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PM2.5对高血压(SHR/NCrl)大鼠呼吸道菌群的影响
目的 探讨大气混合污染对高血压(SHR/NCrl)大鼠呼吸道菌群健康效应的作用机制.方法 通过模拟现实大气污染及混合气体染毒,建立急性暴露于大气污染的低、中、高浓度的动物模型,对染尘染毒前后SHR大鼠口咽部及呼吸道黏膜生物菌群的分布状况进行定性、定量、定位的检测,对其呼吸道微生态变化的趋势进行动态研究.结果 染尘染毒后SHR大鼠的需氧菌、厌氧菌致病菌的检出率分别为71.8％和20.7％,高于染尘染毒前的0.6％,差异有统计学意义(P＜0.05).在厌氧菌的检出率中,染尘染毒前SHR大鼠呼吸道内未检测出破伤风杆菌(Tetanusbacillus)和死亡梭菌(Fusobacterium mortiferum),而染尘染毒后分别在28只、5只SHR大鼠中分别检测出此两种菌;厌氧菌属中的韦荣球菌属(Veillonella spp)检出率为53.1％与染尘染毒前比较差异有统计学意义(P＜0.05).染尘染毒后需氧菌中的条件致病菌数量开始增加,检出率也随之上升.检出结果表明,染尘染毒后机体内菌群数量和种类发生了变化.结论 PM25作为有害物质的载体,当随着呼吸进入人体呼吸道内时,会引起机体呼吸道正常菌群的紊乱,使致病菌易于定植且检出率上升,影响机体健康.
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中药呼吸道微生态制剂发展现状
目前,呼吸系统患病现状日益严峻,发病率日益增高,吸烟、空气污染、新病原与耐药病原等问题使得呼吸系统疾病的患病因素更加复杂,而现阶段呼吸系统疾病的治疗主要依靠抗生素,由此造成的抗生素滥用的现状也成为亟待解决的问题.呼吸道菌群对呼吸系统生理功能和病理改变都起到重要作用,中药作为中华医药瑰宝对呼吸道菌群具有很好的调理疗效,呼吸道中药微生态调节剂作为二者的结合产物能够更加高效地防治呼吸道菌群失调,改善微生态环境,是继抗生素之后治疗呼吸系统疾病的新星.中药微生态制剂无不良作用、无残留、不产生抗性,是理想的抗生素替代品,有着广泛的应用前景.
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健康老年人咽部寄殖菌调查
我们于2000年1月对121名健康老年人的咽部分泌物进行了菌群分布调查，旨在了解健康老年人上呼吸道菌群的分布状况，有助于阐明老年人呼吸道感染的发病机制。现将调查结果报告如下。
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冬季儿童上呼吸道菌群分布调查
上呼吸道感染多发生在冬春季节，了解儿童上呼吸道菌群的分布状况，有助于阐明儿童上呼吸道感染的发病机理。我们于2000年1月份，对165名学龄前儿童进行了咽部菌群分布调查。 对象 全部165份标本取自北京市某幼儿园3～6岁健康儿童的咽部分泌物，其中男童77名，女童88名。取材当日无流感流行。 方法 用无菌棉棒取儿童咽后壁分泌物无菌封闭保存，1 h内送实验室接种于5%羊血琼脂平板及含50 mg/L万古霉素的兔血巧克力琼脂平板上，置8%CO2孵箱中，35℃过夜培养。细菌的分离与鉴定均按操作规程进行［1］，用VITEK试卡将细菌鉴定到种。将分离到的嗜血杆菌、卡他莫拉菌及葡萄球菌，用Nitrocefin纸片进行β-内酰胺酶测试，纸片变红为阳性。对分离的肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌，用苯唑西林（1 μg）纸片进行耐药性检测，结果按NCCLS标准［2］进行判断。实验用Ⅹ、Ⅴ因子、OP、氧化酶、Nitrocefin、苯唑西林（1 μg）纸片，蛋白胨、脑心浸液（干粉）、DNA琼脂均购自OXOID公司（英国）。标准菌株流感嗜血杆菌ATCC 49766、肺炎链球菌ATCC 49619和金黄色葡萄球菌ATCC 25923为本实验室菌库保存。
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益生菌防治呼吸道感染的研究进展
呼吸道感染是一种较常见的呼吸道疾病,在全球发病率和死亡率较高,已成为全球关注的重要问题.抗生素用于治疗呼吸道感染的效果显著,但大量及不合理地使用抗生素易造成菌群失调,导致人体免疫力低下,尤其是在儿童和老年人中易出现反复感染.本文就益生菌对呼吸道菌群的调节作用进行综述.
