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Src介导ERK信号通路对宫颈癌细胞增殖凋亡的作用
目的 探讨Src介导ERK信号通路对宫颈癌细胞增殖凋亡的作用.方法 采用体外细胞实验方法,以宫颈癌细胞Hela(HPV阳性)和C33A(HPV阴性)为研究对象,施加Src激酶选择性抑制剂(PP2)对Src激酶进行抑制.于抑制前后采用流式细胞术(FCM)检测各组细胞的周期及凋亡情况,分别采用Real-time PCR法和Western-blot法检测各组细胞ERK 1/2、c-Fos和c-Jun的mRNA和蛋白表达水平.应用SPSS 20.0软件进行数据录入和分析.结果 Src抑制后,Hela和C33A细胞均显示增殖指数降低,凋亡率升高,处于G0/G1期细胞比例升高,S期和G2/M期细胞比例降低,ERK 1、ERK 2、c-Fos和c-Jun的mRNA含量升高,ERK 1/2、磷酸化ERK 1/2 (p-ERK 1/2)和磷酸化c-Fos (p-c-Fos)蛋白表达水平降低,c-Jun和磷酸化c-Jun(p-c-Jun)蛋白表达水平升高.Hela细胞凋亡率、p-ERK 1/2和c-Fos蛋白在Src抑制前后的变化低于C33A细胞.结论 Src活化可以上调ERK信号通路中关键因子ERK 1/2和c-Fos磷酸化蛋白的表达,促进宫颈癌细胞的生长与增殖,在宫颈癌变中发挥重要作用.HPV感染可能对Src介导的ERK信号通路调节具有调节作用.
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ERK信号通路在中药诱导脑缺血耐受中的研究进展
脑缺血耐受是指机体在遭遇严重的缺血性损伤时的一种内源性脑保护现象。缺血预处理是诱导脑缺血耐受的有效手段，但因其本身的有创性和受伦理限制，难以在临床中实施。研究发现，细胞外信号调节激酶（ERK）信号传导通路在脑缺血耐受的形成机制中有着重要作用，同时中药诱导脑缺血耐受形成有着独到优势。本文就近年来ERK信号通路在脑缺血耐受诱导中的作用以及中药干预作用进行综述。
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翘芩清肺剂对哮喘大鼠气道平滑肌细胞外信号调节激酶通路的影响
目的:探讨翘芩清肺剂在改善哮喘气道炎症及其可能的作用机制.方法:选取雌性SD大鼠50只,制备哮喘大鼠模型并随机分成5组,即正常组、模型组、地塞米松组和翘芩清肺剂低、高剂量组.分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1(IL-1)、IL-5及干扰素-γ(IFN-γ)的含量,并观察肺组织病理学改变;用免疫组织化学染色法观察细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)在肺组织内的表达,转化生长因子(TGF)-β1在支气管组织内的表达;用实时定量-聚合酶链反应(Real-time PCR)测定气道平滑肌组织中ERK mRNA含量.结果:模型组中ERK蛋白含量及mRNA水平,TGF-β1蛋白表达较正常组有显著增加(P＜0.05);与模型组比较,各干预组均能明显降低ERK mRNA及TGF-β1蛋白水平(P＜0.05).结论:翘芩清肺剂可明显改善哮喘大鼠的呼吸道症状,对气道具有保护作用,其作用机制可能与调节IL-4/IFN-γ平衡失调、抑制ERK通路的磷酸化,减轻气道炎症有关.
