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墨汁染色在肺泡灌洗液隐球菌检测中的应用
目的 将印度墨汁染色用于检查肺泡灌洗液中的隐球菌感染,以提高呼吸道标本中隐球菌的涂片阳性率.方法 采集患者血液及肺泡灌洗液,将血液直接接种血培养瓶,将肺泡灌洗液充分振荡呈液化状态,有利于隐球菌从包裹的黏液中游离出来,分别进行真菌培养和涂片,涂片经墨汁负染后光学显微镜检查,来检测肺泡灌洗液中隐球菌.结果 血培养真菌阳性,经Vitek 2全自动微生物分析系统鉴定为新型隐球菌.肺泡灌洗液经印度墨汁染色后,在低倍镜下观察,黑色背景中可见透明荚膜包绕的酵母细胞,但肺泡灌洗液真菌培养未见生长.结论 将墨汁染色用于肺泡灌洗液隐球菌感染检测,可获得满意的结果,具有很好的诊断价值.
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尾加压素Ⅱ在哮喘小鼠气道重塑中的表达
目的:观测小鼠哮喘激发后尾加压素(Urotensin Ⅱ;U-Ⅱ)水平及气道形态学参数变化,探究U-Ⅱ在哮喘气道重塑中的作用.方法:哮喘组:20只健康小鼠,分为2组,用卵蛋白超声雾化激发哮喘,分别连续4周和8周；对照组:生理盐水雾化激发哮喘,观察3组气道形态学参数、血浆及肺泡灌洗液U-Ⅱ水平有无统计学差异及相关性.结果:血浆及肺泡灌洗液U-Ⅱ比较,哮喘8周组＞哮喘4周＞对照组,差异有显著性(P＜0.01),气道形态学参数比较,哮喘8周组＞哮喘4周＞对照组,差异有显著性(P＜0.05)；气道形态学参数与哮喘激发时间呈正相关(R =0.96 ～0.97,P＜0.01)；血浆U-Ⅱ水平与哮喘激发时间呈正相关(R=0.97,P＜0.01),肺泡灌洗液与血清中U-Ⅱ含量亦呈正相关(R =0.99,P＜0.01).结论:U-Ⅱ可能参与了哮喘的病理生理过程,并参与了哮喘气道重塑.
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咳嗽变异性哮喘肺泡灌洗液IL-5变化及孟鲁司特对其调节作用
目的 观察咳嗽变异性哮喘儿童肺泡灌洗液IL-5变化及孟鲁司特对其调节作用.方法 60例咳嗽变异性哮喘患儿随机分为A、B组各30例,对照组30例为同期行支气管镜检查的健康儿童,A组给予常规治疗,并予布地奈德雾化1 ng一天2次,治疗4周;B组在A组治疗基础上予孟鲁司特5 mg口服每晚1次,疗程为4周.观察治疗前后肺泡灌洗液IL-5变化.结果 治疗前A、B组IL-5水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05),与对照组比较,差异有显著性(P＜0.01);治疗后A、B组IL-5比较,差异有统计学意义(P＜0.01).BALF中IL-5浓度与FEV1/FVC和EOS呈明显相关(P＜0.01).结论 咳嗽变异性哮喘肺泡灌洗液IL-5显著增高,孟鲁司特能降低BALF中IL-5水平,其水平对于咳嗽变异哮喘诊断和治疗有重要意义.
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孟鲁司特钠对儿童哮喘肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞调亡的影响
目的:观察孟鲁司特对儿童哮喘肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞( BALF-EOS)凋亡的影响.方法:选择中、重度哮喘患者42例,随机分为对照组和治疗组各21例,对照组给予常规治疗,治疗组在此基础上口服孟鲁司特钠片5 mg每日1次睡前,疗程4周.比较2组治疗前后EOS水平和凋亡率,观察差别有无统计学意义.结果:治疗前EOS水平比较,差别无统计学意义(P＞0.05)；治疗1周和4周后EOS水平比较,差别有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01)；治疗前EOS凋亡率比较,差别无统计学意义(P＞0.05)；治疗1周和4周后EOS调亡率比较,差别有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:孟鲁司特可诱导BALF-EOS凋亡,减少肺内EOS数量.
