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肺结核并发糖尿病患者血浆氧化应激水平的检测结果分析
目的 分析肺结核并发糖尿病患者检测血浆氧化应激水平的情况.方法 收集2016年2月至2017年1月上海市公共卫生临床中心收治的45例肺结核患者(PTB组)、28例肺结核并发2型糖尿病患者(PTB-DM2组),及24名健康对照志愿者(HC组)的肝素抗凝血浆,分别定量检测3组患者血浆总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、血红素氧合酶-1(HO-1)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)及脂质损伤标志物丙二醛(MDA)的含量,以“中位数(四分位数)[M (P25,P75)]”表示.采用SPSS 23.0软件分析3组患者相关数据,GraphPad Prism 7.0软件作图,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 HC组、PTB组、PTB-DM2组各生化指标T-AOC[4.65(4.16,5.15)、2.70(3.50,4.30)、2.55 (2.03,3.48) U/ml]、CAT[54.20 (35.46,81.30)、23.49(9.49,44.72)、5.66(-14.00,31.98) U/ml]、HO-1[16.12 (11.84,24.09)、11.44(7.95,15.53)、8.19 (7.53,11.58) ng/ml]、GSH [5.14 (3.98,7.33)、4.69 (3.02,6.47)、2.90 (1.90,6.14) μmol/ml]、SOD[14.31 (10.63,17.33)、14.28(11.86,15.69)、13.78(12.26,18.00) U/ml]、MDA[3.60 (2.62,4.40)、5.11 (4.26,7.23)、12.77(9.47,14.89) nmol/ml]比较差异均有统计学意义(x2=35.28,P＜0.01;x2 =28.94,P＜0.01;x2 =23.00,P＜0.01;x2=9.24,P=0.010;x2 =15.53,P＜0.01;x2=59.46,P＜0.01).PTB组患者血浆的T-AOC、CAT、HO-1含量较HC组均明显下降,MDA水平较HC组明显升高,差异均有统计学意义(Z=-3.88,P＜0.01;Z=-3.82,P＜0.01;Z=-3.21,P=0.005;Z=-3.94,P=0.008).PTB-DM2组患者的T-AOC、CAT、HO-1、GSH、SOD水平均较PTB组患者均明显下降,MDA水平较PTB组患者明显升高,差异均有统计学意义(Z=-3.08,P=0.047;Z=-2.44,P=0.046;Z=-2.27,P=0.023;Z=-2.45,P=0.096;Z=-3.50,P=0.002;Z=-6.01,P＜0.01).结论 感染结核分枝杆菌后,PTB患者的抗氧化能力降低,且存在脂质氧化损伤;并发2型糖尿病可加重PTB患者的氧化应激状态,患者的抗氧化能力更低,脂质氧化损伤加剧.
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氧化应激在糖代谢紊乱中的作用
为探讨氧化应激和糖尿病发生/发展的相互关系,由四氧嘧啶诱导建立糖尿病大鼠模型,进行抗氧化干预.动物经此化学诱导剂处理后,血糖/血脂和硫代巴比妥酸反应产物(TBARs)升高,SOD降低,再经抗氧化干预,即可发生逆转恢复.试验结果表明糖/脂代谢调节和氧化应激密切相关.
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生物活性物质的抗氧化能力评价方法及其研究进展
准确评价生物活性物质的抗氧化能力已经成了氧化与抗氧化研究领域的热点问题,综述了国际上当前比较流行的几种体外抗氧化能力评价方法,如:2,2'-连氮-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)-二铵盐法、1,1-二苯代苦基苯肼法、铁离子还原/抗氧化能力测定法、氧自由基吸收能力测定法、化学发光法,以及体内抗氧化能力评价方法的关键点.
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过氧化氢处理K562细胞中JWA基因的表达及其与DNA损伤和凋亡的关系
目的研究过氧化氢(H2O2)诱导K562细胞氧化应激过程中,JWA蛋白、热休克蛋白(hsp70和hsp27)和p53蛋白的表达特点,探讨JWA参与细胞应答氧化应激的作用和可能机制.方法用0.01、0.1、1 mmol/L的 H2O2处理K562细胞10、30、60、180 min建立氧化损伤模型;用0.1 mmol/L H2O2处理不同时间(6 ～ 48 h)和不同浓度(0.5 ～ 1 000 μmol/L)的H2O2处理48 h分别诱导K562细胞凋亡, 然后用DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA损伤和凋亡,用免疫印迹方法检测热休克蛋白(hsp70和hsp27)、p53以及JWA的蛋白表达水平.结果在DNA损伤模型中,H2O2活跃地调节JWA的表达,JWA对氧化应激的应答比热休克蛋白更快速,JWA和hsp70的表达规律相似;在低剂量H2O2(0.01 mmol/L)处理时,JWA和热休克蛋白的表达均显著增高;在细胞凋亡模型中,JWA、hsp70、 hsp27和p53的表达均显著增高,其中,JWA、hsp70和p53三者的表达规律相似.结论 JWA是一个有效的环境应答基因并活跃地参与细胞应答氧化应激所致的DNA损伤和细胞凋亡的信号通路,其介导的信号通路可能与hsp70和p53有关.
