首页 > 文献资料
-
硝普钠诱导体外哮喘大鼠支气管平滑肌细胞凋亡
目的观察一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)是否诱导哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)凋亡.方法 Wistar大鼠10只,用卵白蛋白作为致敏原建立大鼠哮喘模型,分离出大鼠的气道平滑肌细胞,用SNP(NO的供体)干预,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长率的变化,用原位末端标记法和流式细胞术检测SNP对哮喘大鼠气道平滑肌细胞细胞凋亡的影响.结果⑴MTT法测定:SNP+哮喘组的细胞抑制率明显高于哮喘组细胞存活率,(n＝8,P＜0.05),且呈浓度依赖关系.⑵TUNEL(原位末端标记)法检测:SNP+哮喘组的凋亡指数明显高于哮喘组,(n＝4,P＜0.05).⑶流式细胞术测定SNP+哮喘组的平滑肌细胞凋亡率明显高于哮喘组,(n＝4,P＜0.05).结论硝普钠能抑制哮喘大鼠气道平滑肌细胞的增殖,并且能诱导哮喘大鼠气道平滑肌细胞的凋亡,这种作用可能与治疗哮喘的气道重建有关.
-
骨骼肌条件培养液对胸部恶性肿瘤抑制作用的实验研究
目的 研究骨骼肌微环境因素对胸部恶性肿瘤细胞增殖的影响,评价其在骨骼肌转移瘤罕见性中的意义及其临床应用前景.方法 原代培养新生Wistar大鼠骨骼肌细胞,用MTT法分析、比较其条件性上清液(MMCM)对胸部恶性肿瘤细胞(A549,肺泡细胞癌细胞株;Anip-973,肺腺癌细胞株腹水型亚系;PLA-801C,肺巨细胞癌细胞株;NCI-H466,肺小细胞癌细胞株;Eca109,人食管鳞癌细胞株)及正常非肿瘤细胞(金黄地鼠肾细胞株BHK-21)的体外抑瘤作用.结果 MMCM分别与A549、Anip-973、PLA-801C、NCI-H466、Eca109及BHK-21共同培养后,五株恶性肿瘤细胞的增殖均显著受抑,而正常非肿瘤细胞株则不受影响.结论 新生大鼠骨骼肌细胞可产生选择性抑制胸部恶性肿瘤细胞增殖的抑瘤物质,这种抑瘤物质可能是临床上骨骼肌内罕见转移瘤现象的生物学基础,并可望因此而诞生一种新的防治肿瘤转移的方法,并终应用于临床.
-
川芎嗪在抑制人肺血管平滑肌细胞黏着斑激酶中的表达
目的 探讨川芎嗪对人肺血管平滑肌细胞(HPASMCs)黏着斑激酶(FAK)的影响.方法 实验分成4组:对照组不加任何干预因素; fibronectin(FN)组 (作为刺激剂) 40 μg/ml;川芎嗪组100 μg/ml; 联合组FN 40 μg/ml + 川芎嗪 100 μg/ml.采用免疫印迹方法,流式细胞仪及TUNEL法分别检测FAK蛋白质的表达、细胞周期、细胞凋亡的变化.结果 FAK蛋白质在对照组与川芎嗪组中无表达,FN组中高表达(5438±679);联合组(川芎嗪 + FN 组)中表达降低(3860±435),联合组与FN组比较差异有统计学意义(t＝39.3,P＜ 0.01);流式细胞仪测定结果示:FN组表现为HPASMCs中G1相的比例减少,S相增高,凋亡率降低,川芎嗪组表现刚好相反.凋亡率比较:依次为川芎嗪组＞对照组＞联合组＞FN组.结论 川芎嗪通过减少FAK形成抑制HPASMCs增生,促进细胞凋亡,在防治HPASMCs增生方面有着重要的作用.
