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封闭式缝合羊膜空间自血留置在眼表疾病的应用
眼表外伤和疾病导致眼表层破坏,轻者表现为眼部的刺激症状明显,重者表现为持续性难以忍受的疼痛.病理表现:角膜上皮缺损、上皮糜烂、溃疡,甚至形成角膜瘘等影响视力现象,且久治不愈.对这类严重的眼表疾病,虽然有传统治疗以手术行眼表层切除的方法,但再生的上皮却表观为结膜化,难以获得稳定的角膜表层[1、2].我们应用羊膜封闭式缝合在眼表球结膜上,羊膜与角膜的间隙注入自血形成血凝块(简称血膜)利用血膜治疗眼表疾病,获得了满意的疗效.从1996年10月至2002年4月共治疗92例(92只眼)报告如下:
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改良外周血厚、薄血膜制片法
卫辉位于河南北部,近几年无蚊传疟疾病例,大部分医院未开展疟疾检查.今年按照全球基金河南疟疾项目办要求,各级各类医疗机构应建立门诊镜检站(发热门诊),全年对就诊的"三热"患者(临床初诊疟疾、疑似疟疾和原因不明发热)进行血检,所有外来流动人口和从高疟区回归的当地居民中的发热患者均应进行血检.发热患者血涂片显微镜检查,是疟疾诊断和虫种鉴别的主要方法,是疟疾疾病控制和检测的重要手段.其基本过程是采血-涂制血膜-染色前处理-染色-镜检.常用的血膜涂片有两种,一种是借推片将血液薄薄地涂在载玻片上,使每个血细胞平铺,称薄血膜,因薄血膜血液干燥快,原虫形态极少变形,多用于观察疟原虫形态与鉴别虫种;另一种是把较多的血液涂成圆形,血膜中血细胞重叠,原虫较为集中,称为厚血膜,厚血膜涂布面积小,阳性率检出较高.
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3种方法提取血膜疟原虫DNA的比较研究
目的 对3种提取血膜疟原虫DNA的方法进行比较研究,筛选出从血膜中提取疟原虫DNA的佳方法.方法 血膜依次经过二甲苯脱油和乙醇脱色处理,然后分别采用Na2HPO4法、Chelex-100法和试剂盒法提取DNA.根据疟原虫小亚基核糖体RNA编码基因(18S SSU rRNA)保守区设计套式PCR引物,分别以3种方法提取的疟原虫DNA为模板进行套式PCR扩增,并对扩增产物进行测序分析. 结果 疟原虫新血膜(保存1年内)3种方法提取的DNA经PCR扩增后均呈阳性且测序成功,与镜检结果一致.Chelex-100法提取的旧血膜(保存1~5年)标本和试剂盒法提取的旧血膜和陈旧血膜(保存6~10年)的DNA经PCR扩增后均呈阳性且测序成功,与镜检结果一致. 结论 3种方法均可成功提取新血膜疟原虫DNA,Chelex-100法可提取旧血膜的疟原虫DNA,试剂盒提取法适用于旧血膜和陈旧血膜的疟原虫DNA的提取.
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41例阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者血细胞CD55和CD59抗原检测
采用流式细胞术(FCM)和免疫荧光标记技术对阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者完全或部分缺乏退变加速因子(DAF,CD55)和反应性溶血膜抑制物(MIRL,CD59)的异常红细胞和粒细胞进行分析[1-5],提高了对PNH 的诊断水平,但各实验室之间缺乏统一的判断标准.我们应用Biocytex公司提供的标准化的Redquant CD55/CD59 和Cellquant CD55/CD59试剂盒,可以简便、快速地对PNH细胞表型进行定量分析,现报道如下.
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自血光量子血膜治疗褥疮
应用自血光量子血膜治疗褥疮是指用注射器抽取病人自身血,经紫外线照射、充氧后将适量血液直接喷射到褥疮的创面上,血液凝固治形成一层血膜,治疗褥疮收到明显的效果.
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三种血涂片染色方法在教学应用中的比较
血涂片标本的观察是组织学实验教学的主要内容之一,因此血涂片质量的好坏直接影响到实验教学的效果。一张染色优良的血涂片要求血膜肉眼观为粉红色,在显微镜下能显示各种细胞的特有色彩,染色质清楚,学生容易区别辨认。为了提高学生对血涂片的观察效果,提高整体教学水平,笔者对青年种血涂片染色方法进行了比较,方法如下。
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血膜中白细胞的分型特征
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在老挝感染的输入性恶性疟一例
患者男性,29岁,工人.2000年9月赴老挝参加我国ADB第八工程援助项目,2001年5月回成都休假,出现畏寒、发热、全身乏力等症状,持续10 h左右缓解.之后,每天或隔天周期性发作1次.曾在多家医院就医,均以感冒治疗,无效.6月26日上午到我院就诊,血常规检查:WBC 6.6×109/L,中性粒细胞0.76,淋巴细胞0.24;RBC 3.96×1012/L,血红蛋白28.3 g/L,血片镜检未查见疟原虫.以原因不明发热收治入院.当天下午2点,患者再次发热(39℃),涂制薄血膜,瑞氏液染色,镜检,查见疟原虫环状体及配子体,据此拟诊为恶性疟.再经成都市卫生防疫站采血镜检确诊为恶性疟.给与肌注蒿甲醚80 mg/次,上、下午各1次,次日再次查血常规:WBC 5.4×109/L,中性粒细胞0.67,淋巴细胞0.33;RBC3.26×1012/L,血红蛋白26.7 g/L.体温降至37℃.之后,连续3次薄血膜镜检复查,未见疟原虫.继续治疗1 wk后出院,随访1年未复发,2002年7月来院复查未见异常.
