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FGF-21和Nrf2对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的影响
目的:研究成纤维细胞生长因子21(FGF-21)对博莱霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化炎症应答及氧化应激的影响,并探讨其抗肺纤维化的作用机制.方法:建立BLM诱导的小鼠肺纤维化的模型,40只小鼠随机分为对照组、BLM组及FGF-21(1、2及5 mg/kg)+BLM组.Western blot检测I型胶原蛋白(collagen I)、纤连蛋白(fibronectin)和核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平.DCFH-DA染色检测活性氧簇(ROS)的生成.ELISA用于测定肺组织炎症因子的表达.试剂盒检测各组小鼠肺组织中的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性和羟脯氨酸(HYP)含量.结果:FGF-21处理显著降低BLM诱导的肺组织炎症介质肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6的表达水平,减少ROS及MDA的含量,并增加抗氧化酶系统SOD和GPx的活性(P<0.05).同时,FGF-21下调BLM诱导的collagen I和fibronectin,并减少TGF-β1及HYP的含量.Nrf2沉默能够逆转FGF-21的抗纤维化作用.结论:FGF-21通过激活Nrf2信号抑制炎症应答进程,减轻氧化损伤,减少细胞外基质沉积,从而缓解BLM诱导的肺纤维化.这可能为肺间质纤维化治疗提供新的靶点.
关键词： 成纤维细胞生长因子-21 核因子E2相关因子2 炎症应答 氧化应激 肺纤维化 -
Nrf2对香烟烟雾提取物诱导的人支气管上皮细胞中IK K s表达的影响
目的:探讨香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)刺激后人支气管上皮细胞中核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)的表达与IκB激酶家族(I kappa B kinases,IKKs)的关系.方法:培养人支气管上皮细胞,分为正常对照(control)组、CSE组、15-脱氧-前列腺素J2(15-deoxy-prostaglandin J2,15d-PGJ2)预处理后CSE刺激(15d-PGJ2+CSE)组和Nrf2 siRNA转染后CSE刺激(Nrf2 siRNA+CSE)组.首先通过CSE刺激人支气管上皮细胞,再通过15d-PGJ2预处理和Nrf2 siRNA转染的方法来增加和降低Nrf2的水平,并用RT-PCR法及Western blot法观察各组细胞Nrf2与IKKs的表达.结果:支气管上皮细胞在CSE的刺激下,Nrf2和IKKα/β的mRNA表达水平均明显升高,蛋白表达水平亦明显增高(P<0.05).在支气管上皮细胞中,15d-PGJ2预处理可增加Nrf2的表达,而Nrf2 siRNA可成功抑制Nrf2的表达.Nrf2表达增加伴有IKKα/β表达明显降低;而Nrf2表达被抑制后,IKKα/β表达明显增加(P<0.05).这些变化在转录水平和翻译水平是一致的.结论:Nrf2能抑制CSE诱导的人支气管上皮细胞中IKKs的表达.
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Nrf2-ARE通路在缺氧/吡那地尔后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用
目的:探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)通路在缺氧后处理和吡那地尔后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用.方法:建立成年大鼠心肌细胞缺氧复氧模型,分离、培养心肌细胞,随机分为6组(n=8):正常组(N组)、模型组(M组)、缺氧后处理组(IPO组)和不同浓度吡那地尔后处理组(P25组、P50组和P100组).分离后的心肌细胞培养20 h后,除N组继续培养外,其余各组均缺氧45 min,复氧60min.IPO组缺氧45 min后复氧、缺氧循环3次,每次各5 min,在继续复氧60 min; P25组、P50组和P100组缺氧45 min后分别以25、50和100μ mol/L吡那地尔处理5 min,复氧60 min.采用real-time PCR及Western blotting技术检测复氧末心肌细胞中Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQ01)和超氧化物歧化酶1(SOD1)mRNA及蛋白表达水平.结果:与N组比较,其它各组与Nrf2、NQ01、SOD1及HO-1的mRNA及蛋白质表达均降低(P＜0.05)；与M组比较,其它各组mRNA及蛋白质表达均显著增高(P＜0.05)；其中IPO组和P50组mRNA转录量显著高于P25组和P100组(P ＜0.05)；P25组SOD1 mRNA显著高于P100组(P＜0.05).IPO组和P50组Nrf2、SOD1和NQ01蛋白质表达显著高于P25和P100组(P＜0.05)；P50组HO-1蛋白质表达量显著高于IPO组、P25组和P100组(P＜0.05)；P25组HO-1和NQO1蛋白质表达显著高于P100组(P＜0.05).结论:缺氧后处理和吡那地尔后处理可能通过激活Nrf2-ARE通路减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤.
