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外周血微转移前列腺癌细胞的免疫磁珠法检测
目的 探讨建立前列腺癌外周血微转移癌细胞的免疫磁珠检测方法.方法 将体外培养的前列腺癌LNCaP细胞与外周血单个核细胞(PBMC)或全血混匀,与抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)的单抗一起孵育后,经免疫磁珠分离,显微镜观察,计算玫瑰花环形成率,检测特异性和敏感性.并以抗前列腺特异性抗原(PSA)单抗作对照.结果 免疫磁珠法检测前列腺癌细胞时,一抗为抗PSMA单抗优于抗PSA单抗.单个核细胞与LNCaP细胞比为5×105:1时可检测到癌细胞,每ml外周血中含20个肿瘤细胞时即可被检测出来.结论 免疫磁珠法检测外周血微转移前列腺癌细胞有较高的特异性和敏感性.
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乳腺癌循环肿瘤细胞检测的临床价值
目的 探讨乳腺癌循环肿瘤细胞(CTC)检测的临床意义.方法 选取2016年5月至2018年4月南宁市第二人民医院乳腺甲状腺外科收治的111例乳腺癌确诊患者为研究对象,比较不同TNM分期患者CTC阳性率差异、乳腺癌术后患者化疗前后CTC阳性率差异、CTC阳性与阴性患者的化疗效果.结果 Ⅰ期患者CTC阳性率为12.5％(2/16)、Ⅱ期患者阳性率为68.1％(47/69)、Ⅲ期患者阳性率为90.9％(20/22)、Ⅳ期患者阳性率为100.0％(4/4),四组患者间的CTC阳性率比较差异具有显著统计学意义(P<0.01);化疗(或内分泌治疗)前CTC检出阳性率为65.8％(73/111),显著高于化疗(或内分泌治疗)后的32.4％(36/111),差异具有显著统计学意义(P<0.01);化疗(或内分泌治疗)前CTC阳性与阴性两组患者化疗有效率比较,化疗(或内分泌治疗)前CTC检测为阳性患者有效率为30.1％,显著低于化疗(或内分泌治疗)前CTC检测为阴性患者的68.4％,差异具有显著统计学意义(P<0.01).结论 CTC检测可作为乳腺癌的独立生物学因素,有助于全面病情评估、复发及转移的早期定位,而化疗后CTC阳性率显著下降,可有效预测乳腺癌辅助治疗的疗效与预后.
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D-CIK治疗抑制进展期乳腺癌中循环肿瘤细胞的初步研究
目的：探讨D-CIK治疗对进展期乳腺癌外周血中循环肿瘤细胞数的变化情况及意义。方法采用Cellsearch检测系统对32例明确诊断为进展期乳腺癌患者分别在CIK细胞回输治疗前后检测外周血中循环肿瘤细胞数目变化情况，同时观察治疗过程中患者的相关不良反应。结果患者接受D-CIK治疗后，循环肿瘤细胞的数目明显减少，由治疗前的5~18个/7.5 ml减少为治疗后的2~11个/7.5 ml，两者差异具有统计学的意义(P<0.05)。治疗过程中未见明显不良反应。结论 D-CIK治疗可明显降低患者外周血中循环肿瘤细胞的数目。
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非小细胞肺癌患者循环肿瘤细胞与SCC-Ag的相关性分析
目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者循环肿瘤细胞数与血清鳞状细胞癌抗原（SCC-Ag）水平的相关性。方法采用Cell Search 系统检测35例NSCLC患者循环肿瘤细胞数，同时检测其血清SCC-Ag水平，并以20例良性疾病患者及50例健康体检者为对照。结果 NSCLC患者循环肿瘤细胞数明显高于良性疾病患者和健康体检者（P＜0．05），NSCLC 患者中Ⅰ、Ⅱ期患者循环肿瘤细胞数明显低于Ⅲ、Ⅳ期患者（P＜0．05）。NSCLC患者中SCC-Ag水平明显高于良性疾病患者和健康体检者（P＜0．05）。NSCLC患者循环肿瘤细胞数与SCC-Ag水平呈正相关（P＜0．05）。结论联合检测 NSCLC 患者循环肿瘤细胞数及血清SCC-Ag水平，有利于提高NSCLC的早期检出率。
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循环肿瘤细胞的检测及临床应用
恶性肿瘤目前已成为威胁全世界人民健康的主要疾病之一,肿瘤的高病死率不得不引起我们的重视,其中我国以肺癌、胃癌、直肠癌、乳腺癌、前列腺癌等高发.虽然近年来在肿瘤的诊断、治疗上已有了很大的进步,但是肿瘤的高复发、高转移率依旧是亟待解决的难题.
