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  • 转基因大米的免疫毒理学评价

    作者:陈小萍;卓勤;朴建华;杨晓光

    目的评价转基因大米和非转基因大米对小鼠免疫功能的异同.方法以转豇豆胰蛋白酶抑制剂(cowpea trypsin inhibitor,CpTI)基因大米和母系非转基因大米喂养BALB/C小鼠30天(均配成AIN-93G的全价营养饲料,并且含有大量的转基因大米或非转基因大米),比较各组小鼠的各项免疫毒理指标:体重、脏器指数、血常规、淋巴细胞分类、血清抗体滴度、空斑试验(PEC)、迟发型皮肤过敏反应(DTH)、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验.结果发现转基因大米和非转基因大米喂养的小鼠各项免疫毒理指标无差异.结论转基因大米对小鼠的免疫功能的影响与非转基因大米基本相同,转基因大米与非转基因大米在免疫毒理学方面的评价具有"实质等同性".

  • 转豇豆胰蛋白酶抑制剂大米90天喂养实验研究

    作者:卓勤;陈小萍;朴建华;顾履珍;李宁;杨晓光

    目的观察转豇豆胰蛋白酶抑制剂(简称CpTI)的大米是否具有潜在的毒副作用.方法将断乳的Wistar大鼠随机分为3组:转基因大米组(T)、非转基因大米组(N)和阴性对照组(C).T组饲料中含78.3%的转基因大米,N组饲料中含74.7%的非转基因大米.喂养大鼠90天,称量每日进食量、每周体重身长.检测中期及末期的血常规和生化指标.90天末,处死动物,取股骨测骨密度,称量脏器重量,计算脏器系数,并对脏器进行病理观察.结果大部分指标T组与其他两组差异无显著性,雄性T组1月末的身长较其他两组长,末期的血糖及ALT较其他两组低,雌性T组中期的红细胞计数及血红蛋白较其他两组高,雌性T组末期单核细胞计数较其他两组高(P<0.05).但这些数值都在文献报道的正常范围内.结论用转CpTI大米喂养大鼠90天未发现其有对健康产生毒副作用的结果.

  • 转人乳铁蛋白基因大米的营养成分及亚慢性毒性研究

    作者:胡贻椿;朴建华;杨晓光

    目的 比较转人乳铁蛋白基因(hLf)大米与其亲本大米在营养成分上的差异,并观察其是否具亚慢性毒性作用.方法 对大米中的主要成分及矿物质、维生素进行测定并比较.将初断乳Wistar大鼠按性别、体重随机分为4组饲喂90天,自由进食与饮水.依据大米成分分析结果配制饲料:转hLf大米高剂量饲料(A组,大米添加量为71.45%)、转hLf大米中剂量饲料(B组,大米添加量为35.725%)、亲本大米高剂量饲料(C组,大米添加量为71.01%)和AIN-93G对照饲料(D组).观察大鼠的体重、进食量、血常规、血生化、脏器系数、骨密度情况,并对大鼠的脏器进行病理学检查.结果 转hLf大米与亲本大米在总的主要营养成分、矿物质、维生素上没有显著差异,但在乳铁蛋白及Fe含量上具明显差异.转hLf大米组血常规(WBC、HGB、RBC、MCH)、血生化(AST、Glu)、脏器系数、骨密度的个别指标与亲本对照组或AIN-93对照组存在显著差异(P<0.05);其他观察指标与两个对照组均无显著差异.结论 部分指标虽然存在组间差异,但仍在正常范围内,未发现转hLf大米对健康具有毒副作用.