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氟对甲状腺细胞凋亡的影响及其机制研究
目的 探讨氟对人正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1的毒性作用及机制.方法 分别用0(对照)、0.1、1.0、3.0 mmol/L的NaF作用于体外培养的Nthy-ori 3-1细胞24h后,采用噻唑蓝染色法、乳酸脱氢酶(LDH)比色法检测存活率和LDH漏出率,采用流式细胞术检测活性氧(ROS)水平、细胞周期构成比及凋亡率.结果 以对照组细胞存活率为100％,1.0、3.0 mmol/L NaF组细胞存活率分别为(76.64±9.13)％、(64.04±6.32)％,与对照组存活率的差异有统计学意义(P值均＜0.01).3.0 mmol/L NaF组LDH漏出率及ROS水平分别为(48.66±7.15)％,(29 993.50±1786.86),较对照组[分别为(35.24±3.02)％,(13 021.33±1067.55)]升高(P值均＜0.01).1.0 mmol/L NaF组细胞G0/G1期、S期细胞百分比分别为(40.76±5.65)％、(54.05±4.59)％,与对照组[分别为(60.09±1.76)％、(32.59±2.43)％]相比,差异有统计学意义(P值均＜0.01).3.0 mmol/L NaF组细胞凋亡率为(20.09±3.22)％,高于对照组[(9.64±3.44)％],P＜0.01.结论 试验浓度的氟能降低甲状腺细胞存活率,增加LDH漏出率和ROS产生,并使细胞发生S期阻滞及诱导细胞凋亡.
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大气PM2.5暴露对太原市过敏性鼻炎患者氧化应激水平的影响
目的 探讨大气PM2.5暴露对过敏性鼻炎患者鼻腔氧化应激水平的影响.方法 采用定组设计,招募了60例居住在太原市城区的过敏性鼻炎患者,于2017年6月至2018年1月进行4次重复测量,采集鼻腔冲洗液并测量其中氧化应激指标丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD);收集测量期间大气污染物和气象因素的监测数据,利用时间活动模式结合微环境监测法进行PM2.5暴露评估,采用混合效应模型分析PM2.5暴露浓度与氧化应激水平的关系.结果 共有49例患者完成了所有4次重复测量,年龄为(36.7±8.4)岁.4次测量研究对象MDA含量M分别为3.70、3.70、5.58和6.24 nmol/ml, SOD活力M分别为105.50、102.50、95.00和96.50 U/ml,PM2.5暴露水平分别为(40.0±2.7)、(41.5±2.5)、(52.3±5.9)和(74.7±4. 9)μg/m3.单污染物混合效应模型分析发现,MDA含量与滞后第0至3天(lag 0 d~lag 3 d)的PM2.5浓度均呈正相关,β(95%CI)值分别为0.24(0.17,0.30)、0.34(0.27,0.41)、0.32(0.20,0.44)、0.33(0.23,0.43);SOD活力与lag 0 d~lag 2 d的PM2.5浓度均呈负相关,β(95%CI)值分别为-0.99(-1.66,-0.31)、-1.35(-2.08,-0.62)、-0.94(-1.80,-0.07).多因素分析发现,控制气温、年龄等因素后,PM2.5浓度在lag 1 d与MDA含量和SOD活力存在关联,PM2.5浓度每升高10 μg/m3,MDA含量增加0.26(95%CI:0.18,0.33)nmol/ml,SOD活力下降0.87(95%CI:0.21,1.53)U/ml.结论 PM2.5暴露可加重过敏性鼻炎患者鼻腔的氧化应激反应.
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红景天苷对链脲霉素诱导糖尿病大鼠脑组织氧化应激的影响
目的 研究红景天苷对实验性糖尿病模型大鼠脑组织氧化应激的影响.方法 将大鼠按随机数字表法分为正常对照组,模型组,红景天苷高、中、低剂量组,阳性对照组,每组16只.除正常对照组外,其余各组大鼠采用高糖饮食后,一次性腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型.造模成功后,红景天苷高、中、低剂量组分别灌胃100、50、25 mg/kg红景天苷溶液;阳性对照组灌胃25 mg/kg盐酸二甲双胍溶液,正常对照组、模型组灌胃等体积生理盐水.各组均1次/d,连续给药12周后取材.分别于给药前,给药治疗第4、8、12周测定各组大鼠空腹血糖水平.给药12周后,测定各组大鼠体质量,测定血清中磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)、总抗氧化能力(T-AOC);测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平;采用苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织病理学改变.结果 给药12周后,与模型组比较,红景天苷高剂量组大鼠空腹血糖[(16.0±0.9)mmol/L比(18.0±1.2)mmol/L]显著降低(P<0.01),血清中CPK[(240.7±62.3)U/L比 (312.5 ± 78.2)U/L] 、 LDH[(265.4±54.6)U/L 比 (346.3 ± 73.8)U/L] 水平升 高 (P < 0.01) , T-AOC[(10.8±2.8)U/L 比(8.7±2.4)U/L]水平降低(P<0.01),脑组织 SOD[(11.5±3.2)U/mg 比(8.1± 2.9)U/mg]、GSH-Px[(13.1±2.8)U/mg 比(11.4±2.5)U/mg]、CAT[(3.8±1.1)U/mg 比(2.6±0.8)U/mg]升高(P<0.01或P<0.05),MDA[(5.3±1.4)U/mg比(6.3±1.8)U/mg]水平降低(P<0.01).红景天苷治疗组大鼠脑组织病理形态学改变明显改善,以高剂量组为显著.结论 红景天苷对实验性糖尿病大鼠脑组织具有剂量依赖性的保护作用,该作用可能与红景天苷改善抗氧化酶系统活性、抑制氧化应激损伤有关.
