首页 > 文献资料
-
富氢水对创伤性脑损伤大鼠Nrf2表达及氧化应激损伤的影响
目的 探讨富氢水对创伤性脑损伤(TBI)大鼠核因子E2相关因子2(Nrf2)表达及氧化应激损伤的影响.方法 将90只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、TBI组、富氢水干预组,每组30只.采用改良Feeney法自由落体撞击制作TBI模型;假手术组开颅窗后不撞击.富氢水干预组撞击致脑损伤后腹腔注射富氢水5 mL/kg,每日1次,共5d;假手术组和TBI组给予等量生理盐水.各组分别于术后6、12、24、48 h和5d时取6只大鼠进行神经功能缺损评分(NSS),活杀后取损伤灶周边皮质脑组织备检.分光光度法检测过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测Nrf2 mRNA和核蛋白表达;苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织病理学改变.结果 ①NSS评分:富氢水干预组术后12、24、48 h和5d时NSS评分(分)较TBI组明显下降(12 h:9.83±2.32比13.17±2.71,24 h:9.83±2.79比13.50±2.43,48h:7.50±2.07比11.83±2.14,5 d:5.50±1.87比10.50±2.43,均P＜ 0.05).②TBI术后CAT、GSH-Px明显低于假手术组,MDA明显高于假手术组,以24h时为明显[CAT (kU/g):1.080±0.312比3.571±0.758,GSH-Px(kU/g):9.195±3.173比32.385±10.619,MDA(μmol/g):12.282±2.896比4.349±1.511,均P＜0.01];富氢水干预组各项指标均明显改善,接近假手术组水平.③RT-qPCR:3组各时间点Nrf2 mRNA表达差异均无统计学意义.④Western Blot:TBI组术后脑组织Nrf2核蛋白表达(灰度值)较假手术组明显上升,24 h达高峰(0.703±0.262比0.238±0.120,P＜0.05);富氢水干预组术后Nrf2核蛋白表达明显高于TBI组,以24h时为明显(1.110±0.372比0.703±0.262,P＜0.05).⑤HE染色:假手术组脑组织结构完整;TBI组各时间点出现不同程度的脑损伤,以24h时损伤为明显;富氢水干预组损伤较TBI组明显减轻.结论 富氢水可上调TBI大鼠脑组织Nrf2表达,减轻脑组织氧化应激损伤,其机制可能与Nrf2诱导其下游抗氧化物酶表达有关.
关键词： 核因子E2相关因子2 富氢水 创伤性脑损伤 氧化应激 -
Nrf2在EGCG诱导食管癌细胞凋亡中的作用
目的：探索核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid-2-related factor 2，Nrf2）是否影响表没食子儿茶素没食子酸酯（-）-epigallocatechin-3-gallate，EGCG）对食管癌细胞ECA-109的凋亡。方法：应用MTT方法在ECA-109的Nrf2干扰细胞（si-RNA）与阴性对照细胞（si-NC）和空白对照细胞（control）中计算EGCG的半数致死量（IC50）。使用流式细胞仪分析EGCG对3组细胞凋亡的影响。使用Western blot分析EGCG对3组细胞Nrf2与cleaved-Caspase-3蛋白表达的影响。结果：在食管癌ECA-109细胞中，EGCG能够诱导Nrf2的表达，而Nrf2的缺失明显降低了EGCG的IC50、增加了凋亡率、上调了其对cleaved Caspase-3蛋白的影响。结论：EGCG对Nrf2的诱导减弱了其对食管癌细胞凋亡的影响。
关键词： 表没食子儿茶素没食子酸酯 核因子E2相关因子2 凋亡 食管癌 干扰 -
肺癌细胞A549和H460对137Csγ射线辐射敏感性差异的研究
