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荧光定量PCR法检测弥漫大B细胞淋巴瘤IgH基因重排的意义
目的 探讨荧光染料标记的实时定量PCR方法检测弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)IgH基因重排的可行性和临床意义.方法 44例DLBCL患者的57份骨髓标本用于检测IgH基因重排.Namalwa细胞系作阳性对照,U-937细胞系作阴性对照.SYBR Green荧光染料标记的实时荧光定量PCR方法检测IgH基因重排CDRⅢ.β-actin作内参照,对IgH基因重排相对定量.结果 分析融解曲线可以确定IgH基因重排产物的特异性.荧光定量PCR检测IgH基因重排的阳性率分别为63.2%.Ⅰ、Ⅱ期患者IgH基因重排表达量中位数为0,Ⅲ、Ⅳ期患者IgH基因重排表达量中位数为0.35,两组患者之间差异有统计学意义(P=0.018).LDH值高于正常组,IgH基因重排表达量为0.39,LDH值低于正常组,IgH基因重排表达量为0.01,两组之间差异有统计学意义(P=0.046).结论 荧光染料标记的定量PCR方法可用于DLBCL的骨髓微小残留病变的检测.检测骨髓IgH基因重排,可以协助分期.
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双重打击淋巴瘤一例
患者 男性,48岁.因腹部发现肿物10d余,于2014年2月入我院.无发热、盗汗、体质量下降、中枢神经系统等症状.既往体健.查体:一般情况尚好,肝、脾、浅表淋巴结不大.白细胞计数8.5×109/L,血红蛋白154 g/L,血小板计数232×109/L,肝肾功能、心电图(ECG)正常,乳酸脱氢酶(LDH)225 U/L,β2微球蛋白(β2-MG) 1.5 mg/L.腹部彩色超声示:腹腔及腹膜后肿物直径＞ 10 cm.外科行剖腹探查术,术中见肿块巨大,与胃壁、胰腺、腹主动脉、下腔静脉等重要脏器联系紧密,取部分组织送检.
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重组激活基因表达应用于淋巴细胞来源肿瘤MRD的检测
[目的] 探讨rag1基因表达在淋巴细胞来源肿瘤MRD检测中的应用价值.[方法] 提取35例淋巴细胞来源肿瘤患者57份外周血标本单个核细胞的基因组DNA和总RNA, 用RT-PCR检测rag1基因表达,用通用引物PCR联合检测IgH 和TCRγ基因重排.[结果] rag1表达检测淋巴细胞来源肿瘤MRD的阳性率显著高于IgH重排/TCRγ重排单独检测(P<0.05);rag1表达检测和IgH、TCRγ基因重排联合检测MRD的阳性率分别是73.7%(42/57)和68.4%(39/57),敏感性分别为2×10-4和1×10-3, 无显著性差异;2种方法检测结果的一致率为80.7% (46/57).[结论] 首次尝试用rag1基因表达检测MRD, 结果表明rag1基因表达可以作为淋巴细胞来源肿瘤外周血MRD检测的良好指标.
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神经系统髓外浆细胞瘤临床病理学观察
背景与目的:发生于神经系统的髓外浆细胞瘤罕见.本研究分析神经系统髓外浆细胞瘤的临床病理特点.方法:总结3例神经系统髓外浆细胞瘤临床病理特点,EnVision法分析免疫表型(LCA、CD20、CD79a、CD3、CD7、PC、MUM1、CD138、Ki-67),PCR法分析IgH和TCR-γ基因重排,并进行治疗随访.结果:3例神经系统髓外浆细胞瘤,2例发生于大脑,均为男性,年龄为48和64岁.1例发生于T10椎管内,女性,29岁.影像学均提示占位性病变.临床表现为头痛呕吐,病理学特征为:不同分化程度的浆细胞样肿瘤细胞弥漫性浸润,间质内血管丰富或形成血湖.可见淀粉样物质沉积.免疫表型:3例之瘤细胞均表达CD79a,PC和MUM1,均不表达CD20和CD3、CD7.基因重排分析结果显示IgH基因均呈单克隆性重排.结论:神经系统髓外浆细胞瘤具有特征性的临床病理学改变,免疫组化和基因重排分析能够帮助确定肿瘤细胞起源,诊断时应综合考虑,并排除多发性骨髓瘤.
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石蜡包埋淋巴组织中DNA提取方法的比较
目的：通过比较三种从石蜡组织中提取DNA的不同方法，寻找一种高效、经济而简便的方法指导实际工作。方法选取结外淋巴组织增生性病变8例，采取三种方法提取DNA,分别是酚-氯仿提纯法，快速法和试剂盒法。通过检测提取DNA的浓度和纯度，PCR扩增效果，比较三种DNA提取方法的优劣。结果试剂盒法提取DNA OD260/280比值在1.91-1.96间；酚-氯仿提纯法OD值在1.32-1.68间；快速法OD值在1.19-1.36间。其中试剂盒提取DNA为稳定。3种方法提取的DNA为模板行PCR扩增，阳性率无统计学意义。结论快速法简单、无毒、需要的样品少，是一种值得推荐的DNA提取方法。
