首页 > 文献资料
-
不同时期卡介苗免疫治疗对结核病大鼠疗效和CD4+CD8+双阳(DP)T细胞的影响
目的 探讨不同时期给予卡介苗(BCG)免疫治疗对结核病化疗效果和T细胞严群的影响.方法 80只PPD皮试阴性SD大鼠随机分成(1)化疗开始同步加BCG治疗组;(2)化疗1月后加BCG治疗组;(3)单纯化疗对照组;(4)模型效果判断组.各组于实验开始接受结核杆菌(Mtb)攻毒;第1个月末处死模型效果判断组全部大鼠作病理学和结核杆菌细菌学检查,其他各组于第1个月末接受抗结核化疗,其中第1组化疗开始加用BCG治疗,第2组化疗1个月后加用BCG治疗.观察各组大鼠死亡率;检测各组大鼠于Mtb攻毒前和Mtb攻毒后1、2、3、5个月末的外周血中CD3+、CD4+、CD8+、DPT细胞含量,第2、5个月末加查淋巴细胞绝对计数.结果 (1)Mtb感染后1个月内1、3、4组各死亡2只大鼠,第2组死亡1只大鼠.化疗开始后4个月治疗期死亡率:化疗一开始即同步加BCG治疗组22.2%(4/18)高于化疗1月后加BCG治疗组(0/19),P＜0.05;化疗对照组为5.6%(1/18),(2)结核病鼠表现为CD4/CD8比值(可伴CD4+细胞)降低、CD8+(可伴DP)细胞升高,P＜0.05或P＜0.01;这种改变可在化疗后1～2个月内恢复到接近正常水平.(3)化疗开始同步加用BCG组治疗1个月时表现为T淋巴细胞(CD3+)、CD4+T细胞百分率显著降低,而淋巴细胞绝对计数和CD8+、DPT细胞百分率升高,P＜0.05或P＜0.01;治疗2个月后CD3+、CD4+T细胞恢复到正常范围而仍保持CD8+、DPT细胞较高水平.(4)化疗1个月后再加用BCG组在加用BCG后表现为CD3+、CD4+细胞百分率不降低而CD8+、DP细胞升高.结论 淋巴细胞总数显著升高而T细胞占总淋巴细胞百分率显著降低是化疗开始同步加BCG治疗组第一个月死亡率升高的一个重要免疫学特征.DP细胞是抗结核保护性免疫相关细胞.BCG作结核病的免疫治疗应在化疗1个月后开始.
-
卡介苗免疫治疗应用基础与临床研究进展
自从Robert Koch使用Mtb培养滤液疫苗(旧结核菌素)治疗人类结核病出现"郭霍现象"( Koch phenomenon)、许多患者临床表现恶化、少数患者死亡之后,结核病疫苗治疗研究受到重创,直到化疗药物的出现人们仍然未找到有效的免疫治疗方法.化疗药物的治疗效果和结核病控制策略的成功曾经使人们欣喜若狂,但20世纪80年代后结核病低流行率的西方国家结核病重新抬头和上升,随后全球耐多药结核病和广泛耐药结核病流行形势严峻[1],人们发现,化疗和管理还不能解决结核病治疗的全部问题,结核病的免疫治疗再次成为人们研究的热点[ 2].卡介苗(BCG)曾在人类抗结核病的斗争中发挥了重要的免疫保护作用,至今仍是我国预防儿童结核病的重要武器之一.由于BCG在结核病预防中的肯定作用[1-4],笔者从1988年以来一直致力于结核病化疗同时加用BCG免疫治疗研究.
-
儿童结核治疗失败原因分析
目的:探讨儿童结核治疗失败的原因所在.方法:回顾性分析248例儿童结核患者的临床资料,分为治疗成功和治疗失败两组进行分析对比.结果:248例儿童结核患者满疗程后治疗成功187例(75.4%),失败61例(24.6%),肺结核的治愈率为96.0%,肺外结核的治愈率54.8%.PPD≥10 mm(χ2=16.340,P=0.000)、痰结核菌涂片和/或培养阳性(χ2= 6.073,P=0.014)多见于较大儿童组,未接种卡介苗多见于较小儿童组(χ2=10.811,P=0.001).经多元LOgistic回归分析,痰结核菌阳性[OR=1.1 61(95%CI=0.271-4.845)]、未接种卡介苗[OR=1.092(95%CI=0.850-4.934)1、肺外结核[OR=2.775(95%CI=0.477-8.791)]是与治疗失败有关的独立因素.结论:痰结核菌阳性、未接种卡介苗、肺外结核易导致治疗失败.儿童结核治疗疗程至少6个月以上,并建议给予全程DOT.国家结核病控制规划应包含预防接种计划的监督执行,以确保卡介苗接种100%的覆盖率.对疑似肺外结核的儿童及时给予经验性抗结核治疗也是减少治疗失败的重要措施.