  • 赖氨酸转基因大米与亲本大米在五指山小型猪回肠中的消化代谢比较

    作者:胡贻椿;李敏;朴建华;杨晓光

    目的 对赖氨酸转基因大米与其亲本大米中蛋白质和氨基酸在猪回肠的消化代谢情况进行比较研究.方法 选择近交系五指山小型猪为实验动物,通过外科手术将T型瘘管安置于小型猪回肠末端,给其饲哏赖氨酸转基因大米和亲本大米,收集小型猪回肠末端的消化产物进行分析,采用酪蛋白饲料法测定内源性氨基酸的排出量.从而比较两种大米蛋白质和氨基酸的表观消化率和真消化率.结果 赖氨酸转基因大米与亲本大米的蛋白质表现消化率和真消化率都没有显著差异;各种氨基酸的消化率结果显示,除半胱氨酸的表观消化率外,其他氨基酸的表观消化率和真消化率都没有显著差异.结论 赖氨酸转基因大米与亲本大米在五指山小型猪体内的蛋白质和氨基酸消化代谢基本没有差异,均能很好地被消化吸收.

  • Xa21转基因大米的营养学评价

    作者:李英华;朴建华;陈小萍;卓勤;毛德倩;杨丽琛;杨晓光

    目的观察转基因大米对幼鼠喂养的营养学功效.方法将初断乳Wistar大鼠按雌、雄分别随机分为三组,即转基因大米组、非转基因大米组和AIN93G正常对照组.饲相应饲料,自由进食,喂养28天.观察指标:大鼠进食量、蛋白质功效比、体重、身长、血常规、血生化、脏体比值和骨密度.结果雄性组:转基因大米组除肝/体比高于非转基因大米组外,其他所有观察指标和非转基因大米组均无显著性差异.雌性组:转基因大米组肝/体比、血钙和干骺端骨密度高于非转基因大米组,其他所有指标转基因大米组和非转基因大米组均无差异.与正常对照组相比,转基因大米组血钙和干骺端骨密度显著增加.结论转基因大米28天动物喂养实验未发现有明显毒副作用.

  • 不同加工条件下转基因大米潮霉素标记基因(hpt)稳定性研究

    作者:沈立明;吴永宁;张建中;周萍萍;魏晓丽;朱祯

    目的从DNA稳定性的角度,探讨转基因大米潮霉素标记基因hpt向食品或消化道微生物转移发生水平转移的可能性.方法利用针对hpt不同大小片段的PCR扩增体系,对hpt在转基因大米加工食品中的稳定性进行研究.结果建立的PCR体系能稳定扩增出hpt236bp-910bp不同大小的5个片段.利用这一PCR体系对s86转基因大米不同加工食品的检测显示,加工米饭、粥大于500bp的片段已降解,爆米花和锅巴大于236bp的hpt片段已降解.对照M86大米加工米饭和粥仅能扩出植物叶绿体基因rbcl片段,爆米花、锅巴及空白对照所有扩增均为阴性.结论hpt在转基因大米加工食品中均已不同程度的发生了降解,不同加工方式对hpt片段降解影响显著,在加工后hpt以较大或完整片段向食品或消化道微生物转移的可能性减小.

  • Xa21转基因大米对大鼠致畸作用的实验研究

    作者:李英华;朴建华;卓勤;陈小萍;毛德倩;杨丽琛;杨晓光

    目的 观察Xa21转基因大米对大鼠胚胎生长、发育的影响.方法将初断乳Wistar大鼠按雌雄分别随机分为4组:转基因大米组、非转基因大米组、AIN93G对照组和敌枯双阳性对照组.单笼喂养,饲相应鼠料,喂满90天,雌雄合笼.观察母鼠和胎鼠的生长发育情况.结果转基因大米组孕鼠增重、活胎体重、身长、尾长均显著高于阳性对照组,而死胎数、吸收胎数、畸形率(外观、内脏、骨骼)均显著低于阳性对照组.转基因大米组与非转基因大米组、AIN93G对照组相比,所有观察指标均无统计学差异.结论转Xa21基因大米与非转基因大米相比,对大鼠受孕率、胚胎生长发育无显著性差异.