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海南垦区大劣按蚊和微小按蚊分布与疟疾发病的关系
海南农垦系统主要分布在山林地带,少数单位居住在丘陵及滨海平原地区,其疟疾发病情况各不相同。1991~1998年对垦区进行按蚊调查,并对不同按蚊分布区疟疾的发病情况进行系统观察。1 材料与方法1.1 按蚊调查 晚8~12 h,以人与牛诱捕成蚊,每小时捕蚊15 min,并带回鉴别蚊种。1.2 疟疾病例的发现 对“四热”病人采血涂片(厚、薄血膜各一),染色后镜检疟原虫并鉴别虫种。
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从Giemsa染色的血膜中扩增间日疟原虫DNA方法探讨
目的 建立从Giemsa染色的血膜中提取疟原虫DNA的方法.方法 分别采用Na2HPO4法和Chelex-100离子交换法,经过反复优化,提取血膜中的DNA,进行套式PCR扩增鉴定PvMSP-1等位基因型.结果 用Na2HPO4法和Chelex-100离子交换法分别提取40张不同类型的间日疟原虫阳性血膜DNA,未染色的厚血膜全部扩增出目的基因条带,而染色的薄血膜未能扩增出目的基因条带.两种方法均可检测红细胞间日疟原虫感染率≥0.01%的血涂片.结论 从多年保存的标准血膜中提取疟原虫DNA进行基因型鉴别是可行的.
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1990-2000年宁海县基本消灭疟疾后监测结果分析
1 内容与方法1.1 病情监测1.1.1 面上监测每年4-10月份对临床诊断为疟疾、疑似疟疾、不明原因发热的病人(下称"三热"病人),制作厚薄血膜,经吉氏染色后镜检疟原虫,阳性者虫种鉴定.
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疟疾诊断方法的研究进展
疟疾是一种严重危害人类健康的蚊媒传染病.迄今为止,显微镜镜检(厚血膜,薄血膜)仍是疟疾诊断的金标准.但是显微镜镜检做为一种诊断方法又存在一些问题.由于疟原虫形体小,形态相似,难以染色和检出,要有经验的人员才能做到正确的诊断;同时,镜检费时费力,不适合大规模样品的检测[1].七十年代初,随着免疫学技术的发展,间接荧光抗体[1,2]和ELISA[3]均很快在疟疾诊断中得到应用.然而,这些方法也有自身的缺点:首先难以区分是现在还是以前的疟疾感染;其次,疟疾流行区人群的循环抗体水平高,用血清学检测流行区个体的抗体指标意义不大.再有生产特异纯净的抗原成本较高,而且天然抗原的制备技术落后还会直接降低其特异性和敏感性.近年来,随着分子生物学技术和生物化学技术的提高,以分子(疟原虫结构成份及代谢产物)或DNA为基础的疟疾诊断方法不断涌现.现将疟疾诊断技术方面的进展做一简要的综述.
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海南农垦1992~1997年流动人口疟疾监测
海南疟疾发病率居全国首位.随着改革开放和市场经济发展,大量非疟区易感人群进人海南疟区,在流动人口聚集点引起疟疾暴发,为控制疟疾的发病与扩散,我们在1992~1997年对进入垦区的省内外流动人口中"四热病人"或者居住在疟疾病灶点者采耳垂血涂厚薄血膜各一个(厚血膜直径1cm左右),编号登记,染色后镜检疟原虫并分类(下简称血检).
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检查疟原虫的三种方法比较
血涂片检查疟原虫是临床检验中的常用项目,制备血涂片有两种方法,即簿血膜和厚血膜,现在也采用试管法,试管法对疟原虫的检出率有所提高,现用厚血膜、薄血膜、试管法对150例疟原虫检查的标本进行比较.
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骨髓中发现疟原虫1例
疟疾是疟原虫感染所致传染病,外周血厚薄血膜染色镜检查找疟原虫是确诊疟疾、鉴别虫种的主要方法.现将骨髓中发现疟原虫1例患者资料报道如下.