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鼻息肉患者鼻息肉组织及鼻分泌物中白细胞介素-5的测定
目的：探讨鼻息肉患者鼻息肉组织及鼻分泌物中白细胞介素-5(IL-5)的含量。方法：采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定鼻分泌物及组织匀浆中IL\|5含量，用Bradford法测定组织匀浆总蛋白，研究对象为：31例鼻息肉患者，8例常年性变应性鼻炎，11例慢性鼻窦炎及6例健康人对照。结果：① 鼻息肉患者鼻息肉组织IL-5水平高于慢性鼻窦炎及健康人(P＜0.001)；② 鼻息肉患者与常年性变应性鼻炎患者鼻分泌物中IL-5水平均明显增高，其与慢性鼻窦炎及健康人比较，差异有显著意义(P＜0.05)；③ 在整体水平上(56例)和鼻息肉组内(31例)组织匀浆与鼻分泌物中IL-5含量的Pearson相关系数分别为0.70和0.66。结论：鼻息肉匀浆组织及鼻分泌物中IL-5含量明显升高，提示IL-5与鼻息肉有密切的关系，在鼻息肉的发病中起着较为关键的作用。
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p16和Cyclin D1表达与鼻咽癌发生的相关性
目的探讨p16和Cyclin D1(CD1)异常表达与鼻咽癌发生、发展的相关性.方法以免疫组化法,对60例鼻咽癌患者(25例治疗前已远处转移,13例放疗后远处转移,22例放疗后6年以上无瘤生存)治疗前的癌组织和22例非癌鼻咽部炎症组织,进行p16和CD1蛋白表达的检测.结果①癌组织中p16蛋白阴性表达与CD1蛋白阳性表达有显著相关性(P＜0.05);②炎症组织p16阴性表达和CD1阳性表达,均明显低于鼻咽癌各组治疗前组织(P＜0.01);③治疗前NPC组织的p16和CD1的异常表达,在治疗前远处转移组与治疗后远处转移组之间对比,在治疗后远处转移组与治疗后未发生转移组之间对比,差异均无显著性(P＞0.05);④鼻咽癌组织不同临床分期的p16和CD1表达异常的差异均无显著性(P＞0.05).结论p16与CD1蛋白异常表达与鼻咽癌的发生有关,均属于鼻咽癌发生的早期事件.这种异常表达可能与鼻咽癌的病情发展无明显相关性.
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猴实验性青光眼视乳头筛板细胞外基质免疫组化研究
目的 研究猴实验性青光眼视乳头筛板细胞外基质的改变，探讨眼压增高对筛板的影响。方法 用免疫过氧化物酶技术（ABC法）观察9只猴早、中、晚期青光眼模型筛板中，Ⅳ型胶原蛋白、层连接蛋白的分布。结果 与正常猴视乳头相比，早、中期青光眼模型视乳头筛板无明显变化。晚期青光眼视乳头筛板前区和筛板部Ⅳ型胶原蛋白和层连接蛋白阳性染色物明显增多，筛板后陷、重叠及融合。结论 青光眼病理过程中的眼压增高，可引起视乳头筛板细胞外基质发生特异性改变，从而使视乳头筛板的生物力学特性发生变化。
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唾液中丙型肝炎病毒抗体的检测及应用
目的探讨唾液中丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)抗体检测的可行性及其临床应用的意义.方法应用改进后的酶免疫技术,分别对86例患者外周血和唾液样品中的HCV抗体(抗-HCV)进行平行检测、对比分析.结果 86例患者中,外周血抗-HCV阳性29例,其中27例唾液检测抗-HCV也是阳性,另外2例为阴性;外周血抗-HCV阴性57例,其唾液检测也均为阴性.与外周血的检测结果相比,唾液样品中抗-HCV检测的灵敏度(93.1%,27/29)、特异性(100%,57/57)均较好.结论唾液中抗-HCV的检测可用于HCV感染的临床诊断和流行病学研究.