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微流控芯片技术在循环肿瘤细胞检测中的应用研究
肿瘤细胞从原发灶脱落 ,进入外周血液形成循环肿瘤细胞(CTCs) ,随后迁移到远处器官形成转移灶 ,这是导致大多数肿瘤患者死亡的主要原因[1] .现有文献表明CTCs具有较高的临床应用价值[2] .Zhang等[3]认为剔除疾病组织学分期、分子亚型、不同个体治疗、患者复发或转移与否等因素 ,检测外周血液中CTCs(5个/7 .5 mL )即可预测患者预后.这表明CTCs在监测肿瘤转移及预后判断中应用价值不可小觑.
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循环肿瘤细胞富集检测的研究进展
恶性肿瘤的复发和转移是导致肿瘤患者死亡的重要原因。目前临床上仍主要通过影像学检查及传统肿瘤标志物的检测来发现并诊断肿瘤，发现时患者常常已处于肿瘤进展晚期，影响患者预后［1］。循环肿瘤细胞（CTCs）是从原发或转移肿瘤病灶脱落，进入外周血的肿瘤细胞，与肿瘤的转移密切相关，其检测具有重要的临床意义，不仅有助于实时监测肿瘤动态、早期发现肿瘤微转移，还能为评估预后和疗效以及肿瘤的个体化治疗提供可靠参考［2］。近年来纳米技术在CTCs的富集检测中得到广泛应用，本文对常用的CTCs富集检测方法以及相关研究进展进行总结，并对纳米技术在 CTCs检测中的应用进行探讨。
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肺癌的液体活检和检测技术进展
原发性肺癌是我国常见的恶性肿瘤之一。据统计，2013年我国主要癌症发病顺位和死因顺位排第一的均是肺癌，肺癌年龄标化病死率高达40．41／10万。肺癌具有发病率高、发病机制复杂、早期难以发现、治疗效果不佳等特点。肿瘤标志物有助于早期诊断肺癌，对早发现、早治疗有重要作用，并在精准医疗和个体化治疗中起重要作用。根据《原发性肺癌诊疗规范（2015版）》，癌胚抗原、细胞角蛋白19片段抗原、神经元特异性烯醇化酶和胃泌素释放前肽及鳞状上皮细胞癌抗原已被推荐为常用的原发性肺癌标志物［1］。数据库显示，在初诊时57％的肺癌患者已经发生了远处转移［2］，所以发现新的用于早期诊断和个体化治疗的肿瘤标志物十分必要。
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循环肿瘤细胞检测及其在前列腺癌中的研究进展
近年来，国内外围绕循环肿瘤细胞（CTCs）在结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、胃癌、肺癌等实体肿瘤中的应用价值展开了多项探索性研究。食品药物监督管理局（FDA ）批准了CellSearch检测的结果可作为转移性的结肠癌、前列腺癌和乳
腺癌的预测指标，分别以3个／7．5微千、5个／7．5微千和5个／7．5微千外周血的 CTCs为Cutoff值，该值与患者临床无进展生存期与总生存期相关。CTCs的检测可有效地应用于体外早期诊断，指导个体化治疗包括临床药物的筛选、耐药性的检测，肿瘤的复发监测以及肿瘤新药物的开发等，为动态实时监测患者的治疗效果提供了直接的证据。本文就循环肿瘤细胞现今在肿瘤个体化治疗领域，特别是在前列腺癌个体化治疗中的研究及进展做一回顾和总结。 -
循环肿瘤细胞的分子检测及临床应用的研究进展
癌症是目前危害人类健康的首要疾病，分子检测在癌症的诊断和治疗中发挥的作用日益增大，基因重排、染色体易位和融合基因形成、原癌基因及抑癌基因等分子检测对于疾病的诊断、疗效监测、预后判断等具有重要的意义。并且在个体化治疗的时代，基因检测成为决定日常临床治疗的一部分［1‐3］。
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循环肿瘤细胞检测应用于肺癌诊治的研究进展
肺癌是肺部常见的恶性肿瘤，居恶性肿瘤的首位［1］。近年来，肺癌的发病率及病死率均迅速增长，严重威胁人类的生命健康。肺癌复发和远处转移是导致患者死亡的主要原因。目前随着诊断方法进步及靶向治疗药物的出现，规范有序的诊断、分期，以及根据肺癌临床行为进行多学科治疗的进步，肺癌患者生存率已经有所增高。早在1869年，有学者在1例死亡的癌症患者尸检血液中发现了类似原发肿瘤的恶性细胞，首次提出循环肿瘤细胞（circulating tumor cells ，CTCs）的概念［2］。此后，随着各个相关学科的发展及对CTCs的认识，出现了多种检测CTCs的方法，并逐渐开始应用于乳腺癌、结肠癌、肺癌等。其中，有研究发现，检测CTCs在肺癌的诊断及治疗中具有极其重要的作用［3-4］。
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EPCAM联合CK8免疫磁珠制备及循环肿瘤细胞检测
目的 研究循环肿瘤细胞(CTCs)富集和鉴定方法 .方法分别用羧基磁珠制备EPCAM、CK82种免疫磁珠,分成EPCAM组、CK8组、2种磁珠均等混合检测的EPCAM/CK8组3组,对循环肿瘤细胞进行富集,采用HE染色和免疫细胞化学法鉴定细胞.结果 EPCAM组、CK8组、EPCAM/CK8组检测值分别为12.4±7.3、9.8±4.2、21.6±5.9个肿瘤细胞,检测效率差异有统计学意义(P<0.05).结论 EPCAM与CK8联合检测可有效提高非小细胞肺癌CTCs检出效率.
