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血管内皮生长因子C在喉鳞癌中的表达
目的了解血管内皮生长因子C(VEGF-C)在喉鳞癌中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法采用免疫组化方法检测60例喉鳞癌患者术后肿瘤组织石蜡标本的VEGF-C蛋白的表达.结果在部分喉鳞癌患者的癌细胞胞浆中可检测到VEGF-C蛋白的表达(45/60).且VEGF-C蛋白的表达在有淋巴结转移的喉鳞癌组织中明显高于无淋巴结转移组织,在低分化喉鳞癌组织中的表达明显高于高、中分化喉鳞癌组织.结论 VEGF-C表达于喉癌中,其表达与喉癌细胞的淋巴结转移密切相关.
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下调ATM表达对裸鼠喉鳞状细胞癌移植瘤放射感性影响的研究
目的 探讨反义ATM多核苷酸(AS-Lipo)作用于裸鼠移植瘤对喉鳞状细胞癌(Hep-2)放射治疗敏感性的影响.方法 用克隆生存率来检测喉鳞状细胞癌放射治疗后的生存能力；用流式细胞仪来分析喉癌细胞的凋亡情况；用Tunel染色法检测各组瘤体中细胞凋亡情况.结果 在同等剂量的放射治疗下,AS-Lipo组的生存分数低.接受4 Gy放射治疗后,行流式细胞仪检测,结果发现AS-Lipo组的凋亡率为(30.7±1.31)％,远高于转染Sen-Lipo、Mis-Lipo、Lipo组.ATM AS-Lipo+放疗组的细胞凋亡数显著高于单独放射治疗组；ATM AS-Lipo+放射治疗组裸鼠瘤体内的凋亡指数为(17.12±4.2)％,与其他组比较差异有统计学意义.结论 反义ATM多核苷酸增强了裸鼠喉鳞状细胞癌对放射治疗的敏感性.
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喉鳞状细胞癌患者组织及血液中线粒体DNA突变的研究
目的:本研究通过检测喉鳞状细胞癌中线粒体DNA(mtDNA)的突变,探讨mtDNA突变在喉鳞状细胞癌发生中的作用.方法:提取我科2002年9月～2004年6月间收治的54例喉鳞状细胞癌标本,并同时收集同一患者的距肿瘤1cm以上正常黏膜(由病理切片确诊)和血清标本作为对照,经PCR产物扩增直接测序法测定mtDNA序列,确定喉鳞状细胞癌组织的mtDNA突变.结果:总共分析了54例喉鳞状细胞癌患者的标本,在32例(60%)喉鳞状细胞癌组织中总共发现了68个mtDNA突变;包括点突变46个,插入突变13个,缺失突变9个.其中所有的插入突变和缺失突变均发生在D-loop区的重复序列中;所有的点突变均为T→C或G→A间的碱基置换.在这些突变中,主要为同质性突变(homoplasmic mutations),占突变总数的83.8%(57/68);异质性突变(heteroplasmic mutations)则占16.2%(11/68).检测到的这些突变散在分布于mtDNA的全长序列中,其中43个突变位于D-loop区,18个mtDNA点突变位于多肽编码区,其余7个点突变发生于165rRNA、tRNA编码区和位于COH和tRNALysine编码区之间的非编码区.结论:喉鳞状细胞癌的发生发展过程中具有高发生频率的线粒体基因的突变;这些突变可能与喉鳞状细胞癌的发生发展有关.
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反义核苷酸沉默Livin基因对喉鳞癌细胞凋亡影响的体外研究
目的 为了保护喉功能和提高喉鳞癌病人的生活质量,我们设计反义Livin作用于喉鳞状细胞癌来减少Livin表达,分析在体外对喉鳞状细胞癌细胞凋亡的影响.方法 用real-time quantitative PCR对AS-ODNs、Sen-ODNs、Mis-ODNs、hep-2组(Control)的LivinmRNA进行分析;用Western blot对AS、Sen、Mis、与hep-2组的Livin蛋白进行分析;用流式细胞仪分析喉癌细胞的凋亡情况.结果 AS-ODNs、Sen-ODNs、Mis-ODNs与Control组的Livin mRNA相对表达量以AS-ODNs组低,为(24.03±7.02)％,AS组与Sen、Mis、Control组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).AS、Sen、Mis与Control组的Livin蛋白相对表达量以AS-ODNs组低,为(11.65±3.68)％,AS组与Sen、Mis、Control组比较,差异亦有统计学意义(均P＜0.05).将AS、Sen、Mis转染喉鳞状细胞癌细胞,行流式细胞仪检测,结果发现AS组的凋亡率为(36.54±6.04)％,远高于Sen、Mis、Control组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在体外,Livin反义多核苷酸降低了喉鳞状细胞癌中Livin的表达,同时增强了喉鳞状细胞癌细胞的凋亡.
