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  • 核酸检测与酶联免疫检测血液病毒的比较分析

    作者:李玉泉

    目的 探析核酸检测与酶联免疫检测血液病毒的临床效果.方法 选取2013年7月—2016年7月该血站检验科血液样本500例为研究对象,分别给予核酸检测与酶联免疫检测,并且计算与对比两种检测方法 的阳性率.结果 在HBV(乙型肝炎病毒)检测中,核酸检测阳性率为3.0%(15/500),同酶联免疫检测的1.2%(6/500)进行比较,差异有统计学意义(P<0.05);在HCV(丙型肝炎病毒)检测中,核酸检测阳性率为1.8%(9/500),同酶联免疫检测的1.6%(8/500)进行比较,差异无统计学意义(P>0.05);在HIV(人类免疫缺陷病毒)检测中,核酸检测阳性率为0.4%(2/500),同酶联免疫检测的1.8%(9/500)进行比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 在血液病毒检测中,核酸检测与酶联免疫检测各具优势,存在一定的互补性,因此,可结合实际情况,给予两者联合应用,以此提高血液病毒检测准确性.

  • 长沙市无偿献血者血液样本酶联免疫检测联合核酸检测HBV的结果分析

    作者:白颖;张钢;郭咚;蒋义

    目的 分析2017年度长沙血液中心所有无偿献血者的血液样本HBV项目的酶联免疫检测联合核酸检测筛查结果.方法 对该站2017年1-12月采集的159228份血液的相应标本,先采用2种不同厂家试剂进行2遍包括HBsAg等4项感染性标志物的酶联免疫检测以及转氨酶的血清学检测,后对所有血清学检测结果合格的进行包括HBV DNA等3项经血传播病毒的核酸检测.结果 在159228份献血者样本中,共3552份样本血清学检测项目不合格,其中1259份HBsAg的结果为不合格.对血清学检测合格的155676份样本进行核酸检测后,71份为HBV DNA阳性.结论 对无偿献血者的样本采取酶联免疫检测和核酸检测相结合的联合检测模式,使HBV的检出率有明显提高,有效避免因隐匿性乙肝、窗口期等因素造成的漏检,降低输血传播乙肝风险,提高血站的血液质量安全.

  • 免疫检测技术在中药质量快速评价中的应用

    作者:张波;南铁贵;孙晴;刘洪美;丁凤伟;王颖

    中药质量评价分为有效性和安全性2个方面,现有的中药质量评价方法以仪器检测方法居多,不能满足生产及生活中简单、快速、现场化的实际需求.免疫检测技术具有灵敏度高、特异性强、操作简单、检测快速、检测成本低、仪器依赖性低、易于现场化等优点,在临床检验、食品安全检测及环境污染监测等领域应用广泛.近些年来,免疫检测技术逐渐应用于中药质量控制领域,涉及中药有效成分的定量检测,中药有害物质检测,中药外源性污染物检测等方面.该文综述了应用较广的酶联免疫检测法和胶体金免疫检测试纸条技术的原理及在中药质量评价中的应用,该技术在中药质量现场快速检测中具有较好应用前景.

  • 液相杂交技术在聚合酶链反应酶联免疫检测的应用

    作者:李稻;程建新;罗伟;施蓉;杭勤;黄东生;顾文莉;陶义训

    目的采用液相杂交技术,简化核酸杂交过程,建立乙肝病毒(HBV)的液相杂交的聚合酶链反应-酶联免疫检测(PCR-ELISA)方法。方法将5′端标记生物素的PCR扩增产物与5′端标记地高辛的探针呈液相混合,90℃ 2 min,55℃ 1 min杂交。杂交后产物被链霉亲和素酶标板固定,经酶标记抗地高辛标记抗体结合、显色。结果液相杂交酶联免疫检测条件优化:探针浓度3 pmol/次, 酶标记抗体稀释度1∶1000。液相杂交时间3 min,固相杂交时间120 min,但其检测结果无明显差别。检测灵敏度1×104拷贝/ml, 34份HBsAg(+),HBeAg(+),抗HBc(+)标本的阳性检出率为97.1%;34份HBsAg(+),抗HBe(+),抗HBc(+)标本的阳性检出率67.7% ;17份HBsAg(+)、抗HBc(+)阳性检出率58.8%;其他免疫检测指标组合标本为34份(5.9%);34份献血员标本均为阴性。结论在PCR-ELISA中使用液相杂交技术可使实验操作简便、快速,更适合临床实验室实际应用。

