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循环肿瘤细胞检测对IRE联合微球栓塞治疗肝癌的预后评估价值
目的:采用CanPatroTM-CTC-二代捕获技术联合RNA多重原位杂交分析检测不可逆电穿孔(irre-versible electroporation,IRE)联合载药微球经动脉化疗栓塞(transarterial chemoembolization with drug-eluting beads,DEB-TACE)治疗肝癌前后循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs),评估该诊断方法的使用价值及临床意义.方法:收集2015年8月至2018年3月来我院分别接受IRE+DEB-TACE联合疗法、IRE单一疗法和DEB-TACE单一疗法治疗的原发性肝癌患者的外周血进行CTCs检测.同时收集10例健康体检者外周血做对照.观察治疗前、后HCC患者CTCs改变.结果:91例HCC患者术前外周血可检测出CTCs 82例(90.1％).每5 ml血液中位数CTCs为8.5个(6.0,13.0).10名健康体检者外周血中未检测到CTCs(0.0％).术前肿瘤标志物AFP水平与患者外周血CTCs数量呈正相关(P<0.0001).三组在治疗前CTCs无统计学差异(P>0.05).治疗后一个月,三组在治疗前、后CTCs差异分别有统计学意义(P<0.05).IRE+DEB-TACE组、IRE组术后CTCs均显著低于DEB-TACE组(P=0.0140,P=0.0352).结论:CanPatroTM-CTC-二代捕获技术联合RNA多重原位杂交分析可有效检测肝癌CTCs.IRE或联合微球栓塞治疗肝癌可能有助于提高短期疗效.
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RT-PCR检测乳腺癌患者外周血表皮生长因子受体和细胞角质蛋白-19mRNA的表达
目的探讨逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测乳腺癌患者外周血表皮生长因子受体(EGFR)mRNA作为乳腺癌循环肿瘤细胞标志的可能性及意义.方法以转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,分别对40例乳腺癌患者和30例健康人静脉血进行EGFRmRNA检测,同时与目前研究较多的循环上皮细胞标志:细胞角质蛋白CK-19的mRNA做比较.结果在30例健康人外周静脉血中没有发现EGFRmRNA的表达(0%),但有8例CK-19阳性(26.7%).而40例乳腺癌患者检测出13例EGFR mRNA阳性(32.5%),与正常人相比P＜0.01,两组间存在显著性差异;CK-19的mRNA阳性例数为14(35.0%),与正常人相比P＞0.05,两组间无统计学差异.通过免疫组化检测到25例(62.5%)的肿瘤组织中EGFR阳性,所有外周血中EGFR mRNA阳性的病例,相应的原发肿瘤病灶中EGFR蛋白均为阳性,组织中EGFR蛋白高表达的患者外周血EGFR mRNA检出率也高(P＜0.01).26例初治患者中5例EGFR mRNA阳性(19.2%),14例复治患者中8例EGFR mRNA阳性(57.1%),两组相比P＜0.05,存在显著性差异.6例曾使用过紫杉醇类药物挽救化疗的转移性患者中1例EGFR mRNA阳性(16.7%),8例未使用过紫杉醇类药物挽救化疗的转移性患者中7例EGFR mRNA阳性(87.5%),两组相比P＜0.05,存在显著性差异.结论 CK-19的mRNA作为乳腺癌循环肿瘤细胞的标志无诊断意义,但EGFR mRNA有望作为检测乳腺癌循环肿瘤细胞的有效标志.RT-PCR检测乳腺癌患者外周血EGFR mRNA有助于判断预后.紫杉醇类药物有助于降低乳腺癌复发转移的风险.