关键词： 核因子E2相关因子2 吡那地尔 缺氧复氧损伤 心肌细胞 后处理 -
抗氧化应激转录因子-Nrf2的研究进展
细胞毒物、致癌物以及亲电子试剂在外界环境中无处不在,这些物质及其代谢产物直接或间接干扰DNA、蛋白质和脂质等生物大分子的生理功能,参与各种疾病包括肿瘤、老化、哮喘、急性肺损伤、动脉粥样硬化、神经退行性疾病和自身免疫病等疾病的病理生理过程,时刻威胁人类健康.为了对抗各种外来物质的攻击,细胞在进化过程中逐渐获得了对抗这些毒性物质的防御能力.其中一个对抗氧化应激重要的细胞防御机制是由核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)所介导的,Nrf2通过与胞浆蛋白Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Kelch-like epichlorohydrin-associated protein 1,Keap1)以及抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)相互作用,启动下游编码抗氧化蛋白和II相解毒酶的基因表达,发挥细胞保护作用.
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大鼠肝移植术后肝脏损伤的动态观察及核因子E2相关因子2的作用研究
目的 探讨大鼠肝移植术后肝脏损伤的规律以及核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)在其中所起的作用.方法 将35只雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠随机均分为假手术组、肝移植后4h组、肝移植后8h组、肝移植后16h组、肝移植后24 h组,每组7只,其中假手术组只进行开腹和血管分离,其余各组建立大鼠原位肝移植模型.术后相对应时间点处死大鼠,检测各组大鼠肝脏病理学改变,氧化损伤和抗氧化物的含量变化,分析大鼠肝移植术后肝脏损伤的规律及特点.同时检验移植肝Nd2蛋白的表达变化.结果 肝移植术后8h,大鼠移植肝损伤为明显,过氧化氢、羟自由基和丙二醛的含量明显升高,而抗氧化物超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、还原型谷胱甘肽的含量显著下降.随后,活性氧水平和抗氧化物活性逐渐恢复至正常水平,肝脏损伤逐渐修复.肝移植术后大鼠肝组织Nrf2蛋白的表达从术后4h即开始明显升高,肝移植术后8、16、24 h肝组织Nrt2蛋白的表达均明显高于假手术组.结论 大鼠肝移植术后8h肝脏损伤为明显,而后逐渐恢复.移植肝的损伤程度与活性氧水平以及抗氧化物活性的下降趋势高度一致.而这一变化过程可能与Nrf2的高表达上调了抗氧化物的含量密切相关.
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Nrf2-Keap1系统及相关因子在小鼠黄褐斑组织中的表达
目的:探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)-Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)系统及相关因子在小鼠黄褐斑模型皮肤中的变化.方法:将24只Balb/c雌性小鼠随机分成2组,每组12只.模型组采用中波紫外线照射联合黄体酮注射方法造模,对照组肌肉注射同剂量的灭菌注射用水,采用qPCR相对定量检测小鼠皮肤的Nrf2和Keap1基因表达水平,化学比色法检测小鼠皮肤中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果:与对照组相比,模型组小鼠皮肤组织的Keap1 mRNA表达量明显增强(P＜0.01),Nrf2 mRNA表达量无明显改变(P＞0.05),模型组SOD和GSH-Px活性明显下降(P＜0.01),MDA含量明显上升(P＜0.01).结论:氧化应激在黄褐斑发病中起着非常重要的作用,抗氧化损伤Nrf2-Keap1系统与黄褐斑的发病关系密切,可为黄褐斑的治疗提供新的靶点.
