重组大鼠转化生长因子-β1和胰岛素样生长因子-1基因转染兔软骨细胞及对其增生及合成的促进作用

目的探讨重组大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)基因、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因转染兔软骨细胞后生物性状的变化,为骨关节炎基因治疗中目的基因的选择提供参考.方法将体外培养的兔膝关节软骨细胞分为空白组、质粒pcDNA3转染组、pcDNA3+TGF-β1基因转染组、pAT153+IGF-1基因转染组.筛选阳性克隆后,对软骨细胞所分泌的TGF-β1因子、IGF-1因子、Ⅱ型胶原进行原位杂交、免疫组织化学、免疫荧光检测、流式细胞仪检测、3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)检测.结果空白组与质粒pcDNA3转染组的上述指标差异无显著性(P＞0.05);基因转染组与空白组、pcDNA3转染组相比,TGF-β1因子、IGF-1因子、Ⅱ型胶原的含量均有明显提高,DNA合成率及各生长周期比例差异有显著性(P＜0.05);pcDNA3+TGF-β1转染组与pAT153+IGF-1转染组相比,上述指标差异也均有显著性(P＜0.05).结论 pcDNA3+TGF-β1、pAT153+IGF-1基因转染后的软骨细胞生物学性状优于未转染组,上述基因转染有助于软骨细胞活力的提高;pcDNA3+TGF-β1 转染后软骨细胞生物学性状优于pAT153+IGF-1组,在骨关节炎基因治疗中可优先选择TGF-β1基因.

神经精神狼疮的临床分型及其预后

目的了解神经精神狼疮(NPLE)的临床分型,探讨其与狼疮疾病活动性、预后的关系.方法对符合1999年美国风湿病学会(ACR)神经精神狼疮定义标准的70例SLE病人追踪0.5年以上,了解NPLE的临床分型,采用系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)和损伤指数对其进行评估,并分析死亡情况.结果本组发现有14种NPLE,以癫痫样发作常见,以下依次为无菌性脑膜炎、脱髓鞘综合征、急性意识障碍、精神病、狼疮样头痛、脑血管意外、脊髓损害、性格改变、焦虑、知觉异常、颅神经损害、运动障碍和吉兰-巴雷综合征.单种NPLE仅24%,2种叠加37%,3种或以上39%.NPLE多种叠加数与SLEDAI和损伤指数的积分均存在显著相关,与死亡情况相平行.结论大部分NPLE存在多种叠加,不但提示疾病活动,而且意味着病情严重,预后较差,病死率较高.

β2微球蛋白缺乏对鼠狼疮的影响

目的观察β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2m)基因敲除(knockout)对狼疮鼠(NZB×NZW)F1(β2m-/- BWF1)的影响,探讨β2m在鼠狼疮发病机制中的作用.方法制备β2m-/- BWF1.酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中IgG型抗磷脂抗体、IgG型抗dsDNA抗体、类风湿因子(RF)、IgG和IgG3.比较β2m-/- BWF1和野生型(β2m+/+ BWF1)及杂合型(β2m+/- BWF1)在生存率、自身抗体、IgG和IgG3的差异.结果①BWF1雄性鼠生存率高于雌性鼠,β2m-/-对狼疮鼠的生存率无明显影响.②β2m-/- BWF1鼠4个月时抗磷脂抗体低,β2m-/-对抗dsDNA抗体无明显影响,β2m-/- BWF1鼠RF在4个月时低于其他两组,到8个月时则高于其他两组.③在4个月和6个月时β2m-/- BWF1鼠IgG显著降低,8个月时差异不显著可能与低蛋白血症有关.β2m-/- BWF1鼠IgG3仅在6个月时显著降低.结论β2m-/-对BWF1鼠的影响是多方面的,但并未影响系统性红斑狼疮(SLE)的生存率,对三种自身抗体的影响并不一致,以抗磷脂抗体和RF的改变明显,由于IgG吸收减少、分解加速,IgG明显降低.