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参术胶囊对脾虚胃癌小鼠ERK信号通路中AP-1和IL-2的影响
目的:研究参术胶囊对脾虚胃癌小鼠细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路中转录激活蛋白-1(AP-1)和白细胞介素-2(IL-2)的影响,以探讨参术胶囊阻断脾虚胃癌发生的机制.方法:随机取17只SPF小鼠作为空白组正常喂养,其余小鼠均首日给予山西白醋15 mL·kg-1·d-1灌胃,次日给予10 mL·kg-1·d-1灌胃,连续9d,第10天给予N-亚硝基二乙胺(DENA)按2.8 mg· kg-1·d-1灌胃,连续110 d,建立脾虚胃癌小鼠模型.将模型动物随机分为模型组、胃复春片718 mg·kg-1·d-1剂量组、参术胶囊440,220,110 mg·kg-1 ·d-1剂量组,试验组从111 d起灌胃给药,连续30 d.实验结束后,观察各组小鼠一般情况的变化；HE染色观察参术胶囊是否阻断脾虚胃癌的发生；用免疫组化法研究参术胶囊对诱导脾虚胃癌模型ERK1/2,AP-1,IL-2等指标的影响.结果:参术胶囊作用脾虚胃癌小鼠模型30 d后,能改善诱发型脾虚胃癌小鼠模型一般状态,其病理表现较模型组明显减轻,免疫组化结果显示胃复春片组和参术胶囊440,220 mg·kg-1 ·d-1剂量组均能明显增强模型动物ERK1/2,AP-1,IL-2的表达(P ＜0.05,P ＜0.01),参术胶囊110 mg·kg-1·d-1剂量组能明显增强模型动物ERK1/2的表达(P＜0.01),而对AP-1,IL-2的表达无明显改善.结论:参术胶囊可通过ERK信号通路阻断脾虚胃癌发生.
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基于Raf/Ras/ERK信号通路探讨督脉电针对脊髓损伤1、7d后MEK2、p-ERK1的影响
目的:观察督脉电针对脊髓损伤(SCI)模型大鼠MEK2、p-ERK1含量的影响,探讨督脉电针对SCI的作用机制.方法:将120只清洁级SD大鼠随机均分为2个时间段组(术后l、7d组),随后再将每组分为3个亚组:假手术组、模型组及督脉电针组,采用改良式的Allen's打击法复制模型,取材前,采用神经功能Basso Beattie Bresnahan (BBB)评分法对各组大鼠后肢运动神经功能进行评估;HE染色法观察SCI大鼠损伤脊髓前角组织病理改变;Western blot技术检测损伤脊髓MEK2、p-ERK1表达量.结果:大鼠BBB评分显示,与假手术组比较,术后l、7d的模型组BBB分值均明显减少(P＜0.01);与模型组比较,术后7d的督脉电针组BBB分值明显增加(P＜0.01).HE染色结果显示,与模型组比较,督脉电针组脊髓前角神经元细胞数目增多,排列趋于整齐.Western blot显示,与假手术组比较,术后7d的模型组大鼠受损脊髓组织中MEK2、p-ERK1表达均有不同程度升高(P＜0.05);与模型组比较,术后7d的督脉电针组MEK2、p-ERK1表达均有升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:督脉电针治疗可以促进SCI大鼠后肢运动功能的恢复,可以诱导MEK2、p-ERK1蛋白的表达,促进SCI后的神经修复再生功能.
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右归饮通过Wnt/ERK信号通路交叉串扰影响成骨细胞相关蛋白的表达
目的:观察细胞外信号调节激酶(ERK)、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白在右归饮含药血清影响成骨细胞过程中的作用,明确右归饮含药血清对ERK、Wnt通路和ERK/Wnt交叉串扰的作用.方法:体外培养成骨细胞,分组,加药干预.培养3d后,应用ELISA检测Wnt/β-catenin及ERK通路相关蛋白β-catenin、Runx2、ERK蛋白表达情况.结果:右归饮含药血清能显著上调3种蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).联合阻断ERK、Wnt通路,3种蛋白表达水平较含药血清组有明显降低(P＜0.05,P＜0.01);与单独阻断其中一条通路比较,有明显下降(P＜0.01).单独阻断某一条通路,仅Runx2较右归饮含药血清组有明显降低(P＜0.05,P＜0.01).结论:右归饮含药血清能显著增加成骨细胞活性,该作用与ERK、Wnt信号通路密切相关,且两条通路之间存在一定的交叉串扰作用.