-
卡介苗免疫对大鼠抗结核发病和T淋巴细胞亚群的影响
目的 探讨卡介苗(BCG)对大鼠结核感染及CD4+ CD8+双阳(DP)T细胞的影响.方法 60只结核菌素纯化蛋白衍生物(PPD)皮试阴性SD大鼠随机分成:①BCG免疫组;②BCG免疫后结核分枝杆菌(Mtb)攻击(BCG-TB)组;③Mtb攻击后不化疗(TB)组.BCG组、BCG-TB组于观察开始接种BCG.BCG-TB组、TB组于3个月末接受Mtb攻击.比较全部大鼠接种Mtb后的死亡率;实验开始和其后3、4、5、6、8个月末检测外周血中T细胞亚群.结果 BCG组、BCG-TB组无死亡;TB组感染后5个月内死亡率45%(9/20).TB组死亡率高于BCG组和BCG-TB组,P＜0.01.实验开始时3个组组间对应参数比较差异均无统计学意义(P＞0.05);3个月末BCG组、BCG-TB组之间各对应参数比较差异均无统计学意义(P＞0.05);BCG组和BCG-TB组第3个月末与接种前比较,CD8+、DP升高,且显著高于TB组(Mtb干预之前),P＜0.01或P＜0.05.BCG组DP细胞于接种BCG后第6个月后开始回落,但仍显著高于接种前;BCG-TB组于Mtb攻击1个月后CD8+、DP继续升高,观察的第8个月CD8+、DP回落,但仍显著高于BCG接种前;TB组Mtb攻击后1个月末CD8+、DP有升高但低于BCG组和BCG-TB组,同时伴有CD3+、CD4+降低,差异均有统计学意义,P＜0.05或P＜0.01,此后维持在相近水平.Mtb攻击2个月末BCG-TB组DP高于BCG组和TB组,P＜0.05或P＜0.01.Mtb攻击5个月后,3个组间DP差异无统计学意义(P＞0.05).结论 BCG预防接种可保护Mtb感染宿主免于发病和死亡,增强抗结核保护性细胞免疫力表现之一为DP细胞升高,DP细胞是抗结核保护性免疫相关T细胞.DP细胞的形成与CD4+ SP细胞上CD8+抗原表达有关.
关键词： 结核病 细胞免疫学 CD4+CD8+双阳(DP)T细胞 BCG -
恶性疟原虫FCC-1/HN株裂殖子表面抗原2(MSA-2)基因在卡介苗BCG中的表达
目的:裂殖子表面抗原2基因(Merozoite surface antigen 2,MSA2)是恶性疟原虫的一种保护性抗原,为研究其重组BCG疫苗的保护作用,首先探讨携带有恶性疟原虫FCC-1/HN株MSA2基因的重组分枝杆菌-大肠杆菌穿梭质粒pBCG/MSA2在卡介苗(Bacillus Calmette Guerin,BCG)中的表达情况.方法:采用电穿孔转化法将重组质粒pBCG/MSA2导入BCG中,通过卡那霉素抗性筛选并经PCR鉴定的重组BCG培养于Middlebrook 7H9 Broth(M7H9)培养基,并添加10% M7H9 Enrichment ADC和0.05% Tween80,4周后于45℃进行诱导表达,表达产物进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)及免疫印迹(Western-blot)分析.结果:SDS-PAGE及Western-blot分析结果均显示在约31kDa的位置上可见明显的蛋白条带,并与MSA2基因编码序列推断的分子量相符.结论:恶性疟原虫裂殖子表面抗原2可在BCG中表达,这些结果将为恶性疟原虫多价BCG疫苗的研制提供科学依据.
