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三种方法检测抗双链DNA抗体的比较及临床意义
目的 利用绿蝇短膜虫间接免疫荧光法(CL-ⅡF)、欧蒙酶免疫斑点法、胶体金快速斑点法3种方法单独及不同组合联合检测抗双链DNA(ds-DNA)抗体的比较,了解3种方法联合检测在系统性红斑狼疮(SLE)中的诊断及临床应用价值.方法 120例SLE患者分为疾病活动组和疾病稳定组,另选择121例疾病对照(干燥综合征35例、混合性结缔组织病30例、类风湿关节炎38例、系统性硬化症18例患者血清)、40例健康患者血清对照,利用3种方法检测其血清中抗ds-DNA抗体,了解检测的敏感性和特异性,并寻找对临床有价值的联合检测方法.结果 CL-ⅡF法、欧蒙酶免疫斑点法、胶体金快速斑点法在SLE中的敏感性分别为45.8%、42.5%、47.5%,均明显高于疾病对照组及健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);在检测SLE疾病活动组抗ds-DNA抗体中,3种方法敏感性分别为65.2%、58.3%、61.1%,而在疾病稳定组中敏感性分别为16.6%、18.7%、27.0%,差异有统计学意义(P＜0.01);3种方法的联合检测可以明显提高抗ds-DNA抗体在SLE中的检出率,而特异性仍然很高.结论 3种方法检测SLE中的抗ds-DNA抗体均具有很高特异性,但敏感性略低,尤其在疾病稳定期中,而3种方法间的联合检测则可以弥补敏感性低的不足,尤其是CL-ⅡF法和胶体金快速斑点法的组合更适合临床应用.
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酶标仪快速检测Rh-D阴性血型的方法研究
目的建立一套快速、高效的Rh-D阴性血型鉴定方法,用于血站系统大批量Rh-D定型实验,以便达到快速、准确、高效检测的目的.方法采用全自动样品处理仪完成对待检红细胞的稀释、分配及加入抗-D试剂的全过程.采用酶标仪在620nm波长条件下进行批量比色判读结果.结果利用酶标仪快速检测,在血球稀释浓度为1∶8、Rh检测试剂稀释度为1∶16时,对13 800份标本进行检测,结果符合率为100%.结论酶标仪快速检测Rh-D阴性血型的方法操作简单、快捷,精确性、重复性较好,对于减少血站系统检验人员工作强度、提高工作质量有较大帮助.
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维生素D代谢及25-羟基维生素D测定方法研究进展
功能性的维生素D主要包括维生素D3和维生素D2.维生素D除了具有传统意义上的骨骼效应,它还有着广泛的非骨骼效应,与心血管疾病、免疫疾病、糖尿病、肿瘤等疾病密切相关.25-羟基维生素D(25OHD)测定是衡量维生素D营养状态的佳指标.根据测定原理不同,目前25OHD的测定方法可分为多种,液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)具有特异性强、准确性高的特点,被认为是评价维生素D营养状况的"金标准"测定法.
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血清中血管紧张素转换酶测定的临床应用
血管紧张素转换酶(ACE)是一种二肽羧肽酶,主要分布在肺泡毛细血管内皮表面,其主要作用是水解血管紧张素Ⅰ(Ang Ⅰ)转化成血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ).现对其结构、测定方法、临床应用等方面作一介绍.
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甲状腺球蛋白抗体和微粒体抗体定量检测在自身免疫性甲状腺炎诊断中的应用
目的 探讨甲状腺球蛋白抗体(TGAb)和甲状腺微粒体抗体(TMAb)定量检测在自身免疫性甲状腺炎诊断中的应用.方法 对219例甲状腺肿大患者和500例正常血清用酶免疫法(EIA)定量检测甲状腺球蛋白抗体和甲状腺微粒体抗体.结果 甲状腺肿大患者TGAb和TMAb定量检测结果分别为(295±648)IU/mL和(309±536)IU/mL,检出率分别为61%(134/219)和62%(136/219),经过2种抗体的检测,后有126例确诊为自身免疫性甲状腺炎(AITT).500例健康对照TGAb和TMAb定量检测分别为(9±4)IU/mL和(14±6)IU/mL.结论 EIA定量检测血清TGAb和TMAb操作简便,结果准确,符合临床常规使用要求,对自身免疫性甲状腺炎的诊断、疗效观察具有重要临床应用价值.
