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单克隆抗体亲和层析一步纯化重组人生长激素
单克隆抗体亲和层析技术可用来从体液、组织抽提液、细胞培养液中,特别是从基因工程菌体破碎液等复杂组成物中分离出微量蛋白质和多肽.由于其特异性高,操作简便而迅速,在高价值蛋白质和治疗用多肽的下游处理过程中,作为一种良好的分离纯化工具,有较广泛的适用性.本文运用该技术从人生长激素(hGH)基因工程菌发酵破碎液中一步分离制备高纯度并具有生物活性的重组hGH.
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2型糖尿病颈动脉硬化与微量蛋白尿关系的研究
微量蛋白尿、尤其白蛋白尿与2型糖尿病心血管疾病发生率和病死率密切相关,是预测糖尿病心血管事件的一项独立危险因素[1].
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尿常规检查的意义
尿常规检查是指尿液一般性检查,大致分为两大类:尿液试纸检查及显微镜分析检查.包括外观、尿蛋白、尿糖、潜血、比重、酸碱度、红细胞、白细胞、圆柱体、结晶体、细菌等.尿蛋白:一般正常尿液中仅含微量蛋白质,尿液中蛋白质含量超过1 5 0毫克/2 4小时的,称为蛋白尿.生理性尿蛋白增多常见于剧烈运动后、体位变化、身体突然受冷暖刺激,或情绪激动等.因在这些情况下,肾小球内皮细胞收缩或充血,使肾小球通透性增高.病理性蛋白尿,临床常见病有:急性肾小球肾炎、肾病综合征、肾盂肾炎、慢性肾炎、高血压肾病、苯中毒等.
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尿微量蛋白质的优化收集
目的为了有效收集一次随机尿液中微量蛋白质,以作为职业性肺癌及其他肿瘤患者尿微量基因蛋白研究的基础.方法本实验应用低温加压超滤系统对肺癌及健康者尿微量蛋白质进行超浓缩,并对尿微量蛋白的优化收集条件进行探讨.结果显示肺癌及健康者100 nl尿液经超浓缩和纯化后,可得到尿微量蛋白610 mg,并发现经冰冻保存超过1 d的尿样蛋白明显下降.结论提示尿样在4℃的保存条件下进行超浓缩和纯化处理后,可得到很高的尿微量蛋白质.能满足多次重复试验.该技术为开展尿微量癌基因蛋白的研究奠定了良好的基础.
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肝素锂对比浊法检测微量总蛋白的干扰分析
目的：证实肝素锂对比浊法检测微量总蛋白的干扰效应，并对其进行相关方法性能评价。方法分别配对检测8份不同浓度微量总蛋白尿液干扰标本，筛查判断肝素锂是否是试验的干扰物；浓度0．172、0．427 g ／L 微量蛋白质标本中分别加入不同量的肝素锂（干扰物试验系列样品，肝素锂浓度分别为0．000、0．025、0．030、0．035、0．040、0．045、0．050 mg／L），重复检测4次，进行干扰物剂量效应试验。结果干扰标本检测结果显示，8份含肝素锂与不含肝素锂的配对标本中大偏倚为159．37％，小偏倚为11．37％，2组间结果差异有统计学意义（t＝17．24，P＜0．05）；浓度为0．025 mg／L 肝素锂对0．172 g ／L 微量蛋白质标本干扰效果的95％置信区间为0．034～0．062；0．030 mg ／L 肝素锂对0．427 g／L 干扰效果的95％置信区间为0．043～0．053；肝素锂浓度分别为0．025 mg／mL 和0．050 mg／mL 时，0．172 g／L 微量蛋白质标本的结果偏倚分别为27．33％、58．14％；肝素锂浓度分别为0．030 mg／mL 和0．050 mg／mL 时，0．427 g／L 微量蛋白质标本的结果偏倚分别为11．24％、18．74％；同系列浓度的肝素锂对0．172 g／L 和0．427 g／L 微量蛋白质标本的干扰物剂量呈线性相关，其线性方程分别为 Y ＝1．974X －0．00103，Y ＝1．599X －0．0005。结论肝素锂是比浊法检测微量蛋白质的外源性干扰物，它对微量蛋白质检测结果为正干扰，特别对低水平微量蛋白质检测的干扰效果更明显，且随着肝素锂浓度升高，干扰效果越强。