  • 电化学发光与酶联免疫检测血清甲胎蛋白的比较

    作者:李倩;高学慧;甘勇;潘蔚如

    目前,临床实验室常规检测血清甲胎蛋白(AFP)多采用酶联免疫法.近年来,电化学发光免疫法以其敏感、快速、稳定等优点,在固相标记免疫测定技术上居领先地位[1].为进一步了解电化学发光免疫法的特点,本文应用电化学发光免疫法与酶联免疫法对比检测165份临床血清标本的AFP含量,对数据进行统计分析和比较,报告如下.一、材料和方法

  • TRX及TXNIP在溃疡性结肠炎患者中的表达及作用

    作者:杨婕琳;冯丽英;赵东强;杨川杰;刘丽;姜慧卿

    目的 检测UC 患者血清及结肠组织中TRX 及TXNIP 的表达,分析这两种氧化应激因子与UC 病情严重程度的相关性,探讨二者在UC 发生发展中可能的作用.方法 收集29 例UC 患者(病例组)及25 例正常人(对照组/C 组)的外周静脉血和结肠黏膜活检组织.按照Sutherland DAI 评分标准予以患者评分后,分为轻中度活动组(A 组= 17 例)、重度活动组(B 组= 12 例).分别采用免疫组织化学染色法和酶联免疫检测技术(ELISA) 检测各组患者血清和结肠组织中TRX 及TXNIP 的表达.根据检测结果,对TRX 、TXNIP 与UC 患者病情严重程度的相关性进行统计学分析.结果 血清学检测显示:TRX 和TXNIP 在各组中的表达水平为:C 组0.05),余各组之间均有明显差异(P<0.05).免疫组织化学染色显示:TRX 在各组中的表达水平为:C 组A 组>B 组.各组间的表达均有明显差异(P<0.05).相关性分析:血清中TRX 及TXNIP 的表达与UC 患者病情的严重程度均具有显著相关性(r = 0.421,P <0.01; r = 0.439,P <0.01); 结肠组织中TRX 和TXNIP 的表达与UC 患者病情的严重程度均具有显著相关性(r = 0.940,P <0.01; r = -0.940,P<0.01).结论 活动期UC 患者血清中及结肠组织中TRX 与TXNIP 的表达与病情的严重程度密切相关,二者可能通过氧化应激机制参与了UC 的发病,其表达在一定程度上可以反映疾病的活动度.

  • 血液病毒采用核酸检验与酶联免疫检测的准确率比较研究

    作者:张伟富;王兆勇

    目的 比较研究血液病毒采用核酸检验与酶联免疫检测的准确率.方法 采用随机分组的方法将2013年1月至2015年1月来我院进行体检的10000位患者的血浆样本平均分为两份,分别采用核算检验与酶联免疫进行检测,观察组的10000份血液样本采用核酸检验方法,对照组10000份血液样本采用酶联免疫方法,对比分析两种检验方式的检测结果.结果 观察组10000份血液样本中其阴性有9940份为阴性,60份为阳性,阳性率为0.6%,对照组10000份血液样本中阴性有9830份为阴性,170份为阳性,阳性率为1.7%,观察组阳性检测率显著低于对照组,观察组其病毒检测准确率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)结论 针对血液病毒检测,采用核算检验能够显著的保证检验的准确率,其检查效果高于酶联免疫检测,在临床上值得推广应用.