关键词： Wnt/β-catenin信号通路 ERK信号通路 交叉串扰 右归饮 成骨细胞 -
疏血通脉胶囊预处理对ERK信号通路的脑缺血耐受诱导作用调控研究
目的:研究ERK信号通路在脑缺血耐受诱导中的作用,观察疏血通脉胶囊预处理对其调控作用.方法:对大鼠行3 min脑缺血预处理,诱导其产生脑缺血耐受,24h后建立脑缺血再灌注模型(缺血预处理组),观察ERK/P-ERK的变化情况,并与假手术组、缺血再灌注组、疏血通脉胶囊组及PD98059组进行比较,检测各组神经元凋亡数量,观察ERK/P-ERK与神经元凋亡的相关性.结果:缺血预处理组及疏血通脉胶囊组P-ERK表达水平均明显上调,同时神经元凋亡数量减少,与缺血再灌注组比较差异有统计学意义.腹腔注射ERK抑制剂PD98059后,大鼠P-ERK表达水平受到明显抑制,神经元凋亡数量增加,并加重神经功能缺损情况.结论:脑缺血预处理能够减少脑缺血再灌注后神经元凋亡,改善神经功能,其机制可能与ERK信号通路激活有关,疏血通脉胶囊预处理可能通过激活该通路起到脑保护作用.
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红景天苷对小鼠MSCs的增殖及其细胞周期的影响
目的 本研究探讨了不同浓度红景天苷通过ERK信号通路对小鼠骨髓间充质干细胞增殖和细胞周期变化的影响及机制.方法 实验分为对照组(D-MEM/F-12完全培养液)、不同浓度红景天苷(5～ 100 μg/mL)诱导组和阻断组(5～100 μg/mL+ 30 μg/L PD98059),利用CCK8法、流式细胞术及Western blot分别检测ERK信号通路阻断前后细胞抑制率、细胞周期及其相关蛋白的表达.结果 10 μg/mL诱导组和阻断组均能抑制细胞增殖,且5μg/mL(P＜0.01)、25 μg/mL(P ＜0.05)和100 μg/mL(P ＜0.05)诱导组对细胞抑制显著高于阻断组.25 μg/mL诱导组和阻断组G0/G1期细胞比例均增加,细胞周期阻滞于G0/G1期.诱导组和阻断组cyclin A和cyclin D1蛋白的表达与对照组比较均下调,P21蛋白的表达上调.阻断组cyclin A蛋白的表达与诱导组比较明显下调(P＜0.01);50和100 μg/mL诱导组与阻断组相比cyclin D1蛋白表达显著下调,P21蛋白的表达显著上调(P＜0.01).结论 红景天苷能通过调节细胞周期相关蛋白的表达抑制小鼠MSCs细胞的增殖和细胞周期的改变.
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TNF-α通过ERK信号通路刺激骨髓间充质干细胞表达VCAM-1
本研究目的在于探讨TNF-α对人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSC)血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule l,VCAM-1)表达的影响及与ERK信号通路的关系.应用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离人BMMSC,并对其进行表面抗原表达及诱导分化鉴定.用不同浓度的TNF-α刺激BMMSC,流式细胞术检测其表面VCAM-1表达及ERK信号通路抑制剂U0126对BMMSC VCAM-1表达的影响,用Western blot检测ERK通路活性的变化.结果表明,分离培养的BMMSC表达CD29、CD69、CD44、CD105,不表达CD34、CD45;BMMSC可诱导分化为成骨细胞及脂肪细胞;BMMSC膜上的VCAM-1表达随着TNF-α浓度的增加而增加;经U0126预处理后TNF-α刺激的BMMSC膜上的VCAM-1表达减少;TNF-α增加BMMSC ERK信号通路的活化程度,U0126抑制TNF-α对ERK活性的作用.结论:TNF-α可能通过ERK信号通路刺激MSC表 达VCAM-1.