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鼻咽癌患者外周血循环肿瘤细胞的检测及其与预后的相关性
目的:利用抗体标记和流式细胞仪联合方法检测鼻咽癌外周血中的循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)数量,分析评价CTCs与患者临床特征和预后之间的相关性.方法:针对福建省肿瘤医院2012年7月至2014年5月收治的67例鼻咽癌首诊患者以及10例健康志愿者,抽取外周血10ml,提取其中的单个核细胞.依次应用抗Epcam、抗CD45以及抗CK单克隆抗体对上述提取的单个核细胞进行抗体标记,将Epcam阳性、CD45阴性以及CK阳性的细胞作为鼻咽癌患者的CTCs,应用流式细胞仪检测其在外周血中的存在情况,分析其与患者临床特征及预后之间的关系.结果:鼻咽癌组外周血中的CTCs明显高于健康志愿者组,差异具有统计学意义(P<0.05).单因素分析结果表明,鼻咽癌患者外周血CTCs水平与进展情况(P=0.04)、N分期(P=0.001)以及临床分期(P=0.035)均显著相关.Logistic多因素回归分析结果则显示,仅患者的N分期与CTCs水平具有相关性(P=0.003),CTCs阳性患者的N分期更晚.Kaplan-Meier生存分析显示,CTCs阳性患者的无进展生存期(progression free survival,PFS)要显著短于CTCs阴性患者(P=0.029).结论:鼻咽癌患者外周血中CTCs阳性与患者N分期相关,且提示预后不良,可能成为鼻咽癌患者预后评估的一个辅助指标.
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晚期卵巢癌患者外周血循环肿瘤细胞的检测及其临床意义
目的:探讨晚期卵巢癌患者外周血中循环肿瘤细胞(CTC)的检测及其临床意义.方法:选择2014年6月至2016年6月永州市中心医院收治的60例晚期卵巢癌患者作为观察组,收集同期本院的30例健康志愿者作为对照组.分别抽取外周血7.5 ml,采用流式细胞仪检测卵巢癌患者一线方案化疗2周期前后及对照组外周血中EpCAM、CK19同时(+)且CD45(-)的CTC的变化情况,同时分析其与临床特征及化学疗效的关系以及比较化疗前后CTC数目评价与RECIST疗效评价标准之间的关系,并随访患者的无进展生存期(PFS),分析患者治疗过程中CTC数目的变化与患者PFS的关系.结果:观察组中42例检测到CTC,阳性率70%,对照组未检测到CTC,两组比较,差异具有统计学意义(P<0.05).CTC阳性表达情况与卵巢癌患者的分化程度及CA125表达相关(P<0.05),与患者的年龄、肿瘤直径、腹水情况均无相关性(P>0.05).观察组中化疗前CTC阳性表达42例,阳性率为70%,化疗2周期后卵巢癌患者CTC阳性表达18例,阳性率为30%,两组差异具有统计学意义(P<0.05).化疗2周期后,CTC数目评价与RECIST疗效评价标准之间差异无统计学意义(P>0.05),且两种方法的吻合度较高(k=0.479).运用相关分析显示,CTC表达与化学疗效呈负相关(r=-0.223,P=0.009).化疗2周期后外周血中循环肿瘤细胞数目<5,其无进展生存期为13.2(11.0~15.1)个月,外周血中循环肿瘤细胞数目≥5,其无进展生存期为6.4(3.8~9.2)个月,两组差异具有统计学意义(P<0.05).结论:CTC阳性表达与卵巢癌患者的分化程度及CA125表达相关,与化疗疗效呈负相关,CTC的表达情况可以预测卵巢癌患者的化疗疗效及预后.
