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丝胶对2型糖尿病大鼠胰腺胰岛素PI3K-Akt信号通路的调节作用
目的 探讨丝胶是否通过影响胰腺胰岛素PI3K-Akt信号通路发挥降血糖的作用.方法 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组,每组12只.采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素(35 mg/kg,2次,1次/d)连续腹腔注射法制作2型糖尿病大鼠模型,模型成功标准是空腹血糖≥11.1 mmol/L.模型成功建立后,丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃35d.采用ELISA法检测大鼠血清脂联素水平,Western blotting法和Real-time PCR法分别检测大鼠胰腺胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和Akt蛋白和mRNA的表达情况.结果 与糖尿病模型组比较,丝胶治疗组大鼠血清脂联素水平,胰腺IR、IRS-1、PI3K、Akt蛋白和mRNA的表达明显升高(P＜0.01,P＜0.05).结论 丝胶可通过上调糖尿病模型大鼠胰腺IR、IRS-1、PI3K和Akt的表达,改善糖尿病时胰腺胰岛素PI3K-Akt信号转导通路的异常,从而发挥降低血糖的作用.
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当归多糖拮抗致衰剂对大鼠胸腺结构与功能的保护作用
目的 探讨当归多糖(ASP)拮抗致衰剂对大鼠胸腺结构与功能的保护作用及相关机制.方法 SD大鼠随机分为4组,每组10只.衰老模型组,每天1次皮下注射D-半乳糖(120mg/kg),共42d;ASP衰老模型组,每天1次注射D-半乳糖剂量与时间同衰老模型组,第15天起腹腔注射ASP (100 mg/kg),至第42天;正常对照组,每天皮下注射等量生理盐水42d;ASP对照组,注射等量生理盐水14d,第15天起腹腔注射ASP 28d(同ASP衰老模型组).药物注射完成后第2天,取各组胸腺,测定胸腺指数,观察胸腺组织形态学,检测胸腺细胞衰老;制备各组胸腺细胞,体外培养细胞检测其增殖、细胞周期分布,测定细胞因子分泌量、细胞产生活性氧(ROS)及超氧化物歧化酶(SOD)含量.结果 D-半乳糖复制的衰老模型大鼠胸腺结构与功能损伤明显.与衰老模型组大鼠比较,ASP衰老模型组大鼠胸腺指数升高,胸腺皮质与髓质面积比例增加,胸腺细胞的增殖能力提高,处于G1期胸腺细胞比例减少,G2及S期细胞比例增加,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-3-Gal)阳性胸腺细胞百分率下降,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素(IL)-2、IL-6的分泌能力明显提高,SOD活性明显提升,ROS含量下降.结论 当归多糖对致衰剂D-半乳糖所致的胸腺损伤有明确的拮抗作用,其机制可能与抑制氧化损伤有关.
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青海省妊娠高血压综合征患者血清瘦素水平及瘦素受体的基因多态性
目的 探讨瘦素受体(LEPR) Gln223 Arg(rs1137101)基因多态性与青海省妊娠高血压综合征之间的相关性.方法 选取妊娠高血压综合征(PIH)患者107例,正常妊娠组116例,用ELISA法检测血清瘦素水平.以外周静脉血DNA为模板,采用聚合酶链反应-限制性内切酶长度片段多态性(PCR-RFLP)对LEPR基因Gln223Arg位点基因型进行分析.结果 PIH组血清瘦素水平高于对照组(P＜0.05).PIH组基因型频率GG型、GA型和AA型分别为49.5％、43.9％和6.5％,对照组分别为63.8％、32.8％和3.4％.PIH组和对照组LEPR基因Gln223 Arg位点等位基因G和A频率分布具有差异性.PIH组A等位基因频率高于正常妊娠组(x2=4.60,P＜0.05,OR=0.62,95％ CI=0.40 ～0.96).结论 LEPR基因Gln223Arg的A等位基因是PIH遗传易感基因之一,可能是PIH的潜在危险因素.
