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重组人皮肤模型评价化妆品皮肤腐蚀性/刺激性替代方法的建立
目的 通过构建重组人EpiDerm皮肤模型,建立检测化妆品的皮肤腐蚀性/刺激性的替代试验方法;方法取人的包皮组织,分离表皮和真皮后分别进行原代培养,用鼠尾胶原构建皮肤模型,经气液面培养后,腐蚀性试验作用3min和1h,刺激性试验作用15min后续培养42h,检测化学物致皮肤模型细胞活性的改变四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT试验)和白介素-1α(IL-1α)的释放量(ELISA法),评价化学物的腐蚀性,刺激性.结果 腐蚀性试验中,MTT检测作用于3种腐蚀性化学物(正辛酸、10%KOH、丙烯酸)后,细胞相对活性均<50%(3min)和<15%(1h);而2种非腐蚀性化学物(四氯乙烯、丁香酚)使细胞相对活性变化不大.刺激性试验中,MTT检测4种刺激性化学物细胞相对活性,其中3种化学物(三氯乙烷、5%KOH、10%SLS)致细胞活性明显小于50%,2种非刺激性化学物(乙醇、丙二醇)和1%TritonX-100作用后细胞活性>50%,在ELISA实验中,仅TritonX-100致IL-1α释放量大于60pg/ml,说明其同样具有刺激性.结论 所建重组人皮肤模型试验方法基本成功,可以作为检测化学物皮肤腐蚀性和刺激性的体外替代方法.
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不同质量浓度臭氧对兔骨骼肌损伤修复过程中IL-1α与MDA的影响
目的 研究不同浓度的医用臭氧在兔骨骼肌损伤部位局部注射对损伤组织和血浆中IL-1α及血浆中MDA的影响.方法 将90只实验兔随机分为空白组、模型组、臭氧治疗组(20、30和50μg/mL,分别为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组)进行造模,术后12 h治疗,分别在24 h、5 d和10 d取材,检测损伤骨骼肌组织与血浆中IL-1α及血浆中MDA的变化情况.结果 组织与血浆中IL-1α及血浆中MDA的变化结果显示,模型组与Ⅰ组在24 h、5 d和10 d均显著高于空白组,Ⅱ和Ⅲ组在24 h和5 d均显著高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);臭氧治疗组在24 h、5 d和10 d均显著低于模型组(P<0.05);Ⅲ组在24 h和5 d显著低于Ⅰ组,10 d显著低于Ⅰ组(P<0.05),与Ⅱ组比较差异无统计学意义(P>0.05);Ⅱ组在24 h、5 d和10 d均显著低于Ⅰ组(P<0.05).结论 质量浓度为20、30和50μg/mL医用臭氧可显著降低兔骨骼肌损伤组织与血浆中IL-1α及血浆中MDA的含量,减轻炎症,可有效修复损伤的骨骼肌,且其疗效随医用臭氧浓度的增加而增强.
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P-选择素等多项指标检测在胸腔积液鉴别中的应用价值
目的 分别检测结核性与恶性胸腔积液(以下简称胸液)中检测P-选择素、IL-1α、sFas、sFasL、AM(肾上腺髓质素)含量并与癌胚抗原(CEA)比较,探讨各检测方法及联合检测在结核性与恶性胸液鉴别诊断中的价值.方法 在结核性与恶性胸液中,应用ELISA法检测P-选择素、IL-1α、sFas、sFasL的含量;用放射免疫法(RIA)分别检测AM与CEA含量,对所得数据进行统计学处理.结果 (1)结核性胸液中P-选择素、IL-1α含量均明显低于恶性胸液组,分别为(t=8.71,P＜0.01),(t=6.80,P＜0.01);(2)结核性胸液中sFas、sFasL含量均明显高于恶性胸液组,分别为(F=4.451,t=6.422,P＜0.001);(F=5.760,t=6.866,P＜0.001);(3)结核性胸液中AM、CEA含量均明显低于恶性胸液组,分别为(t=7.49,P＜0.05);(t=6.37,P＜0.01).结论 P-选择素、IL-1α、sFas、sFasL与AM在对结核性与恶性胸液的鉴别诊断上,敏感性、特异性及临床诊断符合率均高于CEA,有较高的临床实用价值.ELISA法中以P-选择素为优,放免法以AM为优,联合检测可明显提高其临床诊断符合率.
