞系中，miR-34c-3p和miR-34c-5p的表达量要明显小于正常胶质细胞系HEB。而转染了miR-34c-3p的U87和U251细胞，其miR-34c-3p的表达量明显高于未转染组的细胞（ Normal组， P ＜0寣．05）和NC组细胞（ P ＜0．05），miR-34c-5p也呈同样的变化。利用Transwell小室，U251细胞转染miR-34c-3p或miR-34c-5p后，其迁移至下室的细胞数量与Normal 组和NC组比较显著减少，在 U87细胞中的情况相同。结论转染上调miR-34c在胶质瘤中的表达能够抑制其迁移和侵袭能力，为脑胶质瘤靶向治疗提供可靠的依据。
关键词： 胶质瘤 miR-34c-3p miR-34c-5p 迁移 侵袭 -
MicroRNA-590-5p、microRNA-103、microRNA-34c-5p、Dicer及BRMS-1基因在肺癌中的表达研究
目的 探讨microRNA-590-5p(miR-590-5p)、miR-103、miR-34c-5p、Dicer及BRMS-1在肺癌中表达及相互间关系.方法 选取47例肺癌患者的癌组织及癌旁正常组织,利用Trizol提取总RNA,实时荧光定量聚合酶链反应检测基因的相对表达量.结果 肺癌组织与癌旁正常组织miR-103、miR-34c-5p、Dicer及BRMS-1基因表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),miR-34c-5p与P53呈正相关(P<0.05), miR-103与多药耐药相关蛋白呈正相关(P<0.05),Dicer与miR-34c-5p、miR-103及miR-590-5p呈负相关(P<0.05).结论 在肺癌组织中Dicer基因表达与miR-34c-5p呈负相关,可能通过抑制癌基因的表达,抑制肺癌的发生.
关键词： 肺癌 miR-590-5P miR-103 miR-34c-5p Dicer -
丙戊酸钠通过激活miR-34c-5p/ATG4B信号通路抑制SH-SY5Y细胞自噬
目的 探讨丙戊酸钠(VPA)对SH-SY5Y细胞中miR-34c-5p/ATG4B信号通路的激活作用及对自噬的影响.方法 人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y用含10％胎牛血清的DMEM培养基常规培养,然后使用不同剂量VPA处理SH-SY5Y细胞24 h,采用定量PCR分析VPA处理对ATG4B mRNA与miR-34c-5p表达的影响,免疫印迹法分析VPA处理对ATG4B蛋白表达的影响,将含ATG4B启动子片段的报告质粒转染SH-SY5Y细胞,然后通过荧光素酶报告基因系统分析VPA处理对ATG4B启动子活性的影响,用VPA单独或联合转录抑制剂放线菌素D分别处理SH-SY5Y细胞不同时间,定量PCR分析检测不同处理对ATG4B mRNA稳定性的影响,用VPA单独或联合miR-34c-5p抑制剂处理细胞24 h,通过检测不同处理对ATG4B表达变化的影响,进而判断miR-34c-5p在VPA下调ATG4B表达中的作用,同时通过Western blot检测不同处理对LC3-II表达的影响,分析细胞自噬水平变化.结果 VPA可剂量依赖性降低SH-SY5Y细胞中ATG4B的mRNA和蛋白水平(P<0.05).VPA处理不影响SH-SY5Y细胞中ATG4B的启动子活性(P>0.05),但显著下调其mRNA的稳定性(P<0.05).同时,VPA处理明显增强SH-SY5Y细胞中miR-34c-5p的表达水平(P<0.05).使用miR-34c-5p抑制剂与VPA联合处理SH-SY5Y细胞,可逆转VPA对ATG4B表达的下调作用.VPA处理还下调了SH-SY5Y细胞中LC3-II的表达水平(P<0.05).结论 VPA可能通过激活miR-34c-5p/ATG4B信号通路而抑制SH-SY5Y细胞自噬.
关键词： 丙戊酸钠 SH-SY5Y细胞 Atg4B miR-34c-5p 自噬