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普通环境长爪沙鼠呼吸道菌群的分离鉴定
目的 调查普通环境长爪沙鼠呼吸道细菌及支原体携带情况,为制定长爪沙鼠微生物学等级标准提供依据.方法 对普通环境饲养的65只长爪沙鼠进行解剖,取气管分泌物接种血琼脂,分别放入普通培养箱和5% CO2培养箱中培养48 h,分离菌株后同时进行生化分析和PCR测序鉴定,以期准确判断分离菌株所属菌属;气管浸液提取DNA,用支原体特异性引物进行PCR检测,并分别计算检出率.结果 本研究共检出22种细菌及支原体.不同细菌、支原体感染率相差很大,阳性率在1.5%(1/65)到64.6%(42/65)之间,其中部分细菌为大鼠和小鼠致病菌.结论 本研究为长爪沙鼠的微生物学等级标准的制定提供了参考数据.
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变性梯度凝胶电泳方法对慢性阻塞性肺疾病患者呼吸道菌群分析
目的 对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期及COPD急性加重期(AECOPD)患者呼吸道菌群进行分析,了解疾病不同阶段的菌群分布特征和变化情况.方法 收集COPD稳定期、AECOPD患者及正常对照组痰标本,用变性梯度凝胶电泳(DGGE)方法分析三组样本的菌群分布情况,了解COPD患者呼吸道菌群分布、多样性及相似性等特征.结果 所有标本对应泳道都可见丰富条带.COPD稳定期组和正常对照组条带多样性类似,AECOPD组明显减少.COPD患者组条带亮度普遍较正常对照组高,部分条带在患者组与正常对照组间位置相同但前者亮度高,部分条带仅存在于患者组.部分条带在三组间位置相同,但亮度从正常对照组至AECOPD组逐渐增加.AECOPD组与稳定期组部分条带位置相同但前者亮度高,部分条带仅存在于AECOPD组.结论 COPD病程不同阶段呼吸道菌群分布及细菌负荷均发生了较大变化.
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学龄前健康儿童咽部菌群分布调查
为了解儿童上呼吸道菌群分布状况,本文对辽阳市110名3～6岁学龄前儿童的咽部分泌物进行了菌群分布调查.现将结果报告如下.
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应激状态下人体上呼吸道菌群的变化
部队在野外训练、执行特殊任务等应激状态下,由于环境变化、精神紧张、身体疲劳、机体免疫功能降低而导致呼吸道疾病的发生,是造成部队非战斗减员的主要原因之一.为探讨应激状态下上呼吸道菌群变化规律,我们于2002年10月对驻寒区部队野外训练期间上呼吸道正常菌群变化进行调查.现将结果报告如下.
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医务人员鼻咽部带菌状况调查
目的:了解医务人员鼻咽部的带菌状况.方法:采用常规分离培养法对178例医务人员的鼻咽拭子标本进行分离培养,药敏试验根据1999年美国NCCLS有关抗生素敏感试验标准进行,流感嗜血杆菌β-内酰胺酶检测采用Nitrocefin纸片法,耐青霉素肺炎链球菌(PRP)检测采用E-test法.结果:25.8%的医务人员鼻咽部携带流感嗜血杆菌,其产β-内酰胺酶率4.3%;52.8%携带副流感嗜血杆菌;11.8%携带金黄色葡萄球菌,其中耐苯唑西林的为31.1%;9.6%携带肺炎链球菌,其中PRP为29.4%.结论:医务人员的鼻咽部普遍携带病原菌,且普遍耐药,是医院内感染的主要传染源,因此采取相应措施(如医务人员与病人接触时戴口罩),这对防止医院内感染具有重要的作用.
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老年上呼吸道微生态研究
目的 通过研究健康老年机体上呼吸道微生态菌群构成,了解老龄人群上呼吸道优势菌群种类及数量,为从微生态学角度预防呼吸道感染的发生提供参考.方法 自沈阳市选取年龄为65～70岁健康老人为研究对象,无菌咽拭法采集咽后壁粘膜表面标本,对菌群进行定量分析、定性鉴定.结果 老年人群咽后壁需氧菌群与厌氧菌群数量之比为2.65:1,检出率较高的需氧菌及厌氧菌包括唾液链球菌、口腔链球菌、缓症链球菌、微黄奈瑟菌、灰色奈瑟菌、麻疹孪生球菌等,检出率较高的菌构成比也较高.结论 健康老年人群中检出率和构成比都较高的需氧菌和厌氧菌共同构成老年人上呼吸道口咽部优势菌群,在维持呼吸系统微生态平衡中起重要作用,可作为上呼吸道微生态学研究的重要指标菌.