-
肌源性干细胞在周围神经缺损修复中应用的研究进展
肌源性干细胞（ MDSC）是一种具有很强增殖能力的干细胞，它主要位于成体肌肉组织中，具有良好的自我更新和向多种组织分化的潜能［1］。 MDSC来源于肌肉组织，容易获取，体外分离、培养较容易，增殖能力较强［2］。 MDSC不仅可以向肌肉细胞分化，在特定条件下通过相关诱导还可以分化成上皮细胞、内皮细胞、骨细胞、脂肪细胞、神经细胞和雪旺细胞等［3］。目前国内外关于周围神经缺损修复的研究中，组织工程学是热点， MDSC被作为种子细胞进行研究，在周围神经缺损修复中具有广阔的临床应用前景。下面就对MD－SC以及其在周围神经缺损修复中应用的研究进展进行综述。
关键词： 周围神经系统疾病/治疗 干细胞 肌 平滑/细胞学 综述 -
运用运动控制理论治疗老年腓肠肌痉挛的临床研究
目的 探讨运用运动控制理论指导下的踝关节运动训练方法治疗老年腓肠肌痉挛的疗效.方法 将80例60～69岁老年腓肠肌痉挛患者,按门诊顺序分成观察组和对照组各40例.对照组仅采用单纯的踝关节运动训练;观察组则运用运动控制理论,以预防和控制腓肠肌痉挛为任务导向,进行踝关节运动训练.12周末对两组患者治疗前后腓肠肌痉挛症状进行监测与评价.结果 12周末,两组治疗后症状均较治疗前明显改善(P＜0.05);观察组腓肠肌痉挛症状改善及疗效明显优于对照组(P＜0.05).结论 单纯踝关节运动训练,能改善老年腓肠肌痉挛症状,在此基础上运用运动控制理论,以预防及缓解腓肠肌痉挛为任务导向的踝关节运动训练能进一步提高疗效,明显改善临床症状,缓解发作,是一种值得推广的治疗方法.
-
全反式视黄酸对体外培养的人体大隐静脉内膜平滑肌细胞增殖与凋亡的影响
目的研究全反式视黄酸(atRA)对体外培养的人体大隐静脉内膜增厚、平滑肌细胞增生与凋亡的影响.方法30小段(1 cm长)人体大隐静脉(HSV),随机分成HSV组、atRA组和对照组(n=10),atRA组和对照组均体外培养14 d.atRA组:培养液中含atRA100μM;对照组:培养液中含同等量无水酒精(atRA溶剂).对HSV组及培养后的atRA组、对照组标本进行取材固定,Masson染色,免疫组化测定增殖细胞核抗原(PCNA)及TUNEL法检测平滑肌细胞凋亡,计算机图象分析仪测量血管内膜厚度、计算内膜增生指数及细胞增殖和凋亡百分比.结果体外培养人体大隐静脉能产生明显的内膜增生和平滑肌细胞增殖(P＜0.05);atRA组内膜厚度、增生指数及PCNA阳性细胞百分数均明显低于对照组(P＜0.05).而凋亡细胞百分数则明显高于对照组(P＜0.05).结论atRA可以抑制体外培养人体大隐静脉内膜增厚及平滑肌细胞增生,促进平滑肌细胞凋亡.
-
p38丝裂原活化蛋白激酶在低氧鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的表达
目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在低氧引起的鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用.方法 采用细胞培养方法,免疫印迹技术,流式细胞仪方法测定在低氧情况下p38 MAPK的表达及其细胞周期的变化.结果 低氧情况下细胞中p38 MAPK表达增加,细胞呈现增殖性变化.结论 p38 MAPK在低氧情况下参与了鼠肺动脉平滑肌细胞增殖,具有重要的病理生理学意义.