目的 研究肺癌细胞A549和H460对137Cs γ射线的辐射敏感性差异及核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白含量的差异.方法 使用2、4、6 Gy 137Cs γ射线照射A549和H460细胞;1、2、4、6Gy137Cs γ射线照射H460细胞,用克隆形成法检测细胞增殖能力,单细胞凝胶电泳检测细胞DNA损伤修复情况,casp_1.2.3b1彗星分析软件分析olive尾距值和尾部DNA含量,蛋白质印迹法检测Nrf2蛋白表达量.克隆形成率、olive尾距值和尾部DNA含量采用独立样本t检验进行比较.结果 经2、4、6 Gy137Csγ射线照射后,肺癌A549细胞的克隆形成率分别为(73.78±14.69)％、(42.26±3.19)％、(17.50±2.18)％;H460细胞的克隆形成率分别为(56.38±6.28)％、(23.82±8.25)％、(4.66±0.87)％,肺癌A549细胞克隆形成率高于H460细胞,且差异均有统计学意义(t=7.99,P=0.015;t=6.75,P=0.019;t=12.03,P=0.005).4 Gy照射后2h,肺癌H460细胞的olive尾距值(1.27±0.05)和尾部DNA含量(4.51±0.19)％明显高于A549细胞[0.68±0.04、(2.12±0.14)％],且差异均有统计学意义(t=8.69、10.30,均P＜0.05).蛋白质印迹实验结果显示,肺癌A549比H460细胞系的Nrf2蛋白丰度高,照射后两种细胞中的Nrf2蛋白水平均升高,但肺癌A549细胞明显高于H460细胞.结论 肺癌A549细胞系对137Csγ射线的辐射抗性强于H460细胞系,这种辐射抗性差异可能与两种细胞系内Nrf2蛋白的含量相关.
-
Nrf2-自噬通路在大鼠切口痛-瑞芬太尼诱导痛觉过敏中的作用
目的 探讨切口痛-瑞芬太尼痛敏模型大鼠脊髓内核因子E2相关因子2(Nrf2)-自噬通路在痛觉过敏中的作用.方法24只雄性SD大鼠依随机数字表法分为3组:盐水+切口痛组(I组)、切口痛-瑞芬太尼痛敏组(RI组)、Nrf2激动剂t-BHQ组(t-BHQ组),每组8只.I组和RI组建模前分别经尾静脉输注生理盐水0.1 mL/(kg·min)和瑞芬太尼1 μg/(kg·min),连续输注60 min.t-BHQ组于输注瑞芬太尼前0.5 h腹腔注射t-BHQ(15 mg/kg),12 h 1次,连续4次,余处理同RI组.3组输注同时于双侧后足建立Brennan切口痛模型.分别于输注前24 h(T0)、输注后2 h(T1)、6 h(T2)、24 h(T3)和48 h(T4)测定大鼠机械刺激缩足阈值(PWT)及热刺激缩足潜伏期(PWL).测试完毕后将大鼠处死,取L4~6脊髓节段,Western blot法测定脊髓自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、Beclin-1、Nrf2及其下游分子血红素氧化酶1(HO-1)表达水平.结果 随着处理时间的延长,3组PWT、PWL呈总体下降的趋势.从T1开始,与I组相比,RI组PWT下降、PWL缩短,T4时LC3Ⅱ、Beclin-1表达升高、Nrf2、HO-1蛋白表达降低(P<0.05);与RI组相比,tBHQ组PWT升高、PWL延长(P<0.05),同时Nrf2、HO-1、LC3Ⅱ、Beclin-1蛋白表达均明显升高(P<0.05).结论 Nrf2-自噬通路的激活可明显改善切口痛-瑞芬太尼诱导的痛觉过敏.
-
Keap1-Nrf2-ARE通路在肺部疾病中的研究进展
核因子E2相关因子2(Nrf2)是细胞调节抗氧化应激反应的重要转录因子,通过与其胞浆伴侣蛋白Keap1和抗氧化反应元件(ARE)相互作用,启动编码抗氧化蛋白和Ⅱ相解毒酶的基因表达,在细胞防御保护中发挥作用.Nrf2缺失或激活障碍,将加重氧化应激源的细胞毒性,导致细胞功能障碍、凋亡甚至死亡.Keap1-Nrf2-ARE通路在炎症、肿瘤、衰老、凋亡、神经损伤、呼吸系统疾病、心血管疾病和自身免疫病等疾病中发挥广泛的细胞保护功能.本文对Keap1-Nrf2-ARE通路在肺部疾病中的新研究进展进行了综述.
