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如何提高网织红细胞的计数率
网织红细胞是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞.其胞浆内的残存的嗜碱性物质RNA,用煌焦油蓝活体染色后细胞内含有蓝色颗粒、线状或网织结构.网织红细胞较正常成熟红细胞略大,根据其网织结构密度与多少可分为五型.0型(有核型)主要存在于骨髓、Ⅰ型(丝球型)周围血中偶见、Ⅱ型(鱼网状)周围血中少见、Ⅲ型(破网状)周围血中可见少量、Ⅳ型(点粒型)周围血中常见.
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迈瑞 BC-6600全自动血液分析仪计数网织红细胞的性能评价
网织红细胞（Ret）是指尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜碱性的 RNA 物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后呈浅蓝或深蓝色的网状结构[1]。传统的显微镜手工镜检法操作简便，试剂成本低廉，现在仍然被广泛应用于临床，但其个体差异大且难以标准化。近年来随着高性能全自动血细胞分析仪的发展与应用，Ret 的检测也进入了一个新的阶段，为 Ret 计数提供了更为先进的检测方法和更多的检测参数。我院2003年初新引进一台迈瑞 BC-6600全自动血液分析仪，可计数 Ret，为此，本研究对迈瑞 BC-6600全自动血细胞分析仪计数 Ret 的精密度、稳定性、线性范围、携带污染率作了评价，并与人工镜检法做相关性分析。
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3种抗凝全血对网织红细胞染色结果影响的观察
网织红细胞(reticulocyte)是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞.因其质内尚存留多少不等的嗜碱物质,RNA,经煌焦油蓝活体染色法染色后,嗜碱物质凝聚成颗粒,其颗粒又可联缀成线,而构成网织红细胞.网状结构愈多,表示该细胞越幼稚,将其分成一、二、三、和四级.
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网织红细胞计数方法的比较与评价
目的 通过对网织红细胞计数方法的比较与评价,确保临床检测数据分析的可靠.方法 采用四种煌焦油蓝染色方法,对120份健康体检人员进行计数分析.结果 10 g/L煌焦油蓝酒精溶液染色法计数结果1.27±0.72,20 g/L煌焦油蓝酒精溶液染色法计数结果1.19±0.65;10 g/L煌焦油蓝枸橼酸钠染色法计数结果1.01±0.85;10 g/L的煌焦油蓝ACD染色法计数结果1.20±0.75.结论 10 g/L煌焦油蓝酒精染色法与20 g/L网织红细胞、煌焦油蓝ACD染色法计数结果差异无统计学意义(P>0.05),与10 g/L煌焦油蓝枸橼酸钠染色法差异显著(P<0.05).活体染色时间不能过短,15～20 min为宜,温度25～37℃为宜.
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血细胞分析仪测定网织红细胞的应用
网织红细胞(网红)计数值是反映骨髓红系造血活力的参数,目前国内实验室常用的是使用煌焦油蓝染色法,显微镜人工计数网织红细胞.这种方法由于手工操作,人为影响因素较多,重复性差.我们应用美国COULTERMAXM五分类全自动血细胞分析仪测定网红,与人工镜检法进行了比较,报告如下.
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煌焦油蓝原法和改良法计数网织红细胞的比较
网织红细胞(Ret)计数试管法由于操作简便,重复性好被许多医院所采用,但Ret目视计数误差较大,它主要取决于血涂片的好坏,计数红细胞数量的多少和方法等.因此,笔者对毕永春等报道的煌焦油蓝改良法计数Ret与煌焦油蓝原法作了平行对比,报告如下.
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网织红细胞新型染色液的配制
应用瑞氏、姬氏和煌焦油蓝三种染料配成网织红细胞染色液[1](下简称新型染色液),用于网织红细胞活体染色.经6年跟踪观察的结果,报道如下.
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ASK SOLUTION染色液的应用评价
对新购置的ASK SOLUTION网织红细胞染色液临床应用进行评价.方法:收集34例健康人标本经传统煌焦油蓝生理盐水溶液和ASK染色液染色后,在不同时间涂片计数网织红细胞百分数进行比较观察,传统煌焦油蓝盐水溶液染色15～20分钟,ASK染色液染色5～10分钟,经统计学处理两种方法P＞0.05无显著性差异,34例网织细胞百分数均值分别为0.86%、0.88%.结果:ASK染色时间短,红细胞内的RNA与新亚甲蓝染料作用充分,深蓝色颗粒清晰易见,不易漏检,背景清晰无杂质.结论:ASK染色液可以取代传统煌焦油蓝染色液.
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灵芝三萜对小鼠体内红细胞系统成熟的影响
目的 研究灵芝三萜介导的促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对小鼠体内红细胞系统表达的影响.方法 煌焦油蓝染色法计数网织红细胞的数量;ELISA法检测小鼠体内EPO分泌量.结果 2μg/ml灵芝三萜可诱导小鼠血液中网织红细胞数量为9.8％,2 μg/ml灵芝三萜联合EPO诱导小鼠血液中网织红细胞的数量升高为21.2％;相同浓度的灵芝三萜单独刺激可诱导血液中内源性EPO的含量升高至2.8ng/ml,与联合EPO刺激后小鼠血液中内源性EPO的表达相比无显著性差异.结论 灵芝三萜可促小鼠体内红细胞系统的成熟并诱导内源性EPO的增加.
