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CD81与HCV关系研究进展
CD81属于四次跨膜蛋白超家族成员,是相对分子量26kD的一种膜表面粘附分子.CD81分布广泛,具有多种功能.1998年意大利科学家Pileri等首次报道了CD81是与HCV特异结合的蛋白质分子,以后大量的实验表明CD81是HCV感染的初受体,但也有部分实验不支持这一观点.本文就CD81与HCV关系研究进展做一综述.
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补肾活血方对老年自发性高血压大鼠血清抗衰老因子Klotho含量的研究
Klotho (KL)基因是Kuro-o等[1]在1997年从表现为衰老的模型小鼠中克隆成功,随后发现人和大鼠中也存在KL基因.Klotho基因缺失鼠(KL-/-)的表型类似人类的衰老表现,包括寿命缩短、动脉硬化等[2-4].反之,Klotho高表达可延长实验动物的寿命,说明它是一个衰老抑制基子.KL基因可通过选择性拼接产生两种蛋白产物上,一种为跨膜蛋白,一种为分泌型KL蛋白,它以游离的形式发挥功能,在人组织及血清中中可检测到其存在[5].
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J亚群禽白血病病毒跨膜蛋白gp37基因克隆与表达
禽白血病病毒(ALV)跨膜蛋白(TM)在病毒-细胞融合过程中起关键作用,其蛋白内部存在的许多高度保守序列有可能成为抗病毒的重要靶点.对TM结构和功能的深入研究将为抗禽白血病病毒乃至其它反转录病毒相关制剂的研制提供科学的理论基础.本研究通过PCR从本实验室分离的ALV-J山东汶上毒株获得表达TM的gp37基因,克隆连接pMD18-T载体并测序,从已构建的质粒pMD18-T-gp37中酶切回收gp37基因,构建重组转移载体pFastBacHTb-gp37.利用昆虫杆状病毒表达系统对gp37基因进行表达,通过间接免疫荧光和Western blot 检测gp37基因表达产物,间接免疫荧光显示,重组杆状病毒感染的sf9细胞呈现明显的强阳性反应;Western blot分析,重组病毒感染的sf9细胞蛋白显示出约21kD的阳性条带.结果表明,gp37基因在sf9细胞内表达成功.
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扣带素--调节血管内皮细胞屏障功能的新靶点
血管内皮细胞间连接顶端的紧密连接是构成旁细胞屏障的重要结构。紧密连接由跨膜蛋白和胞浆蛋白组成,其中胞浆蛋白作为桥梁连接跨膜蛋白和细胞骨架蛋白,因此在决定紧密连接结构的完整性中发挥了重要的作用。然而目前,关于血管内皮中特异性表达的重要胞浆蛋白的研究仍十分有限。扣带素(cingulin)是1988年发现的一种紧密连接胞浆蛋白,已有研究表明 cingulin 在上皮细胞中参与调控紧密连接跨膜蛋白的表达以及细胞的增殖能力。然而,cingulin 在血管内皮中的作用尚不清楚。作者首先使用免疫组化和免疫荧光技术检测到人皮肤、脑和肺组织的血管内皮上存在 cingulin 特异性的表达,其与经典的紧密连接粘连蛋白(zonula occludens-1,ZO-1)存在共定位。在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中过表达 cingulin 可增加紧密连接链的长度,增加跨内皮细胞电阻值,并降低分子量为376 Da 和70000 Da 荧光示踪分子的通透性;而在敲低 cingulin的小鼠内皮细胞中,低分子量荧光示踪分子的通透性显著增加,这提示 cingulin 可经促进紧密连接的形成进而增强内皮细胞的旁细胞屏障功能。进一步,作者在 cingulin 敲除小鼠中通过尾静脉注射生物素(作为旁细胞途径示踪分子)后发现,菱形窝下缘后区的神经元以及浦肯野细胞均呈现生物素阳性染色,提示在这些部位的血脑屏障受到了破坏。以上结果表明,cin-gulin 可调控血管内皮细胞的屏障功能,其机制与调节紧密连接结构的形成和稳定性有关,这为将来治疗脑和外周器官的血管渗透综合症提供了新思路。
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前列腺六次跨膜蛋白2功能的研究进展
人类的前列腺六次跨膜蛋白2 (six transmembrane protein of prostate2,STAMP2)同属于4个啮齿类蛋白家族中的一员,近几年来对它的命名各有说法,包括STAMP2、STEAP2 (six transmembrane epithelial antigen of prostate 2)、TIARP(TNF-induced adipose related protein)、STEAP4、STEAP和STEAP3[1],因与STAMP1基因序列相似而命名.在前列腺癌的研究中STAMP2首次被发现,是前列腺细胞表面抗原,参与前列腺癌的发生过程[2].在动物脂肪组织和胰岛素抵抗的研究中发现,TNF-α可以诱导STAMP2高表达,激活炎性反应通路,参与炎性反应,并在代谢平衡中发挥调节作用[3],提示STAMP2可能在人体组织中发挥重要作用.研究显示,肥胖、体质量增加、胰岛素抵抗、2型糖尿病等均与STAMP2的功能可能有关[4],但在高血压的研究中尚未检索到相关报道.目前对STAMP2功能的研究较少,本文就STAMP2的研究现状进行综述.