-
弓形虫GRA4基因体外扩增、克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达
目的 体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白4(GRA4)基因,构建大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒ps3000-GRA4,重组耻垢分枝杆菌,鉴定重组蛋白的抗原性. 方法 用聚合酶链式反应(PCR)方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA4基因,克隆入pGEM-T载体,然后亚克隆法构建ps3000-GRA4大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒,经电转化方法,将GRA4基因片断的穿梭质粒转化到耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis mc2 155)中,用重组耻垢分枝杆菌免疫小鼠,Western blot方法检测免疫小鼠血清中的弓形虫抗体. 结果 成功扩增了弓形虫的GRA4基因并构建克隆质粒pGEMT-GRA4、穿梭质粒ps3000-GRA4,Western blot分析显示,GRA4重组蛋白能被重组质粒免疫小鼠血清识别,分子质量单位约为40.0 ku. 结论 重组耻垢分枝杆菌在小鼠体内表达出了重组蛋白GRA4,具有抗原性,刺激小鼠机体产生了抗弓形虫的抗体,为弓形虫重组BCG(Bacillus Calmette-Guerin)疫苗的研究奠定了基础.
-
结核分枝杆菌感染小鼠巨噬细胞中LincRNA Cox2的作用研究
目的 探讨结核分歧杆菌感染巨噬细胞中lincRNA-cox2的表达及作用机制. 方法 应用实时定量PCR检测感染牛分枝杆菌(BCG,MOI≈10∶1)的小鼠巨噬细胞(RAW264.7)中lincRNA-cox2的差异表达.对感染BCG的RAW 264.7细胞给予p38MAPK通路特异性抑制剂SB203580(10 μmol/L)、JNK通路特异性抑制剂SP600125(10μmol/L)、ERK通路特异性抑制剂U0126(10 μmol/L),以确定lincRNA-cox2起作用的信号通路.用小分子RNA干扰真核载体转染技术诱导lincRNA-cox2沉默,检测结核菌感染后相关炎症因子TNF-α的差异表达. 结果 RAW264.7细胞感染BCG后lincRNA-cox2显著上调(t值分别为:0.9771,1.650,P=0.0391,P＜0.05,差异有统计学意义);阻断p38MAPK通路和JNK通路后lincRNA-cox2显著下调(p38MAPK通路抑制剂组t值分别为:3.777,0.5659,P=0.0483,P＜0.05;JNK阻断组t值分别为:3.777,0.4998,P=0.0458,P＜0.05,差异有统计学意义);沉默lincRNA-cox2的RAW264.7细胞感染BCG后TNF-α水平显著降低(t值分别为:318.8,64.42,74.68,P值分别为0.0186,0.0226,P＜0.05,差异有统计学意义). 结论 结核菌感染后可能通过激活p38MAPK、JNK通路上调RAW264.7细胞中lin-cRNA cox2的表达,进而促进炎症因子TNF-a的释放,起到控制结核感染的作用,可以为结核病在基因水平上的诊断和治疗提供参考.