  • 转Xa21基因大米亚慢性毒性实验

    作者:李英华;朴建华;卓勤;陈小萍;陈晓滨;杨晓光

    目的 观察Xa21转基因大米对大鼠的亚慢性毒性损害.方法 将Wistar大鼠按性别体重随机分为转基因大米组、非转基因大米组和AIN93G正常对照组.分别饲相应饲料90天,自由进食.观察大鼠体重、身长、血常规、血生化、脏器重量、骨密度和脏器的病理学检查.结果 与非转基因大米组相比,实验中期转基因大米组血糖降低,胆固醇和高密度脂蛋白升高,实验结束时上述差异消失,但雌性组谷草转氨酶活性显著升高.与AIN93G正常对照组相比,实验中期转基因大米组体重、甘油三酯、高密度脂蛋白显著增高,血糖降低;实验结束时上述差异消失.脑、心、脾、肺、肾、胃、十二指肠、肾上腺、睾丸、卵巢病理检查未见异常.结论 现有实验结果 不能证实转基因大米对大鼠有亚慢性毒性作用.

  • 转豇豆胰蛋白酶抑制剂大米的致畸作用研究

    作者:卓勤;陈小萍;朴建华;韩驰;杨晓光

    目的用表达杀虫蛋白CpTI(豇豆胰蛋白酶抑制剂)的大米喂养Wistar大鼠,研究其是否具有致畸作用.方法将断乳的Wistar大鼠随机分为4组,转基因大米组、非转基因大米组、阴性对照组和阳性对照组,敌枯双为阳性对照物.转基因大米组含78.3%转基因大米,非转基因大米组含74.7%与转基因大米同品系的非转基因大米,两个对照组的饲料为AIN93G,三种饲料的宏量及微量营养素的含量相同.大鼠性成熟后,进行传统的致畸实验,观察母鼠及胎鼠的情况.结果转基因大米组的孕鼠增重、胎鼠体重、身长和尾长显著高阳性对照组,畸形率(包括外观畸形、骨骼畸形和内脏畸形)显著低于阳性对照组(P<0.01),转基因大米组、非转基因大米组及阴性对照组间的所有指标均无显著性差异(P>0.05).结论此种转CpTI基因的大米对大鼠无母体毒性、胚胎毒性和致畸作用.

  • 转人乳铁蛋白基因大米的慢性毒性研究

    作者:张敏;卓勤;田园;李卫东;毛德倩;朴建华;杨晓光

    目的 观察转人乳铁蛋白(hLF)基因大米是否具有慢性毒性作用.方法 初断乳的180只SD大鼠按性别、体重随机分为3组:转基因hLF基因大米组、亲本大米对照组和AIN-93对照组,分别饲喂相应饲料12个月.观察大鼠的体重、进食量、血常规、血生化情况,实验末期处死动物,称量脏器重量并对脏器进行病理学检查.结果 转hLF基因大米组血常规(LYM%、GRN%)、血生化(ALT、AST、GLU)在个别时间点上与亲本对照组或AIN-93对照组存在显著差异(P<0.05);其他观察指标与两个对照组均无显著差异.结论 现有实验结果不能证实转hLF基因大米对大鼠有慢性毒性作用.

  • 转Bt基因大米与相应亲本大米差异蛋白质组学研究

    作者:程娟献;夏晴;桑志红;毛劼;王心正;董方霆;何昆

    目的:利用差异蛋白质组学及生物信息学等技术方法,探讨外源Bt基因的导入对大米表达蛋白质组的影响,深化转基因大米在蛋白质组学方面的研究。方法在转基因大米“华恢1号”和亲本大米“明恢63”样品中提取大米总蛋白,通过二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)实验方法,得到相应的蛋白质组2D-PAGE谱,再选择差异明显的蛋白质点进行质谱鉴定及生物信息学分析。结果对转Bt(cry1Ab/1Ac)基因大米和亲本大米2D-PAGE图谱的蛋白质点进行了对比匹配,识别出明显的差异蛋白质点28个,以亲本大米为参照,转Bt基因大米相对高表达的18个,相对低表达的10个;选择转基因大米凝胶上的差异蛋白质点进行了质谱鉴定和生物信息学检索,发现差异蛋白质主要参与能量代谢,蛋白质合成、氧化还原和应激响应等生物过程。结论转Bt基因“华恢1号”及其亲本大米“明恢63”表达的蛋白质组存在一定差异,但未发现这些差异蛋白质具有抗营养性和致敏性,也未发现新蛋白和毒蛋白的表达。