  • 血液病毒采用核酸检验与酶联免疫检测的准确率比较研究

    作者:房敏

    目的 比较研究血液病毒采用核酸检验与酶联免疫检测的准确率.方法 采用随机分组的方法将2013年1月~2015年1月来我院进行体检的10000位患者的血浆样本平均分为两份,分别采用核算检验与酶联免疫进行检测,观察组的10000份血液样本采用核酸检验方法,对照组10000份血液样本采用酶联免疫方法,对比分析两种检验方式的检测结果.结果 观察组10000份血液样本中其阴性有9940份为阴性,60份为阳性,阳性率为0.6%,对照组10000份血液样本中阴性有9830份为阴性,170份为阳性,阳性率为1.7%,观察组阳性检测率显著低于对照组,观察组其病毒检测准确率显著高于对照组,差异显著,具有统计学意义(P<0.05)结论 针对血液病毒检测,采用核算检验能够显著的保证检验的准确率,其检查效果高于酶联免疫检测,在临床上值得推广应用.

  • 进口试剂检测HIV抗体假阳性2例分析

    作者:张秋丽;庞力;范丽霞

    1 临床资料1.1 一般情况 2008年2-7月,我们对无偿献血者标本4 441份进行HlV检测.1.2 试剂与仪器试剂:(HIV)1+2型抗体诊断试剂盒(北京高达生物技术有限公司),(HIV)1+2型抗原抗体诊断试剂盒(法国伯乐生物技术有限公司),(HIV)1+2型抗体诊断试剂盒(胶体硒法,雅培生物技术有限公司).仪器:RSP 150全自动加样仪(瑞士%cam公司),BEP Ⅲ全自动酶免分析仪(德国Beh-ing公司).

  • 分析核酸检验与酶联免疫检测血液病毒的应用及检验准确率

    作者:虢娟;邓凯航;林雪珍;赖艳娥;李尚烽

    目的 分析核酸检验与酶联免疫检测血液病毒的应用及检验准确率.方法 25087份无偿献血者标本,有24383份标本做完酶联免疫检测后又进行核酸检验.比较两种检验准确率.结果 24383份标本,其中酶联免疫检测阳性130份,准确率为0.53%,核酸检验阳性32份,准确率为0.13%,两种检验方法准确率对比差异具有统计学意义(P<0.05).结论 通过核酸检验对血液病毒进行检测具有较高的准确率和灵敏度,能大大减少误检、漏检的发生率,值得在临床推广应用.

  • 金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素的酶联免疫检测研究

    作者:薛士鹏

    目的:探讨金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素的酶联免疫检测的临床应用价值。方法本次研究的对象是小白鼠,将本院自制的金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素作为免疫抗体,研究这种抗体在产生过程中的作用,采用金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素间接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)检验方式对其进行检验,总结出金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素的酶联免疫检测在细菌霉素中检测的理论依据。结果本院自制的金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素纯度较高,能够与金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素的浓度呈现出线性关系。在本次研究过程中,小白鼠高效价为1:10000。从本次试验中发现,当金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素的浓度在2~1000 ng/ml 范围中时竞争性抑制率与金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素浓度10~450 ng/ml 时样品中的金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素浓度会随之增加。结论采用金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素的酶联免疫检测这种方式应用于检测中具有极强的价值,灵敏度较高,能够检测出样品中金黄色葡萄球菌 B 型肠毒素的残留情况。

  • HBsAg和抗-HCV两次酶联免疫检测方法与血液病毒核酸筛查技术的关联

    作者:于晓华;刘国强

    目的 采用酶联免疫方法对抗-HCV、HBaAg进行检测,以此探讨与分析两次酶联免疫检测措施和NAT技术对HCV、HBV检测的相关性.方法 根据酶免检测试剂说明书严格操作,通过ELISA方式常规酶联免疫血液筛查门诊血液标本的抗-HCV与HBsAg.结果 50份HBsAg阳性血清学筛查标本中,HBsAg进口与国产酶免检测阳性标本26例,进口阳性标本7例,国产阳性标本6例;48份抗-HCV阳性血清学筛查标本中,进口与国产酶免检测阳性标本13例,进口阳性标本2例,国产阳性标本1例.HBsAg的单一进口与单一国产试剂ELISA阳性率为0.07%、0.04%,进口与国产双试剂ELISA检测阳性率为0.35%;抗-HCV的单一进口与单一国产试剂ELISA阳性率为0.1%、0.06%,进口与国产双试剂ELISA检测阳性率为0.18%.国产与进口联用试剂检测阳性率明显高于其他两组,P<0.05,具有统计学意义.结论 进口和国产抗-HCV、HbsAg的ELISA试剂阳性差异性不明显,而进口国产双试剂的酶联免疫检测和核酸检测具有较高相符率.