-
新型结核病疫苗菌株在小鼠体内的毒性及安全性研究
目的 观察由卡介苗(简称BCG)和结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra(简称H37Ra菌株)为亲本菌株构建的融合菌株(简称B/R菌株)接种C57BL/6小鼠后在小鼠体内的毒性及其安全性. 方法 将204只C57BL/6小鼠随机分为生理盐水组(36只)、BCG组(56只)、B/R组(56只)和H37Ra组(56只);分别皮内接种无菌生理盐水、BCG菌悬液、B/R菌株菌悬液、H37Ra菌株菌悬液0.1 ml(含活菌数为1.0×106个),观察各组小鼠生存基本情况并记录接种后第3、6、9、12、15、18周小鼠体重;分别于接种后第2、3、6、9、12周取BCG组、B/R组、H37Ra组小鼠各4只,处死后摘取小鼠完整肺脏和脾脏称重后分别制成脏器组织匀浆,接种于罗氏培养基培养20 d,计数各脏器菌落数(CFU);分别于接种后第3、6、9、12、15、18周,四组分别随机各取6只小鼠,脱颈处死后称取体重,摘取小鼠肺脏及脾脏在组织固定液中固定(固定前脾脏称重),48 h后制作病理切片,HE染色后观察小鼠肺脏、脾脏的病理变化,并计算各组小鼠各时间点的脾脏系数. 结果 (1)4组小鼠接种后一般生存状态良好,接种部位未出现明显溃疡、脓疱等.从接种后第1 d～18周各组小鼠均无死亡,生存率为100％.接种后第3周、6周,四组之间小鼠体重相比差异无统计学意义(P＞0.05),接种后第9周、15周,H37Ra组小鼠体重低于生理盐水组(P＜0.05),接种后第12周,BCG组小鼠体重低于生理盐水组(P＜0.05),接种后第18周,H37Ra组小鼠体重分别与生理盐水组、BCG组、B/R组相比均降低(P＜0.05);(2)接种后第2周、3周、6周时小鼠脾脏定植细菌数(Log10 cfu),H37Ra组、B/R组均较BCG组升高(P＜0.05);B/R组与H37Ra组比较差异无统计学意义(P＞0.05).接种后第9周小鼠脾脏定植菌数(Log10cfu),H37Ra组较BCG组升高(P＜0.05),B/R组分别与H37Ra组、BCG组相比差异无统计学意义(P＞0.05).接种后第12周小鼠脾脏定植细菌数(Log10cfu),H37Ra组、B/R组均较BCG组升高(P＜0.05),B/R组较H37Ra组降低(P＜0.05).(3)在接种后第2周小鼠肺脏定植菌数(Log10cfu),B/R组较BCG组升高(P＜0.05);B/R组、BCG组分别于H37Ra组相比差异无统计学意义(P＞0.05).接种后第3周三组小鼠肺脏定植菌数(Log10cfu)之间相比差异无统计学意义(P＞0.05);接种后第6周小鼠肺脏定植菌数(Log10 cfu),H37Ra组较BCG组升高(P＜0.05),B/R组分别与H37Ra组、BCG组相比差异无统计学意义(P＞0.05);接种后第9周小鼠肺脏定植菌数(Log10cfu),H37Ra组较BCG组升高(P＜0.05);B/R组较H37Ra组降低(P＜0.05),B/R组与BCG组相比差异无统计学意义(P＞0.05);接种后第12周小鼠肺脏定植菌数(Log10 cfu),B/R组、H37Ra组均较BCG组升高(P＜0.05),B/R组与H37Ra组相比差异无统计学意义(P＞0.05);(4)各时间点生理盐水组小鼠肺脏、脾脏均呈现正常病理征象.接种后第3～18周BCG组、H37Ra组及B/R组小鼠肺脏均表现出不同程度的炎细胞浸润和气道上皮细胞局部脱失,肺泡间隔增宽,部分肺间质水肿,但肺泡腔无改变,均未出现结核结节,第3～18周BCG组、H37Ra组和B/R组小鼠脾脏均有不同程度白髓比例升高,淋巴小结体积增大,动脉周围淋巴鞘增厚;红髓扩张淤血,巨噬细胞增多等改变;(5)接种后第3周、6周小鼠脾脏系数,BCG组、H37Ra组及B/R组均较生理盐水组明显升高(P＜0.05);接种后第9周小鼠脾脏系数,H37Ra组及B/R组均较生理盐水组明显升高(P＜0.05),BCG组与生理盐水组相比差异无统计学意义(P＞0.05),接种后第12周小鼠脾脏系数,H37Ra组较生理盐水组显著升高(P＜0.01),B/R组较生理盐水组升高(P＜0.05);BCG组较H37Ra组降低(P＜0.05).接种后第15周、18周四组小鼠脾脏系数之间比较差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 B/R菌株的毒性较H37Ra菌株降低,与卡介苗相当,其使用安全性较好.