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“改良三甲散”含药脑脊液对Aβ25-35诱导海马神经神经元细胞损伤IL-1α、IL-1β和IL-6的影响
目的：探讨改良三甲散对β淀粉样蛋白（Aβ25-35）所致海马神经元细胞损伤时细胞炎性因子IL-1α、IL-1β和IL-6的影响。方法：将原代培养的神经元细胞分为空白组、模型组、石杉碱甲组和改良三甲散低、中、高剂量组。选择性培养7~10天后吸去培养液，分别加入空白培养液、正常脑脊液（生理盐水组）、石杉碱甲脑脊液和中药脑脊液低、中和高剂量，加培养液补至等量，37℃孵育2 h。然后除空白组之外的各组加入经老化处理的Aβ25-35（终浓度为5μmol·L-1），建立AD细胞模型。空白组加入等量的培养液，继续孵育24 h后收集细胞上清液。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测IL-1α、IL-1β和IL-6的含量。结果：改良三甲散能降低细胞上清液中IL-1α、IL-1β和IL-6的含量。结论：改良三甲散脑脊液能有效抑制细胞炎性因子IL-1α、IL-1β和IL-6的释放，具有一定的抗炎效应，从而保护海马神经元细胞。
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点刺"委中"放血治疗腰椎间盘突出症机制的探讨
目的:通过观察实验性腰椎间盘突出症(LIDP)家兔坐骨神经传导速度(SNCV)和髓核组织中白细胞介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)、磷脂酶A2(PLA2)及PCE2(前列腺素E2)水平变化,探讨点刺"委中"放血治疗LIDP的机制.方法:40只健康新西兰家兔随机分为4组,即空白组、LIDP模型组、点刺委中组和点刺非穴时照点组.自制的LIDP动物病理模型造模器造实验性LIDP病理模型,三棱针点刺"委中"或对照点放血治疗7天.采用BL-410生理信号记录系统记录SNCV,酶联免疫吸附法和放射免疫等方法测定腰椎间盘髓核组织中IL-1α、PLA2,和血浆中的PGE2的含量.结果:点刺委中组治疗后SNCV显著高于治疗前(P＜0.01),其治疗前后SNCV的差值显著高于模型组和非穴对照组(P＜0.05);点刺"委中"放血可降低LIDP家兔髓核组织中IL-1α、PLA2,和血浆中的PGE2含量、与模型组和非穴对照组比较差异有显著性或非常显著性意义(P＜0.01或0.05).结论:点刺"委中"穴可明显增快LIDP家兔的SNCV,减少IL-1α、PLA2,和PGE2等炎症因子含量,提示减轻损伤局部炎症反应可能是点刺"委中"放血治疗LIDP的机制之一.
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整合素α1、层黏连蛋白和IL-1α在大鼠肝再生过程中的表达变化
目的通过检测整合素α1、层黏连蛋白(LN)和IL-1α在大鼠肝再生过程中的表达变化,探讨肝细胞增殖的机制.方法SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组和实验组.切除实验组大鼠2/3肝,分别于术后不同时段取肝,以免疫组织化学方法检测肝组织中整合素α1和LN的表达变化,以ELISA方法测定肝组织和库普弗细胞内IL-1α的含量变化.结果1.整合素α1定位于肝细胞膜和细胞质,术后4 h其免疫反应阳性肝细胞数开始增多,24～36 h达高峰,144 h后恢复正常(P＜0.01);2.肝内LN免疫反应阳性面积于12 h开始增加,24～48 h达高峰,术后12 h阳性肝细胞数增多,以24～36 h多(P＜0.01),96 h后恢复正常;3.IL-1α在肝组织中的含量于术后1 h开始升高,3 h达高峰,4 h后低于正常并持续至144 h(P＜0.01),在库普弗细胞内的含量于术后0.5 h开始升高,1.5～4h维持在高峰,12 h后低于正常并持续至96 h(P＜0.01).结论库普弗细胞分泌的IL-1α可能是肝再生早期刺激肝细胞增殖的信号分子之一,肝再生期间肝细胞与细胞外基质之间的黏附过程可能与整合素α1和LN有关.
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炎症性肌病肌肉功能障碍的研究
炎症性肌病突出表现为肢体近端肌肉无力,病理改变主要为肌纤维变性、坏死,肌纤维及其间质有炎性细胞浸润等,但有部分患者肌肉组织缺乏炎性细胞浸润而肌无力却非常明显,说明炎性细胞之外的某些因素对肌无力的发生可能有一定作用.此文通过分析炎症性肌病某些细胞因子、组织相容复合体的异常表达,微血管的病变以及肌肉能量代谢的特点,对该病肌肉功能障碍的可能机制进行阐述.