-
核转录因子Nrf 2在帕金森病中的作用
核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid-2-related factor 2，Nrf2）是细胞调节抗氧化应激反应的重要转录因子，其与抗氧化反应元件（anti-oxidative response element，ARE）结合，形成的Keap1-Nrf2-ARE信号通路是机体抵抗内、外氧化应激的关键保护性通路。现有研究显示Keap1-Nrf2-ARE信号通路对帕金森病患者具有重要的神经保护作用。该文对近年来Nrf2在治疗帕金森病方面的作用及其机制，以及以Nrf2为药物治疗靶点治疗帕金森病的新研究成果进行总结。
关键词： 核因子E2相关因子2 帕金森病 氧化应激 -
PI3K/Akt信号通路在大鼠过度训练致急性肾损伤中的作用及山莨菪碱的干预效应
目的:探讨PI3K/Akt信号通路在过度训练致急性肾损伤中的变化和作用,以及山莨菪碱是否通过PI3K/Akt信号通路起到肾脏保护作用.方法:将60只大鼠随机分为四组:正常对照组(NC)、过度训练组(OT)、过度训练+山莨菪碱组(OTA)、过度训练+渥曼青霉素组(OTW).除NC组外,其余各组分为建模后即刻、6h和24 h三个亚组.通过一次性游泳力竭运动建立过度训练模型.OTW和OTA组于建模前20分钟分别腹腔注射渥曼青霉素25 μl/kg和山莨菪碱10 mg/kg.于相应时点检测血肌酐、尿素、肌酸激酶水平;Western blot法检测肾组织Akt、p-Akt、Nrf2表达;TUNEL法检测肾脏细胞凋亡.结果:与NC组相比,OT组出现肾功能损伤和细胞凋亡,p-Akt、Nrf2表达上调(P＜0.05).与OT组相比,OTA组部分时点肾功能改善,细胞凋亡减少,p-Akt、Nrf2表达进一步上调(P＜0.05).OTW组总体表现与OTA组相反(P＜0.05).各组间Akt表达无明显差异.结论:在过度训练致急性肾损伤中,PI3K/Akt通路激活增多,进而减少过氧化反应,改善肾功能,抑制细胞凋亡.山莨菪碱可通过该通路发挥肾脏保护作用.
-
莱菔硫烷诱导人肝细胞硫氧还蛋白还原酶表达
目的 探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对人肝细胞系HHL-5细胞硫氧还蛋白还原酶-1(thioredoxinreductasel,TR1)的诱导作用及机制.方法 采用WST试验观察SFN对HHL-5细胞24h的细胞毒作用,及TaqManone-step RT-PCR测定对TR1 mRNA的诱导,蛋白印迹法(Western blotting)测定核因子E2相关因子2(nuclear fac-tor erythroid 2-related factor2,Nrf2)的蛋白表达.结果 5mol/L SFN处理HHL-5细胞24h促进细胞增殖,更高剂量表现生长抑制作用;SFN处理HHL-5细胞24h呈剂量依赖性诱导TR1转录,10mol/L SFN对TRI的诱导为对照组的4.6倍;20μmol/L SFN处理1h后明显诱导了胞浆和胞核Nrf2蛋白表达,并且这种诱导呈明显的时间依赖性.结论 SFN可能通过诱导转录因子Nrf 2介导的TR1转录,从而增强机体抗氧化防御系统机能.