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梭曼抗体酶研究Ⅱ:"潜过渡态"半抗原设计策略及其在梭曼抗体酶研究中的应用
目的:探索用化学免疫方法防治梭曼中毒.方法:提出"潜过渡态"半抗原设计策略,并据此设计、合成了新型半抗原和人工抗原.结果:该新型半抗原可成功诱导具有类酶活性的催化梭曼水解的抗体酶;还发现了一种新型的磷酰酯交换反应.结论:实验证明了该半抗原设计策略的有效性.该半抗原设计策略还可能应用于能诱生催化磷(膦)酸二酯水解的抗体酶的半抗原设计,以及应用于有类似酯酶、酰胺酶、肽酶或核苷酸活性的抗体酶的研究.
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纳米磁粒子复合物标记对内皮祖细胞生物学特性影响的实验研究
目的 探讨超顺磁性纳米磁粒子复合物Fe2O3-多聚赖氨酸(PLL)标记外周血内皮祖细胞(EPCs)后对细胞生物学特性的影响,为标记细胞的体内外MRI提供实验基础.方法 合成Fe2O3-PLL复合物.分离兔外周血单个核细胞,贴壁法筛选出EPCs,25 mg/L的Fe2O3-PLL标记EPCs,普鲁士蓝染色、电子显微镜观察细胞内铁,四氮噻唑蓝(MTT)比色试验比较未标记、标记细胞间生长曲线的差异,流式细胞分析检测标记、未标记细胞的细胞周期变化、细胞凋亡、表面标记物表达情况,实时定量聚合酶链反应(PCR)检测标记、未标记细胞的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、KDR、血管性假血友病因子(vWF)基因在mRNA水平上的差异,激光共聚焦显微镜下观察并分析标记、未标记细胞的Ca2+浓度、膜流动性变化.实验所得数据,计量资料多组比较采用方差分析,两组间比较采用两样本t检验.结果 Fe2O3-PLL对细胞的标记率接近100%,铁颗粒位于细胞质内.25 mg/LFe2O3-PLL标记细胞,其生长曲线、细胞周期[G0-G1期为(93.74±3.52)%]、细胞凋亡[早期凋亡率为(12.89±1.81)%]与未标记细胞[细胞周期为(94.57±3.66)%,细胞凋亡率(11.67±1.18)%]相比,差异无统计学意义(t值分别为0.283、0.977、P值均>0.05);eNOS、KDR、vWF基因的相对表达量及CD34、CD106、CD146、KDR等细胞表面标记物的表达水平相比差异也无统计学意义(P值均>0.05);对Ca2+通道影响小,细胞膜流动性无明显变化.结论 25 mg/L的Fe2O3-PLL对兔外周血EPCs的标记率接近100%,并且对细胞的生物学特性无明显影响,可用于进一步MRl的研究.
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酶组织化学在肌活检中的应用
酶组织化学技术是研究神经肌肉疾病基本的重要手段之一,在神经肌肉疾病的诊断和分类上起决定性作用.笔者对骨骼肌的病理生理形态、组织化学和酶组织化学、常见肌酶和非酶组化染色原理及意义做一综述.
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全自动酶免分析仪检测HIV拖带阳性解决方法的探讨
目的 探讨全自动酶免分析仪检测人体免疫缺陷病毒(HIV)拖带阳性的解决办法.方法 收集常规筛查中的HIV抗体强阳性标本4份,分别在不使用外部清洗液和使用外部清洗液的情况下,用TECAN 150型4针全自动酶联免疫分析仪做阳性拖带模拟试验,观察增加外部清洗液在消除加样针拖带阳性中的作用及其对酶免试验的影响.结果 拖带模拟试验中,以CDS-C清洗液作为系统清洗液时,在不使用外部清洗液的情况下,HIV抗体强阳性标本4例都出现了阳性拖带现象.以CLEANER2000清洗液作为外部清洗液的情况下,HIV抗体均无阳性拖带孔出现,并且在使用CLEANER2000清洗液作为外部清洗液的情况下与无外部清洗液比较,HIV的质控品和对照品的实验结果差异无统计学意义(P > 0.05).结论 CLEANER2000清洗液作为外部冲洗液能够避免全自动酶免分析仪加样中HIV拖带阳性现象的发生,并且对酶免试验结果无显著影响.
