人工养殖大鲵肉延缓黑腹果蝇衰老的实验研究

目的 探讨人工养殖大鲵肉延缓果蝇衰老的作用.方法以大鲵肉浆,分别按占培养基的4%,2%,1%(g/g)含量,加入到基础培养基中,并以基础培养基为对照组,观察对果蝇寿命、生殖能力、飞翔能力、耐寒能力的影响,测量果蝇体内超氧化物歧化酶(SOD)、脂褐素(LF)活性的变化.结果 大鲵肉能显著提高果蝇的寿命、生殖能力、飞翔能力、耐寒能力,体内SOD活性明显升高,而LF的活性下降.结论大鲵肉能够延缓果蝇的衰老.

果蝇模型在肾结石研究中的优势与应用前景

目前对尿石症的研究主要采用啮齿类动物来构建动物模型.近年来的研究发现,果蝇的马氏管在解剖结构、生理功能和遗传学特征上都与人类肾脏的肾小管和集合管极为类似,改变遗传或环境因素可以诱导马氏管里产生大量的草酸钙结晶,从而建立果蝇肾结石模型.果蝇作为遗传学的经典模式生物,较之传统的啮齿类动物模型具有独特的优势,将其应用于人类肾结石的研究有望加深人们对结石形成机制的认识.本文综述了果蝇的肾脏系统概况、果蝇在肾结石研究中的优势与缺陷和业已建立的果蝇肾结石模型,并对其在肾结石研究中的应用适当展望,以期为国内尿石症的研究提供参考.

LRIG1基因在人星形细胞瘤中的表达下调与意义

LRIG1是新近发现的一种人类基因组成员,与鼠LIG-1及果蝇Kek1同源,编码一种胞外段含多亮氨酸重复区(LRR)和免疫球蛋白(Ig)样区的细胞表面跨膜蛋白.目前人类对LRIG1了解甚少,对人类肿瘤中LRIG1的研究刚刚展开.我们设计、制作了LRIG1三相寡核苷酸探针,并用原位杂交方法检测了16例人星形细胞瘤肿瘤组织及其周边脑组织中LRIG1 mRNA的表达,旨在研究LRIG1的表达谱并探讨它在肿瘤中的作用.

乙二醇诱导果蝇草酸钙结石模型的建立

目的 探索果蝇草酸钙结石模型的培养方法,并对果蝇模型的成功率、适用性进行评价.方法 将同天龄雄性黑腹果蝇400只随机分成结石A组(n1 =100)、结石B组(n2=100)、结石C组(n3=100)和对照组D组(n4=100),通过二氧化碳麻醉法,分别将其转入带有0.50％、0.75％、1.00％乙二醇的果蝇培养基和不含乙二醇的正常培养基并放入25℃恒温箱内培养.观察统计果蝇的寿命,并解剖果蝇分离体内的马氏管,观察果蝇的结晶形成情况,对形成的晶体进行定性分析.结果 在偏光显微镜下观察,A、B、C、D组的果蝇马氏管结晶生成率分别为87.0％、92.0％、98.0％和6.0％(x2=273.057,P=0.000).在含0.5％乙二醇培养基(A组)里果蝇中位生存期为36 d,0.75％乙二醇培养基(B组)里果蝇中位生存期为31d,1.0％乙二醇培养基(C组)里果蝇中位生存期为23 d,正常培养基(D组)的中位生存期为52 d,单因素方差分析显示F=35.403,P=0.000.所得晶体通过定性分析为草酸钙晶体.结论 0.75％的乙二醇浓度由于其诱导结石形成率高,死亡率相对较低被认为是较理想造模的浓度.稳定的果蝇草酸钙结石模型适合进行高通量的药物试验以及大样本量的结石机制研究.

Sonic hedgehog基因与肠道畸形的研究进展

Sonic hedgehog基因是Hedgehog(Hh)基因家族中的一员,Hedgehog基因初在果蝇中发现,果蝇只有一个Hh基因.以后多个实验室在高等动物中发现有3个Hh基因,第一个高等动物的Hh基因命名为Sonic hedgehog(Shh),在个体发育中起形态发生原作用,第二个为Ihh,调节软骨等组织发育,第三个为Dhh,功能为调控精细胞发育.Shh的功能清楚,在许多系统发育中起关键作用,包括神经系统[1]、肺[2]、肢体发育[3]、毛发生成[4]等.是一重要的发育调控因子.下面就Shh基因及其相关基因与肠道畸形的研究作一综述.

以转基因果蝇为模型研究AD的前景

AD是以进行性认知、行为和日常生活能力损害为主要临床表现的大脑变性疾病,病因与遗传、环境和病理等多因素相关.国外报道65岁以上的老年人群患病率为5%～10%,我国主要城市65岁以上的老年人群患病率约为6.6%.AD发病机制目前尚不清楚,其中Aβ毒性级联假说是目前研究的重点.