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甘草提取物对小鼠肝脏核因子E2相关因子2及其下游基因表达的影响
目的 考察甘草提取物对核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路及其下游基因尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)、γ谷氨酰半胱胺酸合成酶(γGCS)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和多药耐药相关蛋白2(MRP2)的影响.方法 12只小鼠随机分为对照组和甘草提取物组(150 mg· kg-1).给药后24 h处死取肝组织,采用qRT-PCR技术检测小鼠肝中Nrf2、UGT1A1、γ GCS、MRP1和MRP2 mRNA的表达;Western blot技术测定Nrf2蛋白的表达.结果 与对照组比较,甘草提取物显著诱导了小鼠肝脏中Nrf2 mRNA和蛋白的表达,同时Nrf2下游基因UGT1A1、γGCS、MRP1和MRP2 mRNA的表达也显著提高(均P＜0.05).结论 甘草提取物诱导了小鼠肝脏中Ⅱ相解毒酶UGT1A1、γ GCS及转运体MRP1、MRP2,其机制可能与上调Nrf2转录因子的表达,激活Nrf2细胞信号转导通路有关.
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利福平预处理通过Nrf2减轻帕金森病小胶质细胞的氧化损伤
[目的]探讨利福平对鱼藤酮诱导的BV2小胶质细胞氧化损伤中的核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响.[方法]利用鱼藤酮刺激的BV2小胶质细胞建立帕金森病氧化应激的模型,分别用不同浓度的利福平预处理BV2小胶质细胞,CCK-8法检测细胞存活率;分别用双氯荧光素(DCFH-DA)、罗丹明123染色后使用流式细胞仪检测活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP);使用脂质氧化检测试剂盒测定细胞内脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)的含量.采用WesternBlot法检测利福平对小胶质细胞Nrf2核转位以及血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达的影响.用siRNA抑制HO-1基因表达后用CCK-8法检测利福平对鱼藤酮诱导的氧化损伤的影响.[结果]与空白对照组相比,鱼藤酮刺激下BV2小胶质细胞的细胞活力明显降低.鱼藤酮可引起BV2细胞内ROS和MDA的水平显著升高以及MMP明显下降.利福平预处理可以降低鱼藤酮所引起的ROS和MDA的产生,以及逆转鱼藤酮对MMP的降低作用;利福平能够诱导Nrf2的核转位及上调HO-1蛋白的表达.使用siRNA抑制HO-1基因表达后,可逆转利福平预处理对鱼藤酮诱导的氧化损伤的抑制作用.[结论]利福平可能通过激活Nrf2信号通路,减轻鱼藤酮诱导的帕金森病小胶质细胞模型的氧化损伤.
关键词： 帕金森病 利福平 鱼藤酮 核因子E2相关因子2 小胶质细胞 -
激活核因子E2相关因子2信号通路减轻高糖诱导足细胞的凋亡
[目的]探讨激活核因子E2相关因子2(Nrf2)通路能否减轻高糖诱导足细胞的凋亡.[方法]体外培养小鼠足细胞,分为5组:对照组、高渗组、高糖组、高糖+叔丁基对苯二酚(tBHQ),高糖+N-乙酰半胱氨酸(NAC).流式细胞仪检测细胞内活性氧和凋亡;Western blot及real time-PCR检测Nrf2、醌氧化还原酶1(NQO1),血红素加氧酶(HO-1)的表达;检测足细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)及过氧化氢酶(CAT).[结果]高糖组足细胞凋亡率、活性氧及细胞MDA高于对照组(P＜0.05),而该组足细胞SOD、GSH及CAT低于对照组(P＜0.05);高糖+NAC组的足细胞凋亡率、活性氧及细胞内丙二醛低于高糖组(P＜0.05);高糖+tBHQ组足细胞的总Nrf2及核Nrf2、HO-1、NQO1的表达高于高糖组(P＜0.05),细胞内SOD、GSH及CAT高于高糖组(P＜0.05),高糖+tBHQ组足细胞的凋亡率、活性氧及细胞内丙二醛低于高糖组(P＜ 0.05).[结论]激活Nrf2通路降低高糖诱导足细胞的氧化应激,减轻足细胞凋亡.