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EphA2 E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表达及其相关性研究
目的 研究络氨酸蛋白激酶受体A2 (EphA2)、上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)在喉鳞状细胞癌中的表达及相关性.方法 将62份喉鳞状细胞癌标本作为实验组,另选取同期60例鳞状上皮正常者标本作为对照组,采用免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶链接法(SP法)对两组标本进行检查,对比两组EphA2、E-cadherin的表达情况.结果 实验组EphA2表达阳性率高于对照组,但E-cadherin表达阳性率低于对照组,组间差异均有显著性(均P＜0.01).在喉鳞状细胞癌标本中,EphA2与E-cadherin的表达呈负相关.结论 在喉鳞状细胞癌发生发展中,EphA2起促进作用,E-cadherin起抑制作用,研究EphA2、E-cadherin在喉鳞状细胞癌中的表达及相关性具有重要现实意义.
关键词： EphA2 E-cadherin 喉鳞状细胞癌 表达 相关性 -
PCNA和COX—2在喉鳞状细胞癌中的表达及意义
目的 探讨增殖细胞核抗原(PCNA)和环氧化酶-2(COX-2)在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其与肿瘤发生和增殖的关系.方法 用免疫组化SP法检测65例喉鳞癌组织及34例癌旁非肿瘤组织中PCNA和COX-2的表达,并分析两者的表达水平与各临床病理参数(年龄、吸烟、病程、饮酒、TN分期、病理分级)的关系.结果 PCNA和COX2在肿瘤组织中的阳性表达率分别为66.2%和72.3%,与对照癌旁非肿瘤组织比较(29.4%,20.6%)其表达显著增高,差别均有统计学意义.且PCNA和COX-2的表达相关.Logistie回归分析结果,t分期愈高、病程愈长易出现COX-2表达,淋巴结转移易出现PCNA表达.结论 喉鳞癌组织中PCNA和COX-2的过度表达可能促进了喉鳞癌的发生发展,且两者在肿瘤的发生和发展中可能存在协同作用,PCNA和COX-2是喉鳞癌可能的治疗靶点.
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喉鳞状细胞癌中C-erbB-2和E-钙粘附素蛋白表达及其意义
目的:探讨癌基因c-erbB-2蛋白和黏附分子E-钙黏蛋白(E-cad)表达与喉鳞状细胞癌(LSCC)的发生、发展和生物学意义.方法:应用免疫组织化学方法,检测45例LSCC组织和15例声带息肉(VCP)组织中c-erbB-2和E-cad蛋白表达水平.结果:在LSCC组织中c-erbB-2和E-cad表达阳性率分别为75.6%(34/45)和62.2%(28/45).LSCC中,c-erbB-2表达阳性率高于VCP(0/15,0.0%,χ2=22.12,P＜0.01),而E-cad表达阳性率低于VCP(15/15,100%,χ2=4.73,P＜0.05).c-erbB-2高表达和E-cad低表达与LSCC分级和淋巴结转移相关(P＜0.05).LSCC中c-erbB-2表达与E-cad表达呈负相关(r=-0.30).结论:c-erbB-2和E-cad表达水平可作为判断LSCC分级和淋巴结转移和预后的重要参考指标.