  • PCR与酶联免疫检测乙肝病毒的结果比较

    作者:陈秀琴;杨江山;刘树业

    目前,临床上对乙型肝炎病毒(HBV)感染的诊断主要采用酶联免疫吸附法(ELLSA)和放免法(RIA)测定血清中的乙肝标志物(HBVM)由于聚合酶链反应(PCR)直接检测乙肝病毒核酸(HBV DNA)序列,其敏感性高,可达105pg,相当于标本中只要有3个HBV-DNA分子即可检出[1].

  • 急性心肌梗死中的心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)的检测

    作者:何广武;姜惠君

    目的:在确诊急性心肌梗死时,确定H-FABP佳检测时间.方法:通过检测各个时间段心肌梗死患者血清中H-FABP的浓度,确立检测佳时间.结果:心肌梗死患者胸痛3h后, H-FABP浓度显著升高;胸痛6h后,H-FABP浓度达到大值.结论:患者胸痛3h后,H-FABP浓度可以提供给临床医生进行诊断,而且具有较高的灵敏性和特异性.

  • 血站酶联免疫检测联合核酸检测降低输血传播疾病残余风险的效果观察

    作者:梁启忠;程玉根;胡伟伟

    目的 研究血站酶联免疫检测联合核酸检测降低输血传播疾病残余风险的效果.方法 选取我站在2015年4月—2016年7月采集的37121份无偿献血标本作为研究对象,给予其2次酶联免疫检测和1次核酸检测,并对检测结果进行分析.结果运用酶联免疫检测37121份血液标本,单次检测结果为阳性的有352份,双次检验结果为阳性的有115份;核酸检测37121份血液标本,有反应性的标本一共有48份,其中有28份为HBV-DNA有反应性,总阳性率为0.13%.结论当血液中的病毒处于变异、窗口期、隐性感染时,酶联免疫检测的准确率会下降,对用血的安全性造成影响.而酶联免疫检测联合核酸检测则能够减少此类漏洞的发生,提高检测结果的准确性,降低输血传播疾病的残余风险,值得血站推广应用.

  • 脱氧雪腐镰刀菌烯醇七肽模拟表位淘选及应用

    作者:邓舜洲;余宙;游淑珠;许杨

    目的 从噬菌体随机七肽库中淘选脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的模似表位,并以之替代人工抗原建立ELISA检测方法.方法 利用抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体12D1,从噬菌体随机七肽库中淘选到脱氧雪腐镰刀菌烯醇七肽模似表位,七肽模拟表位氨基酸序列为CMRPWLQ.以含有DON七肽模拟表位的噬菌体替代DON人工抗原建立DON间接竞争ELISA检测方法,检测范围为20~400 ng/ml,并应用于小麦、玉米样品中DON含量的检测.结果 检测结果与德国r-Biopharm公司DON检测试剂盒差异无统计学意义.结论 DON噬菌体模拟表位替代DON人工抗原建立的ELISA检测方法可应用于小麦和玉米样品中DON的检测.

  • 浅析进行酶联免疫检测在诊断乙型病毒性肝炎中的价值

    作者:覃家威

    目的:探讨进行酶联免疫检测在诊断乙型病毒性肝炎(乙肝)中的临床价值.方法:选取2015年8月至2017年4月期间在广东省罗定市人民医院进行乙肝检测的200例体检者作为研究对象.对这200例体检者均进行酶联免疫检测和金标免疫检测.对比分析用这两种检测方法诊断大三阳、小三阳的准确率、诊断乙肝的敏感度和特异度.结果:用酶联免疫检测法和金标免疫检测法诊断大三阳的准确率相比,差异无统计学意义(P>0.05).与用金标免疫检测法相比,用酶联免疫检测法诊断小三阳的准确率更高,差异有统计学意义(P<0.05).用酶联免疫检测法和金标免疫检测法诊断乙肝的敏感度相比,差异无统计学意义(P>0.05).与用金标免疫检测法相比,用酶联免疫检测法诊断乙肝的特异度更高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:进行酶联免疫检测在诊断乙肝中具有重要的临床价值.