关键词： 免疫酶技术 拖带阳性 CLEANER2000清洗液 影响 -
TRFIA定量检测HBV血清标志物的临床价值
目的 研究时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)在乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M)定量检测中的应用价值和HBV-DNA的表达水平与乙肝标志物的相互关系.方法 用TRFIA法和ELISA法同时检测178例HBV感染者和110例健康人血清中的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb,比较分析者两种方法的检测结果.对用TRFIA法检测的HBsAg和HBeAg浓度与FQ-PCR检测的HBV-DNA含量进行比较分析.结果 TrFIA法和ELISA法比较,前者五项HBV-M的阳性率均比后者高,P<0.05,有显著性差异.HBsAg和HBeAg的含量分别为随HBV-DNA含量的增加略有增加和显著增加.结论 用TrFIA检测HBV-M,灵敏度高、特异性强,在指导临床治疗、提高检测水平及监测等方面有很大的实用价值.FQ-PCR是测定HBV-DNA含量较为特异、灵敏的方法,能反映出乙肝病毒复制水平和活跃的程度.
关键词： 时间分辨荧光免疫分析技术 乙肝血清标志物 聚合酶链反应 免疫酶技术 定量检测 -
血浆ATⅡ、NPY、IGF-1和hs-CRP水平测定在评估冠心病患者严重程度中的应用价值
目的：探讨血浆血管紧张素Ⅱ（ATⅡ）、神经肽Y（NPY）、胰岛素样生长因子1（IGF-1）和高敏C反应蛋白（hs-CRP）水平测定在评估冠心病患者严重程度中的应用价值。方法采用放射免疫分析、酶免疫分析和高敏酶免疫分析法分别测定157例冠心病患者[包括51例稳定型心绞痛（SA）患者、45例不稳定型心绞痛（USA）患者和61例急性心肌梗死（AMI）患者]的血浆ATⅡ、NPY、IGF-1和hs-CRP水平，并与60名正常对照者进行对比分析。结果157例CHD患者血浆ATⅡ水平与60名正常对照者相比，差异有统计学意义（tSA ATⅡ=2．257，P＜0．05；tUSA ATⅡ=3．018，P＜0．01；tAMI ATⅡ=4．143，P＜0．001）；血浆NPY水平较正常对照者增高（tSA NPY=1．413，P＞0．05；tUSA NPY=2．148，P＜0．05；tAMI NPY=3．068，P＜0．01），但SA患者与正常对照者之间的差异无统计学意义；血浆IGF-1水平与正常对照者相比，差异有统计学意义（tSA IGF-1=2．121，P＜0．05；tUSA IGF-1=2．937，P＜0．01；tAMIIGF-1=4．217，P＜0．001）；血浆hs-CRP水平与正常对照者相比，差异有统计学意义（tSAhs-CRP=2．095，P＜0．05；tUSA hs-CRP=2．867，P＜0．01；tAMI hs-CRP=4．349，P＜0．001）。血浆ATⅡ、NPY、IGF-1和hs-CRP水平随着SA、USA和AMI患者的严重程度而增高。结论血浆ATⅡ、NPY、IGF-1和hs-CRP水平是判断冠心病患者严重程度的有价值指标，亦可以用于治疗后的随访。
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大鼠腹腔神经节中的γ-球蛋白样免疫反应神经元
近年来发现,在交感神经节中有许多肽类激素存在,如抑生长激素样肽存在于交感神经节的细胞中[1],脑啡肽样存在于一些主神经元中,肠血管活性肽样免疫活性纤维也在豚鼠的肠系膜下神经节中观察到[1,3].
