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LC-MS/MS法测定人血浆中多粘菌素E浓度分析方法的建立
目的:建立人血浆中多粘菌素E浓度测定的LC-MS/MS方法 ,方法:样品处理:蛋白沉淀;采用Agilent Polaris C18(50*3 mm,3μm)色谱柱;流动相0.5％ 甲酸水溶液(A)-0.5％ 甲酸乙腈溶液(B);梯度洗脱;流速为0.65-2.4mL/min;内标物:多粘菌素B1;质谱检测,正离子模式.结果:多粘菌素E1的线性范围是20.0～2000 ng/mL(r2=0.9984),定量下限为20.0 ng/mL.批内精密度 ≤4.2％,批间精密度 ≤3.7％;提取回收率在100.3％-113.5％ 之间,总体变异系数(％CV)为6.2％.本方法定量下限低,血浆前处理方法操作简便,节约成本.结论:建立的方法准确精密、 稳定可靠,可用于人血浆中多粘菌素E1浓度的检测.
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2016年中国26个省市食源性沙门菌耐药性特征分析
目的 了解2016年中国26个省、直辖市和自治区食源性沙门菌的耐药状况.方法 采用微量肉汤稀释法测定755株食源性沙门菌对10类16种抗生素的药物敏感性,采用实时荧光定量聚合酶链式反应方法检测mcr-1基因的存在情况.结果 72.7％(549/755)的沙门菌对受试的16种抗生素呈现不同程度的耐药性,其中萘啶酸(NAL)、四环素(TET)、氨苄西林(AMP)、氨苄西林/舒巴坦(SAM)4种抗生素的耐药率较高,均在34％以上,未见碳青霉烯类[亚胺培南(IPM)、美罗培南(MEM)]耐药菌株,44.4％ (335/755)的沙门菌同时耐受3类或3类以上抗生素,表现为多重耐药,同时耐受抗生素种类高为8类.共存在134种耐药谱,优势耐药谱型为NAL、TET和AMP-SAM-NAL.全部菌株中检出2株携带mcr-1基因的菌株,分别为八重耐药的德尔卑沙门菌(Salmonella Derby)和七重耐药的鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium).部分省份沙门菌耐药率较高.结论 2016年中国26个省、直辖市和自治区食源性沙门菌整体耐药水平较高,多重耐药情况严重,我国食源性沙门菌中存在携带mcr-1基因的多重耐药菌株,应引起关注.
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含多粘菌素E多药联合方案与单药方案的有效性和安全性Meta分析
目的：系统评价多粘菌素E与其他抗菌药物的联合治疗方案（联合方案）与单药治疗方案（单药方案）的有效性和安全性。方法：计算机检索PubMed, Embase和Cochrane Library，查找其联合方案与单药方案的临床对照研究文献。检索时限截至2013年5月，按纳入与排除标准筛选文献,采用RevMan 5.0统计软件进行Meta分析。结果：共纳入14篇相关文献，其中死亡率结果共纳入5篇文献，单药方案的死亡率显著大于联合方案的死亡率（OR：2.30,95%CI：1.28,4.13, P=0.005）；临床疗效共纳入11篇文献，总体结果显示,单药方案优于联合方案[OR=1.59,95%CI：1.03,2.45, P=0.04],但亚组分析结果显示，前瞻性研究中，单药方案与联合方案没有显著性差异（OR：1.02,95%CI：0.53,1.94, P=0.96）；微生物结果共纳入4篇文献，结果显示,单药方案与联合方案的微生物根除结果无显著性差异（OR：1.25,95%CI：0.66,2.36, P=0.50）；肾毒性结果共纳入4篇文献，联合方案的肾毒性与单药方案的无显著性差异（OR：0.90,95%CI：0.31,2.61, P=0.85）。结论：联合方案在临床结果和微生物根除结果与单药方案相当，但在提高患者生存率上，联合方案要优于单药方案。多药联合治疗不增加多粘菌素E的肾毒性。
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聚乙二醇化多粘菌素E对革兰阴性菌感染的治疗效果及降低肾毒性的作用
多粘菌素E (polymyxin E,PME)能有效治疗耐药性革兰阴性菌引发的各类感染,但是其明显的肾脏毒性却严重限制了该药物的临床应用.本研究采用化学合成的方法制备了聚乙二醇2000单甲醚-多粘菌素E(mPEG2K-PME),并对其进行了初步表征.在体外抗菌实验和细胞毒性实验的基础上,进一步构建小鼠大肠杆菌腹腔感染模型,考察mPEG2K-PME对腹腔感染小鼠的治疗效果及其对肾组织的毒性作用.结果表明:mPEG2K-PME在体外环境下对大肠杆菌具有明显的抑制作用,对HK-2细胞的毒性降低;在体内对小鼠腹腔感染具有良好的治疗效果,肾毒性明显降低,有望开发成高效低毒的新型制剂.
