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1-09 间接致癌物对肝细胞DNA的损伤
目的二甲基亚硝胺(NDMA)和氯乙烯(VC)这两种间接致癌物需经肝实质性细胞(PC)活化后才具有致DNA损伤作用.为验证经肝PC活化代谢的NDMA物中间活性产物能否"传递”给肝非实质性细胞(NPC),引起后者DNA损伤.方法应用单细胞微量凝胶电泳技术对NDMA和VC的DNA损伤作用进行了研究.实验程序:(1)程序1:NPC和PC分别暴露不同浓度的NDMA或VC中,然后作DNA测试;(2)程序2:先将NPC装入透析袋中,浸没于含不同浓度NDMA或VC的PC悬液中,混合培养后,作DNA测试.结果 NDMA和VC对肝PC的DNA损伤作用具有明显的剂量-效应关系.NPC单独暴露NDMA或VC中无明显的DNA损伤作用,但NPC与PC混合培养并暴露NDMA或VC中时,均出现DNA损伤作用.结论经过PC活化代谢后的NDMA或VC的中间活性产物可进入透析袋内作用于NPC,引起后者DNA损伤.本实验结果有助于解释起源于肝内皮细胞的肝血管肉瘤的产物机制.
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槲皮素固体脂质纳米粒体外释放度考察
目的 考察槲皮素固体脂质纳米粒的体外释放度,为处方设计、制备工艺、质量评价及合理用药提供依据.方法 以生理盐水为释放介质,采用透析袋-高效液相色谱法研究其在0～48 h内的体外释药特性.结果 48 h内槲皮素累积释放度为95.6%.结论 槲皮素固体脂质纳米粒具有良好的缓释特性;该方法 用于考察槲皮素固体脂质纳米粒的体外释放度,操作便利,方法 稳定,结果 重现性好.
关键词： 槲皮素固体脂质纳米粒 体外释放度 透析袋 高效液相色谱法 -
简易显示酸性黏液物质的胶体铁法
用胶体铁(colloidal iron)染色显示酸性黏液物质早已有报道,过去常用Hale法和Rinehart & Abu′l-Haj法,前者需购买进口特制的渗析铁来配制,后者则采用三氯化铁、甘油和氢氧化铵,在三氯化铁和甘油溶液中,要一次次小心地加入定量的氢氧化铵,出现沉淀后轻轻摇动使沉淀完全溶解,稍一不慎就配制不好[1],配制完毕用透析袋(dialysis bag)于清水中透析3 d.现使用一种简易的胶体铁配制法,以便有助于病理诊断.
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瑰及乳膏中白及多糖的体外释放度考察
目的 考察瑰及乳膏的体外释放度,为合理用药提供依据.方法 以无水葡萄糖为对照品、白及多糖为指标、生理盐水为释放介质、0.2%蒽酮-硫酸试液为染色剂,采用透析袋法研究瑰及乳膏的体外释药特性.结果 10 h内白及多糖累积释放度为84.2%,为速释期;在12 h以后其释放度为15.8%,为缓释期;48 h内累积释放度为97.9%.结论 瑰及乳膏具有缓释特性,每10 h使用一次可保持疗效.透析袋法用于瑰及乳膏的体外释放度考察,操作便利、方法稳定、结果可靠.
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透析袋电洗脱法在蛋白质回收和纯化中的应用
将初步纯化后的已构建的人脑硫氧还蛋白还原酶基因PET-HBTR表达产物进行SDS-PAGE电泳,分离纯化目的蛋白,免疫动物制备抗体.SDS-PAGE电泳鉴定确证该抗体具有很高的纯度,抗体滴度可达1:1 000.改进后的透析袋电洗脱法较适合在大批量蛋白纯化之前进行少量蛋白的纯化,亦可用于少量样品的动物实验研究.
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一种可用于治疗苯丙酮尿症的工程菌株的建立
目的:通过基因重组建立高效表达有活性的PAL菌株,为开创苯丙酮尿症的新疗法奠定基础.方法:对已克隆于pUC19质粒中的水稻苯丙氨酸氨解酶的cDNA进行反向测序,根据测序结果,与pET28系列质粒中的阅读框架结构进行比较,选择相匹配的pET28c质粒作为表达载体,用EcoRⅠ分别切开质粒pUC19-rPAL-1-cDNA和pET28c,切下的2.5 kb rPAL-1-cDNA通过1.5%琼脂糖凝胶电泳分离,透析袋回收,酚、氯仿抽提,乙醇沉淀,纯化后溶于双蒸水备用.
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瑰及乳膏中阿魏酸的含量测定及体外释放度考察
目的:建立瑰及乳膏中阿魏酸的含量测定方法并进行体外释放度考察,为其质量控制提供依据.方法:以生理盐水为释放介质,采用透析袋-高效液相色谱法考察瑰及乳膏中阿魏酸24 h体外释药特性.结果:12 h阿魏酸累积释放度为86.7％,24h为98.9％.结论:瑰及乳膏具有缓释特性.透析袋-高效液相色谱法用于瑰及乳膏中阿魏酸的体外释放度考察,操作方便,方法稳定,结果可靠.
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注射用染料木素胶束的体外释药研究
目的:考察以单甲氧醚聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸共聚物为载体制备的注射用染料木素胶束的体外释药规律.方法:以加入2％吐温80的磷酸盐缓冲溶液(pH7.4)为释放介质,采用动态膜透析技术考察注射用染料木素胶束释药行为；采用高效液相色谱法测定含量并计算累积释药率；应用6种数学模型对其释药规律进行拟合；同时与染料木素原料药比较.结果:染料木素原料药在2h内释放完全,而注射用染料木素胶束前期释药较快,后期释药较慢,并可持续释药48 h以上,释药行为符合Weibull模型.结论:注射用染料木素胶束体外释放具有一定的缓释特性.
