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小分子Rhizobium sp.N613胞外多糖的羧甲基化及其抗肿瘤活性
目的 建立小分子Rhizobium sp.N613胞外多糖羧甲基化的制备工艺并研究其抗肿瘤活性.方法 以乙醇为溶剂,用一氯乙酸对小分子Rhizobium sp.N613胞外多糖 (LREPS) 进行羧甲基化修饰,通过正交试验考察了乙醇体积分数、一氯乙酸用量、氢氧化钠用量、醚化温度及时间对羧甲基化LREPS (CM-LREPS) 羧甲基取代度 (DS) 的影响,并获得一系列CM-LREPS产物.红外图谱表征CM-LREPS分子结构.选取4组取代度(0.285,0.531,0.659和0.899)的CM-LREPS样品进行了小鼠肝癌腹水瘤H22抑瘤效果检验.结果 红外图谱分析表明,实现了LREPS的羧甲基化.抗肿瘤试验表明,取代度为0.659的CM-LREPS效果佳,抑瘤率高达59.2%.以取代度和抑瘤率为检测指标,确定CM-LREPS佳制备工艺条件为:乙醇质量分数为90%,LREPS用量为2.0 g,一氯乙酸用量为3.0 g,氢氧化钠用量为4.0 g,醚化温度为40 °C,反应时间为4 h.结论 建立了CM-LREPS制备工艺并获取了相关抗肿瘤技术参数,为该多糖制剂的生产应用奠定了一定基础.
关键词: Rhizobium sp.N613 胞外多糖 羧甲基化 抗肿瘤活性 -
红景天多糖羧甲基化修饰及其抗氧化活性
目的 比较红景天多糖羧甲基化修饰前后抗氧化活性的变化.方法 采用水提醇沉法提取红景天多糖,正交实验优选红景天多糖羧甲基化修饰条件,通过对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基和超氧阴离子自由基清除能力的测定,比较修饰前后红景天多糖抗氧化活性的变化.结果 红景天多糖羧甲基化修饰的佳工艺条件为反应温度60℃、氯乙酸15 mg、反应时间3.5h,得到羧甲基化的取代度为10.73.当浓度为5 mg/mL时,羧甲基化红景天多糖清除超氧阴离子自由基、ABTS自由基的能力分别为53.16%与45.64%,与红景天多糖比较,清除自由基能力明显提高.结论 与修饰前比较,羧甲基化修饰后红景天多糖具有较强的抗氧化活性.
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羧甲基化海洋真菌多糖的制备及产物对巨噬细胞免疫作用的影响
对海洋真菌(Phoma herbarum YS4108)多糖YCP进行羧甲基化修饰,研究其产物(YCPC)的理化性质及其对巨噬细胞免疫活性的影响.采用氢氧化钠一氯乙酸法对YCP进行羧甲基化修饰,通过红外和核磁光谱法对产物进行鉴定,在可见光谱范围检测其溶液透光率,Griess法测定其诱导巨噬细胞分泌NO的活性,并通过流式细胞仪检测其结合巨噬细胞的能力.结果:YCP羧甲基化修饰后得到了10种不同取代度的YCPC样品,红外光谱的COO-峰及13C核磁光谱的C-O峰归属于引入的羧甲基;YCPC的水溶液的透光率:YCPC6>YCPC10>YCP;诱导巨噬细胞分泌NO的能力:YCP>YCPC10>YCPC6;且YCPC对YCP结合小鼠腹腔巨噬细胞有竞争性抑制作用.YCP羧甲基化修饰后,产物的水溶液透光率明显提高,并具有和YCP相同的巨噬细胞表面特异性结合位点,YCPC诱导巨噬细胞分泌NO的能力随取代度升高而下降.
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N-烷基,O-羧甲基甲壳胺衍生物的制备及结构分析
甲壳胺(DAC-85)在水-甲醇中于弱酸性条件下与月桂醛发生还原N-烷基化反应,制得N-十二烷基甲壳胺.进一步在55%氢氧化钠溶液-异丙醇中与氯乙酸反应制得O-羧甲基化甲壳胺衍生物,终获得了两亲性甲壳胺衍生物,并作了元素分析及红外测定.
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改性壳聚糖膜的兔体内组织反应和降解实验
目的:研究植入改性壳聚糖膜后兔体内的组织反应及膜的降解情况.方法:将部分壳聚糖羧甲基化,使用二次冷冻干燥法制备成膜.将膜植入兔背部肌肉,术后2、4、6、12、16周分组处死动物取材,标本HE染色,光学显微镜下观察组织反应;2周和4周时取膜局部,应用扫描电镜观察膜的降解情况.结果:膜在前4周保持完整,16周后完全降解,膜植入早期出现巨噬细胞为主的炎症反应,随着膜的降解,炎症反应逐渐减轻,周围组织无不良反应.结论:壳聚糖改性后制备的多孔膜降解速度快,降解时间和生物相容性基本符合牙周诱导再生术的要求.
