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谷氨酰胺诱导大鼠热休克蛋白70mRNA的表达
热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是感染或非感染(如创伤、休克)等致病因素作用于机体后,诱发机体细胞合成的一组高度保守的蛋白质,谷氨酰胺(Glutamine,Gln)作为体液中丰富的氨基酸之一,对机体多个脏器有保护作用.一些研究表明,Gln在体外可促进果蝇Kc细胞HSP的表达[1];Gln诱导的HSP表达对肠道上皮细胞有保护[2].但Gln是否能在动物的各个脏器引起HSP的表达及时间和量效关系如何,尚未见明确报道.本研究对此进行了实验观察,拟为临床应用提供理论依据.
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七氟醚对吸入麻醉药敏感性不同的果蝇幼虫中枢神经元钾通道的影响
目的 以钾通道为切入点,利用膜片钳技术探讨吸入麻醉药的作用机制.方法 分离制备对吸入麻醉药敏感(S)、耐药(R)和野生(H)果蝇品系脑神经元,以膜片钳技术观察临床有效浓度七氟醚对其全细胞钾电流的影响.结果 1 MAC七氟醚使三品系Ⅲ型钾电流的Ipeak值显著增加:S(19±2)%>H(13±2)%>R(8±2)%;使钾电流的恢复曲线显著上移;不改变钾离子的平衡电位.2 MAC七氟醚使三品系Ⅲ型钾电流的Ipeak值显著增加:S(36±4)%>H(24±2)%>R(14±1)%.3 MAC的七氟醚能使Ⅲ型钾电流稳态失活曲线显著右移.结论 钾离子通道可能是吸入麻醉药的中枢作用位点之一.
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对吸入麻醉药敏感性不同的果蝇幼虫中枢神经元钾通道的研究
目的 以果蝇为动物模型,利用膜片钳技术探讨钾通道在吸入麻醉药作用机制中的地位.方法 以酶解和血清孵育的方法 分离制备敏感(S)、野生(H)和对七氟醚耐药(R)果蝇晚三龄幼虫脑神经元,以膜片钳技术记录其全细胞钾电流,并对电流进行单、双指数拟合.根据失活时间常数和电流幅值大小,将钾电流分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ型.结果 三品系中,Ⅰ和Ⅱ型钾电流的峰值电流(Ipeak)和失活时间常数(τ1)差异无统计学意义;Ⅲ和Ⅳ型钾电流的Ipeak差异有统计学意义(P<0.05):S>H>R;Ⅳ型钾电流τ1差异有统计学意义(P<0.05):S=H>R;Ⅴ型钾电流(钙激活钾电流)的Ipeak差异有统计学意义(P<0.05):R>H>S.结论 钾通道可能是吸入麻醉药七氟醚的中枢作用位点之一.
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EZH2基因与肿瘤关系的研究进展
肿瘤的发生是一个多因素、多阶段的演进过程,涉及癌基因、抑癌基因、DNA损伤修复基因等多种基因的突变及其表观遗传改变.近年来研究[1.2]发现,表观遗传调控因子PcG蛋白表达异常与肿瘤的发生、发展密切相关,而其核心成分果蝇Zeste基因增强子人类司源物2(EZH2)与肿瘤的关系尤其受到关注.EZH2在人类多种恶性肿瘤中表达增高,并与肿瘤的进展和预后密切相关,是肿瘤治疗的潜在靶点.因此,深入研究EZH2在肿瘤发生、发展中的作用及其机制,对开发有关EZH2的靶向药物,在肿瘤治疗上能否取得突破将具有重要意义.现对EZH2基因与肿瘤关系的研究进展综述如下.