关键词： 核因子E2相关因子2 足细胞 氧化应激 -
Keap1-Nrf2/ARE通路在肺癌中的研究进展
Keap1-Nrf2/ARE通路是机体抗氧化应激的重要保护通路,其核心成员为核因子E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)及抗氧化反应元件(ARE).Nrf2是细胞抗氧化应激的关键调控因子之一,其负调控蛋白为Keap1,Nrf2与ARE结合可启动下游靶基因的表达.Keap1-Nrf2/ARE通路与多种癌症密切相关,该通路在肺癌中的作用非常复杂,显示出促癌与防癌的双向作用.本综述将对Keap1-Nrf2/ARE通路及其在肺癌中的研究进展进行阐述,并重点阐述肺癌中Nrf2和(或)Keap1突变以及针对Keap1-Nrf2/ARE通路的肺癌治疗策略.
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核因子E2相关因子2在外周T细胞淋巴瘤组织中的表达及临床意义
目的 探讨核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor-2,Nrf2)在外周T细胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphoma,PTCL)组织中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测24例PTCL组织(PTCL组)及17例淋巴结反应性增生组织(对照组)中Nrf2的表达,并分析其与PTCL患者临床病理特征的关系.结果 Nrf2在PTCL组织和淋巴结反应性增生组织中的表达阳性率分别为41.67％和5.88％,两者比较差异有统计学意义(x2=4.796,P=0.029).Nrf2表达水平与PTCL临床分期、B症状有关(P＜0.05),与性别、年龄、乳酸脱氢酶水平(lactate dehydrogenase,LDH)无关(P＞0.05).结论 Nrf2在PTCL组织中呈高表达,在PTCL发生、发展过程中可能发挥重要作用.
关键词： 外周T细胞淋巴瘤 核因子E2相关因子2 免疫组织化学 临床意义 -
Nrf2/ARE信号通路及其在乳腺癌中的研究进展▲
核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路参与应激状态下机体氧化还原平衡的维持,是氧化应激相关疾病的重要治疗靶点.正常情况下,Nrf2与Kelch样ECH相关蛋白(Keap1)结合于细胞质中,并被快速泛素化降解;在氧化应激状态下,Nrf2被Keap1释放并转运至细胞核内,结合到ARE上激活抗氧化相关基因的表达,从而调控多种肿瘤的发生、发展、侵袭和耐药等病理过程.乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,严重危害女性的身心健康甚至危及生命.本文就Nrf2/ARE信号通路及其在乳腺癌中的调控作用进行综述.
关键词： 乳腺癌 核因子E2相关因子2 Kelch样ECH相关蛋白 信号通路 综述 -
缺血性脑卒中患者外周血中Keap1-Nrf2/ARE通路功能的变化及临床意义
目的:研究缺血性脑卒中患者外周血中Keap1-Nrf2/ARE通路功能的变化及临床意义.方法:选择在本院诊断为缺血性脑卒中的患者作为研究的卒中组,同期在体检的健康志愿者作为研究的对照组.收集外周血并测定Keap1-Nrf2/ARE通路分子及下游抗氧化酶的表达量,收集血清并测定Keap1-Nrf2/ARE通路下游抗氧化酶、神经损害标志物、氧化应激产物的含量.结果:卒中组患者外周血中Keap1的mRNA表达量以及血清中HO1、NQO1显著低于对照组,Nrf2、ARE、HO1、NQO1的mRNA表达量显著高于对照组;卒中组患者血清中 β-actin、UCH-L1、NSE、S100B、GFAP、Hepc25、ROS、MDA、AOPP、ET-1、TXB2的含量高于对照组且与外周血中Keap1的mRNA表达量呈负相关,与外周血中Nrf2、ARE的mRNA表达量呈正相关.结论:缺血性脑卒中患者外周血中Keap1-Nrf2/ARE通路功能的变化与神经损伤及氧化应激反应激活的程度密切相关.