实验性关节炎大鼠血浆肿瘤坏死因子-α和滑膜血管内皮生长因子表达相关性分析

目的同步观察实验性关节炎大鼠不同时间点的血浆肿瘤坏死因子-α (TNF-α)含量与滑膜内皮生长因子(VEGF)表达变化,探讨TNF-α和VEGF在类风湿关节炎(RA)发病机制中的作用及其相关性.方法采用Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎(CIA)模型,同步检测CIA大鼠不同时间点的血浆TNF-α含量和滑膜组织VEGF的表达水平,并同时观察其发病时间与滑膜新生血管形成、关节炎指数积分以及TNF-α和VEGF之间关系.用直线相关分析法分析TNF-α与VEGF之间的关系,用等级相关分析法分析关节炎指数积分与VEGF及TNF-α之间的关系.结果随着CIA发病时间的延长,滑膜新生血管逐渐增多,滑膜增厚,关节炎指数积分逐渐增加,TNF-α含量和VEGF水平也随之升高;其关节炎指数积分与VEGF表达水平呈正相关关系(r＝0.535、P＜0.05),与TNF-α含量虽有相关增高趋势,但差异无显著性(r＝0.371,P＞0.05).血浆TNF-α含量与VEGF表达水平呈显著正相关关系(r＝0.893,P＜0.01).结论 TNF-α与VEGF在RA炎症反应,滑膜新生血管形成的细胞因子网络中起重要作用,二者可能具有互相影响,相互促进,充当恶性网络循环的调控作用;是介导RA发生和发展以及骨质侵蚀、致残的众多因子中的关键因子.

系统性红斑狼疮患者中抗中性粒细胞胞质抗体和细胞因子的关系

目的探讨抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)与系统性红斑狼疮(SLE)血管炎临床特点的关系.检测SLE血管炎患者肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6等细胞因子的血清水平,探讨ANCA与SLE血管炎细胞因子的关系.方法 60例SLE活动期患者和30名正常对照组均通过间接免疫荧光法(IIF)检测ANCA与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗髓过氧化物酶(MPO)抗体(即MPO-ANCA),观察两组ANCA与抗MPO抗体的阳性率.通过ELISA法检测30例SLE活动期患者和30名健康对照者,外周血TNT-α、白细胞介素(IL)-6水平.结果 60例SLE患者15例ANCA阳性,均为核周型抗中性粒细胞胞质抗体(pANCA),阳性率为25%,抗MPO抗体8例阳性(IIF法 ANCA均阳性),阳性率为13.3%,健康对照组ANCA及抗MPO抗体均为阴性.病程超过1年,伴有肾炎、浆膜炎、皮肤血管炎组,ANCA阳性率高,与无相应特点的对照组差异均有显著性(P＜0.05);有关节炎比无关节炎组ANCA阳性率高(P＝0.05).SLE活动期患者与对照组相比:SLE组TNF-α、IL-6水平较高(P＜0.05).抗MPO抗体阳性组与抗MPO抗体阴性组相比:TNF-α、IL-6水平升高,两组差异有显著性(P＜0.05).结论部分SLE病人血清中可检测到pANCA及抗MPO抗体,pANCA与SLE某些临床特点有一定联系.pANCA可能参与SLE血管炎的发病,SLE患者中TNF-α、IL-6血清水平升高.其中TNF-α、IL-6升高与抗MPO抗体有一定关系.

强直性脊柱炎家族聚集性研究

目的通过强直性脊柱炎(AS)病例的家族发病情况调查及一级亲属人类白细胞抗原(HLA)-B27检测,得出本区域强直性脊柱炎家族发病情况及有关遗传方式,一级亲属再显风险率和遗传率评估等资料.方法采用问卷调查形式,记录本人及一级亲属中有关脊柱关节病的相关症状.收到有效回复248例.其中47例亲属有症状,并持续3个月以上.约来院复查,详细询问病史并行体检,留取血样本,根据病情预约双侧骶髂关节位放射学检查,确定能否诊断AS.并分别计算一级亲属再显风险率及遗传率.所有患者和部分一级亲属采用流式细胞仪测定HLA-B27.并对100例正常献血者行HLA-B27检查.结果 248例AS家族中有第2例AS的先证者共38例.AS患者亲属确诊AS共有43例,其中一级亲属患AS 30例.AS先证者一级亲属再显风险率为15.7%,其中同胞再显风险率是7.33%.推算一般AS家庭一级亲属再显风险率为2.4%.根据1998年我科在五角场地区流行病学调查,本地区AS群体发病率是0.11%,本组AS先证者一级亲属的过度危险性为142.7,先证者家庭同胞的过度危险性为66.6,一般AS家庭过度危险性为21.8.计算AS遗传率为71%.预期一级亲属发病率为3.3%,与实际得出的3.0%基本一致.与亲属AS比较,先证者中女性患者比例明显升高(达34.2%),发病年龄相对较轻,病情较轻者少(P≤0.05).对AS患者一级亲属行HLA-B27检查,阳性率为63%.无任何症状的一级亲属HLA-B27阳性率仍高达55%.AS在一级亲属中的确诊率28%,分别占一级亲属中HLA-B27阳性和有症状者的45%.与本地区正常献血者HLA-B27阳性率5%相比较,差异均有非常显著性(P≤0.01).结论 AS是有较高家族聚集性的多基因遗传性疾病,HLA-B27在AS家族中有很高的阳性率.应高度重视AS家庭背景的分析.