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过敏原体外检测1598例变应性疾病患者血清IgE的研究
目的 了解广东省东莞地区变应性疾病患者特异性过敏原及血清IgE水平变化,为临床提供诊疗依据.方法 采用体外定性酶免疫分析法对1 598例变应性疾病患者血清进行吸入物与食入物过敏原检测,同时检测总IgE水平.结果 1 598例变应性疾病患者中血清总IgE阳性1 480例,总阳性率为92.6%,其中以荨麻疹患者高(96.8%).吸入物过敏原以尘螨、粉螨、屋尘高(19.5%),其次为蟑螂、飞蛾、蜜蜂(14.4%);食入物过敏原以草菇、冬菇、金针菇高(11.7%),其次为虾、蟹、扇贝、干贝等(10.1%).结论 尘螨、粉螨、屋尘、草菇、冬菇、金针菇等为广东省东莞地区变应性疾病患者主要过敏原.明确过敏原后对特异性免疫治疗具有重要指导意义.
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56例女性系统性红斑狼疮患者血清肿瘤标志物检测分析
较健康对照组增高,可能与器官受累有关.
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170例小儿常见过敏原分析
目的 探讨食物性及吸入性过敏原在小儿常见过敏性疾病中的意义.方法 采用酶免疫分析法对170例患儿进行血清特异性免疫球蛋白E检测.结果 170例患者中有150例在伞部14项过敏原中至少1项出现阳性反应,总阳性率为88.0%;在吸入性过敏原中以尘螨和粉螨阳性率高(54.7%).在食物组中,以牛肉、羊肉、鸡肉的阳性率高(20.6%).结论 通过血清过敏原检测找出引起病症的过敏原(吸入性和食物性),指导患儿减少对变应原的暴露,对更有效地解决过敏患者的病痛有着极其重要的意义.
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胶体金免疫层析试验的室内质量控制探讨
目的 通过对胶体金粪便隐血试验(FOB)室内质量控制的研究,探讨胶体金免疫层析试验(GICA)的室内质量控制.方法 用递减稀释血红蛋白的方法找到胶体金粪便隐血测试条的弱阳性检测浓度(或称下限质控液),然后配制出上限质控液、下限质控液、阴性质控液,再用这些质控液在临床工作中开展胶体金粪便隐血试验的室内质量控制.结果 FOB的室内质量控制开展两年,有效地监控了胶体金试条的质量变化和检验过程中各种因素对检验结果的影响.结论 通过自配多浓度的质控液,可以比较有效地开展胶体金免疫层析试验的室内质量控制工作.
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胶体金免疫层析试验的室内质量控制探讨
目的 通过对胶体金粪便隐血试验(FOB)室内质量控制的研究,探讨胶体金免疫层析试验(GICA)的室内质量控制.方法 用递减稀释血红蛋白的方法找到胶体金粪便隐血测试条的弱阳性检测浓度(或称检测下限、临界浓度),然后配制出上限质控液、下限质控液、阴性质控液,再用这些质控液在临床工作中开展胶体金粪便隐血试验的室内质量控制.结果 胶体金粪便隐血试验的室内质量控制开展2年,有效地监控了胶体金试条的质量变化和检验过程中各种因素对检验结果的影响.结论 通过自配多浓度的质控液,可以比较有效地开展胶体金免疫层析试验的室内质量控制工作.