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肺癌患者支气管肺泡灌洗液中端粒酶和T抗原检测
目的:检测肺癌患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中端粒酶和T-抗原.方法:肺癌组63例,其中中心型49例,周围型14例;非肺癌疾病组(对照组)31例.对患者BALF中端粒酶、T-抗原进行检测,并与纤支镜刷检,BALF细胞学检查结果比较.端粒酶检测采用PCR-TRAP银染法,T-抗原检测采用半乳糖氧化酶法.结果:①肺癌组BALF中端粒酶、T-抗原阳性检出率分别为76.2%和68.3%,均高于对照组的6.5%和9.7%(P<0.01).②肺癌组BALF中端粒酶和T-抗原联合检测阳性率为93.7%, 高于单项阳性检出率(P<0.01).③中心型肺癌组BALF中端粒酶阳性率为71.4%,T-抗原为67.3%,均高于BALF细胞学阳性率12.2%(P<0.01),但与刷检细胞学阳性率61.2%间差异无统计学意义(P>0.05).周围型肺癌组BALF中端粒酶阳性率为92.9%,高于刷检细胞学阳性检出率的50%(P<0.05)及BALF细胞学阳性检出率的21.4%(P<0.01);T-抗原阳性检出率为71.4%,高于刷检细胞学阳性检出率的50%(P>0.05)及BALF细胞学阳性检出率的21.4%(P<0.05).结论:①肺癌BALF中端粒酶、T-抗原均有检出.②中心型肺癌BALF中端粒酶、T-抗原阳性检出率均高于BALF细胞学阳性检出率.③BALF中端粒酶的检测对周围型肺癌诊断更有价值.
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急性百草枯中毒患者入院时百草枯血药浓度与肺泡灌洗液中内皮素-1浓度的关系
目的 探讨急性百草枯中毒患者百草枯血药浓度与患者肺泡灌洗液中内皮素-1(ET-1)的关系.方法 百草枯中毒患者15人(观察组),按照患者入院时血药浓度又分为0～4mg·L-1组、4～8mg·L-1组、8～12 mg·L-1组、＞ 12 mg·L-1组,对照组为健康体检者10人,采用酶联免疫吸附法测所有研究对象肺泡灌洗液中ET-1的浓度.结果 观察组ET-1浓度(31.40±8.12) μg·L-1高于对照组(18.71±6.89)μg·L-1 (P ＜0.05)；ET-1的浓度随中毒剂量的升高而升高(P＜0.05).结论 百草枯中毒患者肺泡灌洗液中ET-1水平可判断患者病情的重要指标之一.
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甲泼尼龙静脉滴注对难治性支原体肺炎患儿肺泡灌洗液炎症因子表达的影响
目的 观察甲泼尼龙静脉滴注对难治性支原体肺炎(RMPP)患儿肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子表达的影响.方法 选择2015年5月至2018年5月长治市妇幼保健院收治的难治性支原体肺炎患儿114例为研究对象,按照密封信封法分为研究组(在基础治疗上给予甲泼尼龙+阿奇霉素治疗3d后行纤维支气管镜肺泡灌洗术治疗)和对照组(在基础治疗上给予阿奇霉素治疗3 d后行纤维支气管镜肺泡灌洗术治疗),每组57例.比较两组患儿临床症状改善时间、BALF中白细胞介素(IL)等炎性介质水平、常规炎症指标和治疗安全性.结果 研究组体温恢复、咳嗽缓解、肺部啰音和阴影消失时间及住院时间均少于对照组(P<0.05).研究组BALF中IL-2、IL-4、IL-6、IL-8及肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ水平均低于对照组(P<0.05).治疗后,两组患儿红细胞沉降率、C反应蛋白及中性粒细胞百分比均降低(P均<0.05),且研究组上述炎症指标均低于对照组(P均<0.05).研究组不良反应总发生率(7.02％)与对照组(5.26％)比较差异未见统计学意义(P>0.05).结论 甲泼尼龙辅助治疗可有效降低RMPP患儿BALF炎症因子水平,改善炎症反应,促进患儿康复.