关键词： 莱菔硫烷 异硫氰酸盐 硫氧还蛋白还原酶 核因子E2相关因子2 -
低氧对视网膜神经节细胞中Nrf2及其调控的抗氧化酶表达的影响
目的 探讨化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)对小鼠视网膜神经节细胞(RGC)中核因子E2相关因子2(Nrf2)及其下游调控的抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)表达的影响.方法 以小鼠视网膜神经节细胞株RGC-5为研究对象,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞生长活性筛选适CoCl2作用浓度;适浓度的CoCl2作用RGC-5细胞2、6、12、24h,Western Blot检测细胞内总的及细胞核内Nrf2蛋白的表达;Real-time RT-PCR检测SOD和CAT的mRNA表达.结果 适CoCl2浓度为200μmol/L,CoCl2作用2hRGC-5细胞内和细胞核内Nrf2蛋白表达水平开始上调,6h达高峰,12h下降,24h恢复正常.而CoCl2作用2h,SOD和CATmRNA在RGC-5细胞表达水平开始上升,12h达高峰,24h开始回落但仍高于正常组.结论 化学性低氧模拟剂CoCl2能够诱导细胞内Nrf2蛋白表达,促其转位进入细胞核,上调其介导的抗氧化酶SOD和CAT基因的转录.
关键词： 低氧 氯化钴 小鼠视网膜神经节细胞 核因子E2相关因子2 抗氧化酶 -
莱菔硫烷诱导胰岛系INS-1细胞血红素氧合酶1的表达
背景:莱菔硫烷可用于氧化应激相关疾病的治疗,血红素氧合酶是一种催化血红素降解的应激蛋白,已经成为预防氧化攻击的首选研究靶标之一.目的:观察核因子E2相关因子2激动剂莱菔硫烷对大鼠胰岛细胞系INS-1细胞血红素氧合酶1蛋白表达作用及细胞保护机制.方法:体外培养INS-1细胞,先用3 μmol/L莱菔硫烷进行干预培养3 h,再分别加入不同的胰岛素抵抗诱导剂葡萄糖氧化酶、地塞米松和葡萄糖胺刺激建立胰岛素抵抗细胞模型.结果与结论:3 μmol/L莱菔硫烷处理INS-1细胞中血红素氧合酶1的表达增加(P < 0.05),其效应在4 h后达到高峰(P < 0.05).3 μmol/L莱菔硫烷的预处理可逆转由胰岛素抵抗诱导剂导致的血红素氧合酶1表达下调(P < 0.05).而且在葡萄糖胺处理的INS-1细胞中,莱菔硫烷对血红素氧合酶1的表达改善与磷酸化PKB的表达上调具有正相关性(P < 0.05,r = 0.23).结果证实,莱菔硫烷可能通过诱导核因子E2相关因子2介导的血红素氧合酶1表达,增强胰岛细胞抗氧化防御功能和抗损伤信号系统,从而达到拮抗胰岛素抵抗诱导剂对胰岛细胞的损伤作用.
关键词： 莱菔硫烷 胰岛细胞 血红素氧合酶1 核因子E2相关因子2 组织工程 -
丹参水溶性提取物上调血红素加氧酶1表达对H9C2心肌细胞的保护
背景:心肌缺血再灌注损伤的发病与氧化应激损伤有关.既往研究显示丹参具有改善急性梗死心肌细胞凋亡的作用.目的:探讨血红素加氧酶1介导丹参水溶性提取物对H9C2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用.方法:以H9C2心肌细胞为研究对象,实验分为4组,分别为对照组、模型组、钴原卟啉组和丹参组;用300μmol/L H2O2处理心肌细胞24 h建立心肌细胞氧化损伤模型;在建立心肌细胞氧化损伤模型后,用丹参水溶性提取物和钴原卟啉干预氧化损伤的心肌细胞.对照组不做任何处理.结果与结论:与对照组相比,模型组细胞上清液中肌酸激酶和乳酸脱氢酶含量升高,细胞裂解液中丙二醛含量升高,超氧化物歧化酶含量下降,细胞中血红素加氧酶1和核转录因子E2相关因子2表达增加;与模型组相比,丹参组和钴原卟啉组上清液中肌酸激酶、乳酸脱氢酶、丙二醛的含量降低,超氧化物歧化酶含量上升,细胞中血红素加氧酶1和核转录因子E2相关因子2表达明显升高.提示丹参水溶性提取物能够通过激活血红素加氧酶1蛋白的表达,对心肌细胞氧化应激损伤起保护作用.
