首页 > 文献资料
-
利用原代培养细胞进行药物短期毒性筛选方法的建立
新药开发注重2个方面:药效和毒性.一般的策略是先利用高通量筛选的手段对侯选药物进行药效筛选,再对有一定药效的侯选药物进行毒性测定.而利用体外培养的细胞进行初步的毒性筛选是目前发展趋势.为此,我们建立了利用原代培养的大鼠肝肾细胞进行药物毒性筛选的方法,对5种参考药物用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率.
-
Z24经口染毒大鼠血浆的代谢组学研究
目的研究Z24染毒大鼠血浆的代谢表型改变及其与组织病理和血液生化指标的相关性,探讨代谢组学在药物毒性早期筛选中的应用.方法 Wistax大鼠连续经口染毒0、60、130和200 mg/kg Z24 5 d后收集血浆,测定1H NMR谱,并进行血浆生化指标测定和肝脏组织病理学检查.结果 200 mg/kg组大鼠血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及总胆红素(TbiL)分别升高了148.4%、140%和109.8%;130和200m/kg组均出现不同程度的肝脏炎症和坏死.血浆1H NMR谱偏小乘方分析(PLS-DA)发现在不同染毒条件下,各组动物的代谢谱各不相同,与肝脏病理和血浆生化改变相一致,并且其敏感性优于常规毒理学检测指标.结论大鼠血浆1H NMR代谢谱与Z24毒作用强度密切相关,代谢组学分析是一种有良好发展前景的体内药物毒性早期筛选的方法.
-
大鼠肾细胞分离制备及培养方法的比较
目的比较胶原酶消化法、胰蛋白酶消化法和胶原酶、胰蛋白酶两步消化法(简称两步消化法)对大鼠肾细胞分离效果及细胞产量的影响,以及不同培养基(MEM、RpMI1640)、鼠龄(乳鼠、成年鼠)对细胞产量、质量、增殖率和乳酸脱氢酶(LDH)漏出量的影响.方法分别对两组Wistar大鼠(乳鼠和成年鼠)用三种不同的消化方法制备大鼠肾组织细胞悬液,分别在MEM培养液和RPMI1640培养液中原代培养,培养48小时之后第一次传代,观察细胞质量,计算细胞产量,MTT法检测传代细胞24～48小时之间的增殖率,生化分析仪检测传代细胞第1～7天培养液中LDH漏出量.结果胶原酶消化法和两步消化法的肾细胞产量显著高于胰蛋白酶消化法(P＜0.01),两步消化法的细胞质量优于胶原酶消化法,MEM培养液和RPMI1640培养液对细胞产量、增殖率和LDH漏出量的影响均无显著性差异,乳鼠的肾细胞产量显著高于成年鼠(P＜0.01).结论两步消化法对于肾细胞的分离制备尤为适合,MEM培养液和RPMI1640培养液均适于肾细胞的培养,乳鼠比成年鼠更适合肾细胞的制备.
-
原代肝、肾细胞培养在保健食品原料毒性筛选中的应用
目的 建立肝、肾毒性的体外筛选方法,并研究其在保健食品原料毒性筛选中的应用.方法 以原代肝细胞、原代肾细胞、CHL和HepG2细胞为平台,用MTT法检测毒物对细胞活性的半数抑制浓度IC50,用生化学方法检测培养液中酶学指标的变化,作为毒性效应标志物;用已知毒物对该方法进行验证;用该方法对大黄、苍术、红花水提物进行毒性筛选.结果 该方法能够筛选出已知毒物的肝肾毒性;在本实验条件下,未发现大黄、苍术对肝肾存在靶毒性,红花可能存在潜在的肾毒性.结论 本研究建立的方法可用于保健食品原料的毒性筛选;有必要对红花进行更深入的安全性研究.
-
发现毒理学的研究进展
发现毒理学又称为开发前毒理学(Predevelopmental Toxicology),是指在创新药物的研发早期,对所合成的系列新化合物实体(New Chemical Entities, NCEs)进行毒性筛选,以发现和淘汰因毒性问题而不适于继续研发的化合物,指导合成更安全的同类化合物.发现毒理学的研究既可加快药物研发进程,提高研发成功率,又减少资源消耗.笔者就发现毒理学研究的定义、必要性、研究内容、研究方法和我国当前的研究现状作一简述.
关键词： 发现毒理学 新化合物实体(NCEs) 毒性筛选 -
新药研发过程中毒理学研究方法的进展--毒性的原因和早期毒性筛选
毒性已成为新药开发过程中淘汰的主要原因.近年来制药和生物技术工业的研究人员开发了多种新技术以便在药物发现和开发过程中尽早确定化合物的安全特性.笔者首先对药物毒性产生的原因如药靶的特异性、药物的分子结构、药物代谢和代谢动力学等方面进行了分析,再介绍了近几年早期毒性筛选的新技术,包括预测模型、体外高通量毒性筛选、活性代谢产物的检测、高内涵筛选技术、动物实验.
-
利用高内涵分析技术进行药物肾细胞毒性筛选的研究
目的 探讨利用高内涵分析技术对药物进行肾毒性筛选的可行性.方法 选择罗格列酮(rosiglitazone)为阴性药,缬氨霉素(valinomycin)为阳性药,利用高内涵分析技术,通过检测细胞数目(cell number)、DNA含量(DNA intensity)、细胞膜通透性(cell permeability)、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)、细胞色素C(cytochrome C)的释放这5个指标,建立高内涵HK-2肾细胞毒性筛选模型并利用具有明显肾毒性的药物马兜铃酸A(aristolochic acid A)和顺铂(cisplatin)对该模型进行验证.结果 缬氨霉素、顺铂和马兜铃酸A可以检测到明确的HK-2肾细胞毒性,而罗格列酮即使在药物浓度为大血药浓度的1 000倍情况下仍然不会检测到明显的HK-2肾细胞毒性.结论 基于HK-2肾细胞,高内涵平台可以用于对药物进行肾细胞毒性筛选.
-
干细胞的研究现状和应用展望
成体干细胞在治疗多种难治性疾病包括中风、神经系统变性性疾病、糖尿病、心脏病,外伤等已开辟了一个新的方向.干细胞是研究细胞自我更新和分化的重要工具,并将在新药发明和药物毒性筛选中发挥作用,对成体干细胞及其分化的研究必将在今后对医学及生物学领域产生极其深远的影响.
