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RNA干扰的研究进展
RNA干扰(RNA interference)是指双链RNA(dsRNA)分子在mRNA水平关闭相应序列基因的表达或使其沉默的过程,是一种序列特异性的转录后基因沉默.RNA干扰在许多生物体如线虫、果蝇、植物以及哺乳动物中都存在,防止生物体受到外源性核酸的入侵.RNA干扰现象被发现以后,广泛应用于基因的功能、基因治疗等研究.
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丙烯酰胺对雄性果蝇生育力的影响
目的 了解丙烯酰胺对雄性果蝇生殖力的影响.方法 用不同浓度的丙烯酰胺对雄性果蝇染毒,每2 d与羽化8 h内的处女蝇交配,直至交配后的处女蝇无子代产生,观察交配情况以及繁殖子代的各种特征.结果 随着丙烯酰胺浓度的增加,被染毒的雄性果蝇与处女蝇交配情况变差,繁殖的子代数量减少,死亡率增加,羽化时间延长,雄雌性比降低,被染毒雄蝇的寿命减少,同时子代中出现一定量的畸形个体.结论 丙烯酰胺对雄性果蝇的生育能力有显著的影响.
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邻苯二甲酸二丁酯对雌性果蝇生育力的影响
目的 研究邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)对雌性果蝇生育力的影响.方法 将雌性果蝇随机分为5组,分别给予含DBP0%、0.1%、0.4%、1.6%、6.4%的培养基喂饲,10 d后与雄蝇配对产子,每日观察并记录子代孵化数.结果 随着DBP浓度的增加,0.1%、0.4%、1.6%浓度组雌性果蝇产卵时间逐渐延长,子代数量逐渐增多,1.6%浓度组与对照组比较有差异.但6.4%浓度组雌蝇的不育率比对照组高(P<0.01),产卵时间缩短,后代数量减少.结论 低浓度的DBP能增加雌性果蝇的生育力,高浓度的DBP使其生育力降低.
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番茄红素对DBP所致果蝇生殖毒性的拮抗作用
目的 研究番茄红素对邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)所致果蝇生殖毒性的拮抗作用.方法 将果蝇随机分为5组,分别给予溶剂对照培养基和含1.0%DBP及不同浓度番茄红素的培养基喂饲,雌雄配对产子,每日观察并记录子代孵化数和死亡数.结果 与对照组相比,DBP组果蝇的生育率和平均生育数降低,生育期缩短,子代死亡率升高(P＜0.05);随着番茄红素浓度的增加,染毒果蝇的生育率、生育期和平均生育数逐渐提高,子代死亡率逐渐降低.结论 DBP可对果蝇产生生殖毒性,而番茄红素对这种影响有拮抗作用.
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番茄红素对邻苯二甲酸-2-乙基己基酯致果蝇脂质过氧化损伤的保护作用
目的 探讨番茄红素对邻苯二甲酸-2-乙基己基酯[di(2-ethy(hexylphthalate)]致果蝇脂质过氧化损伤的保护作用和机理. 方法测定喂饲DEHP和不同浓度番茄红素对果蝇寿命及果蝇体内超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、过氧化氢酶(catalase ,CAT)活性、丙二醛(maleic dialdehyde ,MDA)含量的影响. 结果喂饲高浓度番茄红素和DEHP的雄性果蝇平均寿命和平均高寿命高于仅喂饲DEHP的果蝇且低于对照组果蝇;喂饲番茄红素和DEHP的果蝇体内SOD、CAT活性水平高于仅喂饲DEHP的果蝇且低于对照组果蝇且随着番茄红素浓度的增高而增高;喂饲番茄红素和DEHP的果蝇体内MDA含量低于仅喂饲DEHP的果蝇高于对照组果蝇且随着番茄红素浓度的增高而降低. 结论在一定浓度范围内番茄红素可以部分拮抗DEHP导致果蝇体内的脂质过氧化,且呈一定的剂量反应关系,对DEHP致果蝇脂质过氧化的损伤有一定的保护功能.