-
限食4周对大鼠骨骼肌收缩功能的影响及其机制
目的 探讨限食4周对大鼠比目鱼肌和趾长伸肌收缩功能的影响及其可能机制.方法 建立限食4周大鼠模型,麻醉下分离比目鱼肌和趾长伸肌,用电刺激法记录单次收缩、强直收缩和疲劳收缩张力;荧光素酶法测定骨骼肌三磷酸腺苷(ATP)含量以反映线粒体功能,并检测线粒体基因细胞色素C氧化酶亚型Ⅰ(COX Ⅰ)与核基因β-aetin拷贝数以反映线粒体生物合成;RT-PCR检测过氧化物酶增殖体受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)、核呼吸因子(NRF)基因转录;Western bloting检测5 '-一磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)磷酸化及一氧化氮合酶(NOS)表达.结果 与正常对照组比较,限食组大鼠比目鱼肌和趾长伸肌对电刺激诱导的单次收缩[(2.5±0.15)N/cm2 vs (1.24±0.12) N/cm2,(2.66±0.21) N/cm2 vs (1.69±0.17)N/cm2,P ＜0.05]、强直收缩[(10.43±0.36) N/cm2 vs(8.06±0.19) N/em2,(11.35±1.02) N/em2 vs(8.12±0.23) N/cm2,P ＜0.05]和疲劳收缩张力均明显增强,并伴随ATP含量[(34.82±4.31) nmol/mg protein vs(15.32±1.94) nmol/mg protein,(30.82±2.15)nmol/mg protein vs (12.32±0.97)nmol/mg protein,P＜0.05]和线粒体生物合成(2.75±0.20 vs 1.52±0.06,1.32±0.10 vs 0.84 ±0.11,P＜0.05)显著增加;限食4周还明显上调比目鱼肌中PGC-1、NRF基因转录和AMPK蛋白磷酸化,而对趾长伸肌无此作用;此外,限食还上调骨骼肌中NOS表达与活性以及NO含量.结论 限食4周明显增强大鼠比目鱼肌和趾长伸肌收缩功能,其机制可能与活化AMPK和NOS/NO通路、上调PGC-1α转录,促进线粒体生物合成与功能有关.
-
饥饿对大鼠骨骼肌收缩和心血管功能的影响
目的 观察不同时程的饥饿对大鼠骨骼肌收缩与心、血管功能的影响.方法 取成年雄性SD大鼠,制备不同时程的饥饿动物模型(实验分正常对照组、饥饿12h组、饥饿24 h组、饥饿48 h组);大鼠经过上述处理后,麻醉下迅速分离心脏、胸主动脉、比目鱼肌和趾长伸肌,并分别连接压力或张力换能器以及相应的实验装置和数据记录系统.心脏用Langendorff灌流,先记录左心室收缩压、舒张末期压和左室压力的变化速率(±dP/dt max)等心功能指标,再进行缺血-再灌注实验,并观测上述心功能指标的变化;用器官浴槽法检测血管环收缩与内皮依赖性舒张反应;用电刺激法分别检测比目鱼肌和趾长伸肌单次和强直收缩的大张力.结果 与正常对照组比较,饥饿24h和48 h均明显降低心脏收缩期左室内压上升的大变化速率(+dP/dt max,P＜0.01);在遭受心肌缺血再灌注后,饥饿48 h明显延长心脏复跳时间[(24.3 ±7.0)min vs(14.0±2.9) min,P＜0.05],并升高左心室平均舒张压和舒张期左室内压下降的大变化速度(-dP/dt max)(P＜0.05),但到再灌60 min恢复正常;饥饿48 h也增加离体血管环对低浓度乙酰胆碱(3×10-8 ACh)诱导的内皮依赖性舒张反应(P＜0.05),但不增加ACh诱导的大舒张反应,饥饿12～48 h均不影响血管环的收缩反应;饥饿48 h还增强比目鱼肌对电刺激诱导的强直收缩张力[(7.01±1.22) N/cm2 vs (5.50 ±0.75) N/cm2,P ＜0.05].结论 饥饿24 ～48 h对大鼠心脏功能有一定的抑制作用,但饥饿48 h增加ACh诱导血管内皮依赖性舒张反应的敏感性,并增强比目鱼肌对电刺激反应的收缩功能.
