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补骨脂素与异补骨脂素对乳鼠颅骨成骨细胞分化成熟影响的比较研究
目的 比较研究中药补骨脂中两种重要组分--补骨脂素与异补骨脂素对体外培养乳鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)分化成熟的影响.方法 取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法培养ROB,每3天换液1次,铺满80%皿底后传代培养.以1×10-5mol·L-1的补骨脂素和异补骨脂素对ROB的分化成熟进行药物干预,比较补骨脂素组、异补骨脂素组和不加药的对照组之间碱性磷酸酶(ALP)活性、碱性磷酸酶阳性克隆数(CFU-FALP)、骨钙素分泌量、钙盐沉积量以及钙化结节数量的差异,Real Time RT-PCR检测IGF-1、Osterix、Runx-2和collagen I的基因表达情况.Western blot法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量.结果 补骨脂素和异补骨脂素均可促进ROB的分化成熟,具体表现在明显提高ROB的ALP活性,促进钙盐的沉积以及骨钙素的分泌,增加CFU-FALP和钙化结节数量,提高IGF-1、Osterix、Runx-2和collagen I的mRNA水平,增强Ⅰ型胶原的蛋白表达,但异补骨脂素的活性明显高于补骨脂素.结论 异补骨脂素促进ROB分化成熟的活性明显高于补骨脂素,提示异补骨脂素是中药补骨脂发挥抗骨质疏松活性的主要有效成分,具有开发为抗骨质疏松新药的潜力.
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闽南地区野生黄花蒿种子成熟与发芽研究
目的 研究泉州地区野生黄花蒿种子成熟与发芽过程.方法 黄花蒿以近野生状态生长,研究种子成熟时间,不同月份种子发芽情况.结果 泉州地区黄花蒿11月20日前后种子基本成熟,平均每颗花果含种子2.87颗,从11月至次年3月种子均可发芽,高发芽率1.62株/果.结论 泉州地区11月份平均气温20.1℃,种子有较长时间成熟,2～3月份气温11 ～23℃,适宜黄花蒿种子发芽.泉州地区适合作为黄花蒿种子繁育基地.
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小剂量米索前列醇促宫颈成熟临床效果观察
引产作为计划分娩的一个重要手段在产科临床应用非常普遍,而宫颈成熟是引产成功的关键.我院自1998年9月至1999年2月将米索前列醇作为促宫颈成熟剂以促宫颈成熟,现将临床效果总结如下.
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氯化锌对小鼠卵母细胞体外成熟的影响
目的探讨氧化锌对小鼠卵母细胞体外成熟的影响.方法采用细胞体外培养的方法,观察卵母细胞在分别含有低、中、高浓度(0 μg/ml、1 μg/ml、10 μg/ml)氯化锌的M199培养液中体外成熟率和减数分裂的变化情况.结果 1 μg/ml ZnCl2组GVBD发生率在4、8 h明显高于对照组(P<0.01),16、24 h高于对照组(P<0.05);而10 μg/ml ZnCl2组GVBD发生率在各时间点均明显低于对照组(P<0.01).8 h后,1 μg/ml ZnCl2组PB1排出率明显高于对照组(P<0.05),而10 μg/ml ZnCl2组PB1排出率明显低于对照组(P<0.05).结论锌对体外小鼠卵母细胞成熟和减数分裂有重要的影响.
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卫出下焦新解
基于“卫出下焦”并类比营气化血的过程，认为卫气虽由中焦脾胃化生，然而功能并未齐全，下焦膀胱促进其成熟，肾阳为其原动力；同时卫气是膀胱气化作用“气”的具体体现，其输布与津液同隧。下焦膀胱与肾在促进卫气成熟及输布方面都起着重要作用。
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改良腹腔镜下治疗卵巢成熟畸胎瘤的研究
目的:探讨腹腔镜下治疗卵巢良性畸胎瘤的效果和手术技巧,防止术中发生囊肿破裂等并发症的方法.方法:腹腔镜下采用囊肿先减压后腹腔外剥除的方法治疗较大卵巢良性畸胎瘤42例.结果:42例卵巢良性畸胎瘤患者腹腔镜手术均获成功,平均手术时间仅30min.结论:腹腔镜手术治疗卵巢良性畸胎瘤具有患者创伤小,康复快等优点,囊肿先减压后腹腔外剥除的手术方法可有效地防止术中囊肿破裂等并发症的发生.