关键词： 番茄红素 邻苯二甲酸-2-乙基己基酯 果蝇 脂质过氧化 -
酞酸二丁酯对黑腹果蝇寿命及SOD和MDA的影响
目的研究环境污染物酞酸二丁酯(Di-n-butyl phthalate,DBP)对黑腹果蝇寿命及抗氧化系统的影响.方法用生存试验检测果蝇寿命,记录不同剂量DBP染毒组果蝇生存数和死亡数,并测定DBP不同染毒浓度和不同染毒时间果蝇体内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量.结果染毒后各剂量组雌雄果蝇半数死亡时间均缩短,平均寿命及平均高寿命与对照组相比均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01),并呈现出明显的剂量-反应关系.不同浓度染毒组雌雄果蝇与对照组相比,SOD活性显著降低(P＜0.05),MDA含量显著升高(P＜0.05);雌雄果蝇在不同染毒时间的SOD活性和MDA含量与对照组相比差异均有显著性(P＜0.01或P＜0.05).结论 DBP可引起果蝇体内SOD活性下降,MDA含量上升,破坏果蝇体内的抗氧化系统,进而使果蝇寿命缩短,有很强的促衰老作用.
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吐温-80对果蝇急性毒性及寿命的影响
目的观察吐温-80对果蝇急性毒性及寿命的影响.方法急性毒性试验取2 d龄果蝇分为4组,分别给予0、0.04%、1%、25%吐温-80溶液连续喂饲3 d,记录3 d累计死亡数,计算半数致死浓度(LC50);生存试验取4 d龄果蝇分为5组,给予含0、0.07%、0.20%、0.60%、1.80%吐温-80的培养基喂饲,每2 d记录果蝇存活数,计算平均寿命和平均高寿命.结果雌蝇LC50为1.70%,雄蝇LC50为0.54%,急性毒性试验中雄性果蝇的死亡率与吐温-80浓度呈正相关(P＜0.01),生存试验中各浓度组与对照组比较平均寿命均见到缩短.结论吐温-80对果蝇存在急性毒性与缩短寿命作用.
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人参保健口服液对不同天龄果蝇延缓衰老作用的比较
目的研究保健食品喂饲果蝇的适宜时间,完善果蝇生存试验方法.方法用10天龄、20天龄、30天龄和40天龄的果蝇对某保健食品的延缓衰老功能进行检测.结果 20天龄和30天龄果蝇的试验组中延长平均寿命的阳性率为75%,雄蝇出现较高阳性率的天龄比雌蝇小.结论中年开始服用该保健食品是较为适宜的年龄段.
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枸杞胶囊对果蝇的延缓衰老作用
目的探讨枸杞胶囊对果蝇的延缓衰老作用及其机理.方法将未交配的果蝇随机分成5组,给予含不同浓度枸杞胶囊的培养基喂养,用生存实验检测寿命,羟胺法测定SOD活性,TBA法测定MDA含量.结果枸杞胶囊能显著延长果蝇的平均高寿命及雌蝇的平均寿命,雌蝇体内SOD活性明显升高(P<0.05),雌雄果蝇体内的MDA含量均降低(P<0.05).结论枸杞胶囊具有抗氧化、延缓果蝇衰老的作用.
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碧萝芷对黑腹果蝇寿命影响的研究
目的用黑腹果蝇的生存实验来观察碧萝芷(pycnogenol)的延缓衰老功能.方法收集8 h内羽化而未交配的果蝇进行雌雄分组,每个浓度组200只果蝇,共4个浓度组,每2天记录果蝇存活数,每4天更换培养基,直至果蝇全部死亡.结果雄性果蝇的平均寿命指标中4个浓度组都显示了阳性(P＜0.01),平均高寿命组的0.0025%浓度雌性果蝇为阳性(P＜0.05).结论表明碧萝芷具有延缓衰老的作用非常明显.