黑腹果蝇成虫寄生人体鼻腔1例

桑杞脑康颗粒改善转基因果蝇阿尔茨海默病模型学习记忆作用研究

目的:观察桑杞脑康颗粒对于阿尔茨海默(AD)果蝇模型学习记忆能力的影响.方法:采用Gal4/USA系统建立Aβ42果蝇模型;连续给药后利用巴普洛夫嗅觉学习实验观察桑杞脑康颗粒对AD果蝇行为的影响.结果:桑杞脑康浸膏1.72mg/mL、0.172 mg/mL干预剂量可以显著改善Aβ42果蝇的学习能力(P＜0.001),与临床上用于治疗AD的美金刚效果相当(P＞0.05).结论:桑杞脑康颗粒具有显著改善Aβ42引起的AD果蝇学习缺陷的作用.

整合素相关激酶的研究进展

ILK于1996年Hannigan研究β1整合素结合蛋白时被发现,其分子量为59kD,在哺乳动物多种细胞中均有表达,包括结肠、乳腺、肺、肝、心、胰腺、骨骼肌、软骨细胞、淋巴细胞、巨噬细胞和血小板等[1].ILK进化上具有高度保守性,人、鼠类、果蝇中均发现同源类似物,人ILK基因位于染色体11p15.5-15.4.

果蝇伴性隐性致死试验检测头孢唑啉致突变作用的研究

用果蝇伴性隐性致死试验检测头孢唑啉致突变作用,结果药物各测试验组的致死突变率,经统计学处理均未达到显著差异水平.

筛选控制果蝇心脏发育的基因

果蝇的早期心脏发育模式与脊椎动物的早期心脏发育模式具有惊人的相似性,研究果蝇心脏发育基因有助于揭示人体心脏发育机理和先天性心脏病发生机制.为了克隆和鉴定控制心脏发育的新基因,在化学诱变建立果蝇平衡致死系的基础上,用果蝇心脏组织特异抗体Mab No.3,对310个平衡致死系进行免疫化学方法筛选,观察到有63个致死系表现出心脏突变表型.分别将这些有心脏表型突变的品系与果蝇第2和第3染色体缺失系杂交,测定了14个品系的遗传学位点,其中7个品系在遗传学位点上有别于已报道的心脏发育控制基因.并查寻和讨论了各突变品系的可能侯选基因.

019 chaperone在果蝇帕金森病模型中对α-synuslein毒性的抑制

果蝇Bves蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备

目的 为了进一步研究细胞粘附分子Bves在肿瘤的发生及转移过程中的作用,需要获得Bves蛋白并制备其抗体.方法 根据Flybase网站所提供的Bves基因序列,以果蝇的总RNA为模板进行PCR扩增,得到Bves部分编码序列,随后将其连接到pET-28a载体上获得原核表达载体.重组表达质粒经酶切测序鉴定后,转化入大肠杆菌BL21感受态细胞中,并用IPTG诱导融合蛋白的表达,使用活化的Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,将纯化后得到的His-Bves融合蛋白免疫注射新西兰大白兔制备Bves多克隆抗体,并用Western blot对抗体效价进行检测.结果和结论获得了Bves原核表达重组融合蛋白及高效价的兔抗Bves多克隆抗体,为后期深入研究Bves基因的功能奠定了基础.

番茄红素对转基因果蝇模型神经保护作用的研究

目的 研究番茄红素对β-淀粉样蛋白(Aβ)42转基因果蝇的神经保护作用.方法 将实验果蝇随机分为不同浓度干预组、二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照组、模型组和正常果蝇对照组,喂养至果蝇死亡.记录各组果蝇的寿命和运动爬行的结果以及测定果蝇体内超氧化物歧化酶(SOD)、胆碱酯酶活性及脑组织病理变化.结果 番茄红素能延长Aβ 42转基因果蝇的寿命,改善它的爬行能力,能增强其体内的SOD活性,胆碱酯酶活性受到抑制.同时番茄红素能减少模型果蝇脑组织病变空泡形成.结论 番茄红素对Aβ42转基因果蝇具有神经保护作用,其机制可能是通过抗氧化作用来实现的.

壳聚糖对果蝇寿命影响的实验研究

目的通过分析壳聚糖对果蝇寿命的影响,探讨壳聚糖的抗衰老作用.方法以Oregon K黑腹果蝇为研究对象,分别观察喂饲掺入0.005%、0.015%、0.045%、0.135%壳聚糖的果蝇饲料对果蝇寿命的影响.结果 0.015%、 0.045%、 0.135%壳聚糖喂饲组雌性果蝇的平均寿命天数(分别为55.6±15.6,60.7±15.0,68.6±17.1)较对照组(51.0±11.9)明显延长 (P＜0.05);果蝇各剂量壳聚糖喂饲组的高寿命天数(雌性:78.0±4.1,80.9±4.9,86.5±3.4,94.1±3.4;雄性:83.0±5.0,83.0±4.3,85.5±5.3,82.9±3.4)也较对照组(雌性:70.4±2.9;雄性:78.3±5.3)明显延长(P<0.01). 结论壳聚糖有延长果蝇寿命的作用.