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非小细胞肺癌患者外周血肿瘤细胞检测及临床意义
目的：检测非小细胞肺癌患者外周血瘤细胞（CTC），探讨其在治疗中的临床意义。方法：选2015年1月至6月非小细胞肺癌患者48例，同期体检健康人48例作为对照组，检测两组外周血中CTC，分析相关指标差异。结果：观察组CTC阳性24例（50．0％），对照组为0，差异显著（P＜0．05）；CTC阳性不受年龄、性别、吸烟与否、组织学类型及肿瘤病灶的分化程度的影响；化疗后观察组CTC阳性率显著降低（P＜0．05），与疗效存在负相关性。结论：检测外周血CTC有助于预测非小细胞肺癌患者的病情、预后及疗效评价。
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乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞 MiR -21检测的临床意义
目的：研究乳腺癌患者血浆中的 MiR -21表达水平，初步探讨其在乳腺癌中作为循环肿瘤细胞（cir-culating tumor cells，CTCs）的临床意义。方法：采用基于 SYBR Green I 染料荧光分析的茎环实时定量逆转录聚合酶链式反应（qRT - PCR）分别检测40例乳腺癌患者及15例正常对照者外周血中 MiR -21的表达水平，了解 MiR -21表达与临床病理指标的关系。结果：乳腺癌患者血浆中的 MiR -21表达水平明显高于正常对照者（P ﹤0.01）。MiR -21表达与患者月经状况、肿瘤大小、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人类表皮生长因子受体2（HER -2）表达均无明显关系（P ﹥0.05），与 TNM 分期、淋巴结转移相关（P ﹤0.05）。结论：茎环 qRT - PCR 是一种快速、准确、定量检测 MiR -21的方法，MiR -21是一个能有效辅助乳腺癌诊断和监测 CTCs 的潜在标志物。
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IL-8在循环肿瘤细胞自我种植促进人骨肉瘤进展中的作用机制
目的：：探讨IL-8在循环肿瘤细胞自我种植促进人骨肉瘤进展中的作用。方法：免疫组织化学SP法检测30例临床骨肉瘤及10例骨软骨瘤病例肿瘤组织中IL-8表达；建立骨肉瘤原位荷瘤裸鼠模型后,实验组尾静脉注射红色荧光蛋白标记的肿瘤细胞(RFP-F5M2),对照组注射PBS,分别于第2、4、8周后将处理组原位瘤体冰冻切片置于荧光显微镜下观察自我种植细胞荧光强度；对原位肿瘤进行组织块法原代培养,细胞免疫荧光半定量检测IL-8表达水平。结果：93.3%骨肉瘤组织中IL-8表达阳性,骨软骨瘤中IL-8表达均为阴性。冰冻切片显示,随着时间增加,循环肿瘤细胞自我种植现象明显增加,实验组中第2、4、8周原位灶原代培养细胞免疫荧光显示IL-8表达量逐渐增加,并较对照组具有统计学意义(P<0.05)。结论：IL-8在循环肿瘤细胞自我种植促进人骨肉瘤细胞增殖及转移中发挥着重要作用,可为骨肉瘤患者早期诊断和治疗提供一个新的策略。
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基于 ISET 技术的晚期胃癌循环肿瘤细胞检测及其临床意义
目的：观察基于 ISET 分离技术的胃癌晚期患者外周血循环肿瘤细胞（CTCs）的检出情况，探索其与患者临床特征的关系。方法：采用 KATOⅢ细胞株进行 ISET 技术回收率及敏感性测试实验。选取2014年10月至2015年7月在南京大学医学院附属南京鼓楼医院肿瘤科经病理证实的34例胃癌Ⅳ期患者为研究对象，并与15例健康体检者作对照；采集受试者2.5ml 静脉血，经 CTCBIOPSY异常细胞分离染色仪检测其 CTCs阳性率，并分析 CTCs 与患者临床特征的关系。结果：ISET 分离技术的回收率平均值为85.5%，其敏感性为1个/2.5ml。胃癌组 CTCs 阳性率为23.5%（8/34），对照组均未检出 CTCs。CTCs≥4个组与 CTCs =0个组AFP、CA199、CA242平均数分别为：6484.3 vs 102.9ng/ ml、4595.5 vs 683.8U/ ml、23332.1 vs 806.0U/ ml，2组比较差异有统计学意义（P =0.021，0.049，0.020）。结论：基于 ISET 法的 CTCs 捕获技术具有较高的检出率。胃癌晚期患者外周血 CTCs 阳性率与患者临床特征具有相关关系。