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呼吸道合胞病毒抗原酶联免疫吸附测定检测方法的建立及应用
目的建它呼吸道合胞病毒抗原酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法,应用其对来源于本院的临床样本进行检测.方法建立ELISA方法,检测标本中的呼吸道合胞病毒,与呼吸道合胞病毒细胞培养检测方法进行对照,并利用该方法进行该病毒2007年在广州市的流行性分析.结果本方法的灵敏度略高于呼吸道合胞病毒的细胞培养检测方法,对甲型流感病毒(H3N2亚型、H1N1亚型)、乙型流感病毒、副流感病毒(Ⅰ型、Ⅲ型)、呼吸道腺病毒(Ⅲ型、Ⅶ型)无特异性反应.结论本呼吸道合胞病毒抗原ELISA检测方法可用于呼吸道合胞病毒感染的临床诊断和鉴别诊断.
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广州市健康人群EB病毒感染情况的调查分析
目的 了解广州地区健康人群中的EB病毒感染情况.方法 采用ELISA法检测2007年1月至2011年12月本院体检的217 935例健康人的EB-VCA-IgA抗体,统计对比男女阳性率、5年间阳性率及各年龄段(≤29岁、30 ～ 39岁、40 ～ 49岁和≥50岁5个组)阳性率的差异.结果 EB-VCA-IgA抗体阳性4667例,总阳性率2.14％.其中男性135 985例,阳性率1.87％(2547/135 985)；女性81 950例,阳性率2.59％(2120/81 950),男女阳性率差异有统计学意义(P=0.000).5年间各年阳性率差异有统计学意义(x2=576.054,P=0.000).EB-VCA-IgA抗体的阳性率随着年龄的增长而增高,各年龄段差异均有统计学意义(P=0.000).结论 广州地区健康人群中有一定比例的EB病毒感染者,且40岁以上健康人群感染率相对较高.
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尿液膀胱癌特异性核基质蛋白4检测对非肌层浸润性膀胱癌术后监测及预后评估的意义
目的 探讨尿液膀胱癌特异性核基质蛋白4(BLCA-4)检测对非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌术后监测及预后评估的意义.方法 收集2013年12月至2015年6月就诊于本科室的膀胱癌患者42例,均行经尿道膀胱肿瘤电切术,术后均经病理证实为膀胱非肌层浸润性尿路上皮癌.术前及术后1、3、6、12个月收集患者尿液标本进行BLCA-4水平检测,术后每月进行膀胱镜检查明确肿瘤复发情况.分析术前尿液BLCA-4水平与临床病理参数的关系.多因素COX回归分析膀胱癌术后复发的危险因素.结果 42例患者尿液BLCA-4水平在术后1个月降至低,术后3个月开始逐渐升高.术后肿瘤复发患者经膀胱镜检查确诊前均出现尿液BLCA-4水平升高,尿液BLCA-4呈阳性早时间比膀胱镜确诊复发时间早(8.1±3.5)个月.术前尿液BLCA-4水平与肿瘤分级、临床分期有关(均P<0.05).多因素COX回归分析显示,术前尿液BLCA-4高表达、术后3个月及6个月尿液BLCA-4阳性是肿瘤复发的危险因素(均P<0.05).结论 检测尿液BLCA-4水平适用于膀胱癌术后监测及预后判断.
关键词： 膀胱癌特异性核基质蛋白4 酶联免疫吸附测定 肿瘤复发 预后 -
ELISA检测特异性IgG4诊断肺吸虫病的效果观察
目的探讨用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测特异性IgG4诊断肺吸虫病的效果.方法采用ELISA法检测了肺吸虫病病人血清中的特异性IgG和IgG4抗体及肝吸虫、囊虫、旋毛虫、日本血吸虫病病人和正常人血清中的交叉抗体.结果检测肺吸虫病病人血清中IgG4的敏感性为95.35%,检测正常人血清的特异性为100%,与常规使用的酶联葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)检测结果及检测IgG结果比较差异无显著性(P均＞0.05);与其他寄生虫病病人血清中的交叉反应率,IgG4显著低于用常规HRP-SPA检测结果. 结论ELISA法检测肺吸虫病病人血清中特异性IgG4具有较高的诊断应用价值.