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正畸移动狗乳磨牙后其继承恒牙牙胚牙周组织中BMP、IL-1α、TNF-α的表达及意义
目的研究狗乳牙正畸移动后其恒牙胚牙周组织BMP、IL-1α、TNF-α的表达,探讨乳牙移动后恒牙胚改变的机理.方法取狗下颌第二乳磨牙正畸移动后14天的组织标本,用免疫组织化学染色技术,观察BMP、IL-1α、TNF-α在其继承的恒牙胚牙囊、牙周、牙槽骨组织中的表达.结果与对照侧相比,BMP在乳磨牙牙根的远中牙周膜和牙槽骨中以及恒牙胚的远中牙囊和牙槽骨中的表达明显增强,在乳磨牙牙根的近中牙周膜和牙槽骨中以及恒牙胚的近中牙囊和牙槽骨中的表达明显减弱;而IL-1α正相反,在乳磨牙牙根的远中牙周膜和牙槽骨中以及恒牙胚的远中牙囊和牙槽骨中的表达明显减弱,在乳磨牙牙根的近中牙周膜和牙槽骨中以及恒牙胚的近中牙囊和牙槽骨中的表达明显增强;TNF-α在牙囊中无表达.结论狗乳牙正畸移动后恒牙胚牙周组织发生骨改建.
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中西医联合治疗放射性肺炎的疗效及其机制
目的 观察中西医结合疗法对RP的临床疗效及其机制.方法 RP患者63例随机分为西药组及中西医联合治疗组.西药组予以抗生素及激素治疗,联合治疗组在西药组基础上加用中药汤剂;治疗前后测定患者血浆IL-1α,IL-6,TNF-α水平.结果 ①联合治疗组有效率显著高于西药组(P<0.05).②RP患者血浆IL-1α,IL-6,TNF-α水平显著高于正常对照组(P<0.05);治疗后其水平较治疗前显著降低(P<0.05),且治疗后联合治疗组显著低于西药组(P<0.05).结论 中西医联合疗法对RP有良好的治疗作用,其部分机制可能与调节IL1-α,IL-6,TNF-α水平有关.
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蛋白质芯片技术检测异基因造血干细胞移植患者血浆IL-1α、IL-2和VEGF含量的变化与aGVHD关系的初步探讨
目的 通过动态观察异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者血浆中IL一1α、IL-2及血管内皮细胞生长因子vascular endothelial growth factor,VEGF)含量的变化,探讨其变化与临床急性移植物抗宿主病(aGVHD)发生的关系.方法 32例以异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)治疗的患者,其中男性24例,女性8例,中位年龄36(22～47)岁.根据移植后aGVHD发生情况分成2组,分别为aGVHD组(24例)和无aGVHD组(8例).对2组患者采用蛋白质芯片方法动态检测外周血细胞因子IL-1α、IL-2和VEGF的含量,来探讨细胞因子IL一1α、IL-2和VEGF的含量变化与aGVHD发生的关系.结果 aGVHD组的IL-2含量在移植后第2周升高并达到峰值,显著高于移植前含量及相同时间无aGVHD组(P＜0.01),IL-2的含量变化要早于aGVHD症状出现,而且随着aGVHD的症状控制,IL-2的含量下降.无aGVHD组IL-1α含量在移植后的第3、5周显著高于aGVHD组(P＜0.01):血浆VEGF的含量在移植后的第5周无aGVHD组患者达到高浓度.而在aGVHD组,VEGF的高浓度值出现在移植后的第7周.结论 IL-2在allo-PBSCT后含量突然升高提示即将发牛急性aGVHD;无aGVHD组VEGF的峰值要比aGVHD组提前1周出现,可能预示着无aGVHD的患者比aGVHD患者造血重建更早:2组IL-1α含量存整个观察期内波动较大.通过蛋白质芯片技术检测对IL-2含量并动态观察以预测aGVHD,可能是一个颇具前景的研究方向.
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ELISA检测IL-1α的实验优化研究
目的:研究酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素1(IL-1a)的佳试验条件,用优化配制的TMB/HRP显色体系大程度降低成本,可适用于多数ELISA测定.方法:以前期优化方案为基础,进一步对抗体包被时间、包被温度、显色液配制等条件的优化,检测IL-1a标准品OD值并进行结果比较.结果:抗体包被于室温24 h,优显色体系为按四甲基联苯胺(TMB)终浓度0.1 mg/mL和0.03％H2O2配制,可获得佳IL-1α定量结果.结论:用优化后的ELISA方法测定IL-1a的敏感性、重复性及标准曲线拟合度更佳,具有良好的应用前景.