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酶免疫法检测粪便中幽门螺杆菌特异性抗原
目的:探讨粪便中幽门螺杆菌(HP)特异性抗原(HpSA)酶免疫测定(EIA)法检测试验对Hp感染的诊断价值.方法:检测96例慢性胃炎及溃疡患者粪便HpSA,并以胃活检标本组织学检测为金标准,评价其诊断及治疗效果的价值.结果:EIA法检测敏感性88.9%,特异性95.2%,准确性91.7%,阳性预测值(PPV)92.6%,阴性预测值(NPV)91.3%,同组织学检测相比,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗有效组HpSA含量较治疗前明显下降(P＜0.01),无效组同治疗前相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论:EIA法检测HpSA具有较高的敏感性和特异性,且取材方便,患者无痛苦.适用于不适于做胃镜检查的患者,并有可能作为治疗监测的指标.
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鲁西南煤矿职工4 249例HBV血清学标志物分析
乙型肝炎病毒(HBV)在我国的感染率较高,达到8%～10%[1].HBV血清学标志物的监测是临床诊断、治疗、分析和判断感染者病程及传染性的重要依据.
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520名新战士血清刚地弓形虫抗体调查
弓形虫病是一种由刚地弓形虫所引起的人畜共患寄生虫病,呈世界性流行,目前我国的调查发现其发病率也比较高,有的地方可达10%以上,特别是以猪、猫、绵羊作为主要的传染源,具有重要的流行病学意义,人作为中间宿主,与这些感染有密切关系.为了解某部来自全国520名新战士弓形虫感染情况,本研究对其进行了血清弓形虫抗体调查,发现有部分人血清特异性抗体增高,其结果报告如下.
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小巨核酶标染色在血液病中的鉴别诊断意义
小巨核细胞是一种病态的巨核细胞,可存在于多种血液病的骨髓中,是骨髓病态造血的主要特征之一.小巨核细胞用常规瑞氏染色,在普通光学显微镜下很难识别,导致其检出率低而限制了其在血液病鉴别诊断中的应用.
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微粒子化学发光酶免疫法与放免法测定促甲状腺激素的临床价值比较
目的为了比较微粒子化学发光酶免疫法(chemiluminescent immunoassay,CLIA)及放射免疫法(radiomunoassay,RIA)用于评价甲状腺功能的临床价值.方法分别采用这两种方法对50例正常人(对照组)、50例甲状腺性甲亢患者(甲亢组)及50例原发性甲减患者(甲减组)进行促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、FT3、FT4、TT3、TT4等测定.结果用CLIA测定sTSH甲亢患者与对照组比较具显著性差异,而用RIA测TSH则甲亢与对照组没有差别.对甲减患者,sTSH、TSH与对照组比较均具显著性差异.结论表明CLIA测sTSH对甲状腺性甲亢诊断更具有临床价值.
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甲状腺滤泡性肿瘤中核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达与临床意义
目的 研究核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体7(peroxisome proliferator-activated receptor γ,PPAR γ)在甲状腺滤泡性肿瘤中表达及其与病变的关系.方法 分别应用免疫组化方法及原位杂交方法检测42例原发性甲状腺滤泡性肿瘤(滤泡性腺癌19例,腺瘤23例)标本中PPAR 7蛋白及tuRNA表达.结果 PPAR γ蛋白及PPAR TmRNA在甲状腺滤泡性腺癌表达与甲状腺滤泡性腺瘤的表达差异无统计学意义,11例vs 8例(P＞0.05).PPAR γ蛋白在无肿瘤转移、低预后指数的甲状腺滤泡性腺癌表达阳性率升高,7例vs 4例,6例vs 5例(均P＜0.05),PPAR γmRNA在无转移甲状腺滤泡性腺癌表达阳性率增高,7例vs 5例(P＜0.05).PPARγ蛋白和PPARγmRNA表达水平呈显著正相关(rs=0.771,P=0.000).结论 检测PPAR γ蛋白及PPAR TmRNA水平可能是判断甲状腺癌预后的观测指标.