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番茄红素对2型糖尿病模型大鼠肝组织的保护作用
目的 探讨番茄红素对2型糖尿病大鼠肝脏氧化应激损伤的保护作用.方法 将80只大鼠按随机数字表法分为正常对照组,模型组,番茄红素低、高剂量组各20只.除正常对照组外,其余各组大鼠通过高脂高糖饮食和腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备2型糖尿病大鼠模型.造模成功后,番茄红素低、高剂量组分别灌胃番茄红素溶液10、20 mg/kg,正常对照组及模型组灌胃等体积生理盐水.连续给药4周,1次/d.分别于给药前和给药后2、4周测定各组大鼠空腹血糖水平.4周后,测定各组大鼠体质量和肝脏指数;检测血清中谷氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总抗氧化能力(T-AOC)水平;测定肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平;采用苏木精-尹红(HE)染色观察肝脏组织病理改变.结果 与模型组比较,番茄红素高、低剂量组大鼠血清中ALT[(714.8±291.5)U/L、(862.7±348.1)U/L比(1 007.6±375.7)U/L]、AST[(75.2±18.6)U/L、(87.6±20.3)U/L 比(99.3±21.5)U/L]、肝组织 MDA[(5.56±1.02)U/L、(5.83± 0.98)U/L 比(6.37 ± 1.18)U/L]均降低(P<0.05 或 P<0.01);番茄红素高剂量组大鼠血糖水平[(16.6 ± 1.1)mmol/L 比(17.9±1.2)mmol/L]、肝脏指数[(26.2±5.3)‰比(30.4±5.8)‰]降低,体质量[(281.5± 24.8)g 比(252.3 ± 23.5)g]增加,血清中 ALP[(135.2 ± 30.8)U/L 比(167.4 ± 32.5)U/L]活性降低、T-AOC[(10.8±2.8)U/L比(8.7±2.4)U/L]水平升高,肝组织中SOD[(10.8±2.3)U/mg比(9.1±2.3)U/mg]、GSH-Px[(16.1±3.4)U/mg 比(14.3±3.5)U/mg]、CAT[(3.16±1.08)U/mg 比(2.63±0.90)U/mg]升高(P<0.05或P<0.01).结论 番茄红素对2型糖尿病大鼠肝脏组织氧化应激损伤具有保护作用.
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黄芪桂枝五物汤加减治疗糖尿病周围神经病变的临床研究
目的：评价黄芪桂枝五物汤加减治疗糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)的临床疗效。方法纳入78例DNP患者并按随机数字表法分为2组各39例。对照组适当运动、控制饮食并配合降糖药物、甲钴胺和维生素B1；治疗组在此基础上加服黄芪桂枝五物汤，均治疗8周。采用酶比色法检测血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)和过氧化氢酶活性，采用比色法检测血清丙二醛水平；肌电图/诱发电位仪检测感觉神经传导速度(sensory nerve conduction velocity, SCV)和运动神经传导速度(motor nerve conduction velocity, MCV)。结果治疗后，治疗组MCV[(43.12±4.1)m/s比(40.27±2.8)m/s，t＝3.585]、SCV[(41.51±3.4)m/s比(39.63±3.5)m/s，t＝2.406]均较对照组升高(P＜0.05)；SOD[(51.1±6.6)U/ml 比(47.6±3.9)U/ml，t＝2.851]、GSH-Px[(241.7±36.1)U/ml比(213.9±31.7)U/ml，t＝3.614]抗氧化酶活性明显高于对照组(P均＜0.01)。治疗组、对照组总有效率分别为87.2%(34/39)、69.2%(27/39)，2组比较差异有统计学意义(χ2＝4.333， P＝0.033)。结论黄芪桂枝五物汤联合西医常规疗法可改善DNP患者抗氧化能力，控制DNP的发展。
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九龙藤总黄酮对过氧化氢诱导乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用