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加味定喘汤对支气管哮喘外周血及肺泡灌洗液内嗜酸性粒细胞的影响
目的 研究加味定喘汤对支气管哮喘患者外周血及肺泡灌洗液(BALF)内嗜酸性粒细胞计数(EOS)影响,探讨加味定喘汤治疗支气管哮喘患者慢性气道变应性炎症(AAI)的疗效机制.方法 将98例根据随机数字法分为2组,A组49例,予加味定喘汤治疗.B组49例,予以沙美特罗/丙酸氟替卡松粉吸入剂(商品名舒利迭)吸入.观察患者治疗前后外周血中EOS及BALF中EOS的变化,并在住院期间做痰培养找真菌.结果 经治疗后,两组的外周血以BALF中EOS计数均明显下降(P<0.05);A组的真菌感染明显少于B组(P<0.05);临床中没有发现严重的不良反应.结论 加味定喘汤能够明显降低哮喘患者外周血中嗜酸性细胞(EOS)计数以及肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸性粒细胞(EOS)计数,副作用少,值得推广.
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肺泡灌洗液中半乳甘露聚糖抗原检查在诊断肺部真菌感染中的应用
目的:观察肺泡灌洗液(BALF)中半乳甘露聚糖抗原检查(GM试验)在诊断肺部真菌感染中的应用和价值.方法:选取92例肺部感染患者行支气管镜下肺泡灌洗,收集BALF行GM试验,并同时做外周血清GM试验和痰真菌培养.结果:发现BALF中的GM试验(阳性结果:检测值＞1)与肺部真菌感染的危险因素之间无差异(P＞0.05);与CT影像学(多发结节、多发浸润)、发热之间无差异(P＞0.05).BALF中GM试验与痰真菌培养结果有显著关联(P＜0.05),而血清中GM试验与痰真菌培养阳性结果无关联(P＞0.05).根据BALF中GM试验阳性结果选择肺部感染的抗真菌治疗,发现64.2％患者抗真菌治疗有效.结论:BALF中GM试验检测结果可作为临床上肺部真菌感染一个较好的辅助诊断依据.
关键词： 肺泡灌洗液 半乳甘露聚糖抗原检查试验 真菌感染 -
微小RNA-30a在老年特发性肺间质纤维化患者肺泡灌洗液中的表达及其下游靶基因预测
目的 检测老年特发性肺间质纤维化(IPF)患者肺泡灌洗液中微小RNA(miRNA.miR)-30a的表达,并对其进行潜在靶基因预测和验证.方法 选择我院呼吸内科IPF患者32例为观察组,与观察组年龄和性别相匹配的健康体检者16例为对照组.提取分离所有受试者肺泡灌洗液中的miRNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法,检测miR-30a的表达水平,运用miRanda、PicTar和TergetScan等靶基因预测分析软件及其他生物信息学方法,筛选miR-30a潜在调控的靶基因,并对关键基因进行验证.结果 与对照组比较,71.8％ (23/32)的IPF组中miR-30a表达水平降低,差异有统计学意义(P＜0.01).预测的56个交集靶基因涉及到离子通道、细胞凋亡、细胞分化、信号传导、免疫自噬等通路,并检验确证miR-30a与转化生长因子-β(TGF-β)激酶1(TAK1)结合蛋白3(TAB3)存在直接的调控关系.结论 miR-30a在IPF患者肺泡灌洗液中低表达,由此产生的基因TAB3高表达可能是导致纤维化加剧的关键因素之一.