关键词： 缺血性脑卒中 核因子E2相关因子2 抗氧化反应元件 氧化应激反应 -
芍药苷通过TLR4炎症通路和Nrf2氧化应激通路减轻大鼠脊髓损伤的实验研究
目的:研究芍药苷对脊髓损伤大鼠模型TLR4炎症通路和Nrf2氧化应激通路的影响.方法:选择雄性SD大鼠并分为假手术组、脊髓损伤组、芍药苷组,建立脊髓损伤大鼠模型后给予30 mg/kg芍药苷连续干预14天,而后取血清标本和脊髓标本,测定细胞凋亡基因、TLR4通路基因、Nrf-2通路基因的表达量.结果:脊髓损伤组大鼠脊髓中caspase-3、caspase-8、caspase-9、TLR4、MyD88、NF-kB、AP-1、Nrf-2、ARE的mRNA表达量以及血清中IL-6、TNF-α、IL-12的含量显著高于假手术组,脊髓中HO-1、SOD、GSH-PX的含量显著低于假手术组;芍药苷组大鼠脊髓中caspase-3、caspase-8、caspase-9、TLR4、MyD88、NF-kB、AP-1的mRNA表达量以及血清中IL-6、TNF-α、IL-12的含量显著低于脊髓损伤组,脊髓中Nrf-2、ARE的mRNA表达量以及HO-1、SOD、GSH-PX的含量显著高于脊髓损伤组.结论:芍药苷能够通过抑制TLR4炎症通路、增强Nrf2抗氧化应激通路来减轻大鼠脊髓损伤、抑制细胞凋亡.
关键词： 脊髓损伤 芍药苷 凋亡 Toll样受体4 核因子E2相关因子2 -
槲皮素诱导大鼠肝细胞Ⅰ型血红素氧化酶表达的分子机制
目的 研究槲皮素对大鼠原代肝细胞中Ⅰ型血红素氧化酶(HO-1)诱导的分子机制.方法 二步胶原酶技术分离培养大鼠原代肝细胞.不同剂量槲皮素作用大鼠原代肝细胞不同时间后,用RT-PCR方法检测HO-1的mRNA表达;50μmol/L槲皮素分别与10μmol/L PD98059、10μ mol/L SB203580、10 μ mol/L SP600125、1μmol/L Wormannin共孵育原代大鼠肝细胞12h后,用RT-PCR、Western blot法检测HO-1 mRNA和核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平的变化.对数据进行单因素方差分析、Bonferroni t检验.结果 大鼠原代肝细胞经25 ～ 200μmol/L槲皮素处理12h,或用50μmol/L槲皮素处理4～ 12h后,HO-1的mRNA表达水平较对照组明显升高(P值均＜ 0.01).槲皮素对肝细胞HO-1的诱导被PD98059抑制(0.79±0.05与0.16±0.02,t=19.520,P＜0.01),胞核内Nff2蛋白的表达也被PD98059明显抑制(0.14±0.04与0.04±0.01,t=4.114,P＜0.05).结论 槲皮素可能通过细胞外信号调节激酶/Nrf2信号转导通路诱导大鼠原代肝细胞HO-1的表达.
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滋肾育胎丸对电磁辐射大鼠卵巢组织氧化损伤和Nrf2蛋白表达的影响
目的：研究滋肾育胎丸对电磁辐射大鼠卵巢组织氧化损伤和卵巢颗粒细胞中核因子E2相关因子2（Nrf2）蛋白表达的影响。方法：将30只SD大鼠按体质量随机分为正常组、辐射组和辐射治疗组，每组10只。正常组大鼠不辐射，另两组置于900 MHz辐射箱中每天辐射4 h。辐射治疗组每天辐射后ig滋肾育胎丸混悬液[0.25 g（生药）/0.1 kg]，正常组和辐射组ig等体积生理盐水，连续20 d后于动情期处死大鼠。采用免疫组化法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞中Nrf2蛋白的表达，生化法检测卵巢组织总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量。结果：与正常组比较，辐射组大鼠卵巢颗粒细胞中Nrf2蛋白表达增强，卵巢组织中T-SOD和GSH-Px活性降低、MDA含量增加（P＜0.05）；与辐射组比较，辐射治疗组大鼠卵巢颗粒细胞中Nrf2蛋白表达无显著变化（P＞0.05），卵巢组织中T-SOD和GSH-Px活性升高、MDA含量降低（P＜0.05）。结论：滋肾育胎丸对900 MHz电磁辐射所致的大鼠卵巢组织氧化损伤有一定的防治作用，对Nrf2蛋白表达无明显影响。
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大黄素和黄芩苷联用对急性胰腺炎模型大鼠Akt/Nrf2通路的影响研究