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肺炎支原体肺炎患儿口咽部菌群的改变
目的 比较健康儿童与肺炎支原体肺炎患儿口咽部菌群的差异,分析肺炎支原体感染对儿童口咽部菌群变化的可能影响.方法 采用高通量测序技术,对30例肺炎支原体肺炎患儿及30例健康儿童16S rDNA进行测序分析,比较两组间的菌群多样性及在门、属水平上菌群结构差异.结果 健康儿童与肺炎支原体肺炎患儿在性别、年龄、抗生素使用等方面差异无统计学意义.肺炎支原体肺炎患儿口咽部菌群多样性比健康儿童明显降低.在门水平上,Proteobacteria(变形菌门)、Bacteroidetes(拟杆菌门)和Fusobacteria(梭杆菌门)在健康儿童中相对丰度显著高于肺炎支原体肺炎患儿组,而Firmicutes(厚壁菌门)、Tenericutes(柔膜菌门)和Actinobacteria(放线菌门)在肺炎支原体肺炎患儿组中相对丰度均显著高于健康儿童组;在属水平上,两组排在相对丰度前10位的属差异具有统计学意义,共有6个属在肺炎支原体肺炎患儿中显著增加,分别为Staphylococcus(葡萄球菌)、Actinomyces(放线菌属)、Acinetobacter(不动细菌属)、Atopobium(阿托波菌属)、Cor ynebacterium(棒状杆菌)和Abiotrophia(营养缺陷菌属).结论 肺炎支原体肺炎患儿口咽部菌群存在明显的改变,其口咽部菌群多样性比健康儿童明显降低,在门、属水平肺炎支原体肺炎患儿与健康儿童差异均有统计学意义.
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儿童呼吸道菌群的调查
目的 了解儿童呼吸道菌群的分布特征.方法 对重庆医科大学附属儿童医院的呼吸内科住院部500例小儿下呼吸道负压吸引法痰标本做分离培养;105例门诊未使用抗生素有咽部体征的上呼吸道患儿咽拭子标本做分离培养;同时对150例健康儿童上呼吸道咽拭子标本做分离培养,对他们的生长菌群进行分类鉴定和药敏试验,并对结果作对比分析讨论.结果 草绿色链球菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌、流感嗜血杆菌检出率差异无显著性(P＞0.05);而儿童下呼吸道痰标本结果和105例门诊上呼吸道患儿咽拭子标本结果比较大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、肺炎链球菌、副流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌、真菌差异无显著性(P＞0.05),与150例健康儿童上呼吸道咽拭子标本结果比较差异有显著性(P＜0.05).革兰阴性杆菌对亚胺硫霉素(IMP)耐药率低,对哌拉西林/他唑巴坦(TZP)、阿米卡星(AK)、环丙沙星(CIP)耐药率＜30%;革兰阳性球菌未发现耐万古霉素(VA)菌株,对利福平(RD)、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)耐药率相对较低;流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌对CIP、IMP耐药率＜10%;肺炎链球菌无VA耐药菌株,对氧氟沙星(OFX)、RD耐药率＜10%;草绿色链球菌也无耐VA菌株;对RD、复方磺胺(SXT)、四环素(TE)耐药率＜30%.结论 儿童正常菌群的分布特征以草绿色链球菌为主.从病原菌来看,下呼吸道住院患儿痰标本分离的致病菌大于门诊上呼吸道感染患儿咽拭子分离的致病菌大于健康儿童咽拭子标本携带的致病菌.
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基于16S rDNA可变区测序技术对抗生素治疗后的6月龄内肺炎婴儿的呼吸道菌群现况调查
目的 观察<6月龄肺炎婴儿的上、下呼吸道菌群状况.方法 纳入2017年1至8月在复旦大学附属儿科医院呼吸科住院的<6月龄的肺炎婴儿,同时收集口咽拭子及支气管肺泡灌洗液(BALF)标本,利用16S rDNA可变区测序技术分析呼吸道菌群结构,比较上、下呼吸道菌群.结果 24例婴儿的口咽拭子和BALF标本进入本文分析.上呼吸道菌群丰度前5位依次是:链球菌属、假单胞菌属、普氏菌属7、韦荣球菌属和埃希氏-志贺菌属,下呼吸道菌群丰度前5位依次是假单胞菌属、链球菌属、普氏菌属7、克雷伯菌属、罗氏菌属.下呼吸道菌群相较于上呼吸道有更多的独有菌,下呼吸道菌群的物种丰富度显著高于上呼吸道,多样性低于上呼吸道(P<0.05).上呼吸道与下呼吸道菌群丰度在前42位的菌属均为共有菌,占上、下呼吸道总细菌的98%以上.链球菌属和假单胞菌属是上、下呼吸道中相对丰度有显著差异的主要菌属.结论 小婴儿肺炎的上、下呼吸道菌群均存在显著改变;上、下呼吸道菌群物种组成相似,物种比例有差异.