-
新型结核病疫苗融合菌株制备及其免疫学特性的研究
目的 观察由卡介苗(BCG)与结核分枝杆菌国际标准弱毒株H37Ra(H37Ra菌株)构建的融合菌株(B/R菌株)生长特性及其在免疫小鼠体内的生长情况. 方法 分别测定用7H9培养基培养3、6、9、12、15、18、21、24、27和30d的B/R菌株、BCG和H37Ra菌液在波长600 nm处的A值,以时间为横坐标,A600值为纵坐标,绘制细菌生长曲线.将C57BL/6小鼠随机分为B/R菌株、BCG和H37Ra菌株3组,每组30只,分别皮下接种B/R、BCG和H37Ra菌液0.1ml(含活菌数为1.0×106个),免疫15、30、45、60和75 d后无菌条件下取小鼠肝脏、脾脏和肺脏,制成脏器组织匀浆,接种罗氏固体培养基斜面,培养20 d后计数各脏器菌落数(Log10cfu). 结果 细菌生长曲线显示,B/R菌株的适应调整期较长,6d后进入生长对数期,27 d后进入稳定期,生长周期约30 d左右.免疫15、30、45、60和75 d小鼠肝脏、脾脏、肺脏定植细菌数(Log10cfu)B/R菌株组高于BCG和H37Ra菌株组.小鼠肝脏定植细菌数(Log10cfu) B/R菌株组与BCG和H37Ra菌株组比较差异无统计学意义(P＞0.05);免疫15、60及75 d小鼠脾脏定植细菌数(Log 10cfu)B/R菌株组与BCG和H37Ra菌株组比较差异有统计学意义(P＜0.05),免疫30和45 d小鼠脾脏定植细菌数(Log1 0cfu) B/R菌株组与BCG组比较差异有统计学意义(P＜0.05),与H37Ra菌株组比较差异无统计学意义(P＞0.05);免疫15和45 d小鼠肺脏定植的细菌数(Log10cfu) B/R菌株组与BCG和H37Ra菌株组比较差异有统计学意义(P＜0.05),免疫30、60和75d小鼠肺脏定植细菌数(Log10cfu)B/R菌株组与BCG组比较差异有统计学意义(P＜0.05),与H37Ra菌株组比较差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 B/R菌株的生长周期为30 d,在小鼠体内至少存活2个月,定植能力较强.
-
结核分枝杆菌Hsp16.3与感染巨噬细胞凋亡的相关性研究
目的 建立结核分枝杆菌感染RAW264.7株巨噬细胞模型,研究结核分枝杆菌Hsp16.3与感染巨噬细胞凋亡的相关性. 方法 分别用结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株和卡介苗菌株感染RAW264.7巨噬细胞株,于感染后1、3、6及12h,利用激光共聚焦显微镜鉴定卡介苗及结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株感染RAW264,7巨噬细胞模型;同时利用流式细胞技术于上述各时间点检测各组感染巨噬细胞的凋亡率,并分析其时相性变化;利用PCR技术扩增模型目的基因,利用Western blot检测上述各个时间点Hsp16.3蛋白表达水平的时相性变化. 结果 激光共聚焦显微镜下观察到RAW264.7巨噬细胞内有标记MTB16KD的绿色荧光,证实结核分枝杆菌感染巨噬细胞模型构建成功.巨噬细胞感染结核分枝杆菌后凋亡率升高,其中感染后1、3和12h凋亡率H37Rv感染组与BCG感染组比较差异有统计学意义(P＜0.05);巨噬细胞感染结核分枝杆菌后的PCR产物大小为435 bp;感染细胞Hsp16.3蛋白表达升高,其中感染后1h和3h升高更显著. 结论 结核分枝杆菌感染可导致巨噬细胞凋亡,感染巨噬细胞的凋亡率与菌株毒力强弱有关,弱毒力结核分枝杆菌感染的巨噬细胞早期凋亡更显著;结核分枝杆菌感染巨噬细胞的凋亡与结核分枝杆菌表达Hsp16.3水平高低有关,在感染早期强毒力结核分枝杆菌Hsp16.3表达水平较高.
关键词： 结核分枝杆菌H37Rv株 BCG Hsp16.3 巨噬细胞 凋亡 -
细粒棘球绦虫Eg95抗原编码基因在BCG中的表达效率研究
目的探讨细粒棘球绦虫Eg95抗原在BCG中的表达, 为囊型包虫病疫苗的开发利用提供依据. 方法用热诱导方法诱导rBCG-Eg95疫苗,用SDS-PAGE和Western blot鉴定所表达的蛋白. 结果表达重组蛋白为可溶性蛋白,分子质量单位为16.5 ku.Western blot示重组蛋白具有抗原性, 用薄层扫描Bio-Rad Quantity one分析系统分析,表达效率为占BCG 菌体总蛋白的12%. 结论细粒棘球绦虫Eg95抗原在BCG中成功表达,为BCG发展为多价疫苗载体奠定了基础.