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探讨重组促红细胞生成素药理作用的评价方法
目的:探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对小鼠药理作用的评价方法.方法:煌焦油蓝染色法计数网织红细胞的数量；自动血细胞计数仪分析平均血红蛋白(MCH)的含量.结果:小鼠年龄对结果影响较大,90d以上的小鼠测定结果较稳定；通过比较小鼠肝脏、脾脏及血液的网织红细胞的数量发现,脾脏对红细胞生成素敏感；红细胞MCH的含量可以间接反应机体内促红细胞生成素的治疗效果.结论:小鼠体内促红细胞生成素的治疗效果可以通过网织红细胞计数和体外MCH的含量来判断.
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临床常见不合理用血的情况分析
目的:探求科学、合理、安全有效的输血方法.方法:回顾性分析我院临床常见的不合理用血情况.结果:500份病例中不合理用血达到了39.2％,其中少量输血有62例(12.4％),搭配血有53例(10.6％),输营养血55例(11％),输注无效的血有26例(5.2％).结论:规范临床科学合理用血、保障输血安全、节约输血资源,以及提高临床输血质量和技术水平具有积极而深远的意义.
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网织红细胞染色方法的改进
网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞,其胞浆内尚存嗜碱性的RNA物质.经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后呈浅蓝或深蓝色的网状结构.以往染色检测时,我们采用常规的煌焦油蓝染色方法.由于染色时间过长,着色不清晰,沉渣过多,背景杂乱,可能影响实验的准确性.2004年3月,我们对常规染色方法进行了改进研究,现报道如下.
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网织红细胞计数方法的改进和体会
网织红细胞(Ret)是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞.Ret的计数方法一般有显微镜计数法和流式细胞仪计数法,由于条件限制,一般基层医院均采用煌焦油蓝染色显微镜计数法,但在实际操作中煌焦油蓝法计数结果较难判断,误差较大.本人在实际工作中对煌焦油蓝法做了一点改进,使细胞计数更加清晰,易于辨认,提高了Ret计数的准确性.
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网织红细胞的显示及体会
1.试剂的配制:①煌焦油蓝1 克加无水酒精100ml,充分溶解后瓶口密封保存,若有沉淀使用前过滤.②需制备煌焦油蓝染色膜:取一干净平滑优质玻璃片,用滴管在玻片一端滴加2～3滴煌焦油蓝入平皿内以防灰尘污染,干后待用.③取新鲜耳垂血或手指血2～4滴滴在已经干燥的染料色膜上, 与血滴充分混合,可将两玻片轻轻移动两下,血液和染料的比例应恰到1:1,然后将染色的玻片放入平皿内或放在大玻璃缸内,缸内放湿沙布以防血液干固.④在室温内静止染色3 ～10min.⑤染色后将两张玻片分开,将血液按常规涂片方法涂成均匀的血片(2～4 张),在通风处干燥.⑥用中性树胶封片,若需保存用瑞氏染液进行复染.2.结果:网织红细胞呈蓝色网状物,不规则,颗粒状、丝状或丝网状结构,其它细胞染色结果和瑞氏染色相同.3.注意事项:①贮存煤焦油蓝染液的瓶子要严紧密封,用前过滤.②染色染料色膜随用随制.③染色的时间不能少于3min,染料沉淀会凝集,纤维素附着于细胞上,往往会认为是网织红细胞,应注意.我们所配染液保存半年染色效果仍很满意.
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改良配方染色液在网织红细胞计数中的应用
目的 探讨改良配方染色液在网织红细胞计数中的应用.方法 选取增生性贫血患者外周血,分别用改良法和常规法在不同时间,使用4种不同配方染液在不同温度下染色,然后推片计数,并作结果对比.结果 4～8℃内所有染液无论染多长时间网织红细胞均不着色,在常温下染色15 min网织红细胞着色不佳.染液Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ24 h染色对其影响不大,细胞完整,碎片和杂质均少见.染液Ⅰ染色佳条件为室温(18～22℃)下1h,水浴(37℃)下30 min;染液Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ在15 min～24 h,染色结果无明显变化.结论 改良配方染色液符合应用要求,效果更好,杂质和细胞碎片明显减少,时间对改良法染色结果影响较小.
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EDTA-K2使网织红细胞溶血造成手工计数失败原因
目前,全国绝大多数医院进行网织红细胞计数仍然采用的是煌焦油蓝染色手工计数法,正常情况下,采用干粉EDTA-K2子弹头离心管采集新鲜离体末梢血进行网织红细胞染色计数对结果是没影响的,但我院在更换了一新批号的干粉EDTA-K2子弹头离心管后,却发现每次进行煌焦油蓝染色网织红细胞计数时全都会失败,镜下均无网织红细胞,而换以前剩下的子弹头离心管同样染色,结果却很好.这一现象以前无人报道过,因此我们就围绕离心管、染液和干粉EDTA-K2这几个因素进行了一系列的试验,以探讨染色失败的原因.
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配制网织红细胞染色液的改进
目的 网织红细胞(reticulocyte,Ret)是判断骨髓造血功能的重要指标,然而网织红细胞染液的配制及其染色过程比较繁琐,为弥补以上不足,受血球计数仪稀释液启发,我们改良了常规所用的煌焦油蓝生理盐水染液.在保证同等质量的前提下,减少染液配制的繁琐过程,延长其保存时间,提高染色质量等.方法 选取增生性贫血患者外周血,分别用改良法和常规法在不同时间,不同温度下染色,然后推片计数.结果 改良法染色效果更佳,杂质和细胞碎片明显减少,时间对改良法染色结果影响较小.结论 在保证同等质量前提下,改良法染色网织红细胞,减少了染色液配制的繁琐,延长了保存时间,细胞碎片、杂质均少于常规法,同时降低了染色对时间的要求.