  • 应用核酸酶免疫试验中探针的熔解温度差异检测已知突变位点

    作者:李稻;杨卫华;段宝华;杭勤;程新建;王鸿利

    目的:探索建立一种利用核酸酶免疫试验中探针的熔解温度差异检测已知突变位点的方法.方法:目的靶基因经扩增后,5'末端标记洋地黄毒苷(digoxigenin,Dig)的等位基因探针与已结合在酶标板上的扩增产物杂交,其杂交的探针-DNA二聚体的碱基错配与未错配之间存在变性温度差异.选择适宜的熔解温度进行已知突变位点的检测,并利用酶联免疫吸附试验对标记探针进行识别、放大和结果判断.结果:实验结果表明,当熔解温度为37℃时,扩增产物的加样量为5μl/孔和检测探针加入量为10 pmol/孔时所测得A450值为0.800~0.923.等位基因检测探针的熔解温度为53℃,P1、P2与靶DNA结合率分别为86%和16%.当P1、P2按不同比例杂合时,其与结合率存在着明显的线性关系(r=0.9985).从8例人类乙型肝炎病毒(HBV)DNA阳性的血清标本检测中证实1例酪氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YVDD)突变、3例野生型,其余4例可能是杂合型突变.结论:本法具较高的检测灵敏度,且其突出的特点是能检测出标本中杂合突变所占的比例,间接反映出患者体内突变的类型和比例.这对于疾病的诊断、治疗、预后评价等都具有较高的价值.

  • HBsAg 和抗-HCV 酶联免疫检测与血液病毒核酸筛查技术之间的相关性分析

    作者:钟万芬;唐小勇

    目的:探讨 HBsAg 和抗-HCV 酶联免疫检测方法与血液病毒核酸筛查技术之间的相关性。方法对我院血液科2011年12月到2013年12月血样标本12300个,首先进行 HBsAg 和抗-HCV ELISA 检测,再利用中和试验和重组免疫印迹试验(RIBA)进行确认检测,并对确认检测阳性和阴性样本行血液病毒核酸筛查,分析 ELISA 检测与血液病毒核酸筛查之间的相关性。结果经过 HBsAg ELISA 国产试剂和进口试剂检测血样标本12300个,221个为阳性,占1.80%,国产和进口试剂检测一致率为99.72%,经过配对卡方检验,两种试剂间差异无统计学意义(P >0.05);抗-HCV ELISA 检测阳性112个,占0.91%,国产和进口试剂检测一致率为99.60%,两种试剂间差异无统计学意义(P >0.05);HBsAg 经过再次确认检测其中阳性201个,阴性20个,再次确认检测与国产和进口试剂检测一致率为90.95%;抗-HCV再次确认检测其中阳性55个、阴性43个、可疑14个,再次确认检测与国产和进口试剂检测一致率为61.61%;经过核酸检测技术(NAT)检测 HBV DNA 阳性和阴性分别为203个、18个,HCV RNA 阳性和阴性分别为70个、42个。将两种因素合并计算,ELISA 检测联合再次确认检测灵敏度为97.44%、特异度93.33%。结论 HBsAg 和抗-HCV ELISA 检测具有较高的灵敏度和特异度,但是由于使用 ELISA 试剂盒不同,常存在误检,而血液病毒核酸筛查技术可以减少这种误检,再次提高检出率。

  • 应用酶联免疫法检测粪便中幽门螺杆菌抗原

    作者:成红艳;董立杰;鹿博;周甜;陆文伟

    自1982年Warren和Marshall首先从人类胃黏膜中培养出幽门螺杆菌(HP)以来,大量研究证实HP感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡的主要病因,与胃癌、胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤的发病也密切相关[1].检测HP感染对这些疾病的防治有着重要的意义.因该种方法系无创性检查,对于抗HP治疗后的复查,患者更易于接受.近年来国外报道一种无创性检查新方法,采用酶联免疫法检测粪便中HP抗原[2-5].我们采用HPSA检测试剂盒检测粪便中HP抗源,并与常规检测方法RUT、WS银染法和14C-UBT进行比较,现报道如下.

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