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羊栖菜多糖对果蝇抗氧化作用和寿命的影响
为探讨羊栖菜多糖对果蝇抗氧化作用和寿命的影响, 采用黑腹果蝇为研究对象, 添加羊栖菜多糖低、中、高剂量组 (质量浓度分别为1.0％, 2.0％, 4.0％) 的培养基饲喂, 每3 d更换1次培养基, 35日龄后, 分别测定果蝇组织匀浆中T-AOC、ASAFR、CAT、SOD的活性及MDA含量, 并每日定时观察记录果蝇存活数, 统计平均寿命、高寿命、半数死亡期, 计算平均寿命延长率和高寿命延长率.结果表明经过各剂量组的羊栖菜多糖饲喂后, 均可增强黑腹果蝇组织匀浆中T-AOC、ASAFR、CAT、SOD活性, 其中2.0％剂量组效果佳, 分别提高雌性26.22％, 21.51％, 23.72％, 31.30％, 雄性18.50％, 23.07％, 15.75％, 24.85％ (P<0.05), 降低果蝇体内MDA含量, 雌性12.78％, 雄性20.06％ (P<0.05).不同羊栖菜多糖剂量组均能延长果蝇的生活寿命, 其中4.0％剂量组显著延长雌雄果蝇的高寿命至50, 48 d (P<0.05), 提高雌雄果蝇的平均寿命达7 d和10 d (P<0.05).羊栖菜多糖抗氧化作用较强, 该结果为羊栖菜多糖应用于保健品和化妆品领域的开发提供了一定的实验基础.
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强身丹对果蝇寿命的影响
目的为了观察强身丹对果蝇寿命的影响.方法以含2%和4%强身丹浓度的培养基饲养美国野生黑腹果蝇,观察强身丹对果蝇寿命的影响.结果强身丹2个浓度组均能延长雌、雄果蝇的平均寿命和高寿命,并使果蝇生存曲线显著右移,且以高浓度组效果明显.结论强身丹具有延年的作用.
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分瓶法测定果蝇吸入麻醉药半数麻醉有效浓度
目的建立测定果蝇吸入麻醉药半数麻醉有效浓度(ED50)的方法学.方法在11个325 ml 的三角烧瓶中各放入30只雄性果蝇,分别加入不同容量的异氟醚标准气,使11个烧瓶中异氟醚浓度分布在零效应浓度与百分之百效应浓度之间.以果蝇失去附壁及运动能力为标准计算各瓶中被麻醉果蝇数,用正规法计算出ED50.结果11次实验在25及50min时的量-效关系曲线均呈S形,用各自的对数浓度与概率单位作图都呈直线相关,相关系数分别为0.972±0.014和0.971±0.025,ED50值分别为(0.51±0.068)%和(0.47±0.085)%,变异系数分别为13.3%和18.0%.结论本法稳定性较好,实用可行.
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单性与混养果蝇氟烷ED50的比较
目的比较雄性、雌性及两性混养果蝇的吸入麻醉药ED50.方法用分瓶法测定同一代次单养雄性、雌性及混养两性果蝇氟烷的ED50.结果雄性、雌性及混养果蝇氟烷ED50分别为(0.614±0.021)%、(0.635±0.022)%和(0.628±0.031)%,各组间均无显著性差异(P＞0.05).结论不同性别及受精果蝇的吸入麻醉药ED50无差别,实验中不必仅选用雄性果蝇.
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金芪降糖片对糖尿病心血管并发症的治疗作用
探讨金芪降糖片对糖尿病心血管并发症的治疗作用.将健康果蝇随机分为3组,分别给予正常饮食、10％高脂饮食、1％金芪降糖片+l0％高脂饮食,2周后用试剂盒测量果蝇海藻糖、三酰甘油的浓度,高速电子倍增摄像机拍摄果蝇心管搏动视频测量心功能,定量PCR测量果蝇心管4ebp、pepck RNA表达量,Western blot测定磷酸化4EBP蛋白表达量.结果显示,高脂饮食可引起果蝇海藻糖、三酰甘油升高,并导致心功能损伤,而金芪降糖片治疗后可以明显降低糖脂水平及恢复心功能;同时与高脂组相比,受试药可提高心血管4ebpRNA表达量及降低pepck RNA表达量,降低果蝇磷酸化4EBP蛋白表达量.结果表明,受试药具有较好的降糖降脂及恢复心功能作用,且可能通过mTOR/4EBP信号通路发挥作用.
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果蝇抗病毒免疫
果蝇是遗传和发育研究的重要模式生物,对果蝇抗病毒免疫研究有助于了解宿主是如何与病毒互相作用以及宿主几条免疫路径在抗病毒中所起的作用.本文从两方面综述了果蝇抗病毒免疫,即果蝇抗病毒先天免疫路径和核糖核酸干扰(RNAi)抗病毒免疫,这些分析能帮助我们更好地了解果蝇抗病毒免疫的机制和特点.