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NET-1蛋白表达与肝癌临床病理因素相关性探讨
NET-1属于四次跨膜蛋白(TM4S)家族成员[1-3] ,具有显著上调癌形成的作用.我们在研究人体组织中NET-1表达[4] 及分析肝与肝癌组织中NET-1表达差异[5]的基础上,通过基因生物工程的方法制备NET-1多克隆抗体,用免疫组织化学方法检测肝癌中NET-1蛋白表达,探讨其与临床病理因素的关系.
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A型流感病毒M2蛋白疫苗的研究进展
流感是由流感病毒引起的一种呼吸道传染病.目前应用的流感疫苗主要是针对流感病毒的膜蛋白HA和NA,但HA和NA存在抗原漂移和抗原转变问题,需要不断改换制备疫苗用的毒株.解决办法之一是研制一种"通用型"流感疫苗.M2蛋白是流感病毒第三种跨膜蛋白,具有离子通道作用,而且其基因序列高度保守.用M2蛋白或M2蛋白胞外区免疫小鼠可以有效保护小鼠免受致死性病毒攻击.因此,M2蛋白被认为是一种潜在的具有交叉保护性抗原,可用于开发通用型甲型流感疫苗.
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呼吸道合胞病毒疫苗研究动态
呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是引起婴幼儿严重下呼吸道感染的重要病毒性病原体,广泛分布于世界各地.其发病率高,多数儿童在两岁前都感染过RSV.老年人和免疫力低下的人群中也会暴发流行.RSV感染的临床表现在不同年龄组往往不同,一般可致鼻炎、中耳炎、哮喘、支气管炎、细支气管炎和肺炎,尤其以后两种疾病为严重,甚至可导致死亡.RSV属副黏病毒科,肺炎病毒属, 病毒粒子直径约150~300 nm.基因组为一条约由15 000个核苷酸组成的单股、负链RNA,主要编码10个蛋白质:3种核衣壳蛋白[核壳蛋白(N)、磷酸蛋白(P)、大聚合酶蛋白(L)]、3种跨膜蛋白[融合蛋白(F)、附着蛋白(G)、小疏水蛋白(SH)];2种基质蛋白(M1、M2)和2种非结构蛋白(NS1、NS2).F蛋白和G蛋白是两种主要的结构蛋白,可诱导机体产生抗体和细胞免疫,因此常被作为RSV疫苗研制的靶抗原.世界卫生组织(WHO)已将研制RSV疫苗列为全球疫苗计划的优先发展项目之一.但迄今为止,尚无安全、有效的RSV疫苗获准上市.