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抑制性消减杂交筛选与克隆果蝇七氟烷敏感性相关基因
目的 采用抑制性消减杂交(SSH)方法筛选与克隆果蝇七氟烷敏感性相关的基因,以进一步研究吸人麻醉药的作用机制.方法 以对七氟烷敏感和耐药的果蝇品系为研究模型,以野生型黑腹果蝇作为对照,应用SSH方法筛选与吸人麻醉药七氟烷敏感性相关的候选基因.结果 筛选到的差异片段中,在敏感品系中高调的有77个.低调的有56个;在耐药品系中高调的有58个,低调的有52个;在敏感品系中高调而耐药品系中低调的有4个.经过与果蝇基因库比对,确定了其中大部分基因的功能,发现这些基因均非位于Y染色体上;与吸入麻醉药敏感性相关的基因大部分位于第2号染色体上.结论 本实验结果与先前有的学者用遗传学方法定位所得结果基本一致,七氟烷麻醉相关基因定位于2号染色体上,为常染色体显性遗传,并且果蝇对吸入麻醉药的敏感性在雌性与雄性间无差异,为进一步研究吸人麻醉药的作用机制提供了新的思路和方法.
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机械分离的果蝇幼虫中枢神经元全细胞钾电流的特性
培养的果蝇胚胎及幼虫中枢神经元已被广泛用于细胞膜离子通道、突触传递和胞内信使调节等电生理学研究.在本实验中, 利用机械震荡分离方法获得了大量的果蝇幼虫中枢神经元, 其中大部分为Ⅱ型神经元.运用膜片钳技术, 鉴定了Ⅱ型神经元上五种具有不同动力学特性的全细胞钾电流.其中E型电流表型表现出与其它四种电流完全不同的"钟形"激活特性.进一步的研究还表明该类型电流具有明显的钙依赖性, 而且它具有与其它四种电流不同的衰减特性.
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“门控-弹簧”模型及其在果蝇机械力信号转导中的分子基础
机械力是生物体生命活动中普遍存在的一种物理刺激,高等生物对机械力的感受是听觉、触觉、压觉以及平衡觉等重要生理过程的生物学基础.生物体中的感受器细胞对机械力信号的转导是上述感受的关键,这一信号转导过程可将细胞外机械力刺激转换为细胞的电信号或者化学信号.“门控-弹簧”模型(“Gating-Spring'"model)在细胞水平定量地描述了机械力信号转导的原理,但是其分子基础(包括机械力信号转导通路的分子组分,结构基础以及力学原理)依然有待探索.近年来,人们以果蝇为模式生物对上述问题进行了系统的研究,取得了重要的进展.本文对“门控-弹簧”理论进行了概述,并对在果蝇系统中取得的研究进展以及有待解决的问题进行综述和展望.
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果蝇的内向整流型钾离子通道
内向整流型钾离子通道(Kir)是一类特殊的钾离子选择性通道,具有内向整流性,即钾离子内流较外流容易得多.这类离子通道介导许多细胞功能,包括维持静息膜电位,维持钾离子平衡稳态以及调节细胞代谢水平.由于哺乳动物中存在15个Kir基因,目前在单个离子通道突变动物中进行的遗传学研究可能因为基因冗余而未能揭示这类通道的许多重要生理功能.这一问题可通过使用简单模型动物来解决,比如整个基因组只含3个Kir基因的果蝇.在果蝇上开展的成熟的遗传学研究方法还可为发现更多的Kir通道调控机制提供有力的工具.因此在这里我们综述了果蝇Kir离子通道的研究进展.对果蝇Kir通道的了解将会引导我们发现人类Kir通道的新的功能及调控机制,并有助于相关疾病的病理学研究.