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人卵丘细胞线粒体膜电位与卵母细胞成熟度相关关系的研究
目的:通过检测人类卵母细胞周围卵丘细胞的线粒体膜电位(ΔΨm),研究其与卵母细胞成熟度的关系.方法:收集卵母细胞质内单精子注射(ICSI)的166个卵母细胞周围的卵丘细胞,根据卵母细胞的成熟度及受精情况分为3组:不成熟卵母细胞组23例;成熟卵母细胞未受精组18例;成熟卵母细胞受精组103例.分别测定线粒体膜电位.用透射电镜观察3例未成熟卵母细胞、3例成熟卵母细胞周围卵丘细胞线粒体的变化.结果:未成熟卵母细胞组、成熟卵母细胞未受精组、成熟卵母细胞受精组线粒体膜电位分别为1.5±0.43,3.9±1.68,5.8±2.24,两两比较差异有统计学意义.透射电镜观察发现未成熟卵母细胞周围卵丘细胞质内线粒体肿胀、嵴减少、嵴消失、空泡化的发生率较成熟卵母细胞周围卵丘细胞高.结论:卵丘细胞线粒体膜电位与相应卵母细胞的成熟度相关.
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雷公藤红素对 CD1＋4单核细胞来源的树突细胞分化及成熟的影响
目的：制作免疫树突细胞（ DC）分化和激活模型，观察雷公藤红素对人DC体外分化和成熟的影响。方法采集浓缩人白细胞，淋巴细胞分离液分离单个核细胞，利用免疫磁珠法分离CD1＋4细胞，流式细胞分选仪确认分选纯度。将分选的CD1＋4细胞在含IL-4和GM-CSF的完全1640培养基中分别培养5 d（分化）和7 d（5 d后加入脂多糖刺激成熟）。对照组不添加雷公藤红素，雷公藤红素组分别加入10、20 nM的雷公藤红素。收集未成熟DC（ iDC）和成熟DC（ mDC），用流式细胞仪检测细胞表面标志CD80、CD83、CD86、HLA-DR平均荧光强度（ MFI）及细胞对FITC-dextran的摄取能力。结果雷公藤红素组iDC、mDC表面标记CD80、CD83、CD86及HLA-DR的MFI低于对照组，且雷公藤红素20 nM组低于10 nM组，P均＜0．05。阴性对照组、雷公藤红素10、20 nM组、对照组细胞摄取FITC-dextran的MFI分别为10．1±2．1、186．3±22．6、72．4±10．2、243．7±31．3，其中阴性对照组低，对照组高，雷公藤红素20 nM组低于10 nM组（P均＜0．05）。结论雷公藤红素可抑制CD1＋4单核细胞分化为DC，并抑制脂多糖诱导的DC表型成熟，还可抑制iDC的抗原提呈功能。
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中药贴敷配合温和灸促进血液透析患者动静脉内瘘成熟研究
目的 探讨中药贴敷配合温和灸对促进维持性血液透析患者自体动静脉内瘘(AVF)成熟的作用.方法 将60例首次行AVF成形术患者,随机分为对照组和观察组各30例,对照组实施AVF围手术期常规护理,观察组在常规护理基础上术后1周实施中药贴敷配合温和灸,连续3周后评价效果.结果 干预后观察组AVF血流量显著优于对照组(P＜0.05),AVF均成熟;对照组4例AVF未成熟重新手术;两组瘘口狭窄、血栓发生率比较,差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 AVF成形术后1周增加中药贴敷配合温和灸干预,能有效增加AVF血流量,促进AVF成熟.
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乌司他丁对脂多糖介导的小鼠肾脏固有树突状细胞成熟的抑制作用
目的 研究乌司他丁对脂多糖介导的小鼠肾脏固有树突状细胞(rDC)成熟的影响.方法 取C57BL/6J小鼠肾脏,制备单细胞悬液,使用免疫磁珠法分选CD11c+的rDC,流式细胞仪鉴定rDC纯度.脂多糖刺激24 h,促使rDC成熟,给予不同浓度(50、100和200 U/L)乌司他丁处理,酶联免疫吸附试验检测上清液中白细胞介素12(IL-12)的分泌水平.100 U/L的乌司他丁处理后,流式细胞仪检测rDC表面主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类分子及CD80和CD86分子,以观察乌司他丁对rDC表型及功能的影响.检测趋化因子受体7(CCR7)的表达,计数受巨噬细胞炎症蛋白3β(MIP-3β)趋化进入细胞培养小室下层的CD11c+细胞的数目,分析乌司他丁对rDC趋化能力的影响.结果脂多糖刺激促使rDC成熟,高表达MHCⅡ、CD80、CD86分子,并分泌大量IL-12,而乌司他丁能够抑制脂多糖介导的rDC表型和功能成熟.经乌司他丁处理,CCR7分子的表达由69.2％下降至37％,并且受趋化的CD11c+细胞数目下降为脂多糖处理者的45.3％.结论 乌司他丁能够抑制脂多糖介导的小鼠rDC的成熟和趋化能力上调.