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献血员丙型肝炎病毒抗体酶免疫法检测试剂的测量值与其真阳性的相关性
目的研究丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)酶免疫试验(EIA)检测试剂测量值/阳性判定值之比值(S/CO值)与真阳性的相关性,以确定预示≥95%真阳性的S/CO值. 方法对采自北京、广州、杭州、昆明、乌鲁木齐等城市抗-HCV EIA初筛阳性的献血员标本159份,用强胜傲拓临床诊断有限公司试剂(Ortho)及6种国产抗-HCV EIA试剂(北京华大吉比爱生物技术有限公司,简称华大吉比爱;北京金伟凯医学生物技术有限公司,简称金伟凯;河南华美生物工程有限公司,简称华美;上海实业科华生物技术有限公司,简称科华;厦门英科新创科技有限公司,简称英科新创;北京万泰生物药业有限公司,简称万泰)双孔复检,并用Chiron公司的 Procleix HIV-1/HCV检测系统进行HCV RNA核酸扩增检测(NAT),NAT阴性标本再用Chiron第三代重组免疫斑点试验(RIBA 3.0)检测.HCV RNA或RIBA 3.0阳性者判为真阳性,分析S/CO值与真阳性的相关性. 结果 7种抗-HCV EIA试剂的S/CO值均与真阳性明显相关,Ortho S/CO≥3.8时,真阳性的预测值为96.1%,华大吉比爱S/CO≥7.0为96.1%,金伟凯S/CO≥10.0为96.1%,华美S/CO≥6.0为97.3%,科华S/CO≥10.0为96.0%,英科新创S/CO≥8.6为96.1%,万泰S/CO≥14.0为96.0%. 结论抗-HCV EIA试剂的S/CO值与真阳性明显相关,预示95%真阳性的S/CO值分别为Ortho≥3.8,华大吉比爱S/CO≥7.0,金伟凯S/CO≥10.0,华美S/CO≥6.0,科华S/CO≥10.0,英科新创S/CO≥8.6,万泰S/CO≥14.0.
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酶法测定血清肌酐参考值的验证及估算肾小球滤过率的应用
目的：观察宜宾市健康人群酶法测定血清肌酐（Scr ）是否存在性别、年龄及地区差异，建立本地区的参考区间。方法选择宜宾市3家使用酶法测定Scr的实验室，采用同一厂商试剂和校准品与日立7600-020型和7810型生化仪组成的检测系统，对入选的健康者血清进行酶法Scr测定，通过进行不同性别、年龄的分组，对Scr水平进行统计，验证各组的参考区间是否存在差异，同时验证基于酶法Scr测定结果估算肾小球滤过率（eGFR）的MDRD方程和CKD-EPI方程的适用性。结果 Scr男性：青年组（75．59±12．45）μmol/L ，中年组（75．52±13．72）μmol/L ，老年组（82．83±18．83）μmol/L。女性：青年组（55．96±10．63）μmol/L ，中年组（59．91±14．17）μmol/L ，老年组（68．30±19．59），比较结果显示：男、女对应年龄段组间差异有统计学意义（P＜0．01）。男性老年组与中年组，女性3个年龄组间差异均有统计学意义（P＜0．05）；其参考区间需要按性别和年龄段分组：男性，17～60岁：48．6～102．9μmol/L ；61～80岁：43．9～117．7μmol/L。女性，17～40岁：35．1～76．8μmol/L ；41～60岁：32．1～87．7μmol/L ；61～80岁：29．9～106．7μmol/L。对两个GFR估算结果显示，CKD-EPI方程估算GFR（eGFR）更符合实际情况。结论该厂商生产的试剂和校准品与日立7600-020和718型生化仪组成的检测系统，对入选的健康者进行酶法血清C r的测定，其血清Cr水平的参考区间在男、女组和男、女各年龄组之间均存在差异，酶法测定的血清Cr估算GFR ，CKD-EPI方程更适用。
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解脲脲原体免疫血清的制备和应用
目的探讨快速检测解脲脲原体(UU)的免疫学方法.方法用处理的临床分离株作为免疫原,免疫家兔制备UU免疫血清,以自制UU免疫血清作为第一抗体,用亲和素-生物素-酶复合物法(ABC法)检测了63例临床标本.结果 UU免疫血清的代谢抑制效价为1:640,ABC法检测临床标本的阳性率为54%,其结果与培养法比较,差异无显著意义(P＞0.05).结论 ABC法可作为快速检测UU的方法.