目的:研究大黄素和黄芩苷联用对急性胰腺炎(AP)模型大鼠的改善作用和机制.方法:将70只大鼠随机分为假手术组、模型组、大黄素组(250 mg/kg)、黄芩苷组(250 mg/kg)、奥曲肽组(阳性对照,10μg/kg)、N-乙酰半胱氨酸组(阳性对照,180 mg/kg)和大黄素+黄芩苷组(125 mg/kg大黄素+125 mg/kg黄芩苷),每组10只.除假手术组外,其余各组大鼠均复制AP模型,造模成功后静脉注射给予相应药物.在给药后3、6、12、24 h,测定各组大鼠血清中淀粉酶、脂肪酶水平;在给药24 h后,检测大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、髓过氧化物酶(MPO)和胰腺组织中半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)水平,并采用Western blot法检测各组大鼠胰腺组织中蛋白激酶B(Akt)磷酸化和核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平.另取40只大鼠随机分为假手术组、模型组、大黄素+黄芩苷组(125 mg/kg大黄素+125 mg/kg黄芩苷)和大黄素+黄芩苷+LY294002(Akt特异性抑制剂)组(125 mg/kg大黄素+125 mg/kg黄芩苷+100 mg/kg LY294002),每组10只,进行机制验证实验.同法造模、给药,24 h后检测大鼠胰腺组织中Akt磷酸化和Nrf2蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,从给药后3 h开始,模型组大鼠血清中淀粉酶、脂肪酶水平即显著升高(P<0.01);给药后24 h,大鼠血清中MDA、MPO和胰腺组织中Caspase-3水平均显著升高(P<0.01),血清中SOD、GSH和胰腺组织中Akt磷酸化及Nrf2蛋白表达水平均显著降低(P<0.01).与模型组比较,从给药后6 h开始,各给药组大鼠血清中淀粉酶和脂肪酶水平均显著降低(P<0.01);给药24 h后,各组大鼠血清中MDA、MPO和胰腺组织中Caspase-3水平均显著降低(P<0.01),血清中SOD、GSH和胰腺组织中Akt磷酸化及Nrf2蛋白表达水平均显著升高(P<0.01).机制验证实验中,与大黄素+黄芩苷组比较,大黄素+黄芩苷+LY294002组大鼠胰腺组织中Akt磷酸化及Nrf2蛋白表达水平均显著降低(P<0.01).结论:大黄素和黄芩苷联用对AP模型大鼠具有一定的改善作用,其机制可能与促进Akt磷酸化以上调Nrf2蛋白表达,并促进其下游抗氧化酶的表达,从而降低体内氧化应激水平有关.
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辣蓼提取物对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用研究
目的:研究辣蓼提取物对大鼠急性胃黏膜损伤(AGML)的保护作用.方法:将48只大鼠随机分为正常组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、阳性组(盐酸雷尼替丁,0.05 g/kg)和辣蓼提取物低、中、高剂量组(以生药量计分别为2.7、8.1、24.3 g/kg),连续灌胃给药7 d,每天1次.末次给药1 h后,除正常组外,其余各组大鼠均灌胃无水乙醇复制AGML模型.造模1.5 h后,计算各组大鼠胃黏膜损伤指数,观察大鼠胃组织病理学变化,采用酶联免疫吸附法测定大鼠胃组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果:与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜损伤明显,黏膜下层毛细血管破裂出血,胃黏膜损伤指数显著升高(P<0.01);胃组织中Nrf2含量和SOD活性显著降低(P<0.05或P<0.01).与模型组比较,各给药组大鼠胃黏膜的损伤均不同程度减轻;阳性组和辣蓼提取物中、高剂量组大鼠胃黏膜损伤指数显著降低(P<0.05),胃组织中Nrf2含量和SOD活性显著升高(P<0.05或P<0.01).结论:辣蓼提取物对无水乙醇致大鼠AGML具有较好的保护作用,其机制可能与提高胃黏膜组织中Nrf2含量和增强SOD活性有关.