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果蝇生长发育中PI3K/Akt/dTOR信号通路的研究进展
果蝇雷帕霉素靶蛋白(dTOR)是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在果蝇中的同源物.PI3K/Akt/dTOR信号通路在果蝇的细胞存活、生长及增殖中都具有重要的作用.研究dTOR途径在果蝇生长发育中的作用可为了解哺乳动物发育过程中涉及的信号通路机制提供依据.现就近年来关于PI3K/Akt/dTOR信号通路及其中信号成分在果蝇发育中调节作用的研究作一综述,并展望深入研究dTOR信号通路机制的意义.
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Notch信号通路在膀胱癌中的研究进展
??1916年 Notch 基因首次在果蝇体内被发现，该基因突变可使果蝇翅膀的边缘产生缺口而得名［1］。在哺乳动物中， Notch 信号由4个同源受体（Notch-1~4）、5个同源配体（分别为 DLL-1、DLL-3、DLL-4、Jagged-1和 Jagged-2）及CSL-DNA 结合蛋白组成［2］。研究发现，Notch 信号的靶基因Hes/HERP?（Hey）包括 Hes1、2、5、Hey1、Hey2等，Hey分子既能形成同型二聚体，也可与 Hes 形成异二聚体抑制下游基因表达［3］。本文对 Notch 信号通路在膀胱癌中的研究进展综述如下。
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大豆分离蛋白对果蝇寿命的影响
大豆因富含优质蛋白、磷脂、维生素和无机盐而被人们广泛认识.近年来,人们陆续发现大豆还含有某些活性成分,如大豆异黄酮、大豆皂甙和大豆低聚糖等.大量动物和人群实验研究表明,这些活性成分具有降血脂、抑制肿瘤以及雌激素样作用等各种保健功效[1～2].
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天雄补肾口服液对果蝇性活力及寿命的药理学实验研究
目的探讨天雄补肾口服液对果蝇性活力及寿命的影响.方法以人参、肉苁蓉、白术、淫羊藿等组成中药复方的水提液加入培养基配制后,使培养基含药分别为0.5%天雄Ⅰ、0.5%男宝和1%天雄Ⅱ,分别饲喂果蝇.结果两个剂量组的天雄补肾口服液均能不同程度地显著缩短果蝇交配潜伏期(P<0.05);对5周龄果蝇(黑腹果蝇)的交配潜伏期的缩短有极显著意义(P<0.01);增加交配前雄蝇振翅次数和延长交配时间(P<0.05);延长果蝇平均寿命和高寿命(P<0.05).结论天雄补肾口服液具有益肾壮阳和延寿作用.
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盐藻β-胡萝卜素抗衰老作用研究
目的 观察盐藻β-胡萝卜素(β-C)对果蝇和大鼠的抗衰老作用,并探讨其可能机制.方法 ①果蝇实验:将果蝇按照不同培养基分组后进行生存实验、性活力实验和飞翔能力实验并测定头部MDA含量.②大鼠实验:老年SD ♂大鼠随机分组,灌胃法给药45 d后,测定血浆MDA含量和GSH-Px、CAT活性,以及心、肝、肺、脾、脑MDA含量和SOD、GSH-Px活性.结果 ①果蝇实验:与对照组相比,各实验组果蝇的平均寿命、高寿命、短寿命、延寿率和性活力皆提高,果蝇头部MDA含量减少;②大鼠实验:与对照组相比,各实验组血浆MDA含量明显下降,GSH-Px活性明显增加,心、肝、肺、脾、脑各组织MDA含量皆降低,SOD、GSH-Px活性则皆增加.结论 盐藻β-C对果蝇和老年大鼠有抗衰老作用,其可能通过增加体内抗氧化酶的活性,提高机体抗氧化能力而发挥抗衰老作用.
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南沙参多糖抗衰老作用的实验研究
目的探讨南沙参多糖对老龄小鼠及果蝇的抗衰老作用及其机制.方法考察用药前后老龄小鼠肝、脑脂褐素和单胺氧化酶,血中皮质醇、睾酮及超氧化物歧化酶、丙二醛和谷胱甘肽过氧化物酶的改变,同时观察药物对果蝇寿命及性活力的影响.结果 1.0 g*kg-1南沙参多糖降低老龄小鼠肝、脑脂褐素含量,显著抑制老龄小鼠血清中丙二醛的生成;提高老龄小鼠红细胞中超氧化物歧化酶及全血中谷胱甘肽过氧化物酶的活性;可使老龄小鼠肝、脑中B型单胺氧化酶的活性降低.该药可增加老龄小鼠血清中睾酮的含量;同时,南沙参多糖10 g*kg-1可延长果蝇的平均寿命和高寿命,提高其性活动能力,增加交配频率.结论南沙参多糖具有抗衰老作用.