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蒙古族AD患者外周血IL-1和IL-18的检测及意义
目的 研究IL-1、IL-18与蒙古族特应性皮炎(AD)患者发病的关系,探讨二者在蒙古族AD发病中的作用及意义.方法 收集蒙古族AD患者100例(实验组)和正常对照者80例(对照组)血液标本,采用常规方法对外周血嗜酸性粒细(PBEC)行绝对计数,并应用酶联免疫吸附法(ElISA)测定研究对象IL-1(IL-1α和IL-1β)和IL-18的表达水平,对AD患儿进行搔抓、失眠、皮损面积、皮损严重度评分.采用统计学分析实验结果,得出变量间的相关性.结果 (1)实验组与对照组比较血清IL-1α值降低,IL-1β、IL-18与PBEC计数均升高(P＜0.01).(2)实验组血清IL-1β、IL-18与PBEC计数与病情严重程度均呈正相关(P＜0.01).(3)实验组血清IL-1α与PBEC计数与病情严重程度无显著相关性(P＞0.05).结论 IL-1α、IL-1β、IL-18在蒙古族AD发病中起作用.
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阳和汤对急性乳腺炎患者血清IL-1α、IL-6的影响
目的:观察阳和汤对急性乳腺炎患者血清IL-1α、IL-6的影响.方法:对照组为正常育龄妇女,阳和汤组为阳和汤治疗急性乳腺炎患者;分别检测对照组及阳和汤组治疗前、治疗7天后血清IL-1α、IL-6含量.结果:阳和汤组治疗前血清IL-1α、IL-6含量明显高于对照组,阳和汤组治疗后与治疗前比,血清IL-1α、IL-6含量均明显降低.结论:阳和汤可以显著降低急性乳腺炎患者血清IL-1α、IL-6含量.说明阳和汤治疗急性乳腺炎可能与调节体内IL-1α、IL-6含量有关.
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沙眼衣原体持续感染状态下STAT3-TLR2信号轴的变化初探
目的：探索在沙眼衣原体（ Chlamydia trachomatis，Ct）持续感染状态下，STAT3-TLR2信号轴的变化，以及相关炎性细胞因子的异常分泌情况。方法：以HeLa细胞为研究对象，建立Ct的急性感染和IFN-γ诱导的持续性感染模型，采用qRT-PCR、Western blot、ELISA等方法比较不同感染状态下，HeLa细胞STAT3-TLR2信号轴相关分子如TLR2、STAT3及IL-1α等的变化。结果：在Ct持续性感染状态下，上皮细胞分泌的IL-1α以及STAT3和TLR2的表达均明显增加，且IL-1α的分泌、TLR2的表达与STAT3的蛋白表达和活化呈一致性的升高。结论：在IFN-γ诱导的Ct持续感染状态下，STAT3-TLR2信号轴相关分子存在明显活化。
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丙型肝炎患者血清IL-1α、IL-6、TNF-α、IFN-γ的检测及意义
为探讨丙型肝炎血清中IL-1α、IL-6、TNF-α、IFN-γ的含量及与临床关系,应用ELISA法对33例各型丙肝患者检测血清中IL-1α,IL-6、TNF-α并与健康人群对照,结果发现:丙型肝炎临床各型患者血清中IL-1α,IL-6、TNF-α含量显著高于对照组(P＜0.01);IL-1α、IL-6、TNF-α与患者病情轻重呈正相关(P＜0.05),慢性丙肝IL-6含量高(P＜0.01);IFN-γ活性低(P＜0.05),IL-lα与IL-6呈正相关.认为IL-1α、IL-6、TNF-α、IFN-γ对丙肝患者病情观察和疗效判断有一定的指导意义.
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补腰健肾汤口服联合肾腧穴贴敷治疗腰椎间盘突出症
目的 探讨补腰健肾汤口服联合肾腧穴贴敷治疗腰椎间盘突出症临床疗效及机制的研究.方法 选取腰椎间盘突出症为诊断而收入院的患者86例,随机分为2组,对照组43例予临床常规治疗,试验组43例予补腰健肾汤口服联合肾腧穴贴敷治疗.比较2组治疗前后VAS、ODI、LFR评分,血清TNF-α、MMP3、CGRP及IL-1α 水平变化.结果 与治疗前比较,2组治疗后的VAS、ODI评分,TNF-α、MMP3、CGRP及IL-1α 水平均明显降低,LFR评分明显升高;治疗后与对照组比较,试验组VAS、ODI评分,TNF-α、MMP3、CGRP及IL-1α 水平均明显低于对照组,试验组LFR评分明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 补腰健肾汤联合肾腧穴贴敷能有效缓解腰椎间盘突出症腰部疼痛,改善腰部运动功能障碍,具有较好的临床疗效.