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吸烟对肺癌患者呼吸道菌群的影响
吸烟是肺癌发生的主要诱因之一,90%男性肺癌患者及75%~80%女性肺癌患者与吸烟有关,被动吸烟是非吸烟肺癌患者的重要危险因素[1]。烟草含有的病原体经呼吸道吸入,使呼吸道定植菌群发生改变。人类约20%恶性肿瘤由微生物引起,关于呼吸道菌群与肺癌发生的关系日益受到关注。现将吸烟对肺癌患者呼吸道菌群影响的研究进展综述如下。
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成年非CF支气管扩张患者呼吸道菌群与临床测量指标间的相关性分析
目的 采用非培养法研究成年非CF支气管扩张患者呼吸道菌群特点及与临床指标间的相关性.方法 入选23例非CF支气管扩张患者(实验组,n=23)和15例健康志愿者(对照组,n=15),记录所有研究对象的一般临床指标,并收集痰液标本和支气管肺泡灌洗液标本.对痰液标本进行传统细菌培养和16S rDNA测序,对支气管肺泡灌洗液标本行16S rDNA测序.分析受试者呼吸道菌群特点及其与患者临床指标间的关系.结果 痰标本焦磷酸测序检测到铜绿假单胞菌和流感嗜血杆菌的频率要高于标准培养法报告的频率.两组均显示,痰标本比BAL标本提供了更多的测序序列.细菌群落多样性与FEV1呈正的线性相关.Mantel检验显示,菌落组成的相似性和FEV1间有显著相关性,全部菌种与LCS、痰中性粒细胞数和性别间有显著相关性.结论 非CF支气管扩张患者下呼吸道菌群的多样性与临床检测指标间有相关性.
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聚合酶链式反应方法筛查慢性阻塞性肺疾病常见致病菌
目的 对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期及急性加重期(AECOPD)患者痰标本进行细菌学分析,筛查常见致病菌的感染情况,探索细菌感染与COPD发病及进展之间的关系.方法 选择7种COPD常见致病菌(肺炎克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、卡它莫拉菌和鲍曼不动杆菌)的特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增的方法,对42例COPD稳定期患者、66例AECOPD患者和11例正常人痰标本进行检测,筛查上述病原菌的感染情况.结果 肺炎克雷伯杆菌在稳定期检出8例(19％),AECOPD检出4例(6.1％)；铜绿假单胞菌在稳定期检出2例(4.8％),AECOPD检出11例(16.7％)；肺炎链球菌在稳定期全部检出(100％),AECOPD检出26例(39.4％),正常对照组全部检出(100％)；金黄色葡萄球菌在稳定期未检出,AECOPD检出6例(9.1％)；流感嗜血杆菌在稳定期检出39例(92.9％),AECOPD检出51例(77.3％),正常对照组全部检出(100％).正常对照组以下各菌均未检出.卡它莫拉菌在稳定期检出12例(28.6％),AECOPD检出6例(9.1％)；鲍曼不动杆菌在稳定期检出3例(7.1％),AECOPD检出5例(7.6％).肺炎克雷伯杆菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌和卡它莫拉菌在COPD稳定期和AECOPD间的检出率差异有统计学意义(P＜0.05),铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌在两组间的检出率差异无统计学意义(P＞0.05).测序结果与检出结果一致.结论 COPD稳定期患者上呼吸道菌群水平接近正常人,而AECOPD患者明显降低.某些细菌感染是AECOPD发病的主要原因,但并非所有细菌感染都与COPD疾病进展有关.
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呼吸道菌群免疫在呼吸系统疾病中作用的研究进展
健康人群呼吸道黏膜表面定居着大量的细菌,主要包括厚壁菌门、放线菌门、拟杆菌门,它们与人体呼吸道局部的黏膜免疫系统相互作用,协同共生,保持了呼吸系统的免疫稳定与平衡.慢性呼吸系统疾病时呼吸道菌群发生改变,哮喘患者变形杆菌门比例增加;慢性阻塞性肺病(COPD)患者呼吸道菌群丰度下降,厚壁菌门,变形菌门比例增加;囊性纤维化(CF)患者呼吸道微生物多样性下降,致病菌及条件致病菌大量繁殖;上呼吸道咳嗽综合征(UACS)患者厚壁菌门及变形菌门比例上升,取代了正常人群咽部原有链球菌及奈瑟氏菌的优势地位.明确呼吸道菌群免疫过程,了解菌群免疫功能紊乱对慢性呼吸道疾病发生机制的影响,可以为防治人类呼吸系统疾病提供新的思路.