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大鼠骨髓来源树突状细胞成熟过程中微小RNA表达谱变化
目的 观察树突状细胞(DC)成熟过程中微小RNA (miRNA)表达谱的变化.方法 将大鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞(imDC)用脂多糖(LPS)刺激,分别于0、12、24 h后提取总RNA,进行miRNA芯片杂交,应用生物信息学方法进行miRNA表达谱数据分析.结果 与未受LPS刺激的imDC比较,刺激12 h之后的DC有54种miRNA的表达出现显著改变,其中44种miRNA表达下调2倍以上,10种表达上调2倍以上；与未刺激的imDC比较,刺激24 h之后的DC有92种miRNA的表达出现显著改变,其中52种miRNA表达下调2倍以上,40种表达上调2倍以上.挑选不同时相表达变化显著的19个miRNA做靶基因预测,发现同时被3个miRNA作用的靶基因有4个(WEE1、CHKA、CDC37L1、RGD1359108).结论 DC的成熟过程中,miRNA表达谱出现显著变化,推测其中某些 miRNA 在DC成熟过程中扮演重要角色.
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"自体血清+鸡尾酒法"诱导外周血DC成熟的研究
目的 比较三种不同的分离诱导外周血树突状细胞(DC)成熟的方法.方法 取正常成人外周血约180 ml,分成三组.分离单核细胞后,经典脂多糖(LPS)诱导组(A组):接种于含RPMI1640+胎牛血清完全培养基的25 cm2培养瓶中,2h后弃悬浮细胞,将贴壁单核细胞,用粒-巨噬细胞集落刺激因子和白介素4培养,培养到第6天时加入LPS诱导24h;鸡尾酒诱导组(B组):单核细胞的培养同A组,培养到第6天时用细胞因子组合(1000U/ml肿瘤坏因子、10ng/ml白介素6、10mg/ml白介素1β、1μg/ml前列腺素E2)诱导24h;自体血清+鸡尾酒诱导组(C组):单核细胞用RPMI1640+10%自体血清完全培养基培养,诱导方法同B组.用流式细胞仪检测各组收集的DC细胞成熟表型CD80、CD86、CD83以及白细胞表面抗原HLA-DR的表达;动态观察各组细胞成熟过程中形态的改变以及其激活淋巴细胞增殖的能力.结果 C组DC成熟过程中形态好、突起多;其成熟表型CD86、CD83、CD80以及HLA-DR的平均表达率分别是(88.60±6.34)%、(50.55±4.03)%、(73.89±6.15)%、(93.24±7.78)%,明显高于A、B组(P＜0.05);激活淋巴细胞增殖指数为2.03,亦明显高于A、B组(P＜0.05).结论 自体血清+鸡尾酒诱导法是一种简单、方便、经济的外周血DC分离诱导成熟的新方法.
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过表达Fpr2对树突状细胞成熟和趋化功能的调控作用
目的:研究过表达小鼠树突状细胞表面受体Fpr2对树突状细胞成熟和趋化功能的影响.方法:通过RVG-P靶向多肽介导质粒PEGFP-N1-Fpr2转染小鼠树突状细胞,上调表面受体Fpr2的表达.ELISA检测IL-6、IL-10,IL-12 p70及TNF-α的水平;通过流式细胞术检测细胞表面分子CD40,CD80,CD83,CD86,MHCII的表达;使用Transwell小室检测细胞迁移能力;Western blot检测MAPK通路(P38,ERK1/2,JNK)的磷酸化情况.结果:上调Fpr2后,表面分子CD83的表达水平明显升高.在细胞因子水平上,转染PEGFP-N1-Fpr2组的树突状细胞的IL-6,IL-10,TNF-α分泌量明显增多.转染质粒DNA后,细胞对CCL21的趋化减弱,但与转染空载体pEGFP-N1组相比,转染pEGFP-N1-Fpr2组的趋化细胞数明显增多.转染pEGFP-N1-Fpr2组的P38,JNK及ERK1/2磷酸化水平均显著高于转染pEGFP-N1组.结论:过表达细胞表面受体Fpr2能促进树突状细胞的成熟,并可能通过上调MAPK信号通路中的P38和JNK的磷酸化来增加其趋化能力.