目的 观察九龙藤总黄酮对过氧化氢(H2O2)诱导乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用.方法分离SD大鼠乳鼠心肌细胞,培养72 h后随机分为空白对照组,模型组,九龙藤总黄酮高、中、低剂量组,舒血宁注射液组.除空白对照组外,其余各组细胞经H2O2(100μg/ml)处理.九龙藤总黄酮高、中、低剂量组给予含240、120、60μg/ml九龙藤总黄酮的培养液干预,舒血宁注射液组给予含100μg/ml舒血宁注射液的培养液,空白对照组和模型组给予普通培养基培养.干预6 h后,通过倒置显微镜观察各组细胞形态学变化,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞存活率;检测各组细胞培养液中天冬氨酸转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)水平;测定各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平;通过流式细胞术测定细胞凋亡率,并通过Western blot方法检测心肌细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达.结果与模型组比较,九龙藤总黄酮中、高剂量组心肌细胞培养液中AST[(28.8±6.1)U/ml、(24.5±5.3)U/ml比(36.2± 6.7)U/ml]、CPK[(1.8±0.4)U/ml、(1.5±0.3)U/ml 比(2.5±0.4)U/ml]、LDH[(805.2±160.9)U/L、(671.5± 128.7)U/L比(916.5±168.4)U/L]水平降低(P<0.05或P<0.01);心肌细胞中SOD[(84.8±17.4)U/mg、(95.3±18.2)U/mg比(55.7±13.1)U/mg]、CAT[(23.4±3.1)U/mg、(26.3±3.5)U/mg比(15.2±3.0)U/mg]水平升高(P<0.05 或 P<0.01),MDA[(8.1±1.7)nmol/mg、(6.8±1.5)nmol/mg 比(11.1±2.3)nmol/mg]水平降低(P<0.05或P<0.01),caspase-3[(1.64±0.16)、(1.30±0.12)比(2.06±0.25)]表达、细胞凋亡率[(24.2±5.5)%、(13.4±3.9)%比(51.2±9.1)%]显著降低(P<0.05或P<0.01);九龙藤总黄酮高剂量组细胞中 GSH-Px[(3.6±0.9)U/mg 比(2.4±0.7)U/mg]活性显著升高(P<0.05).结论 九龙藤总黄酮可有效改善 H2O2诱导氧化应激损伤乳鼠心肌细胞形态、提高细胞存活率、改善抗氧化酶活性、下调 caspase-3表达、降低细胞凋亡率,对H2O2诱导乳鼠心肌细胞氧化应激损伤具有剂量依赖性的保护作用.
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熊果酸对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激和细胞凋亡的影响
目的：探讨熊果酸（ursolic acid, UA）对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠自由基代谢及细胞凋亡的影响。方法120只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组，模型组，熊果酸20、40、80和120 mg/kg治疗组，各20只。采用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注大鼠模型，术后即刻尾静脉注射给药。6 h后，检测各组大鼠血清总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）、肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）水平以及缺血皮质超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）活性。TUNEL 染色法检测缺血皮质细胞凋亡。结果与模型组比较，熊果酸40、80、120 mg/kg治疗组大鼠血清CK[(301.2±86.8)U/L、(258.5±58.4)U/L、(228.7±49.2)U/L比(352.6±88.1)U/L]、LDH[(327.5±87.1)U/L、(288.6±69.5)U/L、(243.7±74.9)U/L比(395.4±98.6)U/L]水平显著降低(P＜0.05或P＜0.01)，MDA[(5.5±1.4)mmol/L、(4.8±1.1)mmol/L、(4.4±1.3)mmol/L比(7.8±2.0)mmol/L]， T-AOC[(9.4±2.2)U/L、(10.5±2.9)U/L、(11.8±3.1)U/L比(8.0±2.1)U/L]显著升高(P＜0.05或P＜0.01)；熊果酸80、120 mg/kg 治疗组缺血皮质SOD[(10.1±2.7)U/mg、(11.6±2.5)U/mg比(6.9±2.6)U/mg]、GSH-Px[(12.9±2.9)U/mg、(14.2±3.2)U/mg比(9.5±2.3)U/mg]、CAT[(3.3±1.3)U/mg、(3.9±1.2)U/mg比(2.3±0.9)U/mg]活性显著增高(P＜0.05或P＜0.01)。TUNEL染色显示，各熊果酸治疗组细胞凋亡较模型组显著减轻。结论熊果酸可增强局灶性脑缺血再灌注大鼠抗氧化酶系统活性，促进自由基清除，减轻氧化应激，抑制细胞凋亡。
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苦参素对脑缺血再灌注模型大鼠氧化应激和炎症反应的影响