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老年特发性肺间质纤维化患者肺泡灌洗液游离囊泡中微小RNA表达差异的研究
目的 在老年特发性肺间质纤维化(IPF)患者肺泡灌洗液游离囊泡(Exosome)中筛选出表达差异的微小RNA(miRNA).方法 收集10例老年IPF患者及10例健康志愿者的肺泡灌洗液并分离Exosome.进行miRNA分离,分离后获得的miRNA采用高通量miRNA表达差异定量检测阵列进行检测,检测结果采用GeneCopoiea在线工具进行分析.结果 高通量miRNA表达差异定量检测阵列显示,与健康对照组比较,在肺泡灌洗液的Exosome中miR-125b、miR-128、miR-21、miR-100、miR-140-3p、miR-374b与健康对照组比较,表达呈上调趋势,分别增高了5.42、9.93、7.62、5.86、7.80、4.16倍,let-7d、miR-30a、miR-27b和miR-103呈下调趋势,分别下降了2.41、2.87、3.27、3.45倍,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 老年IPF患者肺泡灌洗液Exosome中存在miRNA表达差异.
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大剂量氨溴索治疗严重颅脑外伤所致急性肺损伤23例
目的 探讨大剂量氨溴索对严重颅脑外伤所致急性肺损伤在短期内的治疗作用.方法 将严重颅脑外伤所致急性肺损伤患者51例根据氨溴索用量分为两组.大剂量组23例,静脉滴注氨溴索,每次330 mg,tid,连续7 d;常规剂量组28例,静脉滴注氨溴索,每次30 mg,tid,连续7 d.比较两组病例治疗前及治疗后1,3,7 d氧合指数、肺泡灌洗液白细胞介素8(IL-8)、IL-10浓度的变化,比较治疗前后急性呼吸窘迫综合征的发生率.结果 两组肺泡灌洗液的IL-8、IL-10浓度在治疗后较治疗前显著降低(P＜O.01).大剂量组在第3天和第7天,IL-8、IL-10浓度显著低于同期常规剂量组的水平(P＜0.01);氧合指数大剂量组在第7天较常规剂量组明显升高(P＜0.01).结论大剂量氨溴索治疗严重颅脑外伤所致急性肺损伤在短期内能有效抑制肺泡内的炎性因子,提高氧合指数,改善缺氧,具有良好的肺保护作用,且未见严重不良反应.
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检测肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群对肺癌的诊断价值
目的 探讨流式细胞免疫荧光三色分析技术检测肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群的方法和其在肺部恶性肿瘤诊断中的意义.方法 采用流式细胞与CD4FITC/CD8PE/CD3PerCP三色荧光抗体检测肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群,以SSC/CD3 PerCP圈出T淋巴细胞群,分析两组患者肺泡灌洗液中Th(CD3+、CD4+)及Ts(CD3+、CD8+)细胞占T淋巴细胞的百分比.结果 肺良性疾病组Ts细胞占T淋巴细胞的(44.54±9.56)%、Th细胞占T淋巴细胞的(49.28±12.88)%、Th/Ts比值为1.13±0.29;肺部恶性肿瘤组Ts细胞占T淋巴细胞的(64.31±7.37)%、Th细胞占T淋巴细胞的(35.76±7.71)%、Th/Ts比值为0.57±0.18;与良性病变组比较,恶性组Th下降(P＜0.05),Th/Ts比值显著下降(P＜0.01),而Ts显著升高(P＜0.01).结论 肺部恶性肿瘤细胞免疫功能低下,可以通过流式细胞术检测肺泡灌洗液T淋巴细胞亚群,为临床诊断提供依据.