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功能锻炼配合中药熏洗对自体动静脉内瘘成熟的影响
目的:探讨功能锻炼配合中药熏洗对自体动静脉内瘘成熟的影响.方法:选取行自体动静脉内瘘成形术的患者100例,将患者随机分为治疗组和对照组,每组50例.对照组采用单纯功能锻炼的方法,治疗组采用功能锻炼配合中药熏洗的方法,对两组患者的首次穿刺成功率、并发症发生率、内瘘使用时血流量、内瘘成熟时间进行比较和分析.结果:对照组患者首次穿刺成功率、并发症发生率分别为76.00％、16.00％,治疗组患者分别为92.00％、6.00％,治疗组患者首次穿刺成功率明显高于对照组,且并发症发生率明显低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);对照组患者内瘘使用时血流量、内瘘成熟时间分别为(198.21±11.34) mL/min、(55.54±5.56)h,治疗组患者分别为(236.12±11.35) mL/min、(42.65±4.39)h,治疗组患者内瘘使用时血流量高于对照组,内瘘成熟时间早于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:功能锻炼配合中药熏洗较单纯功能锻炼能够更好促进自体动静脉内瘘成熟,缩短内瘘成熟时间.
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氧化修饰高密度脂蛋白促进C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞成熟活化
目的 探讨氧化型高密度脂蛋白对C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞成熟活化及部分免疫功能的影响.方法 制备C57BL/6J小鼠骨髓细胞悬液,利用树突状细胞专用分离液和细胞粘附性差异去除杂细胞,用重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组小鼠白细胞介素4使其分化为骨髓源性树突状细胞.实验分为PBS阴性对照、高密度脂蛋白组、氧化型高密度脂蛋白组和脂多糖阳性对照组.采用流式细胞术检测骨髓源性树突状细胞CD86和MHCⅡ的表达率;液体闪烁计数检测各实验组骨髓源性树突状细胞刺激同源T淋巴细胞增殖的能力;ELISA法检测分泌到培养基中的白细胞介素12和白细胞介素10.结果 与PBS组相比,氧化型高密度脂蛋白处理的骨髓源性树突状细胞,其CD86、MHCⅡ表达率、混合淋巴细胞反应液体闪烁计数和细胞因子分泌量都明显升高;高密度脂蛋白组各项指标升高不如氧化型高密度脂蛋白明显.结论 氧化型高密度脂蛋白可促进C57BL/6J小鼠骨髓源性树突状细胞成熟活化和细胞因子的分泌.
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芦荟对动静脉内瘘建立后早期干预的研究
目的探讨芦荟对动静脉内瘘的早期干预及其功能维护。方法将265例血液透析患者随机分为实验组和对照组,分别为136和129例。实验组在动静脉内瘘成形术后第2天用芦荟外涂和外敷,而对照组术后作常规的握拳,湿热敷等功能锻练,随访观察13个月。结果实验组动静脉内瘘成熟时间明显缩短,首次血流量充足和穿刺的成功率与对照组比较有显著的差异（P〈0.005）实验组动静脉内瘘1年的栓塞率,感染等并发症明显低于对照组（P〈0.005）。结论芦荟促进动静脉内瘘的成熟,减少内瘘血管的感染,栓塞等并发症。
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淫羊藿苷对体外培养乳鼠颅骨成骨细胞增殖、分化及成熟的影响
研究淫羊藿苷对体外培养大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(Rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖和分化成熟的影响.方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法培养ROB,每3d换液1次,铺满80％皿底后传代培养.采用终浓度分别为1×10-4、1×10-5、1×10-6、1×10-7 mol/L的淫羊藿苷进行药物干预,MTT法检测细胞增殖率,同时检测成骨性诱导培养9d后的碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性,筛选出佳浓度.以佳药物浓度干预ROB的分化成熟,比较淫羊藿苷组和不加药的对照组之间的钙化结节数量及碱性磷酸酶阳性克隆数(colonies stained positive for alkaline phosphatase,CFU-FALP)；提取总RNA,Real Time RT-PCR检测Runx-2与Osterix mRNA 的表达情况；Western-blot法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量.结果:淫羊藿苷剂量依赖性抑制细胞的增殖,但可强烈促进ROB的分化成熟,佳药物浓度为1×10-5 mol/L.该浓度下的淫羊藿苷可显著增加钙化结节和CFU-FALP数量,促进与成骨相关的转录因子Runx-2与Osterix mRNA的表达,同时也可增强Ⅰ型胶原蛋白的分泌.结论:浓度为1×10-5 mol/L的淫羊藿苷可显著促进ROB的分化成熟,提示淫羊藿苷有较强的促骨形成活性,具备开发为抗骨质疏松新药的潜力.