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LC-MS/MS法同时测定多粘菌素E和左氧氟沙星的浓度
目的 建立同步测定培养液中多粘菌素E和左氧氟沙星的LC-MS/MS方法.方法 待测样品用固相萃取(SPE)法预处理后,色谱柱为ZORBAXSB-C18柱,流动相为乙腈(0.1％甲酸)-水(0.1％甲酸)(50∶ 50),流速为0.3mL·min-1,用电喷雾离子源(ESI),正离子方式检测,多重反应监测(MRM)扫描.结果 多粘菌素E主要成分多粘菌素A,B和左氧氟沙星的线性范围为0.48 ～9.60 μg·mL-,定量下限为0.48 μg·mL-1,日内精密度(RSD)≤6.83％,日间RSD≤9.85％.绝对回收率为88.06％ ～ 104.43％·RSD≤4.15％.结论 本方法专属性好、灵敏、准确、快速,满足了测定的要求.
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多粘菌素对泛耐药革兰阴性杆菌严重感染临床应用新进展
目的:了解多粘菌素的相关特点,为制定合理的给药方案,提高临床疗效和安全性提供参考.方法:通过查阅文献,总结多粘菌素B及E的药理学特点、临床应用新进展、不良反应及耐药性,并提出相应的防治对策.结果:多粘菌素类对泛耐药革兰阴性菌感染,特别对多药耐药的鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌所致感染有较好疗效.其肾毒性及神经肌肉阻滞反应的发生率较以前降低.由于多粘菌素类的广泛应用,革兰阴性菌中已出现耐药菌株.结论:多粘菌素类使用时应注意剂量、与其他药物联用以及肾功能不全患者安全合理使用等问题.
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玉米浆对多粘菌素E发酵的影响研究
目的：试验比较及评价不同组分玉米浆对多粘菌素E发酵生产的影响。方法：以多粘芽孢杆菌为对象，通过不同产地玉米浆对比试验和四因素三水平正交试验确定多粘菌素E发酵配方中玉米浆原材料佳组分及配比。结果：该菌种使用的原材料玉米浆佳组分及配比条件：胱氨酸1700mg/100g，异亮氨酸1050mg/100g，丝氨酸950mg/100g，组氨酸1300mg/100g。结论：玉米浆质量的波动是引起多粘菌素E发酵单位波动的重要原因之一，要保持稳定的发酵水平就必须对不同产地生产的玉米浆进行摇瓶试验，以确定合适的玉米浆用于生产。
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多粘菌素E检测方法的研究新进展
本文通过查阅了近15年国内外对多粘菌素E检测方法的相关文献报道，综述了检测多粘菌素 E 的新方法，分析了检测多粘菌素 E存在的主要问题，并比较了各方法的特点，并对今后的研究方向提出了建议，为进一步开发新的检测方法提供参考。
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多粘菌素E雾化吸入治疗泛耐药铜绿假单胞菌肺炎临床疗效分析
目的 探讨多粘菌素E雾化吸入治疗泛耐药铜绿假单胞菌肺炎的临床疗效及不良反应.方法 对呼吸科2006年1月～2008年12月收治的13例泛耐药铜绿假单胞菌性肺炎惠者予以加用多粘菌素E雾化吸入治疗,根据临床症状和体征,实验室检查等判定患者的疗效及不良反应.结果 经多粘菌素E雾化吸入辅以其他综合治疗有效率达69.2%,其中痊愈5例(38.5%),显效4例(30.7%).未发生不能耐爱的毒副反应.结论 多粘菌素E雾化能有效治疗泛耐药铜绿假单胞菌性肺炎,无明显毒副作用.
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多粘菌素E高产菌株的选育
以多粘类芽胞杆菌(Paenibacillus polymyxa)18-3为出发菌株,采用紫外线诱变,并以重金属Cu2+作为筛选因子,获得一株遗传稳定且多粘菌素E发酵效价比出发菌株提高45%的菌株.对该菌株再采用亚硝基胍(NIG)诱变,以缬氨酸结构类似物α-氨基丁酸作为筛选因子时得到一株产量提高34%的菌株.
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超滤膜在多粘菌素E预处理中的应用
应用Ultra-floTM超滤膜技术处理多粘菌素E发酵液,可将菌丝分离与后续工艺中的蛋白质剔除合二为一,彻底替代了传统的板框过滤,既避免了大量助滤剂的耗用,节约生产成本;又提高了滤液质量,有助于提高成品的收率和质量.