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循环肿瘤细胞检测在三阴乳腺癌疾病中的应用进展
循环肿瘤细胞检测在肿瘤疾病预后评估和转移机制研究中的作用倍受关注,该文通过文献分析,对循环肿瘤细胞在三阴乳腺癌疾病转移机制和预后评估及治疗监测中的应用进行综述.
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肺癌患者循环肿瘤细胞与D-二聚体及血小板的相关性研究
目的 探究肺癌患者循环肿瘤细胞(CTC)与D-二聚体(D-D)及血小板计数(PLT)的相关性.方法 选取2015年8月至2017年1月收治并确诊的117例原发性肺癌患者,对患者肿瘤细胞表达情况及凝血系统相关因子D-D、纤维蛋白原(FIB)、PLT进行检测,对结果进行分析.结果 D-D、FIB、PLT基本不受性别因素的影响,男女患者间差异均无统计学意义(P>0.05).仅PLT和年龄有一定的关联,≥60岁患者的PLT水平高于60岁以下的患者(P<0.05).不同TNM分期 、病理类型及远处转移状态患者之间,D-D、FIB、PLT水平差异均有统计学意义(P<0.05).117例肺癌患者中检查出CTC阳性69例,CTC阴性48例.CTC阳性患者的D-D、FIB、PLT水平均高于CTC阴性患者(P<0.05).发生远处转移的患者,其CTC阳性率(81.01％)明显高于未发生远处转移患者的CTC阳性率(41.25％),差异具有统计学意义(P<0.05).非条件Logistic回归模型结果显示,D-D及PLT与CTC阳性率具有显著的相关性.结论 血液高凝状态促进了CTC的转移,增加了肺癌细胞远处转移的风险性.
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液体活检在多发性骨髓瘤中的应用及研究进展
近年来,"实时液体活检"逐渐应用于临床的诊断、治疗等活动中,其基本思想是运用血液、尿液、胸腹水、脑脊液等样本来替代肿瘤组织进行病理学、分子生物学、免疫学等方面的检测.液体活检具有非侵入、动态、可重复、风险低等特点,可用于观察肿瘤进展、治疗效果(包括复发后治疗)及评估肿瘤转移风险和"提示肿瘤大小",显示出极好的临床应用前景.目前多发性骨髓瘤的检测多采用骨髓穿刺涂片、血尿M蛋白等,会对患者造成创伤且无法动态监测患者对药物的疗效,具有一定的局限性.该文就液体活检在多发性骨髓瘤这一血液系统恶性肿瘤的诊断、治疗监测、预后评估等方面的应用进行阐述.
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外周血循环肿瘤细胞对卵巢癌预后的评估价值
目的 探索卵巢癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTC)与临床病理因素及其预后的关系.方法 收集北京市顺义区中医医院2012年5月至2014年3月术前诊断为卵巢癌且行规范分期手术的患者56例,采用CellSearch系统检测患者外周血CTC计数,分为CTC阳性组和阴性组,分析其与临床病理因素的关系;采用Kaplan-Meier法行生存分析,Cox比例风险模型行单因素及多因素分析.结果 CTC在外周血的阳性率为37.5％(21/56),CTC阳性与肿瘤分化程度(P=0.003)、FIGO分期(P=0.003)、淋巴结转移(P=0.004)及复发(P<0.001)相关,与年龄、血清糖类抗原199(CA199)、CA125及人附睾分泌蛋白4(HE4)无相关性.CTC阳性组5年总生存率(47.62％)低于C T C阴性组(91.43％),差异有统计学意义(P=0.032);C T C阳性组5年累计复发率(76.19％)高于CTC阴性组(17.14％),差异有统计学意义(P=0.033).单因素分析示FIGO分期、淋巴结转移、肿瘤分化及CTC阳性为影响总生存率及累计复发率的影响因素;多因素分析示肿瘤分化、淋巴结转移及CTC阳性为影响总生存率及累计复发率的独立影响因素.结论 CTC阳性为影响卵巢癌预后的独立危险因子.