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咳喘宁对RSV诱发哮喘大鼠肺泡灌洗液EOS计数及IL-17、IL-8含量的影响
目的:观察咳喘宁对呼吸道合胞病毒(RSV)诱发哮喘模型大鼠肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)计数及白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-8(IL-8)含量的影响.方法:将60只SD大鼠随机分成6组,每组10只,分别为正常组、模型组、西药治疗组、咳喘宁大、中、小剂量组.以卵白蛋白致敏激发并用RSV滴鼻建立哮喘大鼠模型.实验第49天开始给药干预,干预7d后处死大鼠,检测各组大鼠肺泡灌洗液EOS计数、IL-17及IL-8含量.结果:咳喘宁组肺泡灌洗液中EOS计数、IL-17及IL-8含量明显低于模型组;咳喘宁与西药相当,但作用与药物剂量相关.结论:咳喘宁可降低RSV诱发哮喘大鼠EOS浸润、IL-17及IL-8的表达.
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DNA定量分析在支气管镜刷检及肺泡灌洗液中的应用价值
目的:对比支气管镜刷检、肺泡灌洗液的液基细胞学与DNA定量分析结果,探讨细胞DNA定量分析在支气管镜刷检及肺泡灌洗液中的应用价值.方法:选取支气管镜刷检+肺泡灌洗液,并进行细胞DNA定量分析与液基细胞学诊断的368例患者,将两者结果与病理活检结果进行对比.结果:支气管镜刷检细胞DNA定量分析灵敏度、特异度分别为90.8％和79.8％,肺泡灌洗液DNA定量分析的灵敏度、特异度分别为85.8％和78.9％.液基细胞学在支气管镜刷检诊断的灵敏度、特异度分别为68.1％和63.4％,在肺泡灌洗液中的灵敏度、特异度分别为65.9％和60.8％.支气管镜刷检及肺泡灌洗液的细胞DNA定量检测的灵敏度、特异度均高于液基细胞学,二者比较差异有统计学意义(P<0.01).支气管镜刷检、肺泡灌洗液的细胞DNA定量分析的阳性预测值分别为83.5％和82.4％.结论:细胞DNA定量分析在支气管镜刷检和肺泡灌洗液中有很好的应用价值,同时联合液基细胞学检查能提高恶性肿瘤的检出率,降低漏诊和误诊的风险.
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重症肺炎支原体肺炎患儿肺泡灌洗液中Th1/Th2细胞免疫应答状况的研究
目的:检测重症肺炎支原体肺炎(MPP)患儿肺泡灌洗液(BALF)和血清中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4),研究Th1/TH2细胞免疫应答的状况及意义,并评价BALF中细胞因子检测在MPP诊治中的临床价值.方法:采用双抗体夹心ELISA检测25例重症MPP患儿BALF和血清中IL-4及IFN-γ的浓度,并设支气管异物组(25例)和MPP轻症组(25例)作为对照.结果:重症MPP患儿BALF中IL-4和IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比值明显高于支气管异物对照组,差异有统计学意义(P<0.01或0.05).重症MPP患儿血清中IL-4水平及IL-4/IFN-γ比值明显高于支气管异物组和MPP轻症组,差异有统计学意义(P<0.01或0.05).重症MPP患儿BALF中IL-4水平及IL-4/IFN-γ比值高于血清标本,差异有统计学意义(P<0.05).结论:重症MPP患儿存在Th1/Th2失衡,以Th2反应占优势;BALF中细胞因子的检测较之血清更为敏感,在MPP诊治中具有较高价值.
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不同检测方法对肺结核患者肺泡灌洗液中结核杆菌的诊断价值
目的:探讨不同检测方法对肺结核患者肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中结核杆菌的诊断价值.方法:收集2013年1月至2015年12月在长沙市中心医院住院的100例患者的BALF,其中临床确诊为肺结核患者65例,另选取35例作为对照,分别应用BALF涂片法、聚合酶链反应(PCR)、膜-反向斑点杂交技术(reverse dot blot,RDB)同步检测肺结核杆菌.结果:BALF涂片法,PCR检测,RDB法对结核杆菌诊断阳性率依次为43.08％,73.84％,92.31％,3种检测方法阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.05).BALF涂片法灵敏度、特异度、符合率、阴性预测值分别为43.08％,88.57％,59.00％,45.59％;PCR检测分别为73.85％,100.00％,83.00％,67.31％;RDB法分别为92.31％,100.0％,95.00％,87.50％.结论:RDB法不仅能准确诊断结核杆菌,且能快速、简单地分辨肺结核杆菌耐链霉素(SM)、利福平(RFP)、异烟肼(INH)基因型,具有较高的临床应用价值.