-
广州市低肌肉量老年人膳食现况调查
目的 了解广州市低肌肉量老年人膳食营养状况,为低肌肉量老年人合理膳食、预防肌肉衰减提供科学建议.方法 对参与补充乳清蛋白随机对照试验的低肌肉量老年人进行基线问卷调查,收集调查对象一般情况和体格测量资料,采用半定量79条目食物频率问卷调查参与者近1年的膳食情况.结果 共调查122名老年人,男性和女性各61人,平均年龄(71.3±3.8)岁;四肢骨骼肌质量指数(ASMI)男性为(6.39±0.47)、女性为(4.94±0.38).该人群膳食营养素日均摄入量与膳食营养素参考摄入量(DRIs)比较,男性和女性日均蛋白质、维生素E、维生素C和铁的摄入量均达到100％ DRIs;总能量日均摄入量基本达到80％ DRIs;钙的日均摄入量男性仅占DRIs的59.7％、女性占57.7％.蔬菜、畜禽肉日均摄入量男性依次为(344.3±150.3)、(100.2±67.8)g/d,女性依次为(352.9±154.1)、(79.8±49.4) g/d,均高于膳食指南推荐量;水果摄入量男性为(137.7±110.9) g/d、女性为(121.6±62.7) g/d,奶类摄入量男性为(45.6±60.6) g/d、女性为(61.0±69.0) g/d,豆类摄入量男性为(17.4±31.4) g/wk、女性为(17.1±33.8) g/wk,均低于膳食指南推荐量.结论 广州市低肌肉量老年人膳食蛋白质摄入基本充足,但奶类、豆类和水果摄入量不足,建议改善膳食结构以维持适宜的骨骼肌量.
-
碱性成纤维细胞生长因子对人脑动静脉畸形血管平滑肌细胞增殖和表达骨桥蛋白的影响
目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养的人脑动静脉畸形(CAVM)血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和表达骨桥蛋白的影响.方法:应用胶原酶消化法培养人CAVM的VSMC,MTT法检测VSMC的增殖,免疫印迹法检测VSMC骨桥蛋白的表达.结果:bFGF作用于VSMC后,细胞增殖活性明显增加.实验组骨桥蛋白的表达显著高于对照组(P＜0.05).结论:体外条件下,bFGF可以刺激CAVM的VSMC增殖,并能促进其表达骨桥蛋白.
-
血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂抑制动脉损伤后中膜平滑肌细胞血小板源性生长因子的表达及细胞迁徙
目的:研究球囊导管损伤后早期血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)拮抗剂对损伤后大鼠动脉中膜平滑肌细胞血小板源性生长因子(PDGF)的表达及细胞迁徙影响.方法:12周雄性Wistar大鼠颈动脉用球囊导管损伤,分成实验组和对照组,分别于术前2 d给予血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂CV-11974(5 mg·kg-1·d-1)和溶剂,术后2 d、3 d、5 d和14 d处死.用原位杂交、免疫组织化学和病理组织学进行研究.结果:实验组术后第2 d、3 d和5 d中膜平滑肌细胞PDGF-A mRNA和PDGF-A、PDGF B、PDGF-α(R)、β(R)阳性细胞率以及迁徙率明显低于对照组(P＜0.01).实验组的中膜平滑肌细胞表型处于收缩型.结论:血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂明显抑制损伤后动脉中膜平滑肌PDGF及其受体的表达和平滑肌迁徙.