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ERK通路蛋白、ANXA2及FOXJ1蛋白表达与胃癌患者临床分期及预后的相关性研究
目的 对细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路蛋白、膜联蛋白A2(ANXA2)及叉头框蛋白J1(FOXJ1)蛋白表达与胃癌患者临床分期及预后的相关性进行研究,为临床诊断和治疗提供参考.方法 对2011年3月至2015年12月期间诊治的180例胃癌患者进行研究,其中0期38例,Ⅰ期者36例,Ⅱ期30例,Ⅲ期37例,Ⅳ期39例.同期健康体检者30例为对照组.分析各研究对象血清ANXA2及FOXJ1蛋白表达与胃癌患者临床分期及预后的相关性.结果 与对照组比较,胃癌组Ras、Raf、MEK、ERK1/2、ANXA2和ANXA4、FOXJ1及TAP1蛋白均明显升高,且随着胃癌临床分期的增加,上述蛋白的表达明显增强(P<0.05);ANXA2及FOXJ1蛋白与胃癌患者临床预后有密切的相关性,且随着ANXA2蛋白表达的增强患者的预后变差.结论 ERK信号通路蛋白、ANXA2及FOXJ1蛋白表达与胃癌患者临床分期及预后有明显的相关性.
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西格列汀对糖尿病肾病大鼠细胞外信号调节激酶1/2信号通路的影响
目的 观察西格列汀对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的保护作用及对细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路的影响. 方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC)、DN模型组(DN)、西格列汀小剂量干预组(ST1)、西格列汀大剂量干预组(ST2).第16周末处死大鼠,检测血糖、HbA1c、UAER、Scr,肌酐清除率(Ccr)及肾重指数;光镜观察肾组织病理变化;免疫组织化学法及RT-PCR检测肾脏足细胞标记蛋白(Podocalyxin)和ERK1/2蛋白及基因的表达. 结果 (1)16周末,ST1组、ST2组与DN组比较,FPG、UAER、Scr、HbA1 c和肾重指数下降(P＜0.05),Ccr升高(P＜0.05);ST2组上述变化更明显(P＜0.05).(2)与DN组比较,ST1组和ST2组肾小球病理损伤有所改善;且ST2组较ST1组改善更明显.(3)与DN组比较,免疫组织化学显示,ST1组和ST2组肾小球Podocalyxin的表达增加[(0.235±0.012) vs (0.456±0.024)vs(0.678±0.021),P＜0.05];ERK1/2表达降低[(8.021±0.231)vs(6.121±0.021) vs (4.098±0.130),P＜0.05],与ST1组比较,ST2组上述变化更明显(P＜0.01).RT-PCR检测Podocalyxin和ERK1/2基因表达趋势与免疫组织化学表达一致. 结论 西格列汀可延缓DN的进展,其机制与抑制ERK1/2信号通路的活化有关.
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姜黄素类似物H8通过ERK信号通路改善糖尿病小鼠肾脏纤维化的研究
目的 探讨姜黄素类似物H8 改善糖尿病小鼠模型肾纤维化的作用和机制. 方法 选取9周龄糖尿病db/db小鼠和db/m小鼠,分为正常对照组(db/m,Con)、糖尿病组(db/db)、H8 治疗组(db/db+H8),每组8只.各组自给药开始计时,第8周末处死,采集血液和肾脏组织,检测H8对血清尿素(UR)、Scr、SUA特征指标的影响;HE染色、Masson染色观察肾脏病理形态变化;RT-PCR检测小鼠肾组织中胶原蛋白Ⅰ(Col Ⅰ)、波形蛋白(Vimentin)mRNA的表达;Western blot检测ColⅠ、Vimentin、p-ERK、ERK的蛋白表达. 结果 db/db+H8 组血清UR、Scr、SUA降低(P＜0. 05);HE、Masson染色显示,H8能改善db/db小鼠肾脏组织炎症侵袭、胶原蛋白累积与肾纤维化;与db/db组比较,db/db+H8组的RT-PCR显示ColⅠ、Vimentin mRNA水平下降(P＜0.05),Western bolt结果显示,ColⅠ、Vimentin、p-ERK蛋白表达水平也降低(P＜0. 05 或P＜0. 01). 结论 H8 能改善db/db小鼠肾脏纤维化,可能与抑制ERK信号通路有关.