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羧甲基化灵芝多糖预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及其机制
目的 探讨羧甲基化灵芝多糖(CM-GLP)预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及其可能的作用机制.方法 将100只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、灵芝多糖(GLP)组、CM-GLP组、尼莫地平组,每组20只.GLP组腹腔注射GLP 40 mg/(kg· d),CM-GLP组腹腔注射CM-GLP 40 mg/(kg· d),尼莫地平组腹腔注射尼莫地平1 mg/(kg· d),假手术组和模型组腹腔注射等体积生理盐水.各组用药均为1次/d,连续注射7 d.除假手术组外,其余各组均建立脑缺血再灌注模型.各组脑缺血再灌注24 h行神经功能缺损评分,处死后采用干湿法检测脑组织含水量,采用ELISA法检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)表达以及NF-κB、TNF-α、IL-1、IL-6表达,采用Western blotting法检测脑组织热休克蛋白70(HSP70)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达.结果 模型组神经功能评分高于假手术组,GLP组、CM-GLP组及尼莫地平组均低于模型组,且CM-GLP组及尼莫地平组较模型组降低更明显(P均<0.01).模型组脑组织含水量、MDA表达及NF-κB、TNF-α、IL-1、IL-6表达均高于假手术组,SOD活性及HSP-70、p-Akt蛋白相对表达量均低于假手术组(P均<0.01).GLP组、CM-GLP组、尼莫地平组脑组织含水量、MDA、NF-κB、TNF-α、IL-1、IL-6表达均低于模型组,SOD活性及HSP-70、p-Akt蛋白相对表达量均高于模型组,且CM-GLP组及尼莫地平组变化更明显(P<0.05或<0.01).结论 CM-GLP预处理可减轻大鼠脑缺血再灌注损伤;其机制可能与调控HSP70/PI3K/Akt信号通路、减轻再灌注后继发的炎症反应有关.
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保健食品中羧甲基壳聚糖分光光度分析方法研究
多糖因具有抗肿瘤、抗炎和增强免疫作用等生物活性[1],越来越引起人们的关注.壳聚糖是甲壳素的脱乙酰基衍生物,无毒无味,可生物降解,具有良好的生物相容性.实验证实,壳聚糖能提高机体红细胞的免疫作用,使红细胞粘附肿瘤细胞的能力增强,也表现出对荷瘤小鼠的抑瘤作用增强[2].羧甲基壳多糖是由壳聚糖羧甲基化而得,它不但具有壳聚糖的生物活性,而且具有水溶性好、易被人体吸收的特点,因而被用于保健食品中.经文献检索,国内尚无规定的检验方法.我们尝试用分光光度法检测羧甲基壳聚糖,取得了较好效果.该法具有灵敏度高、精密度高、线性好、专属性强的特点,适用于保健食品中羧甲基壳聚糖的含量测定.
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二色补血草多糖的羧甲基化工艺研究
目的:研究二色补血草多糖羧甲基化的优合成工艺.方法:运用响应面法,以多糖羧甲基化的取代度为评价指标,考察反应时间、氯乙酸浓度和反应温度对多糖羧甲基化的取代度的影响.结果:通过响应面法得到的优工艺条件为:反应时间4.0h、氯乙酸浓度是2.8 mol/L、反应温度45℃,在此条件下,二色补血草多糖羧甲基化的取代度为0.853.初步的抗氧化性试验表明,羧甲基化后的二色补血草多糖的抗氧化性能有明显提高.结论:优化得到的二色补血草多糖的羧甲基化工艺路线可行,对进一步拓宽其应用具有一定的参考价值.
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催化法合成6-O-羧甲基甲壳质的研究
为改善甲壳质的水溶性,在其6位羟基上进行了羧甲基化,用正交实验对在催化剂的作用下的合成条件进行了优化选择,并对合成的6-O-羧甲基甲壳质的保湿性、吸湿性进行了测定与比较.
关键词: 甲壳质 羧甲基化 6-O-羧甲基甲壳质 保湿性 吸湿性 -
水溶性羧甲基壳聚糖在医学领域中的研究进展
羧甲基壳聚糖(Carboxymethyl Chitosan)是壳聚糖(Chitosan)经羧甲基化而得的一种水溶性多糖.与壳聚糖相比,羧甲基壳聚糖的水溶性提高,且无毒,无抗原性,具有可降解性,生物相容性好,在医药和保健食品方面的用途日益广泛[1].本文介绍羧甲基壳聚糖在医药领域中的研究进展及其应用前景.
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多糖化学修饰方法的研究进展
多糖是一类重要的生物大分子物质,具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、免疫活性调节等生物活性。多糖的生物活性与其结构有直接关系,对多糖结构通过适当的方法进行修饰能提高或赋予多糖活性、降低某些多糖的毒副作用,修饰的方法包括化学法、物理法和生物法。该文综述了多糖化学修饰的方法、结构分析与鉴定技术及其研究进展,以期为多糖类药物的进一步研究提供依据。