-
BCG30主要分泌蛋白对尘螨变应性患者TH1/TH2平衡调节作用的观察
目的研究结核杆菌相对分子质量(Mr)为30×103的主要分泌蛋白(BCG30,也称Ag85B)对尘螨变应原过敏所致的哮喘等变应性患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌TH1、TH2细胞因子的调控作用. 方法常规分离27例尘螨过敏的变应性患者(A),其中18例哮喘患者(A1)、9例变应性鼻炎或皮炎患者(A2)和13例正常人(B)的PBMC,在离体与螨变应原、BCG30单独或复合共培养,ELISA法测定培养上清IL-5、IFN-γ的水平. 结果 A、A1、A2、B 4组无刺激状态下的IL-5、IFN-γ水平无差异(P＞0.05).尘螨变应原刺激可显著促进A、A1、A2 3组PBMC分泌IL-5, P均＜0.05,同时,A组的IFN-γ水平自身比较亦明显增高(73.58pg/ml±30.23pg/ml vs 30.71pg/ml±18.87pg/ml,P＜0.05).将尘螨变应原与BCG30和PBMC进行复合培养,并与单独尘螨变应原刺激组比较,其IFN-γ水平在A组(92.89pg/ml±29.07pg/ml vs 73.58pg/ml±30.23pg/ml)和A1组(87.60pg/ml±36.45pg/ml vs 58.75pg/ml±7.84pg/ml)均较后者为高(P均＜0.05),且A组的IFN-γ/IL-5的比值较单独尘螨变应原刺激组显著增高(5.03±1.36 vs 4.20±1.64,P＜0.05),而A1组其比值亦有增高趋势(P=0.07).正常人中各刺激组间所有指标均无差异. 结论对尘螨过敏的变应性疾病患者,其PBMC在尘螨变应原存在时较正常人更容易向TH2为主的免疫反应偏移,BCG30能诱导变应性患者产生TH1免疫反应并促使TH1/TH2平衡的恢复.
关键词： 哮喘 Th1/Th2 BCG 结核杆菌分泌蛋白(Ag85B) -
结核病易感相关免疫基因研究进展
结核易感性与遗传、环境、年龄、性别、HIV感染、营养缺乏、BCG接种和吸烟等宿主因素有关[1].其中,遗传因素是影响结核易感性的重要因素[2],可以影响结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculos,Mtb)与宿主免疫系统间的平衡关系,终导致不同的感染结局.
-
结核融合蛋白AMM亚单位疫苗强化BCG初始免疫的免疫效应
目的 研究结核融合蛋白Ag85B-Mpt64190-198-Mth8.4(AMM)和佐剂二甲基三十六烷基铵(DDA)、卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)构建的亚单位疫苗强化BCG初始免疫的免疫效应.方法 将融合蛋白AMM、佐剂DDA和BCG-PSN混合构建AMM亚单位疫苗.实验1组BCG初免后第10周用AMM亚单位疫苗加强免疫小鼠一次;实验2组BCG初免后分别于第8周、第10周用AMM亚单位疫苗加强免疫小鼠一次.同时设立生理盐水及仅BCG免疫两个对照组.BCG初免后第14周、第22周,应用ELISPOT、ELISA检测免疫小鼠的细胞及体液免疫反应.同时在第22周用BCG活菌攻击被免疫小鼠,间隔4周后用流式细胞术和ELISA技术检测T细胞分型及体液免疫反应.结果 (1)IFN-γ水平:BCG初免后14周,特异性抗原Ag85B刺激后实验2组分泌IFN-γ的细胞数(135±14)明显高于仅BCG免疫组(194±16),t=10.98,P<0.01;BCG初免后22周,实验2组(208±11)同样高于仅BCG免疫组(57±18),t=6.43,P<0.01.(2)体液免疫应答水平:实验2组的IgGI抗体滴度明显高于实验1组,而作为反映Th1型免疫反应指标的IgG2a/IgG1比值,强化免疫两次组低于强化一次组.(3)BCG模拟攻击被免疫小鼠后,CD4+CD25+调节性T细胞含量:实验1、2组均高于仅BCG免疫组(t1=3.08,t<2>=3.16,P<0.05).结论 BEG免疫-AMM亚单位疫苗加强免疫两次能够引起较强的细胞及体液免疫反应,同时激活调节性免疫反应.