目的 研究苦参素对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织氧化应激和炎症反应的抑制作用,并探讨其机制.方法 将 140 只大鼠按随机数字表法分为假手术组,模型组,苦参素低、中、高剂量组,每组28只.除假手术组外,其余各组大鼠采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型.造模后第2天开始给药.苦参素低、中、高剂量组分别腹腔注射苦参素溶液25、50、100 mg/kg,模型组与假手术组腹腔注射等体积生理盐水.连续给药7 d.通过盲法神经功能评分评测神经功能损伤,测定脑组织含水量及脑组织梗死体积;检测脑组织氧化酶活性和丙二醛(malondialdehyde, MDA)、NO、诱导型一氧化氮合酶(inducible NOS, iNOS)及炎性细胞因子水平;采用HE染色、TUNEL法观察脑组织形态结构及神经元凋亡状况;WB法检测NF-?B蛋白表达.结果 与模型组比较,苦参素中、高剂量组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、梗死体积、凋亡指数降低(P＜0.05 或 P＜0.01);脑组织 SOD[(148.68±9.12)U/mg、(161.34±10.09)U/mg 比(140.63±8.47)U/mg]、CAT[(3.90±1.32)U/mg、(4.15±1.47)U/mg 比(2.73± 0.89)U/mg]、GSH-Px[(11.46±2.65)U/mg、(13.59±3.27)U/mg比(9.35±2.03)U/mg]活性升高,MDA[(20.18± 3.59)μmol/g、(17.46±3.21)μmol/g 比(29.86±5.40)μmol/g]、iNOS[(12.64±1.83)、(11.75±1.62)比(14.17± 2.06)]和 NO[(23.64±2.18)、(21.27±2.03)比(27.82±2.42)]、TNF-α[(43.9±6.3)nmol/L、(37.2± 5.8)nmol/L 比(56.3 ± 6.9)nmol/L] 、 IL-1β[(715.0 ± 68.5)nmol/L 、 (683.9 ± 70.8)nmol/L 比(930.8 ± 91.4)nmol/L]、IL-6[(168.4±22.5)nmol/L、(133.7±18.1)nmol/L比(212.5±24.7)nmol/L]含量降低(P＜0.05或 P＜0.01);脑组织 NF-?B[(0.35±0.13)、(0.24±0.08)比(0.62±0.15)]蛋白表达下调(P＜0.05 或 P＜0.01).结论 苦参素可减轻脑缺血再灌注大鼠氧化应激损伤,抑制炎症反应.
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黄芪甲苷对哮喘模型小鼠呼吸道炎症及氧化应激反应的影响
目的 观察黄芪甲苷对哮喘模型小鼠呼吸道炎症及氧化应激反应的影响,探讨其作用机制.方法 按随机数字表法将50只小鼠随机分为正常对照组,模型组,黄芪甲苷低、中、高剂量组,每组10只.除正常对照组外,其余各组小鼠用卵蛋白致敏和雾化激发的方式建立哮喘模型.于造模第14天开始给药,于雾化吸入鸡卵白蛋白溶液之前1h,低、中、高剂量组分别灌胃黄芪甲苷溶液25、50、100mg/kg,正常对照组与模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给药14d.造模第27天,进行气道高反应性激发试验.造模第28天取材,采用瑞氏染色检测小鼠支气管肺泡灌洗液中的细胞总数、嗜酸粒细胞计数及百分比,采用ELISA法检测小鼠支气管肺泡灌洗液中IL-6、IL-13含量;检测肺组织MDA、GSH-Px、SOD活性.结果 与模型组比较,黄芪甲苷中、高剂量组支气管肺泡灌洗液中白细胞总数[(8.58±0.92)×105个/ml、(2.10±0.25)×105个/ml比(17.28±2.34)×105个/ml]、嗜酸粒细胞数[(3.17±0.37)×105个/ml、(0.36±0.03)×105个/ml比(10.35±1.06)×105个/ml]及百分比[(36.67±3.96)%、(14.71±2.04)%比(60.82±5.88)%]减少(P<0.01);IL-6[(80.81±13.42)pg/ml、(77.14±12.73)pg/ml比(118.08±20.41)pg/ml]、IL-13[(120.59±18.38)pg/ml、(65.12±13.81)pg/ml比(168.11±26.43)pg/ml]含量降低(P<0.01);肺组织MDA含量[(53.04±5.08)nmol/mg、(42.90±3.91)nmol/mg比(69.03±7.01)nmol/mg]降低,GSH-Px[(4.59±0.41)μmol/g、(6.24±0.58)μmol/g比(2.71±0.26)μmol/g]、SOD活性[(5.98±0.56)U/g、(8.29±0.81)U/g比(3.88±0.39)U/g]升高(P<0.01).结论 黄芪甲苷可有效改善小鼠的哮喘状态,其作用机制与抑制气道内炎症反应及氧化应激反应有关.
