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大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ基因Lys184缺失突变重组腺病毒载体的构建

万文辉;吴恒芳;杨笛;张寄南

摘要: 目的:构建SD大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)赖氨酸(Lys)184缺失突变重组腺病毒载体.方法:利用PCR定点突变方法给大鼠cTn I基因引入Lys184缺失突变,将扩增片段克隆至pMD18-T载体,在C末端用PCR法加6×组氨酸(His)标签序列后,再亚克隆至Adeno-X腺病毒DNA,转染HEK 293细胞,包装形成重组腺病毒(Ad-cTnI Lys184del).结果:PCR及测序结果表明,重组腺病毒序列正确,Western blot证明有融合突变蛋白表达.结论:本研究成功地构建了大鼠cTnI Lys184缺失突变重组腺病毒载体,为后续的功能研究提供了有价值的研究材料.

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