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HIV-2 gp105重组鸡痘病毒引起小鼠细胞和体液免疫应答
人免疫缺陷病毒Ⅱ型(human immunodeficiencyvirus type 2,HIV-2)于1986年在几内亚-比绍被发现.起初HIV-2仅在西非呈区域性流行,随后在欧洲、美洲和亚洲也出现了感染者和发病者.我国的首例HIV-2感染者于1998年在福建省发现[1],并检测出HIV-1与HIV-2的共感染患者[2].因此,研究有效的HIV-2疫苗势在必行.HIV-2 env基因编码前体蛋白gp140,后者裂解后生成外膜蛋白gp105和跨膜蛋白gp36.gp105是病毒的主要抗原,其表面具有大量的Ab表位、TH表位和CTL表位,能诱导机体产生强烈而广泛的中和抗体和细胞毒(CTL)反应,因此是基因工程疫苗研究的重要靶点.本研究将已构建的HIV-2 gp105重组鸡痘病毒大量制备后免疫BALB/c小鼠,观察其在小鼠体内的免疫原性,以获得第一手的实验资料.
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利用生物信息学确定质粒中所含HIV基因片段相应特性
目的确定质粒中所含HIV基因片段的来源以及相应表达产物的特性. 方法将质粒中的该段基因克隆到载体pUC19上进行测序后,利用生物信息学相关技术对该基因序列进行分析,并对其表达产物的基本特性作初步预测. 结果分析表明,该段基因与HIV-ⅢB的同源性高达99%,属于HIV env基因的序列,表达的产物含有HIV gp41和gp120的部分结构. 结论利用生物信息学的有关方法能迅速地对序列进行准确分析,有利于生物学、医学的迅速发展.
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小鼠趋化因子受体CXCR3胞外N末端的原核表达、抗体制备及初步应用
趋化因子受体为与G蛋白偶联、含有7个跨膜区的跨膜蛋白,依其结构特点又可分为多个亚类,其中CXCR3主要表达于激活的T细胞、B细胞和NK细胞表面,其高表达是淋巴细胞发生定向迁移和募集的重要条件,在炎症浸润、细胞迁移、血管形成、移植排斥反应和某些肿瘤的发生中都起着重要的作用.1
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地塞米松对脓毒症大鼠肝脏Toll样受体4的干预作用
研究发现,一族被称为Toll样受体(toll like receptor,TLR)的跨膜蛋白作为受体分子参与了细菌致病过程[1],其家族成员TLR4可与革兰阴性菌内毒素(LPS)及部分厌氧菌毒素结合,激活下游信号转导途径,使机体产生免疫应答[2].肠道中存在大量革兰氏阴性菌,在一些病理状态下可对机体造成损害.而肝脏是清除内毒素的重要器官也是首先遭到攻击的器官,本文通过大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)制备脓毒症模型,探讨脓毒症肝损伤与TLR4信号转导的关系,以阐明脓毒症肝损伤的部分机制及防治策略.
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Claudin蛋白在紧密连接中的作用机制及与疾病的关系
Claudin 蛋白是组成细胞间紧密连接的一种跨膜蛋白,它的功能主要是调节屏障结构的渗透性。细胞间紧密连接的稳定性与Claudin蛋白间及Claudin蛋白与其他紧密连接蛋白间复杂的相互作用有关。Claudin蛋白的转录及表达的调节机制有磷酸化、去磷酸化等。人类很多疾病与Claudin蛋白的突变有关,至今为止,关于Claudin蛋白的了解不仅停留在紧密连接的组成部分,更多的是其调节方式及其与疾病发生的关系等方面的研究。本文作者对Claudin蛋白的结构、作用方式、与临床疾病的关系及其未来研究的展望作一综述。
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P0蛋白在周围神经损伤修复中的意义及其研究进展
P0蛋白(myelin protein zero)是一种分子量为30 ku的糖蛋白,在成熟的髓鞘组织中占组织蛋白总量的50%以上,属于免疫球蛋白基因超家族(immunoglobulin gene superfamily,IgSF)成员,具有黏附和识别、促进神经细胞的生长、信号传导等功能[1-3];主要分布于周围神经髓鞘组织中,是神经膜细胞膜上的一种跨膜蛋白.神经膜细胞相互紧密连接呈螺旋状包裹轴突,形成髓鞘,将轴突与周边的环境严密地隔绝起来.这种紧密的结构形成一种近似绝缘的环境,使神经细胞在传导各种电信号时,能大限度地保证信息的完整性和精确性.研究表明,P0蛋白对维持髓鞘正常的结构和功能有十分重要的意义[4].