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程序性死亡配体-1与白细胞介素-10在喉鳞状细胞癌中的表达及意义
目的 通过检测程序性死亡配体-I(PD-L1)和白细胞介素-10(IL-10)在喉鳞状细胞癌中的表达情况,分析与喉鳞癌的肿瘤部位、病理分级、TNM分期、淋巴结转移等之间的关系.方法 应用免疫组化二步法检测30例喉鳞状细胞癌组织(观察组)和15例癌旁正常组织(对照组)中PD-L1及IL-10的表达情况,分析二者与喉鳞状细胞癌临床病理参数的关系及二者表达的相关性.结果 (1)PD-L1在喉鳞状细胞癌组织(56.67％)中的表达明显高于癌旁正常组织(13.33％);喉鳞状细胞癌组织中PD-L1的阳性表达与病理分级、临床分期(TNM分期)、T分期、肿瘤局部淋巴结转移有关(P＜0.05),与肿瘤分区、患者年龄无明显相关性.(2)IL-10在喉鳞状细胞癌组织(63.33％)中的表达明显高于癌旁正常组织(20.00％);喉鳞状细胞癌组织中IL-10的阳性表达与TNM分期、T分期、肿瘤局部淋巴结转移有关(P＜0.05),与病理分级、肿瘤分区、患者年龄无明显相关性.(3)喉鳞状细胞癌组织中PD-L1、IL-10的表达呈正相关(r=0.522,P＜0.05).结论 (1)PD-L1与IL-10的高表达可能与喉鳞状细胞癌的发病相关,两者参与了肿瘤的发展及转移;(2)免疫卡控点的调控和抑制性细胞因子与肿瘤的免疫逃逸密切相关,PD-L1与IL-10在喉鳞状细胞癌中的表达呈正相关,两者可能协同参与喉鳞状细胞癌的免疫逃逸;(3)联合检测PD-L1与IL-10在喉鳞状细胞癌组织中的表达对喉鳞癌的临床评估有一定价值;为喉鳞癌的免疫治疗提供理论支持.
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Th17细胞及Treg细胞在喉癌外周血中的表达
目的：检测喉鳞状细胞癌患者外周血 Treg 细胞和 Thl7细胞比例，研究其变化与意义。方法：采用流式细胞技术检测10例健康对照者和42例喉鳞状细胞癌患者外周血 Treg 和 Thl7细胞比例，并观察 Th17／Treg 在喉癌分期中的变化。结果：与健康对照组比较，喉癌患者外周血 Treg 细胞和 Th17细胞比例明显升高（P ＜0．05）；发生淋巴结转移者较无淋巴结转移者的 Treg 和 Th17细胞比例增高（P ＜0．05）；通过分析不同喉癌分期中 Th17／Treg 细胞的分布，结果发现Ⅲ＋Ⅳ期组 Th17细胞的比例和Ⅰ＋Ⅱ期无明显差异，而 Treg 细胞在Ⅲ＋Ⅳ期比Ⅰ＋Ⅱ期明显增高（P ＜0．05）。结论：喉癌外周血中 Th17和 Treg 细胞数量增多，二者比例增高，并随着疾病的进展而增加，表明二者均参与了喉癌的发生发展过程。
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喉鳞状细胞癌组织中CD44+和Ki67+的表达及与临床病理的关系
目的：观察CD44+和Ki67+癌干细胞的在喉癌中的表达特征及其与临床病理的关系。方法：应用免疫组织化学染色,检测了18例正常喉黏膜,69例鳞状细胞癌患者中CD44和Ki67+的表达,定位CD44+和Ki67-细胞,并观察、计数。结果：CD44+细胞在正常粘膜组几乎不表达,而在喉鳞状细胞癌组表达丰富,两者差别经独立样本t检验,有统计学意义(P<0.05),Ki67+细胞在正常粘膜组只在基底细胞层散在表达,在喉鳞状细胞癌组织中表达丰富,两者差别有统计学意义(P<0.05)；喉鳞状细胞癌患者中,不同性别、年龄、临床分型之间的CD44+和Ki67+细胞表达没有差异(P>0.05),而在在分化程度、T分期之间的表达有差异(P<0.05)。结论：CD44+和Ki67+作为肿瘤干细胞的标志,可以考虑作为喉癌诊断、判断分化程度、T分期的参考指标。
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S100A8基因在喉鳞癌发生中作用机制的研究
目的:研究S100A8与喉癌发生的关系,揭示炎症在喉癌发生中的作用.方法:应用RT-PCR、West-ern Blot、免疫组化检测S100A8表达,RNAi方法检测其功能、Transwell检测细胞侵袭力,TUNEL和流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT检测细胞生长活性.结果:36例喉鳞癌组织中17例出现S100A8 mRNA表达上调(47.2%),而7例喉部良性肿瘤中2例出现表达上调(28.5%).13例病人喉鳞癌组织中7例S100A8蛋白表达增高.免疫组化分析喉鳞癌组织S100A8蛋白阳性率为54.3%.在高分化喉鳞癌组织为71.4%,而分化程度差的喉癌组织中阳性率为12.8%(P=0.023).RNAi抑制S100A8基因使Hep2细胞凋亡率增高近9倍,使Hep2细胞侵袭力下降,影响Bel-2基因表达,但对Hep2细胞的IKKα表达无明显影响.结论:S100A8与喉鳞癌发生相关并参与喉鳞癌分化,S100A8基因具有抑制喉癌细胞凋亡,促进Hep2细胞侵袭的作用.S100A8基因可能部分通过NF-κB通路参与喉癌发生、发展,在此通路中S100A8基因位于p65下游.