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姜黄素对H2O2诱导H9C2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用
目的 研究姜黄素对H2O2诱导H9C2心肌细胞氧化应激损伤的保护效应.方法 将细胞按随机数字表法分为空白对照组、H2O2诱导组及姜黄素低、中、高剂量组,每组设6个复孔.除空白对照组外,其余各组加入200μmol/L的H2O2进行干预,姜黄素低、中、高剂量组分别加入10、20、40μmol/L姜黄素进行干预.干预后24 h,利用荧光显微镜观察细胞形态,CCK8法检测姜黄素对细胞增殖的影响,测定细胞培养上清中LDH、肌酸激酶(creatine Kinase,CK)、AST活性及MDA含量,检测细胞中SOD、CAT、GSH-Px活性.结果 与H2O2诱导组比较,姜黄素低、中、高剂量组LDH[(247.36±28.04)U/L、(195.14±21.37)U/L、(132.27±16.33)U/L比(247.58±28.34)U/L]、AST[(67.27±10.58)U/ml、(54.81±8.60)U/ml、(42.14±5.95)U/ml比(84.34±12.36)U/ml]、CK[(1.34±0.66)U/ml、(0.95±0.42)U/ml、(0.71±0.39)U/ml比(1.56±0.74)U/ml]活性及MDA[(227.39±32.05)nmol/ml、(185.11±24.37)nmol/ml、(143.50±16.37)nmol/ml比(274.19±36.51)nmol/ml]含量降低(P<0.05),细胞裂解液中SOD[(17.67±1.36)U/mg、(21.54±1.72)U/mg、(28.37±2.36)U/mg比(14.37±1.22)U/mg]、CAT[(19.58±3.87)U/mg、(25.34±4.06)U/mg、(30.21±4.83)U/mg比(14.77±3.25)U/mg]和GSH-Px[(1.99±1.17)U/mg、(2.56±1.29)U/mg、(3.04±0.45)U/mg比(1.67±0.87)U/mg]活性升高(P<0.05).结论 姜黄素可改善H2O2诱导H9C2心肌细胞氧化应激损伤,保护心肌细胞.
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水飞蓟宾防晒霜对慢性中波紫外线诱导豚鼠皮肤损伤的保护作用
目的 观察水飞蓟宾防晒霜对慢性中波紫外线(ultraviolet radiation b,UVB)辐射豚鼠皮肤损伤的保护作用,探讨其作用机制.方法 将60只豚鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、基质组、水飞蓟宾防晒霜组、抗皱日霜组,每组12只.基质组豚鼠背部涂抹基质,水飞蓟宾防晒霜组豚鼠背部涂抹水飞蓟宾防晒霜,抗皱日霜组豚鼠背部涂抹抗皱日霜,正常组与模型组不做处理.涂抹相应药物后,除正常组外,其余各组豚鼠于UVB紫外光疗仪照射,30 min/次,2次/d.照射15 d后,检测各组豚鼠皮肤GSH-Px、SOD及MDA水平;采用Westerrn Blot检测各组豚鼠皮肤caspase-3、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、Bcl-2蛋白表达.结果 与模型组比较,水飞蓟宾组及抗皱日霜组GSH-Px[(8.79±1.57)mg/g、(8.25±2.07)mg/g比(4.66±1.82)mg/g]、SOD[(24.52±5.43)U/mg、(27.81±2.13)U/mg比(10.82±3.40)U/mg]水平升高,MDA[(7.91±2.80)nmol/mg、(6.45±1.86)nmol/mg比(13.57±2.63)nmol/mg]水平降低(P<0.05或P<0.01);caspase-3[(0.44±0.04)、(0.38±0.03)比(0.56±0.06)]、Bax[(0.46±0.05)、(0.40±0.06)比(0.75±0.06)]蛋白表达降低,Bcl-2[(0.39±0.04)、(0.43±0.06)比(0.25±0.05)]蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01).结论 水飞蓟宾防晒霜可增强豚鼠皮肤GSH-Px、SOD活性、降低MDA水平,对慢性UVB诱导豚鼠皮肤损伤具有保护作用,其作用机制与降低caspase-3、Bax蛋白表达、提高Bcl-2蛋白表达,改善皮肤细胞凋亡有关.
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针刺"百会""足三里"对血管性认知障碍模型大鼠认知功能的影响
目的 观察针刺"百会""足三里"对血管性认知障碍(vascular cognitive impairment,VCI)模型大鼠认知功能的影响,探讨其作用机制.方法 采用颈内动脉微栓子注入法制备VCI大鼠模型.按随机数字表法分为假手术组、模型组、阳性药物组、针刺组,每组12只.造模2周后,针刺组大鼠电针"百会""足三里",1次/d,20 min/次;阳性药物组灌胃盐酸多奈哌齐片混悬液0.5206 mg/kg,连续干预30 d.采用水迷宫实验测试大鼠的认知学习能力,生化法检测大鼠皮层SOD、GSH-Px、MDA、过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)含量.结果 与模型组比较,针刺组、阳性药物组大鼠穿越平台次数[(7.5±1.9)次、(6.8±2.2)次比(3.7±1.0)次]增加(P<0.05),目标象限总路程[(495.4±89.4)cm、(487.6±96.2)cm比(341.4±67.3)cm]增加(P<0.05);针刺组、阳性药物组大鼠皮层中SOD[(17.3±3.3)U/mg、(15.1±2.5)U/mg比(9.7±4.9)U/mg]水平升高(P<0.05),MDA[(9.1±2.2)μmol/L、(8.4±3.7)μmol/L比(15.2±4.4)μmol/L]、H2O2[(85.2±16.2)μmol/L、(82.1±13.2)μmol/L比(114.7±24.8)μmol/L]含量降低(P<0.05);针刺组GSH-Px[(14.5±3.7)U/mg比(9.0±2.5U/mg)]活力升高(P<0.05).结论 针刺"百会""足三里"可改善VCI大鼠的认知能力,提高皮层中总SOD及GSH-Px活力,降低MDA、H2O2含量,增强机体抗氧化能力,同时抑制过氧化反应,改善自由基的代谢.