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时间分辨荧光免疫分析检测乙肝病毒血清学标志物的临床评价
目的对时间分辨荧光免疫技术(TRFIA)定量检测乙型肝炎病毒(HBV)五个血清学标志物进行临床评价.方法用TRFIA法和酶免法(EIA)对定值样品和296份临床标本同时测定,对二种方法的结果进行比较分析.结果 TRFIA检测HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe和抗HBc的灵敏度分别为0.2ng/ml、10mIU/ml、0.05Ncu/ml、2Ncu/ml和0.2Ncu/ml;对296份临床血清测定,除HBeAg外,其余4个指标检测阳性率均大于EIA,两个高浓度HBsAg血清EIA法阴性,但TRFIA为阳性.结论 TRFIA较EIA更为敏感;TRFIA在一定程度上可克服EIA法中的高剂量钩状效应.
关键词： 时间分辨荧光免疫技术 免疫酶技术 乙型肝炎血清标志物 -
检测血吸虫循环抗原酶免疫试剂标准化平台技术建设及应用
目的研制标准化的血吸虫循环抗原(SCAg)酶免疫法检测试剂,建立规模化生产能力.方法通过体外培养及分子筛液相色谱获取虫源性及虫卵源性SCAg,用免疫增强剂和淋巴结内免疫法制备高效、特异抗SCAg的捕捉抗体,应用半抗原抗体桥放大技术制备高灵敏度SCAg识别探针,通过抗氧化剂及螯合剂比较研究制备稳定的底物系统,按医学决定水平确定免疫学质量控制标准及参考,优选原材料质量,规范生产工艺,研究制定反应体系的标准化,建立SCAg快速研发的技术平台.结果 TCA提取的SCAg测出低含量为1 ng/ml(10-9g),对实验高感染(1 000±10条尾蚴)家兔混合血清检测的终点滴度可达1∶ 1 280以上,有效诊断率为96.29%,研制的SCAg试剂的批内变异4.69%7.66%,批间变异4.12%7.19%,一年内同批试剂分次对定值血清测定OD值变化小于10%,显示一年内为有效期.通过SCAg技术平台,进一步研究开发了囊尾蚴CAg、弓形体CAg的检测方法,初步实验观察对囊尾蚴囊液及感染弓形体5 d的小鼠腹水抗原检测滴度分别达到1∶ 640及1∶ 1 280. 结论 SCAg标准化平台技术可大量地、快速地提供标准化的血吸虫病诊断试剂,对其他寄生虫CAg检测显示有较好的应用前景.
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胶体金免疫层析法检测乙肝病毒血清标志物的临床评价
目的:对胶体金免疫层析(GICA)试条检测乙型肝炎病毒五个血清标志物进行临床评价,为试剂改良和实验室选用提供参考.方法:用GICA法和酶疫(EIA)法对定值样品和388份临床血清标本同时测定,对二种方法的结果进行比较分析.结果:除HBsAg外,其余4个指标在阴阳交界附近,GICA法较易出现假性结果,两个高浓度HBsAg血清EIA阴性,但GICA阳性.结论:GICA与EIA法一致性较好;用于献血员筛选时必须与EIA结合用;GICA在一定程度上可克服EIA法中的高剂量钩状效应.