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循环肿瘤细胞数目与血清中 Cyfra21－1、CEA、Fg 表达水平的关系
目的：探讨肿瘤患者外周血循环肿瘤细胞（CTCs）与常用的肿瘤指标细胞角质素19可溶片段（Cy-fra21－1）、癌胚抗原（CEA）及凝血功能指标纤维蛋白原（Fg）表达水平的关系，比较 CTCs 阳性组和阴性组转移灶数目差异。方法：采集66例进展期晚期肺癌住院患者治疗前7．5ml 外周血，保存于4℃冰箱中，24小时内由益善生物技术公司使用“免疫去除结合纳米过滤法”行 CTCs 检测。同时检测血清中 Cyfra21－1、CEA、Fg水平，收集并分析 CTCs 数目与转移灶数目、临床 T 分期、转移淋巴结的关系。结果：纳入患者中 CTCs 检出率为86．4％。CTCs 数目与 Cyfra21－1水平有相关关系，相关系数为0．365（P ＝0．003）；CTCs 数目与 Fg 水平相关，相关系数为0．330（P ＝0．007）；CEA 与 CTCs 两变量无明显相关性。两组患者的肿瘤转移器官数目大于3个的比例有显著差异。结论：两组患者 Cyfra21－1异常增高率有显著差异，且 CTCs 数目与 Cyfra21－1表达水平正相关，可由 Cyfra21－1初步估计 CTCs 水平。而外周血中 Fg 异常增高率无显著差异，但二者表达水平呈明显正相关，因此分析 CTCs 数目需要考虑 Fg 表达水平的影响。
关键词： 循环肿瘤细胞 晚期肺癌 癌胚抗原 纤维蛋白原 细胞角质素 19 可溶片段 -
循环肿瘤细胞的富集分离和检测
循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，CTCs）与恶性肿瘤的复发和转移有密切关系。CTCs 是指自发或因诊疗操作由实体瘤或转移灶释放进入外周血循环的肿瘤细胞。但是，CTCs 在癌症患者外周血中含量极少而且其在血液循环中往往相互聚集或者与其他细胞黏附集聚，另外循环肿瘤细胞还可能发生一些转变。例如上皮－间质转化（epithelial －mesenchymal transition，EMT），造成的 CTCs 表面标志物的改变，因此CTCs 的富集分离、检测十分困难。诸多技术各有各的优缺点，至今还没有统一的标准。本文就当今正使用的一些富集分离和检测技术进行总结并分析其优缺点。
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液体活检在非小细胞肺癌中的应用
随着精准医疗和个体化治疗在肺癌领域中的发展，对肿瘤分子生物学特性进行实时监测的要求越来越高。“液体活检”以其标本获取简便、创伤小、重复性高的特点在近年来引起了广泛关注。在所有肺癌患者中，非小细胞肺癌（ non small cell lung cancer，NSCLC）占85%~90%，针对NSCLC，特别是肺腺癌驱动突变的发现及相应靶向治疗的成功应用极大地改写了肺癌治疗的篇章，与此同时也对NSCLC相关分子生物学标志物的实时检测提出了更高的要求。本文以液体活检标志物的检测为起点，就其在NSCLC患者中的临床应用做一综述。
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应用cellsearch系统检测循环肿瘤细胞
循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,CTC)与恶性肿瘤转移关系密切,CTC检测结果对患者的诊断治疗有重要临床意义.近期一种自动化CTC检测系统--Cellsearch系统开始应用,本文着重对该系统的原理,检测流程,临床应用作简要介绍.
关键词： 循环肿瘤细胞 CellSearch系统 恶性肿瘤 -
循环肿瘤细胞在卵巢癌预后中的研究进展
卵巢癌作为常见妇科恶性肿瘤之一，其死亡率位居女性生殖系统肿瘤第一位。循环肿瘤细胞(circulating tumor cel s，CTC)是由原发肿瘤病灶脱落进入循环中的肿瘤细胞，近年来有研究证实CTC可作为卵巢癌预后的独立因素，可能成为一种新型肿瘤标志物来预测卵巢癌的预后、指导治疗决策的制定甚至成为靶向治疗的靶向位点。本文简要综述了CTC的常用检测方法以及其对卵巢癌预后的预测价值的研究进展。
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应用cellsearch系统检测循环肿瘤细胞
循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,CTC)与恶性肿瘤转移关系密切,CTC检测结果对患者的诊断治疗有重要临床意义.近期一种自动化CTC检测系统--Cellsearch系统开始应用,本文着重对该系统的原理,检测流程,临床应用作简要介绍.