关键词： 果蝇 内向整流型钾离子通道 -
果蝇模型在研究铁代谢相关神经退行性疾病发病机制中的应用
铁代谢紊乱一直被视为是许多神经退行性疾病共同的病理特征,如阿尔茨海默氏症(Alzheimer's disease,AD)、帕金森氏病(Parkinson's disease,PD)以及弗里德赖希共济失调(Friedreich's ataxia,FRDA)等均与脑铁代谢紊乱密切相关.随着分子生物学的进展,迄今为止也已经发现许多参与铁运输、储存和调控的基因与神经退行性病变的发生和发展有关,然而铁代谢紊乱在疾病发病过程中的致病机制仍不十分清楚.近年来许多研究者利用各种转基因动物模型来研究铁代谢相关神经退行性疾病的发病机制,但是啮齿类动物模型由于模型构建系统周期较长且比较复杂,从而限制了铁相关蛋白在神经退行性疾病中作用机制的研究进展.果蝇具有生活周期短暂、染色体数目少以及表型易于观察等优点,同时果蝇与人在很多基因和通路上都高度保守,且神经系统也可表现出与人相似的复杂的功能,因此被广泛地应用在铁代谢相关神经退行性疾病发病机制的研究中.果蝇还以其独特的分子遗传学优势,更容易构建缺失、插入、敲除或转基因模型,可在不同神经退行性病理情况下进行遗传学筛选铁相关的调控基因,从而为解决铁代谢紊乱在疾病发病过程中的致病机制提供更多的线索.因此在果蝇模型中发现可以中止甚至是逆转神经元退化进程的铁相关基因,以期为神经退行性疾病的研究和治疗提供策略.
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端粒、端粒酶与肿瘤发生
20世纪30年代，McClintock和Muller分别在玉米和果蝇中发现并命名了“端粒”，它是真核生物染色体的天然末端，长度缩短可导致细胞恶变，端粒酶是一种核糖核蛋白酶，在大多数正常人体细胞中没有活性，在几乎所有恶性肿瘤中被检测到，它们与癌症的关系已成为分子生物学、临床医学等多个学科共同关注的热点。……
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舌蝇体内的锥虫传播与免疫反应
舌蝇是锥虫病传播的主要媒介,人群普遍易感,无先天免疫和年龄分布差异.每年有近6 000万人处于感染该病的危险.随着RNA干扰技术、转基因技术的成熟以及果蝇免疫模型成功建立,锥虫在舌蝇体内发育又重新成为昆虫研究热点,并取得了令人注目的成果.
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冈比亚按蚊体内的疟原虫传播与免疫反应
冈比亚按蚊的免疫系统与入侵的疟原虫之间有一个相互作用的过程,但它们之间是如何作用的?只有在果蝇免疫模型成功建立以后以及其他一系列研究成果取得,如冈比亚按蚊基因分类的完成、RNA干扰技术和转基因技术建立才慢慢清晰起来[1],并且在冈比亚按蚊传播疟原虫以及彼此之间相互作用的研究中得到了有效的验证.
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抗衰老与去衰老的研究与应用
抗衰老技术(technology of anti-aging)是在衰老生物学(biology of aging)基础研究之上发展起来的.从不同的衰老学说出发进行研究,都有可能获得成功.从衰老的氧化学说出发,Lang等[1]发现,羧酸噻唑烷镁(MgTC)能大大提高果蝇、蚊子、小鼠的谷胱甘肽(GSH)含量和延长寿命.从衰老的端粒学说出发,Bodnar等[2]将端粒酶亚单位hTRT基因通过载体转入视网膜色素上皮细胞和包皮成纤维细胞,大大扩展了这两种细胞的复制寿命.从衰老的基因学说出发,Rogina等[3]发现,用P-element适当插入Indy基因,雄雌果蝇平均寿命增长约1倍(37～70d),高寿命增加了50%.上述的研究结果都有可能发展为抗衰老的药物干预或技术干预.鉴于这方面国内已有很多报道,本文不再赘述.
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中电导钙激活钾通道研究进展
中电导钙激活钾通道的分子生物学1991年从果蝇slowpork位点首先克隆出大电导钙激活钾通道(BK)的编码基因,随后于1996年又从哺乳动物脑组织中分离出小电导钙激活钾通道(SK)的三个编码基因,分别命名为SK1-3[3,4].直到1997年,Ishii和他的同事们才从人胰腺组织中克隆出中电导钙激活钾通道(IK)的编码基因[5].