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156例SARS患者血清抗SARS冠状病毒抗体的观测
本研究的目的是观察严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome, SARS)患者抗SARS-冠状病毒(SARS-CoV)抗体IgG和IgM的产生及抗体效价变化特征,探索采集SARS痊愈患者抗血清的时机.应用ELISA方法对随机抽取的156名SARS患者血清标本进行抗SARS-CoV抗体IgG和IgM抗体效价测定.结果表明, 156名SARS患者于病后3至9周期间,IgG抗体阳性率为75.6%, IgM抗体阳性率为41.7%, IgG和IgM抗体均阳性为41%, IgG和IgM抗体均阴性为23.7%; IgG抗体阳性患者中抗体效价为18.23±24.72, IgM抗体阴性患者抗体效价为2.18±1.13; IgG和IgM抗体效价与SARS患者的性别、年龄、病程、体温正常天数无显著相关性.结论: 并非所有SARS患者都能产生抗SARS-CoV抗体,即使产生抗体,其效价的个体差异也较大,并不能通过性别、年龄、病程及体温正常天数等因素较准确地评估抗体的效价.因此,在SARS抗血清采集前,应重新进行抗体效价测定,遴选具有高效价抗SARS-CoV抗体的SARS痊愈患者进行抗血清的采集,才能提高所采集的抗血清在临床的治疗效果,同时又可为患者抗体输注提供量化指标.
关键词： 严重急性呼吸综合征 抗SARS冠状病毒抗体 酶联免疫吸附测定 -
应用酶联免疫法检测组织工程骨牛血清白蛋白残余量的实验研究
目的 检测常规体外构建的组织工程骨中牛血清白蛋白残余量,并探讨减少其残留量的方法.方法 体外分离培养人骨髓基质干细胞,取第2代细胞(P2)接种于完全脱钙骨支架材料并成骨诱导培养2周,体外构建组织工程骨.成骨诱导液为含10％胎牛血清的条件培养液,并于检测前1天更换为无血清的条件培养液.待测组织工程骨先经1∶100 (v∶v)生理盐水浸洗3次,然后加入磷酸盐缓冲液(PBS),37℃振荡浸提24 h,获取浸提液.同法获取未接种细胞的单纯支架材料的浸提液作为对照组.采用酶联免疫法检测样品浸提液中牛血清白蛋白的残余量,比较两者牛血清白蛋白残余量的差异.结果 经生理盐水洗涤3次后,洗涤液中的牛血清白蛋白含量明显降低.酶联免疫法测定的组织工程骨与单纯支架材料的牛血清白蛋白残余量分别为(15.57±5.82)ng和(14.85±5.06)ng,单位重量的牛血清白蛋白残余量分别为(0.254±0.088)ng/mg和(0.306±0.079)ng/mg,两组相比均无显著性差异(P＞ 0.05,n=10).结论 酶联免疫法适用于组织工程骨中牛血清白蛋白残余量的检测.因为支架材料较细胞更易吸附牛血清白蛋白,现有条件下构建的组织工程骨牛血清白蛋白残余量仍然较高,需要继续探索降低其残余含量的新方法.
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两种纳米金标记p53抗体探针的制备、表征和性质研究
目的 制备IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP两种纳米金标记p53抗体探针,并对其进行生物学特征表征和性质研究.方法 利用纳米金粒子与蛋白质非共价吸附和与巯基修饰的寡核苷酸以Au-S键共价结合的特点,将辣根过氧化物酶(HRP)直接或通过寡核苷酸链间接标记在纳米金表面,制备两种多功能纳米金生物探针(IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP探针);应用透射电镜、紫外-可见光光谱等对纳米金探针性能进行表征,对纳米金探针表面HRP酶活性进行分析,并通过酶免疫标记技术(enzyme linked immuncsorbent assay,ELISA)优化探针制备条件和比较两种探针标记效率.结果 ①两种新型探针具有良好的单分散性,大小均一,粒径约10 nm;②p53蛋白检测效果对IgG-Au-HRP和IgG-Au-DNA-HRP探针制各条件优化结果表明:制备IgG-Au-HRP探针时,HRP分子和p53抗体的佳比例为10:1;制备IgG-Au-DNA-HRP探针时,DNA和p53抗体的佳比例为2.5:1;③HRP分子定量检测显示:一个IgG-Au-HRP探针可标记HRP数量约11个,IgG-Au-DNA-HRP探针可标记HRP数量为20个;④两种探针结合ELISA法初步检测p53蛋白判定IgG-Au-DNA-HRP探针比IgG-Au-HRP探针检测蛋白灵敏度高.结论 两种新型纳米金探针制备简单,可作为一种新型探针应用于微量蛋白的高灵敏检测.