-
特丁基对苯二酚抑制中波紫外线诱发HaCaT细胞氧化损伤
目的：观察特丁基对苯二酚（tBHQ）对中波紫外线紫外线B（UVB）诱发人永生化角质形成细胞HaCaT氧化损伤的影响，并探讨其作用机制。方法将HaCaT细胞随机分为4组：正常对照组（G1组）、单纯紫外线辐射组（G2组）、25μmol/L tBHQ预处理+紫外线辐射组（G3组）、50μmol/L tBHQ预处理+紫外线辐射组（G4组）。二氯二氢荧光素－乙酰乙酸酯荧光探针法检测细胞活性氧自由基含量；四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖活性；Western blot检测细胞内及细胞核内核因子E2相关因子2（Nrf2）蛋白表达；应用实时定量PCR检测过氧化氢酶（CAT）和硫氧还蛋白（SRX）的mRNA表达。结果与G1组相比，G2组HaCaT细胞内活性氧自由基含量升高，细胞存活率下降；G3、G4组细胞分别经25和50μmol/L tBHQ预处理后能明显抑制UVB诱发HaCaT细胞氧化损伤，并存在剂量依赖性。与G2组相比，G3、G4组细胞内及细胞核内的Nrf2蛋白水平显著增加，且细胞内CAT和SRX mRNA表达均明显高于G2组。结论 UVB可诱发HaCaT细胞发生氧化损伤；tBHQ可通过增加HaCaT细胞内Nrf2的蛋白表达，并促进其核转位，从而激活Nrf2－抗氧化酶（CAT和SRX）通路，消除活性氧自由基而抑制USB诱发的氧化损伤。
关键词： 特丁基对苯二酚 中波紫外线 HaCaT细胞 核因子E2相关因子2 氧化损伤 -
NRF2启动子区-617G/T多态性与胶质瘤易感性的关联
目的 探讨NRF2启动子区rs6721961多态性与胶质瘤的相关性.方法 收集156例胶质瘤和185例性别和年龄匹配的对照样本,采用Taqman基因分型技术对NRF2 rs6721961进行分型.结果 rs6721961GG、GT和TT基因型在对照组中的频率分别为48.6％、45.4％和5.9％,在胶质瘤组中分别为39.7％、46.8％和13.5％.经卡方检验,携带TT基因型者患胶质瘤的风险增加了2.77倍(x2=6.59,P=0.01).G和T等位基因在对照组中频率分别为71.4％和28.6％,在胶质瘤组中的频率分别为63.1％和36.9％,经卡方检验,携带T等位基因者患胶质瘤的风险增加了1.45倍(x2=5.21,P=0.02).结论 NRF2启动子区rs6721961多态性可能是胶质瘤的易感因素.