白塞病合并急性白血病8例分析

白塞病(Behcet′s disease,BD)是一种以口腔溃疡、外阴溃疡、眼炎及皮肤损害为临床特征并累及多个系统的结缔组织疾病.BD系统性损害涉及皮肤、消化道、肺、中大血管、神经系统等,但合并急性白血病的报道鲜有报道,为探讨BD与急性白血病的相关性,我们回顾了国内外的文献,报道如下.

狼疮肾炎肾组织CD32b表达的免疫组织化学分析

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一累及全身多个系统的自身免疫病,狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)是SLE常见的严重的脏器损害之一,目前其发病机制尚未明了,但与免疫系统关系密切,一般认为是机体出现自身免疫反应,形成免疫复合物(CIC),固定和活化补体释放的趋化因子吸引中性粒细胞,后者脱颗粒时释放炎症介质导致肾小球肾炎.CD32b是IgG的低亲和力Fc受体,可以在单核细胞、巨噬细胞、郎汉斯巨细胞、粒细胞、B细胞和血小板上表达[1].Timothy等[2]证实在胎盘绒毛内皮上也有表达,在皮肤真皮血管内皮细胞也有表达.IgG的Fc受体和IgG的Fc段结合可参与免疫球蛋白介导的病理改变[3].CD32b在动物实验已证实传导抑制信号[4].为探讨CD32b在LN的作用以及与疾病进展的关系,本实验用LN的肾活检组织进行了检测.

间质干细胞的生物学特性及其与自身免疫病的关系

骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是中胚层起源的原始细胞,可分化成间质组织,包括骨、软骨、脂肪、肌肉、肌腱和骨髓基质,以及新研究发现的神经组织.MSCs作为干细胞不仅具有自我更新能力、多向分化潜能,还具有很强的可塑性[1],本文综述MSCs的生物学特性、临床应用前景以及与自身免疫病(autoimmune diseases,AD)的关系.

核被膜蛋白及其抗体的临床意义

自身抗体在风湿免疫性疾病的发生、发展中起着重要作用,对疾病的诊断和预后有指导意义.近年,国外对环型(ring-like pattern)抗核抗体(antinulear antibody,ANA)的研究发现其抗原成分为核被膜蛋白(nuclear envelope protein),并发现其中的抗gp210抗体、抗板层素B受体(lamin B receptor,LBR)抗体对原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)有高度的特异性,特别是对抗线粒体抗体(antimitochondrial antibody,AMA)阴性的PBC患者的诊断具有重要意义.

风湿病药物基因组学研究进展

药物基因组学(parmarcogenomics)是近年来飞速发展的一门学科,它研究药物疗效/毒性和用药者基因多态性之间的关系,是后人类基因组计划的一大重要研究领域.药物基因组学的多项研究成果目前已可在临床上应用.本文就风湿病治疗中的常用药物甲氨蝶呤(MTX)、硫唑嘌呤(AZA)、环磷酰胺(CTX)和新药Infliximab的药物基因组学研究作一简要回顾.

系统性红斑狼疮并弥漫性肺泡出血二例

弥漫性肺泡出血(DAH)是系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosis,SLE)一种罕见而严重的并发症,病因及发病机制不清楚,由Osler[1]于1904年首先报道,发病率不到SLE的2%[2],国外至今报道不下百余例,而国内仅有个例报告[3],现将临床所见2例报道如下.

白塞病导致主动脉瓣换瓣术后反复瓣周漏一例

白塞病(Behcet′s disease,BD)累及心瓣膜病变已屡有报道,其中以主动脉瓣受累多见.主动脉瓣置换术是常用的外科治疗手段,但术后并发症如瓣膜分离或瓣周漏的发生,严重影响患者预后.及时正确地诊断及手术前后内科治疗极为重要.现报道BD致主动脉瓣换瓣术后反复瓣周漏1例.

系统性红斑狼疮并发少见部位骨坏死二例

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)引起骨坏死并非少见,常见部位是髋关节,而膝关节和踝关节等部位,发生骨坏死相对少,现报道2例.

丙基硫氧嘧啶致抗中性粒细胞胞质抗体阳性小血管炎二例

丙基硫氧嘧啶(PTU)是硫脲类抗甲状腺药,是临床常用的抗甲状腺功能亢进药物之一.抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)是原发性小血管炎的血清学诊断工具.近年来发现有少数服用PTU的甲状腺功能亢进患者临床上出现了小血管炎的表现,并且在这些患者血清中也可检测到ANCA.现将我院近年发现的2例PTU相关的ANCA阳性小血管炎报道如下.