关键词： 甲状腺肿瘤 过氧化物酶体增殖物激活受体 免疫酶技术 -
测定低水平血清乙肝病毒表面抗原及其临床意义
目的 了解测定低水平血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人群分布及相关乙肝病毒血清标志物模式特征.方法 微粒子酶免疫分析技术测定6 186例非肝炎病区住院患者血清HBsAg及表面抗体(抗-HBs )、乙肝病毒e抗原及e抗体(HBeAg、抗-HBe)和乙肝病毒核心抗体(抗-HBc),根据定值参比血清和样本的HBsAg荧光速率值/阴性对照荧光速率值的比值(S/N值),并结合中和试验结果,确定浓度在5μg/L以下的HBsAg阳性例数,并分析相关乙肝病毒(HBV)血清标志物模式.结果 共检出HBsAg阳性626例,HBsAg浓度在5μg/L以下的有158例,占总数的2.55%,占HBsAg阳性人群的25.24%.其中,HBsAg浓度在1μg/L以下的有71例(44.94%);1～2μg/L的有26例(16.46%);2～5μg/L的有61例(38.60%).对上述低水平HBsAg人群的5项HBV血清标志物检测获得8种模式,以"HBsAg、抗-HBc、抗-HBe阳性","HBeAg和抗-HBs阴性"模式为主(74.60%);累计HBsAg和抗-HBc同时阳性者占94.17%;HBsAg与抗-HHs同时阳性只出现在HBsAg 1μg/L以下人群中(6.45%).结论 低水平血清HBsAg人群不容忽视,提高HBsAg检测灵敏度有重要意义;同时检测相关HBV血清标志物,对于确定上述人群有帮助.
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大量吸烟对喉鳞状细胞癌组织中p27基因、VEGF、bFGF及微血管密度的影响
目的探讨大量吸烟对喉鳞状细胞癌组织中p27基因、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)表达和肿瘤内微血管密度(intratumoral microvessel density, IMVD)的影响.方法采用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术,检测45例喉鳞状细胞癌组织中p27、bFGF、VEGF表达,并用抗FⅧ因子抗体标记癌组织血管内皮细胞,计算IMVD,并将其以是否大量吸烟分为2组,进行对比分析.结果大量吸烟组与非大量吸烟组比较,p27呈低表达(P<0.05),VEGF呈高表达(P<0.01),IMVD数目增加(P<0.05),bFGF表达无显著性差异(P>0.05); p27与bFGF表达呈负相关(r=-0.49,P<0.01), bFGF与IMVD呈正相关(r=0.72,P<0.01).结论大量吸烟影响鳞状细胞癌组织p27,VEGF表达及肿瘤血管的形成.
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脑梗死急性期性激素水平的动态研究
目的探讨性激素水平与脑梗死之间的关系.方法受试者分为6组,脑梗死男性组,女性组;其他中枢神经疾病男性组,女性组;健康对照男性组,女性组.每组均为24例,年龄50～70岁.分别于病后24 h 和15 d测定各组受试者血清中雌二醇、孕激素、睾酮和催乳素.结果脑梗死组男性血清孕激素、催乳素在病后24 h明显升高,与疾病对照组及正常对照组比较有显著性差异(P＜0.05);男性雌二醇、睾酮在4组中比较均无显著性差异(P＞0.05).脑梗死组女性雌激素水平低于疾病和正常对照组(P＜0.05);其他性激素水平在4组间无显著性差异(P＞0.05).结论性激素水平与脑梗死间存在着一定关系,女性雌激素水平下降是导致血栓形成的1个可能因素.