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白细胞介素-1α及IL-1RA与多发性硬化关系的研究
目的:探讨白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1),尤其是白细胞介素-1αa(IL-1α)和白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)基因多态性与东北地区汉族人群多发性硬化(multiple sclerosis,MS)的关系.方法:多聚酶链反应(PCR)进行IL-1a和IL-1RA基因多态性检测.结果:IL-1α和IL-1RA基因型分布及等位基因频率在MS和对照组间无显著性差异(P＞0.05).结论:IL-1α和IL-1RA基因多态性与MS易感性无相关性.
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针刺八髎穴配合推拿治疗L5-S1椎间盘突出症的疗效观察
目的 观察针刺八髎穴配合推拿治疗L5-S1椎间盘突出症的临床疗效及其对炎症因子和免疫指标的影响.方法 将86例L5-S1椎间盘突出症患者随机分为治疗组和对照组,每组43例.治疗组采用针刺八髎穴配合推拿治疗,对照组采用单纯针刺八髎穴治疗.两组治疗前后分别采用日本骨科协会评估治疗评分(JOA评分)、视觉模拟疼痛评分(VAS评分)、腰椎功能障碍指数(ODI评分)及日常生活能力评分(Barthel评分)评价腰椎功能改善情况,观察两组治疗前后各项炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10、IL-1α)及免疫指标(IgA、IgG、CD4、CD8)的变化情况,并比较两组临床疗效.结果 治疗组总有效率为97.7％,对照组为86.0％,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05).两组治疗后各项评分(JOA评分、VAS评分、ODI评分、Barthel评分)、炎症因子及免疫指标与同组治疗前比较差异均具有统计学意义(P<0.05).治疗组治疗后各项评分、炎症因子及免疫指标与对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 八髎穴针刺配合推拿是一种治疗L5-S1椎间盘突出症的有效方法,对部分炎症因子及免疫指标有明显的抑制作用.
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银屑病患者骨髓基质细胞IL-1α、IL-1β和IL-11分泌水平的实验研究
通过比较银屑病患者与对照组骨髓基质细胞分泌IL-1α、IL-1β和IL-11水平的差异,揭示银屑病患者骨髓造血微环境的异常.采用密度梯度离心法分离患者与对照组骨髓单个核细胞,通过贴壁法培养骨髓基质细胞,收集传3代后又培养72 h的骨髓基质细胞及培养上清,用流式细胞术鉴定细胞表面标志并用ELISA法检测上清液中IL-1α、lL-1β和IL-11的分泌水平.结果显示:90%以上细胞表面抗原高表达CD29,而CD34、CD45及HLA-DR表达阴性,即骨髓基质细胞纯度在90%以上;患者组骨髓基质细胞分泌IL-1α、IL-1β显著低于对照组(P<0.05),而IL-11的分泌水平两组间无统计学差异(P>0.05).结果表明,银屑病患者骨髓基质细胞分泌的IL-1α和IL-1β存在异常,提示患者骨髓造血微环境可能存在异常.
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机械压应力作用下IL-1α与TNF-α对滑膜细胞MMP-2,-9活性的影响
目的 通过研究机械压应力作用下炎症因子对滑膜细胞MMP-2,-9活性的影响,探讨滑膜组织在前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)机械性损伤过程中所起的作用.方法 利用等双轴拉伸装置对滑膜细胞施加12%模拟机械损伤的压应力以及施加炎症因子IL-1α与TNF-α,通过明胶酶谱法检测MMP-2,-9的活性.结果 12%机械压应力使MMP-2的活性增加了122%,TNF-α对MMP-2的活性有着明显的时间依赖性增加,而IL-1α则没有;IL-1α与TNF-α共同作用则对MMP-2,-9活性有着显著增加.结论 机械压应力与炎症因子对MMP-2,-9的活性有着显著的协同作用,机械压应力与炎症因子能够增加滑膜细胞MMP-2,-9的活性,因此滑膜组织可能参与调节关节腔内微环境以及膝关节组织损伤与修复的过程.