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白喉和破伤风类毒素抗原ELISA检测方法的建立
目的 建立定量检测白喉和破伤风类毒素抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法.方法 分别采用白喉、破伤风单抗包被酶标板,兔抗白喉、破伤风多抗作为二抗,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔 IgG抗体作为酶标抗体,以平行线法建立定量检测白喉和破伤风类毒素抗原含量的夹心 ELISA 法,并进行方法学验证.结果 两种定量检测 ELISA 方法的验证结果均符合规定.检测白喉类毒素抗原 ELISA 方法的定量限为 8.90 × 10-4Lf/ml,回收率为 98.35%,批内变异系数(CV)≤10.59%,批间 CV ≤ 13.51%;检测破伤风类毒素抗原ELISA 方法的定量限为 2.13 × 10-3Lf/ml ,回收率为107.28%,批内 CV ≤ 13.96%,批间 CV ≤ 10.06%.结论 建立了白喉、破伤风类毒素抗原 ELISA 检测方法,该法特异性强、准确度高、重复性好,可用于白喉破伤风疫苗产品的质量控制和生产过程控制.
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siRNA干扰跨膜转运蛋白21的表达对KO小鼠胚胎成纤维细胞γ分泌酶活性的影响
目的 探讨跨膜转运蛋白21(TMP 21)对γ分泌酶活性的影响.方法 将淀粉样前体蛋白基因缺陷型KO小鼠胚胎成纤维细胞[MEF(KO)]分为转染组(T)和对照组(C),转染组转染载有TMP 21小分子干扰RNA(siRNA)的质粒,对照组转染空质粒.每组均制备包含细胞全膜蛋白的样品(T1、C1),经CHAPSO进一步溶解后超速离心制备所得纯化全膜蛋白样品(T2、C2),用γ分泌酶组分早老蛋白1(PS-1)特异性抗体免疫沉降C2或T2后获得的γ分泌酶样品(IPT2、IPC2).蛋白质印迹法检测各类样品中γ分泌酶重要组分TMP 21、PS-1和Nicastrin(NCT)蛋白表达量;应用ELISA法检测β淀粉样肽40和β淀粉样肽42的生成总量.结果 蛋白质印迹法检测显示,TMP 21蛋白表达量在转染组样品IPT2中为5294±247 ng/ml,在对照组样品IPC2中为19110±579 ng/ml,组间差异有统计学意义(P<0.05);各类样品中PS-1与NCT蛋白表达量无明显变化;TMP21可与PS-1共沉降.ELISA法检测显示,转染组样品IPT2与饱和浓度底物C99反应生成的β淀粉样肽40和β淀粉样肽42总量为348±18 pg/ml,对照组样品IPC2为与饱和浓度底物C99反应生成的β淀粉样肽40和β淀粉样肽42总量为342±18pg/ml,组间差异有统计学意义(P<0.01).结论 TMP 21可能为γ分泌酶的组分之一.在TMP21蛋白低表达状态下γ,分泌酶活性升高,提示TMP 21为γ分泌酶的负调控因子之一.
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两种ELISA试剂盒对我国单采血浆中水痘-带状疱疹病毒中和抗体滴度的测定和比较
目的 采用两种不同的检测抗水痘-带状疱疹病毒(VZV)中和抗体间接ELISA法试剂盒,对我国单采血浆中VZV特异性免疫球蛋白(VZIG)的效价进行测定,比较两种试剂盒测定结果的相关性和血浆筛查的适用性,并分析利用国内单采血浆研发生产VZIG的可行性.方法 随机选取182份单采血浆样品,100倍稀释后,使用Virion/Serion和VaccZyme/Binding Site两种商品试剂盒同时对样品进行测定,根据评估系统公式或曲线方程计算每份样品中VZIG的效价;采用Pearson乘积矩相关性方法对两种试剂盒的线性关系进行统计学分析.结果 ①VZIG高于10 IU/ml的血浆样品数量为13份(7％,Virion)和16份(9％,VaccZyme):②两种试剂盒检测结果之间的直线线性关系数R2为0.62 (P＜ 0.0001),变异系数为4％;③Virion与VaccZyme的工作范围有不同,前者对于低效价(0.2 ～ 0.4 IU/ml)样本的测定具有很好的灵敏度,而VaccZyme适用于高效价血浆样本(＞150 IU/ml)的检测.结论 Virion与VaccZyme结果具有一致性和相关性;两种试剂盒的工作范围略有差异,VaccZyme较Virion更适用于高效价VZIG原料血浆的检测,可用于普通献浆员单采血浆中VZV中和抗体的筛查.