-
2型糖尿病小鼠骨骼肌细胞葡萄糖转运因子4转位变化的研究
目的:探讨2型糖尿病小鼠的骨骼肌细胞的葡萄糖转运因子4(GLUT4)转位变化.方法:6-8周龄的雌性C57BL/6J小鼠随机分成对照组和2型糖尿病组,每组各12只.对照组小鼠给予正常鼠膳食16周.2型糖尿病组给予高脂高糖膳食16周.用超速蔗糖梯度离心方法分离细胞内膜和外膜的匀浆,用Western blotting方法检测两组大鼠骨骼肌细胞内、外膜GLUT4的蛋白水平.结果:两组的内、外膜GLUT4蛋白总量相近,经胰岛素刺激后,2型糖尿病小鼠骨骼肌细胞GLUT4从内膜向外膜转位少于对照组.结论:在非肥胖2型糖尿病鼠,是胰岛素刺激的骨骼肌细胞GLUT4的转位下降,而不是GLUT4数量的下降,导致了GLUT4的下调,这种下调可能是导致2型糖尿病骨骼肌胰岛素抵抗的分子机制之一.
-
银杏叶提取物对人血管平滑肌细胞Bcl-2蛋白表达的影响
目的:观察银杏叶提取物(Egb)对血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡相关蛋白Bcl-2的影响.方法:采用酶消化法结合组织贴块法培养胎儿主动脉VSMC.加不同浓度Egb干预不同时间段,形态学观察凋亡现象,流式细胞仪技术检测Bcl-2蛋白的表达量变化.结果:随着时间的延长,Egb浓度的增加,细胞表面Bcl-2蛋白表达率明显少于对照组.结论:Egb可以抑制VSMC凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,并且这一作用呈时间及浓度依赖性.
-
缓激肽和阿片受体在骨骼肌缺血预适应对心脏保护中的作用
目的:研究骨骼肌缺血预适应对心肌的保护作用,并探讨缓激肽(BK)和阿片受体在此机制中可能的作用.方法:采用非开胸法建立猪心脏缺血再灌注(I/R)模型,通过球囊堵塞左股动脉造成骨骼肌短暂缺血,分别使用BK的B2受体拮抗剂烟酸己可碱(HOE-140)、阿片受体拮抗剂纳洛酮及神经节阻滞剂六烃己胺进行干预,并于心脏I/R前左股动脉局部注射外源BK.以伊文思蓝和三硝基四氮唑红确定心肌缺血和梗死范围,观察各组梗死范围的差异.结果:远端预适应组(RP组)心肌梗死范围明显小于对照组(CONT组)(NZ/IZ: 24.1%±1.5% vs 51.1%±2.3%, P ＜0.05);预处理前分别使用HOE-140(32.3%±1.4% vs 24.1%±1.5%)或纳洛酮(38.5%±1.5% vs 24.1%±1.5%) 可部分阻断RP的心肌保护作用,且HOE-140和纳络酮联合使用,更进一步阻断这种保护(NZ/IZ: 46.6%±2.9% vs 24.1%±1.5%).I/R前局部给予外源BK注射,可模拟RP的心肌保护作用(39.2%±1.7% vs 51.1%±2.3%);而六烃己胺对RP心肌保护无影响.结论:骨骼肌RP对心肌产生保护.BK和阿片受体同时参与此保护,并且两者保护作用可以叠加;且此过程不依赖神经反射.
-
阿司匹林抗大鼠血管平滑肌细胞增生及与细胞周期的关系
目的:研究阿司匹林抑制大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增生与细胞周期的关系. 方法: 记数大鼠A10 VSMC在不同浓度阿司匹林处理下细胞增殖数量的变化,测定细胞培养液中乳酸脱氢酶活性以确定有无细胞毒性.用Western免疫印迹技术观察细胞周期中各类分子的变化. 结果: 阿司匹林抑制大鼠A10 VSMC增生,此作用非细胞毒性所致.阿司匹林使p21、p27、非磷酸化 p107和cyclin A 表达增加. 结论: 大剂量阿司匹林能够在体外抑制大鼠VSMC增生,与阻断细胞周期的进程有关,可能有益于血管增生性疾病的防治.