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血浆卵泡抑素结构域跨膜蛋白基因甲基化异常在大肠癌诊断中的价值
2003年Sabbioni等[1] 报道,在71%的大肠癌患者血浆中有含表皮生长因子和卵泡抑素结构域跨膜蛋白(TPEF)基因甲基化的改变,TPEF基因异常甲基化有望成为大肠癌早期诊断的有价值的分子标志物.本研究用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)技术分析32份大肠癌组织标本,以建立检测血浆TPEF基因甲基化异常的方法,现报告如下.
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什么是Fas/FasL系统?
问:什么是Fas/FasL系统?答:Fasrymndri t Fas配体(FasL)是细胞表面的两种跨膜蛋白.目前研究认为FasL是死亡因子,Fas则是它的受体.当一个细胞的FasL与另一个细胞的Fas结合时,可以导致表达Fas的细胞凋亡.Fas又称Apo-1,即CD95分子.人Fas基因定位于10号染色体q23,基因长度约25 Kb,人Fas cDNA长度为2 534 bp.人FasL基因定位于1号染色体q23,基因长度约8 Kb.Fas/FasL系统与自身免疫疾病、肿瘤发生、移植物耐受等均有密切关系.
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E-钙黏蛋白复合体与胃癌
E-钙黏蛋白是一类介导细胞-细胞间相互黏附、具有维持组织结构完整性和极性的钙依赖性跨膜蛋白.E-钙黏蛋白功能的发挥,有赖于与连接素共同构成复合体.研究发现,上皮型恶性肿瘤的分化、侵袭和转移与E-钙黏蛋白-连接素复合体的表达及功能障碍有关.众多研究表明,E-钙黏蛋白-连接素复合体介导的黏附功能下降可能存在三个机制:E-钙黏蛋白表达下调或基因突变;α-连接素表达异常或基因缺失;β-连接素分子异常生化修饰.因β-连接素是APC-β-catenin-Tef/Lef信号转导通路的关键分子,E-钙黏蛋白-连接素复合体介导的黏附功能下降还可能涉及癌细胞生物学中更深、更广的层面.对E-钙黏蛋白-连接素复合体的深入研究将有助于进一步揭示胃癌等恶性肿瘤的发生、发展机制.
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信号调节蛋白α在心肌肥厚中的作用及机制研究
目的:信号调节蛋白α(SIRPA)是一种多次跨膜蛋白,其在心脏、骨骼肌等多种组织中均有表达。研究表明SIRPA可参与包括巨噬细胞多核化、骨骼肌分化、神经元存活、糖尿病、免疫细胞调节在内的多种生物学过程,而其在心肌肥厚中的作用及机制国内外少有报道。
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细菌感染对大鼠呼吸道上皮细胞紧密连接蛋白的影响
肺部细菌感染发生的关键步骤包括细菌感染对小气道和肺泡上皮细胞的损伤作用.其中细菌感染导致小气道上皮细胞紧密连接破坏是较早发生的重要事件.现有实验证实 ,有多种蛋白质分子参与紧密连接复合物的构成,重要的有ZO-1和跨膜蛋白-闭锁蛋白(occludin)等[1].因此,我们探讨肺炎克雷白杆菌感染引起细支气管和肺泡上皮细胞ZO-1和occludin蛋白表达变化规律,以阐明肺部细菌感染发生的早期机制.
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C型凝集素在结核病发病机制中的作用
C型凝集素(G-type lectina)是一类非酶、非抗体蛋白质,其活性依赖于Ca~(2+),以跨膜蛋白和水溶性蛋白两种形式存在.C型凝集素的共同结构特征是具有1个或多个糖识别域,能选择性识别并结合病原微生物的糖结构域.C型凝集素根据糖识别域1级结构的不同可分为蛋白聚糖、I型跨膜受体、Ⅱ型跨膜受体、胶原凝集素、选凝素及自然杀伤细胞受体6个家族,其中胶原凝集素、I型跨膜受体和Ⅱ型跨膜受体与结核病的发病机制密切相关.