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清开灵口服液对内毒素血症模型小鼠心肌炎症因子基因表达及自由基代谢的影响
目的 研究清开灵口服液对内毒素致小鼠心肌细胞受损的保护作用,并从炎症因子表达和自由基代谢方面探讨其作用机制.方法 将48只雄性ICR小鼠随机分为正常组、模型组、清开灵口服液小剂量组、清开灵口服液大剂量组,每组12只.清开灵口服液小、大剂量组分别灌胃清开灵口服液9、18 ml/kg,正常组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,共4 d.第5天,除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射脂多糖0.2 ml(40 mg/kg)制备内毒素血症模型,正常组注射等体积生理盐水.分别于造模后0.5、8、20 h再次给药.末次给药后1 h,麻醉心脏取血.采用实时荧光定量PCR检测小鼠心肌组织IL-1β、IL-6、TNF-?基因表达,采用ELISA法测定血清IL-1β、IL-6、TNF-?水平及心肌组织MDA、SOD、GSH-Px水平.结果 与模型组比较,清开灵口服液小、大剂量组小鼠血清TNF-?[(68.75±7.73)pg/ml、(62.03±16.09)pg/ml比(116.06±21.06)pg/ml]、IL-1β[(110.84±40.61)pg/ml、(105.51±38.21)pg/ml比(167.53±54.82)pg/ml]及IL-6[(68.78±20.57)pg/ml、(59.71±13.59)pg/ml比(108.80±28.21)pg/ml]水平降低(P<0.01).清开灵口服液小、大剂量组小鼠心肌组织TNF-?mRNA[(1.42±0.15)、(1.30±0.46)比(3.00±0.82)],IL-1βmRNA[(1.20±0.57)、(1.01±0.40)比(2.32±1.39)]及IL-6 mRNA[(1.53±1.10)、(1.16±1.09)比(4.12±2.23)]表达降低(P<0.01或P<0.05).清开灵口服液小、大剂量组小鼠心肌组织MDA[(10.64±2.91)nmol/mg、(11.36±3.02)nmol/mg比(15.21±2.31)nmol/mg]降低(P<0.01),SOD[(282.32±35.90)U/mg、(325.07±34.76)U/mg比(249.01±45.22)U/mg]和GSH-Px[(48.26±17.13)U/g、(49.66±22.11)U/g比(26.47±20.37)U/g]升高(P<0.05).结论 清开灵口服液对内毒素血症导致的心肌损伤具有保护作用,其作用机制可能与下调IL-1β、IL-6、TNF-?基因表达、降低自由基代谢和提高机体抗氧化能力有关.
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肉苁蓉多糖对小鼠学习记忆的影响
目的 观察肉苁蓉多糖对不同类型学习记忆障碍模型小鼠空间学习记忆能力的影响,探讨其作用机制.方法 120只小鼠按随机数字表法分为空白组,模型组,肉苁蓉多糖小、中、大剂量组,吡拉西坦组,每组20只.肉苁蓉多糖小、中、大剂量组分别灌胃肉苁蓉多糖溶液25、50、100 mg/kg,吡拉西坦组灌胃吡拉西坦10 mg/kg,空白组和模型组灌胃等体积蒸馏水.1次/d,连续给药6周.分别采用环己米特建立小鼠巩固性记忆障碍模型,采用乙醇建立小鼠再现性记忆障碍模型,采用水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力,ELISA法检测各组小鼠脑组织内总蛋白、MDA、SOD水平.结果 与环己米特模型组比较,肉苁蓉多糖中、大剂量组逃避潜伏期[(9.45±2.86)s、(12.73±10.89)s比(48.15±30.33)s]、第1次到达站台时间[(19.33±3.27)s、(13.81±9.79)s比(40.71±16.76)s]缩短(P<0.05),肉苁蓉多糖小剂量组第1次到达站台时间[(11.58±7.04)s比(40.71±16.76)s]缩短(P<0.05),穿越站台次数[(5.46±2.09)次比(3.03±1.47)次]增加(P<0.05),肉苁蓉多糖大剂量组脑组织总蛋白含量[(0.76±0.25)g/L比(0.55±0.12)g/L]增加(P<0.05).与乙醇模型组比较,肉苁蓉多糖小、中、大剂量组逃避潜伏期[(22.67±18.35)s、(22.15±16.22)s、(18.00±13.44)s比(51.33±22.19)s]、第1次到达站台时间[(16.70±11.25)s、(19.75±14.62)s、(9.47±5.46)s比(30.09±13.63)s]缩短(P<0.05),肉苁蓉多糖小、大剂量组穿越站台次数[(5.15±1.28)次、(4.83±0.75)次比(1.34±0.83)次]增加(P<0.05),肉苁蓉多糖大剂量组脑组织总蛋白[(0.76±0.25)g/L比(0.56±0.12)g/L]含量增加(P<0.05).结论 肉苁蓉多糖可明显改善小鼠再现性记忆障碍、巩固性记忆障碍,其机制与促进脑内蛋白质合成有关.