-
同型半胱氨酸对血管平滑肌细胞分泌金属蛋白酶组织抑制剂-1的影响
目的:观察同型半胱氨酸(Hcy)对血管平滑肌细胞(VSMCs)分泌金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的影响.方法:体外培养大鼠VSMCs,加入不同浓度的Hcy培养48 h,应用Western blot技术观察Hcy对VSMCs分泌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和TIMP-1的影响,并通过半定量RT-PCR方法观察TIMP-1 mRNA表达的变化.结果:Hcy减少VSMCs MMP-1的分泌,上调TIMP-1 mRNA的表达,使TIMP-1分泌增加,并呈剂量依赖效应.结论:提示Hcy减少胶原降解可能是致动脉粥样硬化的发病机制之一.
关键词： 高半胱氨酸 肌 平滑 血管 金属蛋白酶组织抑制剂 -
白介素10抑制晚期糖基化终产物诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖
目的:观察重组人白介素10(rhIL-10)对晚期糖基化终产物刺激下离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响.方法:体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,应用不同浓度的AGE分别刺激VSMCs并设立对照组进行比较,将不同剂量的rhIL-10与AGE共同作用并设立对照组进行比较,采用MTS/PES法确定血管平滑肌细胞的增殖程度.结果:与对照组相比,晚期糖基化终产物对血管平滑肌细胞增殖具有明显的刺激作用(P＜0.05).rhIL-10单独应用对血管平滑肌细胞生长没有影响(P＞0.05).在晚期糖基化终产物刺激下,rhIL-10可明显抑制血管平滑肌细胞的生长(P＜0.05).结论:结果提示rhIL-10可抑制晚期糖基化终产物诱导的血管平滑肌细胞增殖.
-
血管紧张素转换酶抑制剂抑制血管平滑肌细胞增殖的机制
目的: 探讨血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)抑制动脉平滑肌细胞增殖及向内膜迁徙的机理.方法: 球囊导管损伤Wistar大鼠颈总动脉,实验组于术前2d开始给与ACEI(temocapril-HCl 10 mg*kg-1*d-1),术后2 d、3 d、5 d分批处死.用抗人PDGF-A、-B及其受体,抗人MMP-1、MMP-9等抗体以ABC法行免疫染色.动脉组织行放射自显影乳剂原位酶谱分析.电镜下观察细胞质内小器官及细胞周围弹性、胶原纤维的密度.结果: 给ACEI后,PDGF及其受体、MMP-1、-9蛋白阳性细胞率及明胶酶活性显著降低,并抑制了中膜平滑肌细胞的表型转换.结论: ACEI可能通过继发地抑制PDGFs、MMPs蛋白表达,阻碍细胞表型转换,从而阻止中膜平滑肌细胞增殖及向内膜迁徙.
-
雌激素诱导胎儿血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-2分泌和活化
目的:探讨雌激素对胎儿血管平滑肌细胞(HVSMC)基质金属蛋白酶-2(MMP-2)分泌及其活化的影响.方法:分别以不同浓度的雌二醇与体外培养的HVSMC作用24 h,明胶酶谱法检测细胞培养上清液中明胶酶活性.结果:随着雌二醇剂量增加,MMP-2的酶原形式(pro-MMP-2) 和MMP-2活性形式逐渐增强.0.1 nmol/L、1 nmol/L、10 nmol/L、100 nmol/L雌二醇组pro-MMP-2分别比对照组高9.4%±8.2%(P＞0.05)、73.0%±13.7%(P＜0.05)、229.2%±42.2%(P＜0.01)、428.4%±72.3%(P＜0.01), MMP-2活性形式分别比对照组高39.8%±12.9%(P＞0.05)、 127.2%±20.4%(P＜0.01)、 428.4%±37.6%(P＜0.01)、 683.4%±50.9% (P＜0.01).结论: 雌二醇以剂量依赖性方式促进pro-MMP-2分泌和活化.