关键词： 辣蓼提取物 急性胃黏膜损伤 核因子E2相关因子2 超氧化物歧化酶 大鼠 -
锌对尿毒症血清诱导的内皮细胞氧化应激的保护作用及其机制
目的:探讨锌对尿毒症血清诱导的血管内皮细胞氧化应激的保护作用及可能机制.方法:收集尿毒症患者及健康正常人血清,以15％的血清浓度作用于血管内皮细胞.分为4组进行实验:正常血清组(N)、尿毒症血清组(U)、尿毒症血清+10μmol/L硫酸锌组(U+10)、尿毒症血清+30 μmol/L硫酸锌组(U+30).荧光素DCFH-DA探针法测定细胞内活性氧含量,采用总抗氧化能力检测试剂盒检测细胞总抗氧化能力,实时荧光定量PCR检测细胞还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸:醌氧化还原酶1 (nicotinamide adenine dinucleotidephosphate: quinone oxidoreductase 1,NQO-1)及诱导Ⅰ型血红素氧合酶(heme oxygenase,HO-1)mRNA的表达,蛋白印迹检测细胞NQO-1、HO-1及核因子E2相关因子2(nucleus factor-E2 related factor 2,Nrf2)的表达.结果:与N组比较,U组内皮细胞的总抗氧化能力明显降低(N vs.U:452.8±19.5 vs.321.4±27.8,P＜0.001),活性氧水平升高(22.9±2.7 vs.75.1±11.2,P＜0.001);而锌干预处理(U+10和U+30)则增加了细胞总抗氧化能力(U vs.U+10 vs.U+30:321.4±27.8 vs.455.7±16.0 vs.462.9±18.6,均有P＜0.001),减少了活性氧产生(75.1±11.2 vs.45.2±7.6 vs.49.3±8.3,P＜0.001);同时,尿毒症血清组及锌干预组NQO-1、HO-1 mRNA及蛋白表达增高(NQO-1蛋白:N vs.U vs.U+10:0A0±0.05 vs.0.65±0.07 vs.1.09±0.08;HO-1蛋白:0.21±0.07 vs.0.47±0.08 vs.1.09±0.11,P＜0.05),且锌干预组较尿毒症血清组增加更明显(P＜0.05);锌干预组细胞核Nrf-2表达较正常血清组及尿毒症血清组增加(N vs.U vs.U+10 vs.U+30:0.23±0.07 vs.0.25±0.07 vs.0.65±0.07 vs.0.69±0.06,均有P＜0.001);但上述指标在不同浓度的锌处理组间均无统计学差异.结论:锌可能通过促进Nrf-2核转位,增加抗氧化酶NQO-1及HO-1表达,进而增加血管内皮细胞的总抗氧化能力和削弱尿毒症血清诱导的氧化应激反应.
关键词： 尿毒症 氧化应激 锌 诱导Ⅰ型血红素氧合酶 核因子E2相关因子2 -
芍药苷对局灶性大鼠脑缺血再灌注脑组织中SOD、Nrf2表达的影响及神经保护作用
目的:研究芍药苷(paeoniflorin,PF)对局灶性大鼠脑缺血再灌注模型脑组织中超氧化物歧化酶(supemxide dismutase,SOD)、核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)在各时间点的表达情况及其神经保护作用.方法:将108只健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、给药组,每组在3、6、12、24、48、72 h进行神经功能评分,黄嘌呤氧化酶法测定S0D活性,RT-PCR、Western blot技术测定Nrf2 mRNA、蛋白分子的表达.结果:与假手术组相比,模型组的神经功能评分明显升高,SOD活性明显下降,Nrf2的表达有所增加,差异具有统计学意义(P＜0.05);与模型组相比,给予PF(20 mg/kg)能使模型组的神经功能评分降低,SOD活性有所升高,Nrf2的表达持续上调,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:PF能通过提高机体消除自由基能力和增加Nrf2表达来减轻局灶性脑缺血再灌注损伤后自由基引起的氧化损伤作用,从而对缺血性脑组织起到脑保护作用.
关键词： 大脑中动脉闭塞模型 芍药苷 超氧化物歧化酶 核因子E2相关因子2 抗氧化