东北三省第二届风湿病学术会议暨吉林省第三届风湿病学术会议纪要

由中华医学会吉林省风湿病分会主办的东北三省第二届风湿病学术会议暨吉林省第三届风湿病学术会议于2003年8月21至24日在吉林省安图县白河镇举行,来自吉林省、黑龙江省和辽宁省的代表共计100余人参加会议.本次会议共收到论文41篇,11篇专题报告(其中6篇为特约专题报告),6篇大会发言交流.会议共评出优秀论文6篇,其中优秀论文一等奖1篇、二等奖2篇、三等奖3篇.

《中华风湿病学杂志》第二届编委会第二次会议纪要

骨关节炎诊治指南(草案)

[编者按] 为提高医疗质量,规范各级医疗机构医师的诊疗行为,以切实保障我国广大人民群众的身体健康,在卫生部、中华医学会的直接领导下,各专科分会从2002年1月起着手编写"临床诊疗指南".为适用于我国不同等级和不同地区医院医师水平的需要,中华医学会风湿病学分会组织了风湿病学专家编写了22种常见风湿性疾病的诊治指南.各位专家在撰写过程中倾注了心血,以严肃认真、严谨求精的态度完成了"指南"的编写."指南"既代表了当前国际上的诊治水平,又符合我国的国情,具有实用性.历时1年余,几经易稿,终于完成.<中华风湿病学杂志>陆续将"指南"以"草案"刊出,以进一步征集广大医师的意见.有任何建议及意见可与中华医学会风湿病学分会唐福林联系.通信地址:北京市东城区王府井帅府园1号北京协和医院风湿免疫科邮编:100730 Email:Tangfl@csc.pumch.ac.cn 传真:010-65296563骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种以关节软骨的变性、破坏及骨质增生为特征的慢性关节病.本病在中年以后多发.研究表明,骨关节炎在40岁人群的患病率为10%～17%,60岁以上则达50%,而在75岁以上人群中,80%患有骨关节炎.该病的终致残率为53%.临床上以关节肿痛、骨质增生及活动受限为常见.骨关节炎的发病无地域及种族差异.年龄、肥胖、炎症、创伤及遗传因素等可能与本病的发生有关.

第27例--全身关节无痛性不规则骨性肿大畸形变脊柱侧弯广泛骨质增生

1 病历摘要患者:女性,35岁.主因脊柱及四肢关节畸形24年,多关节疼痛1.5年于2003年2月20日入院.患者于1979年(11岁)无诱因出现双手近端和远端指间关节轻度骨性肿大,脊柱轻微侧弯,但无活动受限,以后逐渐累及其他四肢大小关节,呈进行性发展,逐渐出现不规则畸形、活动范围缩小及明显的脊柱侧弯畸形,1994年右髋和右膝关节已分别有明显的内收和外翻畸形,但始终无关节发红、疼痛、触痛、晨僵和软组织肿胀.2001年9月患者无诱因出现右膝关节疼痛,以下楼时明显,同时伴易饥饿、夜间小便次数增多(3次/晚)及1个月内体重下降3.5 kg,化验血清甲状腺激素明显升高,确诊为"甲状腺功能亢进症(甲亢)",经甲巯咪唑(他巴唑)治疗20余天后除膝关节症状外,其他所有症状消失,停药后至今未复发,多次复查血清甲状腺激素保持正常.

松质骨骨基质明胶负载软骨细胞移植修复兔膝关节软骨缺损

目的应用松质骨骨基质明胶(bone matrix gelatin,BMG)负载兔软骨细胞移植修复同种异体关节软骨缺损.方法 BMG负载软骨细胞,体外培养12 d后植入同种异体新西兰兔膝关节软骨缺损.对照组植入BMG或不作任何植入.移植前用胰蛋白酶处理关节软骨缺损.术后2、4、8、12、24周行解剖显微镜、组织学、电镜观察和免疫组织化学染色.结果 BMG术后8周降解.实验组术后24周关节软骨缺损以软骨组织修复,与周围软骨及软骨下骨愈合良好.Safranin-O、免疫组织化学染色证实其基质有蛋白多糖和Ⅱ型胶原,电镜观察表明修复组织软骨细胞及基质与正常关节软骨一致.BMG对照组以部分软骨组织修复,空白对照组以纤维组织修复.结论松质骨BMG可作为软骨组织工程的天然细胞支架,其负载软骨细胞移植能修复同种异体兔关节软骨缺损.