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MTA-2蛋白在喉鳞癌中的表达及其临床意义
目的:研究转移相关蛋白2(metastasis-associated protein 2,MTA-2)在喉鳞癌中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组化检测了90例喉癌标本(其中40例为具有配对的淋巴结转移标本)中MTA-2的表达及其与患者临床病理因素之间的关系.另选30例新鲜喉鳞癌及癌旁正常喉组织用于MTA-2的mRNA和蛋白检测.结果:正常喉组织相比,MTA-2的mRNA和蛋自在喉鳞癌组织中表达显著增高,且MTA-2的阳性表达与喉鳞癌的低分化、高TNM分期及淋巴结转移密切相关(P＜0.05).结论:MTA-2的阳性表达与喉鳞癌患者的不良预后显著相关,并可能是喉鳞癌新的标志物及基因治疗靶点.
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喉癌及喉良性病变中HPV不同亚型的检测
目的:检测喉癌、癌前病变及喉良性病变HPVDNA表达的阳性率,探讨HPV感染与喉癌发的相关性.方法:运用流式荧光杂交法以及型特异性PCR方法对于46例喉癌组织、14例喉癌前病变组织及19例喉良性病变组织中HPVDNA进行检测分型.结果:运用流式荧光杂交法在79例喉病变标本中检测HPVDNA阳性率为10.13％,其中46例喉癌阳性率为6.52％;癌前病变组阳性率为35.71％;喉良性病变均为阴性.型特异性PCR方法检测出2例喉癌HPV16阳性,与流式荧光杂交法所检测到的2例相同.结论:HPV是喉乳头状瘤的一个独立的致病因素,而与喉癌的发生关系似乎不是很密切,但尚待进一步大样本研究.
关键词： 喉鳞状细胞癌 喉癌前病变 人乳头状瘤病毒(HPV) 流式荧光杂交法 -
手术治疗喉鳞状细胞癌的预后影响因素
目的:分析手术治疗喉鳞状细胞癌的预后影响因素.方法:收集本院2002年1月-2005年12月期间手术治疗的101例喉鳞状细胞癌患者临床及随访资料,选取11个可能的预后影响因素,通过单因素和Cox比例风险回归模型分析,评价喉癌预后的影响因素.结果:手术治疗喉癌患者的3年生存率为76.09%;单因素分析结果显示声带活动度,临床分型,T分期,淋巴结转移及肿瘤分化程度对3年生存率的影响有统计学意义(P＜0.05);Cox比例风险回归模型分析示声带活动度,肿瘤T分期,及有无淋巴结转移是预后的独立影响因素(P＜0.05).结论:声带活动度,肿瘤T分期以及有无淋巴结转移是手术治疗喉鳞状细胞癌预后的独立影响因素,对于治疗方案的确定和预后判断具有重要价值.
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喉鳞癌中p-STAT3和Skp2的表达及其相关性研究
目的:检测喉鳞癌中信号转导和转录激活因子3的活化和Skp2 蛋白的表达,探讨其临床意义及相关性.方法:采用免疫组织化学法检测p-STAT3和Skp2蛋白在56例喉鳞状细胞癌和30例喉全(或近全)切除者癌旁(＞2.0 cm)正常黏膜中的表达,应用Metamorph/DP10/BX41显微图象分析系统测定阳性表达的平均光密度值,并进行统计分析.结果:与癌旁正常黏膜组相比较,p-STAT3和Skp2蛋白在喉鳞癌组织中过表达(P＜0.01);p-STAT3和Skp2蛋白过表达与喉鳞癌的分化程度、临床分期、颈淋巴结转移有关(P＜0.05或P＜0.01);在喉鳞癌组织中p-STAT3蛋白和Skp2蛋白的表达呈正相关关系,相关系数r=0.8041(P＜0.01).结论:p-STAT3和Skp2蛋白过表达与喉鳞癌的发生、发展和转移等生物学行为有关,两者的表达呈正相关.