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鞍内囊性成熟畸胎瘤1例
1 病历摘要 女,33岁,因头痛、头晕2个月余入院.神经系统检查未见明显阳性体征.入院检查:视力、视野正常,垂体激素检查正常,其中泌乳素459.19 mIU/L.MRI示垂体扁圆形,形态饱满,高度约12 mm;垂体偏右侧可见大小约10mm×8mm类圆形等T1等T2信号影,动态增强后呈明显低信号改变,边缘光滑,垂体柄受压左移,鞍隔明显抬高,考虑垂体瘤可能(图1A).
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前臂腕部自体动静脉内瘘成熟状态的初步研究
目的 通过前瞻性观察前臂腕部自体动静脉内瘘穿刺使用时的头静脉内径,血流量及血管壁厚度,总结中国人内瘘成熟时的内瘘血管状态.方法 自体动静脉内瘘建立后由专业护理人员经验性判断穿刺时间定为拟成熟,并应用彩色多普勒超声监测血管状态.穿刺透析3次后没有出现透析血流量不足、透后出血时间延长、血肿等并发症者判定为成熟,超声测量的数据即定为成熟时的血管状态.结果 31例患者进入研究,30例患者终判定为内瘘成熟.患者平均年龄(52.93±3.21)岁,女性患者13例,内瘘位置左前臂22例,原发病为糖尿病肾病者13例.术前平均头静脉内径(3.10±0.11)mm,术前头静脉血流量及管壁厚度超声无法测得.30例患者平均内瘘成熟时间(57.10±3.21)d.至内瘘成熟时,头静脉平均内径为(4.74±0.16) mm,较术前平均扩张(57.08±5.96)％,与K/DOQI指南推荐的6 mm相比差异有统计学意义(P＜0.05).头静脉平均血流量(569.76±48.34)ml/min,与K/DOQI指南推荐的600 ml/min相比差异无统计学意义(P＞0.05).平均头静脉壁厚度(0.95±0.04) mm.内瘘成熟时头静脉内径、血流量及管壁厚度95％可信区间的下限分别为4.44 mm、486.37 ml/min及0.67 mm.结论 我国维持性血液透析患者腕部自体动静脉内瘘成熟时的头静脉内径明显小于K/DOQI指南推荐的内径数值,我国维持性血液透析患者的内瘘成熟标准可能异于国外.
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口服人α干扰素转化双歧杆菌促进小鼠淋巴细胞的增殖和成熟
目的：探讨人α干扰素（IFN-α）基因转化双歧杆菌口服后对小鼠免疫功能的调节作用。方法构建含人IFN-α基因的大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达载体pBADX-hIFNα2b，电转化获得IFN-α基因转化双歧杆菌，收集L-阿拉伯糖诱导hIFN-α2b表达后的菌体制备成活菌悬液，灌胃Balb/C小鼠。实验组（IFN）小鼠用0.2%L-阿拉伯糖诱导表达后的hIFN-α2b转化双歧杆菌处理，每只按0.1 ml 1010/ml活菌灌胃；阴性对照组（NC）用等量等体积空载体pBADX转化双歧杆菌活菌灌胃；空白对照组（BC）用等体积生理盐水灌胃。隔天灌胃1次，连续处理2周。流式细胞术检测小鼠胸腺、脾脏和血液中淋巴细胞亚群和比例，流式试剂盒检测IFN-γ、IL-4等免疫因子的含量。结果与NS组和BC组相比，IFN组小鼠胸腺CD3+CD8+、CD4+CD8+细胞的比例显著升高（P<0.01）；脾脏CD3+CD4+、CD3+CD8+和CD4+CD8+细胞的比例均显著升高（P<0.01）；血液中只有CD3+CD8+细胞的比例显著升高（P<0.01）。血液中IFN组IFN-γ的含量比BC组和NS组显著升高（P<0.01）；此外，NS组IFN-γ的含量比BC组显著升高（P<0.05）；3组小鼠中血液hIFN-α2b和IL-4的浓度无显著性差异（P>0.05）。结论口服hIFN-α转化的双歧杆菌促进小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞增殖和成熟，增高血液Th1类细胞因子水平。