关键词： 核因子E2相关因子2 启动子 多态性 胶质瘤 -
Nrf2－ARE信号通路：糖尿病及其并发症防治的新靶点
有文献报道〔1～6〕，氧化应激在糖尿病及其并发症的发病中具有重要作用。机体内抗氧化防御系统Nrf2－ARE信号通路的激活，可以促使一系列第Ⅱ阶段解毒及抗氧化酶基因表达上调，从而对氧化应激损伤的器官起到保护作用〔7～9〕。
关键词： 氧化应激 糖尿病 糖尿病并发症 核因子E2相关因子2 抗氧化反应元件 -
核因子E2相关因子2表达与肺癌发生发展关系的Meta分析
目的：应用Meta分析方法评价核因子 E2相关因子2（ Nrf2）表达与肺癌发生发展的关系。方法检索2014年7月以前收录在Pubmed、Cochrane 图书馆、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库、中国学术会议论文全文数据库等数据库中的英文和中文文献，按纳入和排除标准对文献进行筛选并提取资料，采用RevMan 5.0软件进行Meta分析。结果纳入符合要求的国内外8篇文献进行后续研究分析。随机效应模型Meta分析结果显示：Nrf2在肺癌淋巴结转移组的表达量高于其在无淋巴结转移组的表达量〔OR＝0.50，95％ CI（0.26，0.95），P＝0.04〕；同时TNMⅠ＋Ⅱ组患者的Nrf2表达量与Ⅲ＋Ⅳ组患者的Nrf2表达量具有显著差异〔OR＝0.45，95％ CI（0.25，0.80），P＝0.006〕；此外还发现Nrf2表达与肺癌患者性别、吸烟史、分化程度无关。结论 Nrf2与肺癌淋巴结转移和临床TNM分期相关，可作为判断肺癌生物学行为的重要参考指标。
关键词： 核因子E2相关因子2 肺癌 -
Nrf2／ARE/HO－1通路：阿尔茨海默病神经保护的潜在靶点
近年研究表明，调节 Nrf2／ARE／HO－1通路在各种神经系统疾病中具有神经保护作用。通过遗传学或药理学手段上调Nrf2或 HO－1的表达，在动物模型和细胞体系中具有神经保护作用。因此有必要就 Nrf2／ARE／HO－1在阿尔茨海默病（AD）中作用的研究进行梳理。本文对 Nrf2／ARE／HO－1在 AD 中作用的研究历史进行了梳理。调节 Nrf2／ARE／HO－1通路的激活剂有望成为治疗 AD 的手段。氧化应激（OS）损伤在 AD 的发病机制和进展中发挥着重要的作用〔1〕。鉴于 OS 在 AD 中的重要作用，因此，针对抗 OS 的治疗策略对 AD 的发生和发展是有效的治疗途径。
关键词： 核因子E2相关因子2 血红素加氧酶-1 阿尔茨海默病 神经保护 -
Nrf2及其药理性活化剂在糖尿病心血管并发症中的作用
糖尿病(DM)导致的心脑血管并发症是危害人类健康的重大疾病.氧化应激被认为是DM相关心血管并发症发生、发展的重要机制,但通过补充外源性抗氧化剂并未能使心血管疾病患者远期获益.核因子E2相关因子2(Nrf2)可增加内源性抗氧化酶的活性从而提高机体的抗氧化应激能力,可能是治疗糖尿病心血管并发症的一个重要靶点,提示靶向Nrf药物的开发可能获得防治糖尿病相关血管并发症的新一代药物.本文就Nrf2在糖尿病相关心血管并发症发生、发展中的作用及其药理性活化剂对糖尿病(DM)相关心血管病变的治疗作用进行综述.
关键词： 核因子E2相关因子2 糖尿病 氧化应激 心血管并发症 -
不同处理方式对单侧睾丸扭转大鼠对侧睾丸Nrf2表达的影响
目的：研究未成熟大鼠单侧睾丸扭转后健侧睾丸中核因子E2相关因子2（ Nrf2）的表达，探讨不同处理方式下Nrf2表达与健侧睾丸损伤程度的相关性。方法 SD雄性未成熟大鼠36只，随机分为假手术组即对照组、扭转复位组和扭转切除组（ n＝12）。采用Turner法建立左侧睾丸扭转模型，各组大鼠分别于术后6 h、12 h、24 h以快速脱颈法处死，采集未扭转侧睾丸标本进行病理染色、丙二醛（ MDA）检测和Nrf2表达测定。结果扭转切除组与复位组相比睾丸MDA含量显著减少（P＜0.05），Nrf2基因转录和蛋白表达显著增加（ P＜0.05）。结论 Nrf2可能是睾丸扭转复位后影响健侧睾丸损伤修复的重要因素。