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利用果蝇模型探讨SCA3/MJD与PD发病机制的相关性
目的 探讨脊髓小脑性共济失调3型／马查多-约瑟夫疾病(SCA3/MJD)与帕金森疾病(PD)在发病机制中的相关性.方法 利用经典的GAL4/UAS系统,使用MHC-GALA启动子,使毒性蛋白质片段(SCA3 tr-Q78)特异性地于果蝇飞行肌中表达,构建MHC-GAL4/UAS系统的SCA3/MJD果蝇疾病模型.同样使用MHC-GALA启动子,构建可导致常染色体隐性遗传性PD的致病基因PINK1无效突变的果蝇,得到经典的PD果蝇模型——PINK1B9.结果 两种疾病模型果蝇的翅膀异常率均增高,肌肉内线粒体均出现退化,ATP值均明显降低,线粒体氧化呼吸链Complex Ⅰ的亚基ND42的mRNA及NDUFS3蛋白的表达量均下降.结论 同样作为神经退行性变的SCA3/MJD及PD在果蝇疾病模型中体现出了类似的果蝇表型异常及线粒体功能障碍,类似的发病机制可能为“异病同治”找到理论基础.
关键词： 脊髓小脑性共济失调3型/马查多-约瑟夫疾病 帕金森疾病 线粒体 果蝇 -
parkin对AD转基因果蝇模型的神经保护作用及其作用机制的研究
目的 探讨parkin在阿尔茨海默病(AD)发病机制中的作用.方法 利用经典的GAL4/UAS系统,选用ninaEGAL4启动子,将突变位点在R406W处的Tau蛋白在果蝇复眼内选择性表达,构建ninaE-GAL4/UAS系统AD转基因果蝇模型.然后分别在敲除和不敲除线粒体分裂蛋白Drp1情况下,使parkin在AD转基因果蝇模型中表达.结果 parkin明显抑制了AD转基因果蝇模型复眼视网膜光感受神经元变性,而在Drp1被敲除后,parkin的保护作用效果明显减弱.结论 parkin对AD转基因果蝇模型具有神经保护作用,而这种神经保护作用可能需要依赖线粒体分裂蛋白Drp1的功能.
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蜂胶黄酮对果蝇寿命的影响及预防自由基损伤作用
目的:观察蜂胶黄酮对果蝇寿命的影响及预防小鼠自由基损伤的作用.方法:①将果蝇随机分为5组,分别用不同浓度的药物培养基及维生素E进行培养.每24 h记录死亡果蝇数,统计各组果蝇的平均寿命和高寿命.测定果蝇匀浆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性及丙二醛(malonaldehyde, MDA)含量.②将小鼠随机分为6组,用D-半乳糖复制衰老模型,给予维生素E和不同浓度蜂胶黄酮,1个月后,检测小鼠脑组织SOD活性和MDA含量.结果:蜂胶黄酮可显著提高果蝇及小鼠体内SOD活性,降低体内MDA含量;延长果蝇平均寿命和高寿命.结论:蜂胶黄酮通过有效清除自由基抑制或减轻机体组织和细胞的过氧化过程,起到延缓衰老的作用.
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直链烷基苯磺酸钠对果蝇生殖能力的影响及大豆异黄酮的干扰作用
目的:探讨直链烷基苯磺酸钠(linear alkylbenzenesulfonate,LAS)对果蝇生殖功能的影响,以及大豆异黄酮对这种影响的干扰作用.方法:测定培养基中LAS低剂量(150 mg/kg)、中剂量(300 mg/kg)和高剂量(600 mg/kg)时果蝇繁殖能力;采用析因设计方差分析检测大豆异黄酮对LAS的干扰作用及两者的交互作用.结果:低剂量组、中剂量组、高剂量组果蝇的子代数量与对照组差异均有统计学意义(P<0.01),分别为对照组的85.07%、84.59%和71.88%;大豆异黄酮的主效应具有统计学意义(P=0.01),即大豆异黄酮对LAS导致的损伤有保护作用,但LAS的主效应不具有统计学意义(P＞0.05),且大豆异黄酮与LAS之间无交互作用(P＞0.05).结论:LAS可引发果蝇生殖能力降低,而大豆异黄酮对这种影响有干扰作用.