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β-HCG、AFU对原发性肝细胞癌诊断价值
目的 评估人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)联合检测对原发性肝细胞癌(PHC)的诊断价值.方法 应用微粒子酶免发光技术(MEIA)测定40例PHC,20例肝硬化和20例健康志愿者血清中β-HCG、AFU、甲胎蛋白(AFP)、糖链抗原19-9(CA19-9)、糖链抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)等6种PHC癌性标志物.结果 PHC患者上述6种指标与肝硬化组和正常人组比较显著增高(P＜0.05),Ⅰ期PHC的β-HCG、AFU和AFP与Ⅱ、Ⅲ期PHC相比,变化无显著性.结论 检测β-HCG、AFU有助于发现AFP阴性肝癌,两者联合检测可望提高PHC早期诊断率.
关键词： β-绒毛膜促性腺激素 岩藻糖苷酶 肿瘤标记 原发性肝细胞癌 免疫酶技术 -
儿童幽门螺杆菌感染调查
目的:对儿童幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染进行流行病学调查.方法: 对我院儿科体检、门诊及住院的＜12岁儿童共198例进行9项流行因素的问卷调查并借助金标免疫斑点法进行血清学Hp-IgM,Hp-IgG检测.结果: IgM或(和)IgG,总体平均阳性率79.8%(158/198),IgM,IgG的阳性率分别为45.9%,67.8%,＜1岁的婴儿即可发生Hp感染(IgM阳性),3～5岁与6～8岁两组阳性率相对较高,但两组差异无显著性(P＞0.05);6岁以后阳性率开始下降,与6岁前比较,差异有显著性(P＜0.05).结论: 吃零食是儿童幽门螺杆菌感染的重要流行因素.
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CA199及CA242在大肠癌患者血清和组织中表达的意义
目的:探讨CA199,CA242在大肠癌患者血清和组织中表达的意义.方法:用酶联免疫方法测定41例大肠癌患者和25例健康对照者血清CA199和CA242含量;对41例术后癌组织,28例直肠癌下3 cm组织及30例正常对照组织CA199和CA242进行组织化学检测.结果:大肠癌患者血清CA199和CA242含量分别为(48.83±38.75)U/ml和(39.68±34.58)U/ml,阳性率分别为41%和63%,明显高于对照组(P＜0.01).联合检测CA199,CA242时阳性率为78%.DukesC-D期患者血清中CA199与CA242含量分别为(66.63±46.03)U/ml和(52.11+41.35)U/ml,阳性率分别为58%和84%,也显著高于DukesA-B期的(34.32±23.83)U/ml和(28.95±23.50)U/ml及27%和45%,P＜0.05.血清CA199,CA242阳性率和增高程度与大肠癌Dukes分期呈正比,与年龄、性别、肿瘤部位无关;CA199和CA242在大肠癌组织中检测的总阳性率分别为73%和66%,联合检测的阳性率为80%.大肠癌组织CA199和CA242的阳性率明显高于肿瘤下3 cm肠组织和正常组织(P＜0.05),DukesC-D期患者癌组织CA199和CA242的阳性率为95%和84%,均显著高于DukesA-B期(CA199:55%,P＜0.01;CA242:50%,P＜0.05).结论:单独检测血清CA199或CA242时,阳性率偏低,而联合检测可明显提高阳性率.血清与组织CA199、CA242阳性率与Dukes分期均呈正相关,对了解肿瘤进展和分期有参考价值.
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免疫组化法检测HBsAg阴性乙型肝炎病毒感染的应用价值
目的:探讨免疫组化法在HBsAg阴性乙型肝炎患者中的应用.方法:应用免疫组化法中的抗生物素-生物素-过氧化物酶法(ABC法),检测19例HBV血清标志物阴性的肝炎患者.结果:19例患者中有2例在肝组织可查到HBsAg.结论:HBV感染中血清标志物阴性的人群不容忽视,免疫组化法可作为有效的检测手段.