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ERK通路参与的未分化甲状腺癌FRO细胞凋亡过程及三氧化二砷的调控作用研究
目的：探讨三氧化二砷促进未分化甲状腺癌FRO细胞凋亡的机制，为临床治疗提供参考。方法将生长状态良好的未分化甲状腺癌FRO细胞随机分为5组：对照组、U0126（10μM）组、三氧化二砷低剂量（1μM）组、三氧化二砷中剂量（10μM）组、三氧化二砷高剂量（100μM）组。分析各组细胞凋亡蛋白、ERK通路蛋白表达。结果研究发现三氧化二砷能引起未分化甲状腺癌FRO细胞Bax、Caspase-3和Caspase-6蛋白表达增强以及Raf、Ras、MEK、ERK1/2和Bcl-2表达减弱（P﹤0.05），且高剂量效果比中剂量和低剂量更显著（P﹤0.05）。结论三氧化二砷能有效促进未分化甲状腺癌FRO细胞凋亡，且此过程与其抑制ERK信号转导通路蛋白过表达有关。
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双重特异性蛋白磷酸酶-6与肿瘤发生及耐药研究进展
目的 双重特异性蛋白磷酸酶-6(dual-specificity phosphatases-6,DUSP6)在增殖相对不活跃的肿瘤组织及细胞中呈高表达,由于铂类等化疗药物对于增殖不活跃的细胞相对不敏感,使得这部分细胞可以逃脱化疗药物的杀伤作用,可能是产生化疗耐药的根源.DUSP6具有高度底物特异性,仅选择性负调控细胞外信号调节激酶(extracellularsig-nal regulated kinase,ERK)通路,与多种原发性肿瘤的发生发展以及耐药密切相关,在肿瘤治疗中可能独具优势.本研究通过总结现有相关研究,旨在为后续基础研究及抗癌药物研发提供新方向.方法 应用PubMed、CNKI数据库、万方数据库和维普中文科技期刊数据库检索系统,以“双重特异性蛋白磷酸酶6、细胞外信号调节激酶、肿瘤发生和化疗耐药”为关键词,检索2000-01-2018-01相关文献.纳入标准:(1)DUSP6的结构与特征;(2)DUSP6对ERK信号通路的负调控作用;(3) DUSP6调控ERK信号通路与肿瘤发生及化疗耐药相关的基础及临床研究.排除标准:(1)实验设计不合理;(2)良性肿瘤或癌前病变.根据纳入及排除标准,符合分析的文献36篇.结果 DUSP6的表达水平与肿瘤细胞的增殖活力呈负相关.DUSP6通过负调控ERK通路,致使肿瘤细胞处于增殖休止状态,对化疗不敏感而产生耐药,其内在分子机制有待深入探寻.基于这一认识提出的化疗药物与DUSP6小分子抑制剂联合序贯作用,在细胞水平的研究证实对于避免耐药克隆产生有一定作用,后续研究有望通过动物模型及临床实验进一步分析其化疗增敏效果及毒副作用.结论 DUSP6对于预测化疗耐药性具有潜在价值,且可能作为肿瘤化疗耐药的分子靶点.