RNA干扰技术在人体寄生虫研究中的应用进展

RNAi是Fire等[1]于1998年在研究秀丽新小杆线虫(Caenorhabditis elegans)基因组计划时,首次在线虫中阐述双链RNA(duuble stranded RNA,dsRNA)能特异性和选择性地明显抑制目的基因的表达而命名的新技术,随后此技术在全球得以广泛的开展和应用,并在其它动物如果蝇、锥虫、涡虫等中相继证实,已经成为研究基因功能、新基因筛选、基因治疗和寻找药物靶点的重要工具,成为分子生物学研究中为活跃的热点之一.现将该技术在人体寄生虫学研究中的应用进展综述如下.

阿斯巴甜抑制钙通道电流影响果蝇中枢投射神经元电活动

目的：从突触水平检验不同浓度的阿斯巴甜对果蝇中枢神经元影响及作用机制，为进一步探究阿斯巴甜生物安全性提供支持。方法采用膜片钳全细胞记录的方法，通过离子通道的阻断与分离，分别记录给药前后果蝇投射神经元（PN）的胆碱能突触微小兴奋性电流（mEPSC）、钙离子通道电流和钙通道瞬时电流密度，统计并分析mEPSC幅值和频率，以及钙通道电流峰值和瞬时电流密度。结果与给药前相比，8μg／ml阿斯巴甜会降低果蝇PN的mEPSC频率（t＝22．05，P＜0．01）、钙电流峰值（t＝5．01，P＜0．01）和瞬时电流密度（t＝2．68，P＜0．05）；2μg／ml阿斯巴甜会降低果蝇PN的mEPSC频率（t＝3．15，P＜0．05），其他实验指标差异则无统计学意义（P＞0．05）。结论一定浓度的阿斯巴甜可影响果蝇中枢投射神经元的电活动，并且该作用可能是通过影响钙电流而实现的。

叠氮化钠对果蝇寿命及某些抗氧化酶活力的影响

目的 研究不同浓度的叠氮化钠(NaN3)培养基培养果蝇对果蝇寿命及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力的影响.方法 用不同浓度(1、4、16、64 mg/L)NaN3配制的培养基饲喂野生型黑腹果蝇,并设置基本培养基为对照.寿命实验组每天计数果蝇的死亡数直至全部果蝇死亡,计算果蝇的半数死亡时间、平均寿命与高寿命.抗氧化酶实验组测定果蝇三龄幼虫SOD及CAT活力,并与对照组相比较进行统计学分析.结果 随NaN3浓度的升高,果蝇的平均寿命、半数死亡时间和高寿命出现明显下降,并呈现剂量-效应关系.在NaN31～16 mg/L处理组,随着NaN3浓度的升高,SOD和CAT活力极显著升高,但浓度达到64 mg/L,SOD和CAT活力开始下降.结论 提示NaN3对果蝇具有一定的毒性效应,并可能会影响其SOD与CAT活力.

蜈蚣提取物对果蝇寿命的影响

目的:观察蜈蚣提取物对果蝇寿命的影响和对子代是否有致畸性.方法:采用美国野生型黑腹果蝇,观察不同浓度蜈蚣提取物(0,0.2%,1%,2.5%,5%)对果蝇寿命和子代形态的影响.结果:随用药浓度增大,雌雄两性果蝇均表现为半数死亡时间、平均寿命、平均高寿命有明显缩短,并有明显的浓度-药效关系.对用药果蝇的子代观察结果,未发现畸形.结论:蜈蚣提取物可以缩短果蝇寿命,但对子代无明显影响.提示蜈蚣可能有长期毒性,建议临床应用时对长期或连续服用需慎重.

单眼多次取出结膜吮吸线虫1例

患者,男,54岁,因"双眼异物感伴眼痒2周"在北京怀柔医院眼科就诊.自诉1 d前自行从眼内取出白色虫体1条.裂隙灯检查发现左眼结膜囊内可见白色虫体2条,用眼科镊子将其取出,并送病理科检查.就诊结束后嘱患者左氧氟沙星眼液滴左眼,4次/d.后病理科证实虫体为结膜吮吸线虫.5 d后患者复诊,诉左眼仍眼痒伴异物感,再次行裂隙灯检查检深部穹隆白色虫体1条,取出虫体,并使用生理盐水加压冲洗结膜囊,嘱患者局部抗生素点眼,门诊随访3周未见复发.