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液态活检在非小细胞肺癌中的应用及对中医肺癌研究的启示
肺癌是全球癌症发病率和死亡率高的疾病之一,其中非小细胞肺癌占83%[1].NSCLC以肿瘤组织的病理学诊断为金指标,可用于组织学分型、分子病理诊断、预后判断与治疗方案选择.然而由于肿瘤的异质性和进化,组织活检有一定的局限性,肿瘤病灶局部并不能代表整个肿瘤的基因突变情况[2].
关键词： 液态活检非小细胞肺癌 中医肿瘤 循环DNA 循环肿瘤细胞 -
循环肿瘤细胞生物物理特性的研究
被称为液体活检的循环肿瘤细胞（CTC）是由实体瘤原发灶或转移灶脱落进入循环系统的肿瘤细胞，具有肿瘤原发灶或转移灶生物标记，在循环系统中有3种归宿：受到免疫系统攻击被清除，此为大多数CTC结局；进入休眠或静止状态；适应微环境，以单个肿瘤细胞或若干个肿瘤细胞、淋巴细胞与附着血小板形成集合簇方式在血液中运输。集合簇形成能为其提供保护、免受机械压力和免疫攻击，有利于黏附内皮，被潜在转移位点捕获而形成肿瘤转移灶，是近年研究热点。其生物物理属性是分离与检测理论基础，因此本文重点综述CTC生物物理属性。
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乳腺癌外周血循环肿瘤细胞变化与新辅助化疗效果的关系
目的 探讨乳腺癌患者外周血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTC)变化情况与新辅助化疗(neoadjuvant or primary chemotherapy,NCT)疗效的关系.方法 抽取70例乳腺癌患者NCT前后健侧上肢静脉血5mL,利用密度梯度离心法富集血标本中单个核细胞,通过荧光定量RT-PCR技术检测所获得单个核细胞中细胞角蛋白-19(cytokeratin-19,CK-19)阳性的CTC数目.结果 NCT前外周血CTC检出率为24.29％ (17/70),与患者年龄(P =0.008)及HER-2(P =0.022)表达情况有关.根据NCT前后CTC检测情况,将患者分为阳性-阳性、阳性-阴性、阴性-阳性及阴性-阴性4组,以RECIST标准评估NCT疗效时,4组有效率依次为66.67％ (2/3)、78.57％ (11/14)、0(0/4)和71.43％ (35/49),差异具有统计学意义(P=0.023)；以Miller-Payne标准评估NCT疗效时,4组有效率依次为66.67％(2/3)、71.43％ (10/14)、0(0/4)和69.39％ (34/49),差异具有统计学意义(P=0.043).结论 NCT前后CTC的变化情况与疗效有一定关系,CTC可作为评估NCT疗效的潜在预测指标.
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乳腺癌分子分型与外周血循环肿瘤细胞相关性探讨
目的 探讨乳腺癌分子分型与外周血循环肿瘤细胞( circulating tumor cell,CTC)的相关性.方法 抽取116例乳腺癌及20例乳腺纤维腺瘤患者外周静脉血5ml,利用密度梯度离心法富集单个核细胞,通过荧光定量PCR技术检测所获单个核细胞中细胞角蛋白( cytokeratinCK) 19 mRNA表达阳性的CTC,分析乳腺癌分子分型与CTC的关系.结果 116例乳腺癌患者中CTC阳性率为31％ (36/116),20例乳腺纤维腺瘤患者均未检测出CTC.36例CTC阳性患者的中位CTC水平为1.65(1.18,2.87)个MCF-7细胞/2μg总RNA;116例乳腺癌患者中各分子亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)所占比例分别为62.1％ (72/116)、17.2％( 20/116)、20.7％ (24/116)；各亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)CTC阳性率分别为27.8％ (20/72)、35％ (7/20)、37.5％ (9/24),差异无统计学意义(P＝0.615),各亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)CTC阳性患者的中位CTC水平分别为2.1(1.18,3.9)、1.37(1.12,2.12)、1.53(1.32,2.64)个MCF-7细胞/2μg总RNA,差异有统计学意义(P ＝0.046).结论 乳腺癌各分子亚型间CK-19 mRNA阳性CTC水平存在差异,提示各亚型间临床异质性可能与患者CTC水平相关.