关键词： 双重特异性蛋白磷酸酶6 ERK信号通路 肿瘤发生 化疗耐药 -
当归挥发油通过激活ERK信号通路以减轻缺血再灌注神经细胞凋亡的作用
目的 研究当归挥发油(EOAS)对缺血再灌注损伤神经细胞凋亡的影响.方法 将高分化PC12细胞分为空白组、模型组、对照组及当大中小3个剂量实验组.除空白组外,其余各组用含10 mmol·L-1连二亚硫酸钠(Na2S2O4)的无糖培养基缺氧缺糖损伤1h,大中小3个剂量实验组加入终浓度分别为25.00,12.50,6.25ug·mL-1 EOAS,对照组加入10 μmol·L-1依达拉奉,复氧48 h.用MTT比色法检测当归挥发油对细胞增殖的影响,以试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,用流式细胞仪检测细胞凋亡,以AO/PI免疫荧光染色观察凋亡细胞形态,以比色法检测细胞caspase-3的活性,以免疫印迹法检测p-ERK1/2蛋白的表达.结果 与空白组相比,模型组细胞存活率降至(67.4±0.10)％,差异有统计学意义(P＜0.01).与模型组相比,对照组和大剂量实验组的细胞存活率分别升至(86.2±0.10)％,(94.5±0.05)％,差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).与空白组比较,模型组细胞LDH活性、MDA含量分别升高至(912.53±16.71)U ·L-1及(9.05±0.25) iμmol·L-;而SOD水平降至(12.53±0.29)U·mL-1,差异均有统计学意义(均P＜0.01).与模型组相比,大剂量实验组的LDH活性降低至(565.61±11.72)U·L-1,而SOD水平升高至(12.53±0.29)U·mL-1,差异均有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).与模型组相比,大中2个剂量实验组MDA含量分别降至(3.32±0.68),(5.79±0.68) μmol·L-1,差异均有统计学意义(均P＜0.01).模型组与大中小3个剂量实验组细胞的光密度(A)分别为0.75±0.06,0.10±0.02,0.16±0.03及0.49±0.04,与模型组相比,差异均有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).与空白组相比,模型组细胞凋亡率为(31.17±2.44)％,差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比,大中2个剂量组细胞凋亡率分别为(4.57±0.32)％,(5.93±0.81)％,差异均有统计学意义(均P＜0.01).与模型组相比,大剂量实验组能够明显促进细胞p-ERK1/2蛋白的表达(P＜0.01).结论 EOAS通过激活ERK信号通路抑制拟缺血再灌注神经细胞凋亡.
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高内涵筛选用于评价新型siRNA运载试剂的细胞群体生物学活性
修饰siRNAs和新型siRNA运载系统对细胞的作用通常通过PCR、Western Blotting和荧光显微镜来进行细胞整体特征的研究.本文报道了基于高内涵、用于siRNA治疗的一种新型运载系统的新策略(CLD),该策略从细胞整体和细胞群体水平综合考虑siRNA的转染效率及对蛋白表达水平的影响.我们证明CLD能达到更佳的细胞摄取,使siBraf达到更好的抗肿瘤活性.该方法具有高效、准确和适用于多个贴壁细胞系的优点,能简化siRNA的研究过程.
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Renalase对肾小管上皮细胞-间充质转分化影响的研究
目的 本研究旨在探讨Renalase是否可以延缓肾脏纤维化.方法 体外培养人近端肾小管上皮细胞,给予TGF-β1和(或)不同浓度的Renalase与细胞共同孵育,观察细胞形态的变化,应用免疫荧光观察E-cadherin、α-SMA的分布和表达情况;应用Western blot(WB)法和RT-PCR检测细胞中E-cadherin、α-SMA的蛋白和mRNA表达,应用WB检测FN和Col-Ⅰ蛋白表达,并检测细胞内信号分子p-Smad-2/3、p-ERK1/2、p-p38水平的变化,探讨其可能的分子生物学机制.结果 给予TGF-31刺激后,E-cadherin表达下调、α-SMA、FN、Col-Ⅰ表达增加.应用不同浓度Renalase与TGF-β1共孵育细胞,上述现象改善,且呈剂量依赖性.同时,与单独TGF-β1刺激相比,添加Renalase共孵育后,细胞内p-smad 2/3和p-p38表达无明显变化,但p-ERK 1/2表达明显下调,差异有统计学意义.而应用质粒转染过表达ERK信号通路后,Renalase抑制TGF-β1诱导的EMT和纤维化的作用被抵消.结论 本研究首次证实Renalase可以减轻TGF-β1所致的肾小管上皮细胞间充质转分化和纤维化,其机制可能与抑制ERK 1/2信号通路的激活相关,为临床延缓CKD进展提供新的治疗靶点和理论依据.