-
低频超声对BCG急性损伤效应的实验研究
目的 观察不同辐照强度和辐照时间的低频超声对BCG的急性损伤效应.方法 将BCG菌落用生理盐水制备成悬液,分别取2 ml悬液放入24孔板培养样板,实验分为4组,Ⅰ组为对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组为实验组,超声辐照强度分别为:0.13、0.13、1.53 W/cm2,辐照时间分别为:5、15、15 min.每组经超声辐照后,分别观察超声对其温度、死亡率以及菌体结构的影响.结果 经不同剂量低频超声辐照后:(1)辐照前后悬液温度无明显变化;(2)用流式细胞仪检测其死亡率分别为:(4.51土0.17)％、(7.71±1.63)％、(9.14±0.88)％、(28.56±5.21)％; (3) MTT比色法显示实验组与对照组差异显著;(4)透射电镜显示,低频超声能够破坏BCG的菌体结构.结论 低频超声能对BCG造成急性损伤,且损伤程度与超声辐照的剂量有关.
-
章丘市市属小学、幼儿园儿童预防接种证查验结果分析
章丘市疾控中心自2005年开始,每年秋季对明水城区的市属小学和幼儿园新入托、入学儿童的预防接种证进行查验,掌握在校儿童的"五苗"(BCG、HepB、OPV、DPT、MV)接种情况,及时安排漏种疫苗的补种.现将2005～2007年查验结果分析如下:
-
应用免疫学和分子遗传学方法合理设计抗结核病疫苗
罗伯特.柯霍(Robert Koch)因对结核病(TB)的贡献荣获诺贝尔奖已过去100年,Albert Calmette和Camille Guerin制备了减毒疫苗株--牛分枝杆菌卡介苗(BCG)也已过去85年,但是,至今仍然没有有效预防TB的方法.然而,21世纪的初十年将会见证若干新型候选疫苗的临床试验.这些候选疫苗分为二类:1)亚单位疫苗旨在强化由BCG初免诱导的免疫反应,2)改进的重组BCG取代现有的疫苗株.分别使用合适的佐剂、递送系统的蛋白质和DNA疫苗、重组病毒载体如重组的改良疫苗病毒安卡拉(Ankara),用于强化免疫,现正在试验中.已经开发出重组卡介苗(rBCG)用于初免,这些疫苗株具有很高的免疫原性,或者主要抗原的高表达.这些候选疫苗会在2006年底前通过Ⅰ期临床试验.今后的目标是试验这些新候选疫苗的不同组合以促进佳免疫接种方案的形成.
-
新生儿期卡介苗和乙型肝炎疫苗预防接种及其相关问题
我国实行有计划的预防接种制度.国家规定,设有产科的各级各类医疗卫生机构按照"谁接生,谁接种"的原则,承担新生儿乙型肝炎疫苗(简称乙肝疫苗)及卡介苗(Bacille Calmette-Guerin,BCG)预防接种服务.
-
吡柔比星与卡介苗世丝裂霉素膀胱灌注治疗浅表性膀胱癌的疗效对比观察
目的:评价吡柔比星(THP)、卡介苗(BCG)、丝裂霉素(MMC)三种药物膀胱灌注治疗浅表性膀胱癌的不同疗效.方法:将200例浅表性膀胱癌随机分为3组,分别用THP、BCG、MMC作膀胱灌注治疗药物,观察其不同疗效.结果:所有病例随访3～24个月,平均14个月.THP组复发6(6/72)例,BCG组复发6(6/68)例,MMC组复发10(10/60)例.结论:吡柔比星疗效与卡介苗相似,稍优于卡介苗.卡介苗疗效优于丝裂霉素.丝裂霉素耐受性好.吡柔比星不良反应小,耐受性好,可作为临床一线用药.
-
TURBT联合BCG灌洗治疗多发性膀胱癌疗效观察
1例升1级.结论 TURBT联合BCG灌洗对高龄、高危多发性膀胱癌患者是一种可行性的治疗选择,但要密切随访,及时处理复发肿瘤.