  • 喂饲转HJC-1和G6-EPSPS基因大米大鼠主要营养素吸收利用率试验研究

    作者:刘洪亮;王洋;张明月;王静;姜文玲

    目的 研究转HJC-1和G6-EPSPS基因大米大鼠主要营养素吸收利用率.方法 将140只Wistar大鼠随机分为7组,每组20只,雌雄各半,即转基因大米低、中、高剂量3个组,亲本对照低、中、高剂量3个组和饲养对照组,相应饲料喂养7d.比较各组大鼠蛋白质功效比值及蛋白质、脂肪、碳水化合物、纤维素的表观消化率等.结果 除雄性亲本高剂量组蛋白质功效比值高于饲养对照组外,其他各组蛋白质功效比值与饲养对照组差别无统计学意义;除雌鼠转基因低剂量组的蛋白质表观消化率和雄鼠亲本低剂量组的脂肪表观消化率外,其他各组的蛋白质表观消化率、脂肪表观消化率、碳水化合物表观消化率、纤维素表观消化率均高于饲养对照组(P<0.01);转基因各组与相应亲本对照组上述指标的差异均无统计学意义.结论 喂饲转HJC-1和G6-EPSPS基因大米和亲本对照大米的大鼠主要营养素(蛋白质、脂肪、碳水化合物、纤维素)吸收利用率基本具有实质等同性.

  • 转HJC-1和G6-EPSPS基因抗虫耐除草剂大米对BN大鼠致敏性评价

    作者:王静;李瑞;刘洪亮

    目的 利用BN大鼠对转HJC-1和G6-EPSPS基因抗虫耐草甘膦大米进行致敏性评价.方法 42只BN大鼠随机分为7组,每组6只,分别为溶剂对照组、饲养对照组、亲本大米组、转基因大米组、HJC表达蛋白组、G6表达蛋白组和阳性对照组.转基因大米组喂饲含70%转HJC-1和G6-EPSPS基因大米饲料,亲本大米组喂饲含70%的9746亲本大米饲料,表达蛋白组每天每只动物分别灌胃给予1.0 mg/ml HJC和G6蛋白各1 ml,阳性对照组每天每只灌胃给予1.0 mg/ml OVA溶液1 ml,溶剂对照组每天每只灌胃给予PBS 1 ml,连续42 d.各组动物饲料均不含卵蛋白.观察动物体重、行为、毛色、分泌物等毒性表现及死亡情况,每周称重并记录体重,分别于第28天和第42天使用ELISA试剂盒测定血清抗体IgG和IgE水平,试验结束时称重并计算脾和胸腺脏器系数.结果 实验期间各组动物进食正常,活动自如,未出现生病或死亡,各组动物体重及总增重差异无统计学意义.与溶剂对照组和饲养对照组比较,HJC和G6表达蛋白组、转基因大米组血清IgG、IgE抗体水平及脾和胸腺脏器系数差异均无统计学意义.阳性对照组血清IgG、IgE抗体水平高于溶剂对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 全食品喂饲及灌胃给予表达蛋白未发现转HJC-1和G6-EPSPS基因抗虫耐草甘膦大米对BN大鼠血清IgG和IgE抗体水平及免疫器官产生不良影响,未见其对BN大鼠具有潜在致敏性.