关键词： 肺泡灌洗液 涂片检查法 聚合酶链反应 膜-反向斑点杂交技术 结核杆菌 -
不同检测方法对肺结核患者肺泡灌洗液中结核杆菌的诊断价值
目的:探讨不同检测方法对肺结核患者肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中结核杆菌的诊断价值.方法:收集2013年1月至2015年12月在长沙市中心医院住院的100例患者的BALF,其中临床确诊为肺结核患者65例,另选取35例作为对照,分别应用BALF涂片法、聚合酶链反应(PCR)、膜-反向斑点杂交技术(reverse dot blot,RDB)同步检测肺结核杆菌.结果:BALF涂片法,PCR检测,RDB法对结核杆菌诊断阳性率依次为43.08％,73.84％,92.31％,3种检测方法阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.05).BALF涂片法灵敏度、特异度、符合率、阴性预测值分别为43.08％,88.57％,59.00％,45.59％;PCR检测分别为73.85％,100.00％,83.00％,67.31％;RDB法分别为92.31％,100.0％,95.00％,87.50％.结论:RDB法不仅能准确诊断结核杆菌,且能快速、简单地分辨肺结核杆菌耐链霉素(SM)、利福平(RFP)、异烟肼(INH)基因型,具有较高的临床应用价值.
关键词： 肺泡灌洗液 涂片检查法 聚合酶链反应 膜-反向斑点杂交技术 结核杆菌 -
呼吸道感染儿童鼻咽抽吸物和BALF的病原学差异分析
目的：呼吸道感染儿童鼻咽抽吸物( NPA)和肺泡灌洗液( BALF)的病原学差异分析。方法采集本院儿科住院治疗的急性呼吸道感染的140例患儿的NPA和BALF,比较NPA和BALF中各病原体检出率和不同疾病患者各病原体检出率的差异,以及NPA和BALF中各病原体单纯感染率和混合感染率的差异。结果与BALF相比,NPA中细菌检出率(17.14％ vs 8.57％)和非典型病原体检出率(84.29％ vs 69.29％)分别高于BALF(P均<0.05)；NPA中病毒检出率低于BALF中的检出率(6.43％ vs 14.29％)。 NPA中非典型病原体的单纯感染高于混合感染(45.0％ vs 12.86％)；BALF中非典型病原体的单纯感染高于混合感染(50.71％ vs 18.57％)(P<0.05)。肺炎患者的细菌、病毒、非典型病原体检出率均高于支气管炎、毛细支气管炎患者( P<0.05)。结论鼻咽抽吸物中细菌和非典型病原体的检出率高于肺泡灌洗液,病毒的检出率低于肺泡灌洗液,肺炎中病原体的检出率高于支气管炎、毛细支气管炎患者。
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内毒素诱导急性肺损伤小鼠支气管肺泡灌洗液中谷氨酸含量变化的初步研究
目的 观察LPS诱导急性肺损伤时肺内是否存在谷氨酸(Glu)的释放.方法 腹腔注射内毒素制备小鼠急性肺损伤模型,于6h后采用生理盐水行支气管肺泡灌洗,用高效液相色谱法测量灌洗液中氨基酸的浓度.结果 与生理盐水对照组相比,LPS处理组支气管肺泡灌洗液中Glu的浓度增高(P<0.01);苏氨酸、蛋氨酸及精氨酸的浓度降低(P<0.05),其它氨基酸浓度无显著性变化.结论 在LPS诱导的肺损伤过程中肺组织中部分氨基酸代谢发生显著变化,肺内谷氨酸的释放增多,进一步提示Glu参与了内毒素诱导的肺损伤的病理生理过程.