关键词： 睾丸扭转/复位 睾丸切除 丙二醛 核因子E2相关因子2 -
Nrf-2在纳米二氧化硅致人支气管上皮细胞氧化损伤中的作用
[目的]探讨核因子E2相关因子2(Nr-2)在纳米二氧化硅(nano-SiO2)致人支气管上皮细胞(16HBE)氧化应激损伤中的作用.[方法]分别以终浓度为1.0、2.5、5.0、10.0、25.0和50.0 μg/mL nano-SiO2处理人支气管上皮细胞24h,检测细胞活性.根据检测结果,确定本实验nano-SiO2(粒径15mm)的暴露浓度为2.5、5.0和10.0 μg/mL,分别设定为低、中、高浓度组.检测各暴露浓度组细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等氧化应激相关指标.Western Blotting检测细胞总蛋白和核蛋白中Nrf-2的表达水平,同时采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Nrf-2基因mRNA表达水平. [结果]中、高浓度nano-SiO2组16HBE胞内ROS水平明显增高(P＜0.01),同时T-SOD和GSH-Px含量降低(P＜0.05);各浓度nano-SiO2组16HBE胞内MDA含量均明显增高(P＜0.05).与对照组相比,随着nano-SiO2暴露浓度的增高,细胞总Nrf-2蛋白和Nrf-2基因的表达水平呈先增高后降低的趋势,而核内Nrf-2蛋白表达水平均明显增高. [结论]15nm粒径的SiO2可诱导人支气管上皮细胞发生氧化应激性损伤,而Nrf-2的激活和核转位在调节细胞内氧化-抗氧化体系中起重要作用.
关键词： 核因子E2相关因子2 纳米二氧化硅 人支气管上皮细胞 氧化应激 损伤 -
纳米二氧化硅致Nrf-2基因缺陷人永生化表皮细胞氧化损伤的研究
[目的]探讨纳米二氧化硅(nano-SiO2)致核因子E2相关因子2(Nrf-2)基因缺陷型人永生化表皮细胞的氧化应激损伤效应.[方法]采用RNA干扰技术构建人永生化表皮细胞(HaCaT)Nrf-2基因缺陷细胞模型,以终质量浓度(后称浓度)为2.5、5.0、10.0mg/L的nano-SiO2(15 nm粒径)分别染毒HaCaT细胞和Nrf-2基因缺陷细胞24h,检测细胞内活性氧(ROS)、8-羟化脱氧鸟苷(8-oHdG)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(r-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等氧化应激指标,并对细胞总蛋白和核蛋白中Nrf-2蛋白的表达水平进行分析.[结果]5.0、10.0 mg/L nano-SiO2可引起HaCaT细胞的活力明显降低(P＜0.05),而2.5 mg/L nano-SiO2开始即可引起Nrf-2基因缺陷细胞活力呈剂量依赖性降低(r=-0.914,P＜0.05),Nrf-2基因缺陷细胞的活力均明显低于同浓度组的HaCaT细胞(P＜0.05).各浓度组细胞内ROS、8-oHdG和MDA水平均呈剂量依赖性增高,而T-SOD和GSH-Px的含量则呈剂量依赖性降低;与同浓度组HaCaT细胞相比,Nrf-2基因缺陷细胞中相关指标的变异程度更大,差异有统计学意义(P＜0.05).正常HaCaT细胞中,低剂量组总Nrf-2蛋白和低、中剂量组核Nrf-2蛋白的表达水平增高(P＜0.05);而随着nano-SiO2暴露浓度的进一步增高,两种蛋白的表达水平又呈降低的趋势.与HaCaT细胞的阴性对照比较,Nrf-2基因缺陷细胞中总Nrf-2蛋白表达水平下降,核Nrf-2蛋白表达水平未见差异.[结论] 5.0mg/L nano-SiO2可体外诱导HaCaT细胞发生氧化应激性损伤,Nrf-2基因缺陷可通过改变细胞的抗氧化防御能力,增加HaCaT细胞对nano-SiO2的敏感性.
关键词： 核因子E2相关因子2 纳米二氧化硅 人永生化表皮细胞 氧化应激