  • 喂饲转HJC-1和G6-EPSPS基因抗虫耐草甘膦大米大鼠亚慢性毒性试验

    作者:王晓军;王静;刘洪亮;张力;姜文玲

    目的 研究喂饲转HJC-1和G6-EPSPS基因抗虫耐草甘膦大米对大鼠的亚慢性毒性.方法 将140只健康6~8周龄SPF级Wistar大鼠按体重随机分成7组,分别为饲养对照组和低(17.5%)、中(35%)、高(70%)剂量转基因大米组及低(17.5%)、中(35%)、高(70%)剂量亲本组,每组20只,雌雄各半.采用饲喂方式染毒,连续饲养90d.观察大鼠的一般情况,测定体重、进食量;在实验中期(第45天)和实验结束时(第90天)检测血液学和血生化指标,在实验结束后测定各主要脏器重量,计算脏器系数;并进行脏器病理组织学检查.结果 各剂量组动物的体重均呈增长趋势,转基因组、亲本对照组与饲养对照组每周体重及体重总增重、每周进食量、总食物利用率以及中、末期的血液学和血生化指标,各主要脏器系数及病理组织学检查比较,均未发现有生物学意义的改变.结论 未发现喂饲转HJC-1和G6-EPSPS基因抗虫耐草甘膦大米对大鼠具有亚慢性毒性.

  • 富含抗性淀粉转基因大米对大鼠肠道健康的影响

    作者:李敏;朴建华;刘巧泉;杨晓光

    目的 研究富含抗性淀粉转基因大米对大鼠肠道健康的影响.方法 48只健康成年雄性SD大鼠按体重随机分为4组:分别给予非转基因大米大量掺入的饲料(No-GM组)、转基因大米大量和半量掺入的饲料(GM组、Half-GM组)和正常对照饲料重(ND组).喂养5w后连续收集4d粪便;6w后处死大鼠并收集盲肠、结肠内容物,测定内容物和肠壁量、pH值、短链脂肪酸(SCFA)等反映肠道健康的指标.结果 GM组的体重接近ND组,显著低于No-GM组.与No-GM组和ND组相比,GM组和Half-GM组粪便量、粪便水分、盲肠壁以及内容物含量显著增加,并存在显著的量效关系(P<0.05).GM组结肠壁质量与No-GM组和ND组也有显著差异.盲肠、结肠和粪便中SCFA的含量逐渐降低,除了Half-GM组结肠中丁酸含量与其他各组没有差异外,GM组和Half-GM组盲肠、结肠中SCFA含量与No-GM组和ND组相比都有增加,各组大鼠粪便中丁酸含量的差异消失,但是乙酸和丙酸含量仍然存在差异.GM组和Half-GM组粪便和盲肠的pH值非常显著低于No-GM组和ND组.结论 抗性淀粉转基因大米能改善大鼠肠道健康.

  • 转入乳铁蛋白基因大米主要营养素的体内消化率及蛋白质营养价值评价

    作者:胡贻椿;李敏;朴建华;杨晓光

    目的 对转人乳铁蛋白基因大米(hLF大米)与亲本大米(PR大米)主要营养素在体内的消化代谢及蛋白质的营养价值进行初步比较评价.方法 以6头近交系五指山小型去势公猪为实验动物,进行回肠末端造瘘手术安置T型瘘管,采用交叉法分别饲喂hLF大米、PR大米,收集回肠末端消化产物分析比较两种大米主要营养素的体内消化率,采用经消化率校正的氨基酸评分法( PD CAAS)对两种大米蛋白质的营养价值进行初步评价.结果 hLF大米与PR大米在蛋白质/氨基酸、碳水化合物、脂肪、纤维素的消化率上均无显著差异.人乳铁蛋白基因的插入使hLF大米中各氨基酸的含量配比得到了一定的优化,且其PDCAAS比亲本大米提高了2.66%.结论 hLF大米与PR大米在五指山小型猪体内主要营养素的消化代谢上满足“实质等同性”的要求,PDCAAS的结果显示hLF大米中蛋白质的质量略有提高.