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甘肃省SARS抗体血清流行病学调查
目的了解甘肃省严重急性呼吸综合征(SARS)患者、密切接触者和正常人群血清SARS冠状病毒特异性IgG抗体水平.方法利用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测SARS病毒IgG抗体水平.检测对象包括甘肃省9例SARS患者的急性期和(或)恢复期系列血清,1 109例直接护理SARS患者的医生、护士、实验室检测人员、疾控人员和曾与患者有接触的人员以及978例正常人血清.结果9例临床诊断病例SARS冠状病毒特异性IgG抗体中6例为阳性,疾病恢复后12个月血清抗体仍为阳性；密切接触者1例特异性IgG抗体阳性；正常人3例特异性IgG抗体阳性.结论病例抗体阳性符合临床诊断,密切接触者和正常人的抗体阳性数较低,提示可能不存在隐性感染.
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两种分泌抗PrP单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其初步鉴定
目的制备具有广谱种属反应性的PrP单克隆抗体(McAb),用于可传播性海绵样脑病(TSE)的诊断及致病机制研究.方法分别将对应于牛PrP29～48 (BoP1)、PrP89～108 (BoP2)的两种多肽与匙孔血蓝蛋白(KLH)偶联,免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后获得分泌针对上述两种多肽的杂交瘤细胞株,用Western-blot方法检测这些细胞株分泌的McAb与牛(Bo)、人(Hu)和仓鼠(Ha)PrP蛋白的反应性.结果通过细胞融合和2～3轮克隆化,用ELISA筛选出分泌抗BoP1和BoP2抗体的杂交瘤细胞株D11和D8.Western blot显示,获得的McAb均能分别与重组BoPrP(25～242)、重组HuPrP(23～231)和HaPrP(23～231)反应.结论获得了可与牛、人和仓鼠PrP反应的两种McAb,可用于哺乳类PrP检测及TSE致病机制研究.
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HIV-1整合酶酶联免疫吸附试验及其抑制剂的研究
目的建立一种检测人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)整合酶的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,用于筛选和研究HIV-1整合酶抑制剂.方法将质粒F185K/C280S IN1-288转化到大肠埃希菌中,经IPTG诱导表达,柱亲和层析纯化,获得HIV-1整合酶融合蛋白.建立酶联免疫吸附试验方法测定其生物学活性,与32P同位素标记方法比较,并用ELISA方法筛选HIV-1整合酶的抑制剂.结果 SDS-PAGE电泳分析显示,相对分子质量30 000上方有HIV-1整合酶融合蛋白条带出现.ELISA及32P同位素标记法证实,此融合蛋白对于特异底物具有3′切割和链转移活性.ELISA反应的平均P/N值为2.836±0.161,批内及批间变异系数(CV)分别为4.63%和5.89%.检测到中药丹参提取物CEH等有抑制整合酶的活性,CEH的大孔树脂洗脱物CEHL活性提高.结论 ELISA法检测HIV-1整合酶活性技术简单,快速,重复性好,无同位素污染,可用于HIV-1整合酶为靶点的抑制剂的筛选及抗-HIV药物作用机理的研究.
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RT-PCR-ELISA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度的初步研究
目的应用核酸扩增产物测定的固相杂交酶联显色法(RT-PCR-ELISA)检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度.方法应用RT-PCR-ELISA,将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物,与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶联显色,读取吸光度(A值),判断结果.应用此法检测了11批甲肝活疫苗滴度,并与常规细胞培养法(CCID50)比较.结果本方法与细胞培养法的敏感性相仿,具有简便、快速、特异的优点.结论 RT-PCR-ELISA法有望代替常规细胞培养法应用于甲肝减毒活疫苗病毒滴度的检测.