关键词： Renalase 上皮细胞间充质转分化 肾脏纤维化 ERK信号通路 -
MHV-3诱导小鼠暴发性肝衰竭的机制研究及夏枯草总三萜的改善作用
目的：分析MHV-3诱导小鼠暴发性肝衰竭机制研究及夏枯草总三萜的改善作用，为肝衰竭的临床治疗和新药研发提供参考。方法将清洁级昆明小鼠随机分为对照组、模型组、夏枯草总三萜组和PD98059组。腹腔注射MHV-3建立小鼠暴发性肝衰竭模型，药物治疗组分别给予对应药物治疗。分析注射MHV-3后各组小鼠血清炎性因子水平及肝脏组织中MEK/ERK通路相关蛋白表达水平。结果模型组小鼠血清白细胞介素（IL）-2、IL-6及IL-10水平明显升高（P＜0.05），且ERK信号通路蛋白Ras、Raf、MEK、ERK1/2表达明显升高（P＜0.05），与对照组比较差异均具有显著性（P＜0.05）。PD98059组和夏枯草总三萜组小鼠上述炎性因子和ERK通路蛋白的异常表达得到明显恢复（P＜0.05）。结论夏枯草总三萜通过抑制过度激活的MEK/ERK信号通路和炎性反应减轻小鼠暴发性肝衰竭。
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胃癌细胞促进网膜脂肪干细胞分化的机制研究
目的:本实验主要研究在胃癌条件培养基(conditioned medium,CM)诱导下网膜脂肪干细胞(omental-adipose stromal cells,O-ASCs)是否能分化为癌相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs),及ERK信号通路在其中的作用.方法:通过诱导分化成骨、成脂及流式细胞鉴定O-ASCs,将O-ASCs与MGC803和SGC7901 CM共培养,通过RT-PCR和Western-blot检测O-ASCs细胞CAFs标志物α-SMA、FSP-1、vimentin,旁分泌因子VEGFA、TGFβ-1、FAP、SDF-1的表达水平.将O-ASCs分为对照组,SGC7901-CM实验组,SGC7901-CM+U0126处理组,12 h后收集细胞.Western blot检测O-ASCs细胞CAFs标志物α-SMA、FSP-1及ERK1/2、p-ERK1/2的表达水平.结果:经鉴定原代培养出的细胞为O-ASCs,在SGC7901 CM和MGC803 CM作用下,CAFs标志物α-SMA、FSP-1、vimentin及旁分泌因子SDF-1、VEGFA、TGFβ-1、FAP表达均有明显增加(P<0.05).与对照组比较SGC7901-CM组α-SMA、FSP-1、p-ERK1/2表达明显增加(P<0.05),ERK表达未见明显变化(P>0.05).SGC7901-CM+U0126组与SGC7901-CM组比较,α-SMA、FSP-1及p-ERK1/2的蛋白表达水平明显降低(P<0.05),ERK表达变化无统计学意义(P>0.05).结论:O-ASCs通过分化为CAFs及旁分泌作用参与胃癌腹膜转移,ERK信号通路在该过程中发挥了重要作用.
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转化生长因子-β1介导的ERK/MAPK信号通路与肺纤维化
肺纤维化的发生是一个由多种细胞因子启动和维持的胶原蛋白代谢调控失衡的结果.在众多致纤维化细胞因子中,转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)被公认为纤维化形成与发展的诱导和启动因子,可促进间质细胞如成纤维细胞(fibroblast,FB)的增殖、分化和分泌,继而促进胶原蛋白等细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)成分在肺问质和肺泡间过度积聚[1].