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迷迭香酸对H9C2心肌细胞氧化应激损伤的影响
目的 探讨迷迭香酸(RA)对H9C2心肌细胞氧化应激损伤的影响.方法 采用过氧化氢(H2O2)处理建立氧化应激损伤模型,体外培养H9C2心肌细胞并随机分为对照组、H2O2组、H2O2+RA组.H2O2组采用400μmol/L的H2O2处理4 h建立氧化应激损伤模型;H2O2+RA组在加入H2O2前分别用低剂量(5μg/ml)、中剂量(10μg/ml)、高剂量(20μg/ml)的RA预处理24 h,CCK-8法检测H9C2心肌细胞存活率,DCFH-DA探针联合酶标仪检测细胞内反应活性氧(ROS)含量,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、细胞内丙二醛(MDA)含量以及过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,免疫印迹和实时荧光定量PCR分别检测还原性辅酶II氧化酶2(NOX2)、超氧化物歧化酶2(SOD2)以及凋亡相关基因Bax、Bcl-2、cleavage-caspase 3(c-cas 3)和caspase 3(cas 3)的表达情况;TUNEL试剂盒检测细胞凋亡水平.结果 (1)各H2O2组细胞活力均低于对照组,低浓度RA对细胞生长无抑制作用,但RA浓度过高(≥30μg/ml)对H9C2心肌细胞的生长有明显的抑制作用;(2)与对照组相比,H2O2组细胞生存率下降52.9%,LDH漏出量增加73.8%,RA预处理可使细胞生存率升高、LDH漏出量减少,且这种保护作用随着RA浓度增加,更为显著;(3)与对照组相比,H2O2组细胞内氧化水平显著升高,MDA含量增加146.7%、ROS水平增加192.2%,RA预处理后,ROS产生显著减少,细胞内MDA含量下降,RA高浓度组的抑制作用更为显著;(4)与对照组相比,H2O2组细胞凋亡明显,RA预处理可改善H2O2诱导的凋亡水平,且高浓度组的改善程度更加明显.结论 RA对氧化应激条件下的H9C2心肌细胞具有明显的保护作用.
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机械力诱导氧化应激对人子宫旁韧带成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响
目的 探讨机械力诱导氧化应激对人子宫旁韧带成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响.方法 选取2014年1月至10月于本院行阴式全子宫切除术患者10例,术中取切除子宫的子宫旁韧带行成纤维细胞原代培养及鉴定.采用四点弯曲细胞力学加载系统对成纤维细胞进行力学加载构建机械力加载模型.使培养板产生形变位移1 mm的加力大小定义为1 333 μstrain.加力大小分别为0 μstrain(0 mm)、1 333 μtstrain(1 mm)、5 333 μstrain(4 mm),加载频率为0.5 Hz,加载时间为4h.同时采用不同浓度H2O2孵育成纤维细胞构建氧化应激模型.H2O2浓度分别为0、0.2、0.4、0.8和1.6 mmol/L,孵育时间均为4h.采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测两种模型中成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达,采用细胞免疫荧光检测机械力模型中细胞氧化损伤产物8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平变化.结果 机械力加载模型中,实时荧光定量PCR和免疫印迹显示,与对照组(0μstrain)比较,加载1 333 μstrain机械力后成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达均增加,而加载5 333 μstrain机械力后成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白表达均减少(均P＜0.05).细胞免疫荧光检测显示,与对照组(0 μstrain)比较,加载1 333、5 333 μstrain机械力4h后,成纤维细胞内8-OHdG荧光强度明显增强,且后者更为显著.氧化应激模型中,实时荧光定量PCR显示,与对照组(0 mmol/LH2O2)比较,0.2 mmol/L H2O2孵育4h后成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达均显著增加(均P＜0.05);0.4 mmol/L H2O2孵育4h后成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA表达增加(P＜0.05),而Ⅲ型胶原mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05);0.8、1.6 mmol/L H2O2孵育4h后成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达均显著下降(均P＜0.05).氧化应激模型中,免疫印迹检测显示,与对照组(0mmol/L H2O2)比较,0.2 mmol/LH2O2孵育4h后成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05),而Ⅲ型胶原蛋白表达显著增加(P＜0.05);0.4 mmol/L H2O2孵育4h后成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白表达显著增加(P＜0.05),而Ⅲ型胶原蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05);0.8、1.6mmol/L H2O2孵育4h后成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达均显著下降(均P＜0.05).结论 一定范围内的机械力和氧化应激均可抑制子宫旁韧带成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达.机械力可能通过引起盆底支持组织发生氧化应激,导致细胞外基质重构,参与盆腔器官脱垂的发生发展.