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黄芩、板蓝根等清热解毒药对流感病毒所致肺炎小鼠炎性因子蛋白表达的影响
目的 研究清热解毒代表药物对流感病毒FM1感染肺炎小鼠肺匀浆炎性细胞因子的影响,以筛选出对流感病毒具有更好免疫调控作用的清热解毒中药.方法 建立流感病毒鼠肺适应株(FM1)感染的小鼠肺炎模型,采用双抗夹心ELISA法分别在感染后第1、3、5、7天检测空白对照组、模型对照组、黄芩组、板蓝根组、白头翁组、虎杖组、白花蛇舌草组小鼠肺匀浆TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-1、IL-10含量的变化.结果 流感病毒感染小鼠后,模型组TNF-α,IL-1,IL-6,IFN-γ的蛋白表达高于正常空白组,在第3天达峰值,差异有统计学意义(P＜0.05).清热解毒代表药物黄芩、板蓝根均可以降低TNF-α、IL-6、IL-1含量,提高IL-10、IFN-γ的含量,第3、5天时作用较明显,有统计学意义(P＜0.05).白头翁、虎杖及白花蛇舌草对炎性细胞因子在一定程度上有调节作用,但效果不及黄芩和板蓝根.结论 清热解毒代表药物黄芩、板蓝根可通过调节细胞因子水平来干预流感病毒引起的免疫损伤,从而发挥抗流感病毒的作用.
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朊蛋白N端和C端多肽特异性抗体的制备及ELISA检测技术的研究
目的 制备朊蛋白N端和C端多肽特异性抗体,并对ELISA方法在朊病毒病检测中的应用进行研究.方法 构建人朊蛋白N端和C端多肽原核表达重组质粒,分别表达纯化融合蛋白.以此为抗原制备朊蛋白N端和C端多肽特异性抗体.ELISA和Western Blot检测所制备抗体与重组和天然的PrP蛋白的免疫反应性.初步建立间接ELISA检测技术.结果 所制备的N端和C端抗体可特异性识别重组全长PrP蛋白和相应的PrP片段,无明显交叉反应.C端抗体还可有效地识别感染羊瘙痒因子263K的仓鼠脑组织中经PK消化后的PrPSc,其Western Blot反应带型与PrP单抗3F4相似.5000 r/min离心处理脑组织悬液可有效保留上清中PrPSc成分而不影响ELISA检测.蛋白酶K虽经灭活处理,但可明显抑制重组和天然PrP在液相中与相应抗体的结合.间接ELISA方法可根据反应A值区分正常或感染动物样本.结论 所制备的朊蛋白N端和C端抗体具有良好的特异性,C端抗体可用于实验性朊病毒病的检测.建立的间接ELISA方法可试用于朊病毒病的初步筛查.
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TTV酶联免疫方法的建立及其初步应用
目的建立检测TTV的酶免疫技术，了解不同型肝炎患者血清中抗-TTV抗体的分布情况，并结合TTV DNA的检测分析两者的关系。方法 以原核表达的TTV ORF1蛋白为抗原建立检测抗-TTV的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法，采用该方法检测不同肝炎患者中抗-TTV抗体；以套式聚合酶链反应(PCR)方法检测血清标本中TTV DNA。结果 所建立的检测TTV的ELISA方法具有较好的特异性，不同型别肝炎患者中抗-TTV抗体阳性率分别为：甲型肝炎患者10.5%(4/38)，乙型肝炎患者12.5%(16/128)，丙型肝炎患者8.3%(7/84)，丁型肝炎患者7.7%(1/13)，戊型肝炎患者12%(3/25)，庚型肝炎患者6.5%(4/62)，非甲～庚型肝炎患者32.3%(30/93)，健康人群1.3%(1/78)。统计学分析表明，非甲～庚型肝炎患者抗-TTV阳性率显著高于其他型肝炎患者(P<0.01)，而正常人群则显著低于肝炎患者(P<0.05)。抗-TTV阳性率与TTV DNA阳性率存在相关性(P<0.05)。结论 在不同型肝炎患者中均可检出抗-TTV抗体，但以非甲～庚型肝炎患者阳性率高；TTV抗体可与基因同时存在于患者血清中，抗-TTV抗体可能类似抗-HCV，是一传染性标志。