关键词： 循环肿瘤细胞 CellSearch系统 恶性肿瘤 -
人源肺癌循环肿瘤细胞系在不同品系小鼠上肺转移能力研究
目的:探讨一种尾静脉注射人源肺癌循环肿瘤细胞建立的转移模型,比较NOD/SCID小鼠、Nude小鼠和C57BL/6小鼠对该模型的敏感性.方法:将人源肺癌循环肿瘤细胞通过尾静脉注射接种到C57BL/6小鼠、Nude小鼠和NOD/SCID小鼠体内,在不同时间节点对不同品系小鼠上的肺转移情况进行评估;H&E染色检测肺组织病理变化.结果:CTC-TJH-01细胞接种于NOD/SCID小鼠体内后,在第8周首次观察到肺部成瘤,在第10周小鼠肺部成瘤率为100%.而在Nude小鼠和C57BL/6小鼠体内均不成瘤.结论:人源肺癌循环肿瘤细胞通过尾静脉注射接种于NOD/SCID小鼠后能够发生肺转移,该模型可用于临床抗转移药物筛选与评价研究.
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循环肿瘤细胞与肿瘤转移机制的研究进展
肿瘤转移是引起肿瘤患者死亡的主要原因.循环肿瘤细胞(CTCs)与肿瘤转移密切相关.本研究通过已有的文献,回顾分析有关CTCs的一系列转移过程:迁移渗入血液循环系统,适应外周循环系统并渗出至远端器官,突破免疫防御形成转移灶,了解其中涉及的可能影响肿瘤转移的诸多因素,例如毛细血管壁构成、组织微环境、细胞因子调节、细胞间相互作用及信号通路调节等.通过对这些文献的复习,能够帮助我们进一步了解肿瘤转移相关机制.
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CellSearch系统检测胃癌患者循环肿瘤细胞及临床意义
循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells,CTC)是指在肿瘤患者外周血中检测到来源于实体肿瘤、逃离宿主免疫杀伤后存活的异质性肿瘤细胞. 19世纪许多学者发现,肿瘤细胞能通过血流传播到远处器官[1]. 1869年,Cristofanilli等[2]在恶性肿瘤患者外周血中发现了与原发灶肿瘤性质相似的细胞,首次提出循环肿瘤细胞的概念. 1889年,Chafer等[3]提出了"种子和土壤"假说,解释了肿瘤原发灶与转移灶之间的关系. 肿瘤的原发病灶往往并不致死,因肿瘤转移和复发所引起的死亡约占实体瘤的90%[4].循环肿瘤细胞可能代表原发肿瘤的表型和遗传组成,被称为潜在的转移性肿瘤的"液体活检".
关键词： CellSearch系统 胃癌 循环肿瘤细胞 -
中西医结合治疗晚期非小细胞肺癌20例
目的:观察健脾益肾汤治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效.方法:将40例脾肾两虚证Ⅲb、Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者随机分为对照组、观察组各20例.对照组采用NP方案,观察组在对照组治疗的基础上服用健脾益肾汤,1剂/d,水煎早晚分服,连服21天.检测2组治疗前后循环肿瘤细胞(CTC),并评价临床疗效及生活质量(KPS).结果:CTC治疗前后2组组内比较,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后组间比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).总有效率对照组为75.00％,观察组为85.00％,2组比较差异有统计学意义(P＜0.05).KPS改善情况2组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:健脾益肾汤联合NP方案可明显减少晚期NSCLC患者外周血CTC数量,提高肿瘤缓解率和获益率,明显改善患者生活质量.
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肺癌多维度检测方法的研究进展
寻找一种精准、方便,能够动态监测肿瘤细胞发生、发展的检测方法,成为目前全球肺癌研究领域关注的热点.同时,人们也正在探索更多非侵入性的方法来检测肺癌,其中包括对支气管、口腔或鼻腔样本中肺癌标志物上皮—间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的检测,对血清中基础小分子核糖核酸(microRNA,miRNA)及循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)的检测,并希望以上方法可在鉴别癌症患者和非癌症患者中发挥作用.本研究就相关内容作一综述,为基础研究和临床工作提供一些思路.
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血液肿瘤细胞标记物CTC、ctDNA在胃癌早期诊断中的研究进展
胃癌(gastric cancer,GC)是消化道恶性肿瘤之一,发病率和病死率均较高,每年新发病例约1万人次,5年生存率＜30％[1].在中国,胃癌发病率位居男性恶性肿瘤第2位,女性恶性肿瘤第4位[2].虽然胃癌检测技术的提升和治疗的进展显著改善了患者的预后,但仍有许多患者在诊断时已属晚期,因此,早期诊断对于改善胃癌患者的预后至关重要.