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喉鳞状细胞癌中p63基因蛋白表达及其意义
目的:探讨p63基因蛋白表达与喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinomas,LSCC)的发生、发展的关系和生物学意义.方法:应用免疫组织化学方法,检测30例ISCC、10例不典型增生和10例正常喉黏膜组织中p63基因蛋白的表达水平.结果:全部30例ISCC和10例不典型增生组织中p63染色均为阳性.LSCC分化程度越低,阳性细胞数越高、细胞的表达强度越高.正常喉黏膜组织中仅基底层及上基层细胞阳性.p63表达与LSCC分级和淋巴结转移相关(P《0.05).结论:p63可能参与了调控LSCC的发生、发展过程,其高表达预示LSCC预后不良.
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喉癌组织p73基因蛋白的表达及其意义
0引言喉鳞状细胞癌是喉部常见的恶性肿瘤,其发病率有明显增长的趋势.喉部黏膜的致癌过程是一系列复杂的基因变化的过程.
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OLC1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义
目的检测OLC1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测48例喉鳞状细胞癌组织中OLC1的表达情况，并分析OLC1与喉鳞状细胞癌临床病理特征及预后的关系。结果 OLC1在喉鳞状细胞癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织。OLC1蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的阳性表达与患者的年龄、性别、肿瘤分型无关，而与组织学分级、淋巴结转移、临床分期正相关。结论 OLC1高表达可能与喉鳞状细胞癌发展的恶性进程有关，提示喉鳞状细胞癌患者预后不良。
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喉癌手术切缘免疫组化研究现状
喉癌是喉部常见的恶性肿瘤，主要病理类型为鳞状细胞癌。手术治疗为其主要的治疗方式，手术切缘干净与否与预后有明显关系[1]。临床上以病理诊断为金标准，但病理切缘阴性患者仍有一定的局部复发率[2]。有研究表明[3]：分子水平及生化代谢水平出现异常改变早于细胞形态变化，检测功能异常的基因产物或产物表达水平改变，可对疾病进行早期诊断，指导临床尽早处理。免疫组织化学是指利用抗原抗体的特异性结合反应来检测和定位组织或细胞中的某些化学物质的一种技术方法。有许多学者用免疫组织化学方法，研究病理安全切缘的某些肿瘤相关蛋白的表达及表达水平变化，进而了解其与手术安全切缘、肿瘤预后等方面关系。现从以下几个方面综合评述喉鳞状细胞癌手术安全切缘的免疫组织化学研究现状。
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CD44和Ki—67在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床病理学意义
目的:探讨喉鳞状细胞癌组织中CD44和Ki-67的表达及临床病理学意义.方法:取69例喉鳞状细胞癌、18例正常喉黏膜组织标本制成48点共3块组织芯片,应用免疫组织化学法检测CD44和Ki-67的表达并比较其与临床病理指标的相关性.结果:CD44在正常喉黏膜组几乎不表达,而在喉鳞状细胞癌组呈高表达(78.26％);Ki-67在正常喉黏膜组仅基底细胞散在表达,而在喉鳞状细胞癌组呈高表达(86.96％),组间差异均有统计学意义(P＜0.01).CD44和Ki-67的表达与患者性别、年龄、临床分型无明显关系(P＞0.05).CD44表达与肿瘤分化程度及淋巴结转移有关(P＜0.05),Ki-67的表达与肿瘤分化程度和T分期有关(P＜0.05).CD44和Ki-67在喉鳞状细胞癌组织中的表达呈正相关(r=0.439,P＜0.01).结论:CD44和Ki-67的表达与喉鳞状细胞癌临床病理关系密切.二者联合检测可为喉鳞癌患者的临床病理诊断提供帮助,也可为喉鳞癌患者制定化疗方案提供依据.