  • 转基因大米与亲本大米猪回肠蛋白质及氨基酸消化率的比较研究

    作者:韩军花;杨月欣;门建华;边立华;杨晓光;朱元招

    目的:比较表达豇豆胰蛋白酶抑制剂基因大米(转SCK基因大米)和亲本大米蛋白质和氨基酸消化率的差异,并探讨其生物利用率的异同.方法:选用猪为实验动物,通过外科手术法在回肠末端放置T型瘘管,分别喂饲转SCK基因大米和亲本大米,收集动物回肠末端消化产物,分析和计算两种大米蛋白质和氨基酸的消化率.结果:转SCK基因大米与亲本大米中蛋白质的表观和真消化率相似;氨基酸消化率测定结果显示,除亲本大米中赖氨酸的表观消化率与SCK基因大米相比有差异外,其余氨基酸的表观和真消化率均无显著性差异.结论:外源性基因的插入未改变大米中蛋白质和氨基酸的消化率,在蛋白质和氨基酸消化率方面基本满足"实质等同性"的要求.

  • 转基因大米营养评价试验

    作者:陈小萍;卓勤;顾履珍;朴建华;杨晓光

    目的:探讨转基因大米和传统非转基因大米在营养学方面是否具有实质等同性,为转基因大米的安全性评价提供科学方法.方法:以转豇豆胰蛋白酶抑制剂(cowpea trypsinin hibitor,CpTI)基因大米和蛋白含量与之相近的非转基因大米分别配成含蛋白10%(以其所含的大米蛋白为主,添加少量的酪蛋白)、其它营养成分同AIN-93G的饲料喂养断乳Wistar大鼠28 d,比较两组大鼠各营养指标、血液生化指标、体重身长、脏体比、蛋白质功效比(PER)、骨密度.结果:饲喂转基因大米和非转基因大米的大鼠各项营养学指标无差异.结论:转基因大米和非转基因大米的蛋白质的营养价值具有实质等同性,并且转基因大米中的CpTI并未明显干扰饲料中其它营养素的吸收,因此,从营养学角度看,转CpTI基因大米基本是安全的.

  • 转SCK基因大米和亲本大米食用品质的比较研究

    作者:韩军花;杨月欣;边立华;门建华;王竹;沈湘

    目的:对表达豇豆胰蛋白酶抑制剂基因大米(转SCK基因大米)与亲本大米的食用品质进行比较.方法:首先对两种稻米的米质进行了测定和比较,并测定了两种大米在40℃、60℃时的吸水率;挑选1 0名志愿者,对两种米饭的感官品质进行了评价;利用国标方法,测定并比较大米烹调前后主要营养成分的含量并计算烹调后营养成分的保留率.结果:转SCK基因大米与亲本大米营养成分保留率和吸水特性无差别,但转SCK基因大米的米质和感官评分有所下降.结论:转SCK基因大米营养价值无明显改变,米质和感官评分的下降是否与外源基因的转入有关值得引起注意.

  • 转SCK基因大米的营养学评价--小型猪比较喂养研究

    作者:杨月欣;陈淑蓉;韩军花;杨晶明;杨晓光

    目的:通过小型猪喂养实验,分析和评价转豇豆胰蛋白酶抑制剂基因大米(转SCK基因大米)的营养价值,并比较与亲本大米之间的差异.方法:选择断乳期雄性中国实验用小型猪15只,初始体重(6.22±0.42)kg,按体重和窝别随机等分成3组,分别为普通饲料组(NG),仅饲喂市售猪饲料;对照大米组(CG),饲喂70%亲本大米+基础饲料;转基因大米组(GG),饲喂70%转SCK基因大米+基础饲料.基础饲料包括12%小麦麸,8%豆粕,6%酪蛋白和4%的矿物质和维生素混合物.喂养62 d,观察和比较三组动物生长发育、摄食量、血生化指标、骨骼发育、组织病理等方面的差异.结果:GG组动物与CG组的一般营养状况、血常规和血生化值、体格发育、骨骼与肌肉发育和脏器发育及病理方面均未见明显差异,其营养作用基本等同,且两个大米组动物的体重增长值均高于NG组(P<0.05).GG和CG组动物的食物利用率相近,但均高于NG组(P<0.05).结论:转SCK基因大米与对照大米对小型猪的生长发育的影响基本等同,未发现转SCK基因大米造成任何可观察到的非预期不良结果.

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