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大孔吸附树脂纯化藤梨根中总黄酮工艺优选
目的 筛选大孔吸附树脂纯化藤梨根中总黄酮的工艺条件.方法 通过动态吸附和解吸的方法,以总黄酮的吸附率、解吸率为评价指标确定树脂型号；通过佳上样量、上样速度、水洗用量、乙醇洗脱流速、乙醇解析浓度选择、乙醇解析用量等的筛选实验,确定纯化工艺条件.结果 AB-8型大孔吸附树脂分离纯化藤梨根中总黄酮效果好,其吸附率为84.76％,解析率为95.51％.其佳工艺条件为:30 mL藤梨根提取液以3 BV·h-1的流速通过树脂柱,先用水8 BV洗涤,洗脱流速为4BV·h-1,再用70％乙醇4 BV解析,洗脱流速为3 BV·h-1.结论 AB-8型大孔树脂在所确定的优化工艺条件下,可较好地吸附分离藤梨根中总黄酮.
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藤梨根提取物对人胃癌BGC细胞凋亡及Bax蛋白表达的影响
目的:探讨藤梨根提取物对人胃癌BGC-823细胞凋亡的影响及其调控机制.方法:体外培养对数生长期胃癌BGC-823细胞,采用不同浓度的藤梨根提取物作用于人胃癌BGC-823细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡,采用免疫组织化学方法检测Bax蛋白表达.结果:藤梨根作用于BGC-823,在8～32mg· mL-1时呈不同程度的促进凋亡;藤梨根提取物大、中、小剂量组对人胃癌BGC-823细胞中Bax表达水平上调.结论:藤梨根提取物对人胃癌BGC-823细胞的增殖具有明显抑制作用,在实验浓度范围内呈浓度依赖性促进细胞凋亡,这可能与激活Bax蛋白表达有关.
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熊果酸对刀豆蛋白A诱导小鼠T细胞增殖与激活的影响
目的 研究熊果酸(Ursolic acid,UA)对小鼠T细胞活化和增殖的影响,并探讨其免疫调节机制.方法 以刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠T细胞活化和增殖,用MTT法测定细胞增殖,利用流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69、中期活化标志CD25与晚期活化标志CD71的表达情况.结果 在ConA刺激下48 h后,小鼠T淋巴细胞MTT吸收度显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01).熊果酸(10～40 μM)组与ConA组比较显著降低了MTT吸收度,差异具有统计学意义(P<0.01).在ConA刺激淋巴细胞18 h后,小鼠T细胞CD3+ CD69+表达率显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),ConA刺激36 h后,T细胞CD3+CD25+表达率显著高于正常对照组.差异具有统计学意义(P<0.01),ConA刺激48 h后,T细胞CD3+CD71+显著高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.01).熊果酸组在浓度为10～40 μM时与ConA组比较,均能显著降低CD25、CD69、CD71的表达率,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 熊果酸可以显著的抑制多克隆刺激荆ConA介导的小鼠T细胞的活化和增殖.
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藤梨根抗病毒活性部位的初步筛选
目的 通过体外药效实验筛选藤梨根的抗病毒活性部位,初步确定其活性部位的大致成分,为进一步开发利用藤梨根奠定基础.方法 通过MTT实验及对HBsAg和HBeAg的检测,筛选抗乙肝病毒的活性部位.结果 乙醇提取部分(A1)、乙酸乙酯提取部分(Y)对HBeAg和HBsAg的抑制率TI>2,提示对两者抑制作角较强,对试验细胞无明显毒性.结论 根据结果初步认为A1是藤梨根抗肝炎病毒的活性部位,在体外有较强抗肝炎病毒活性,对正常细胞的影响较小.
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藤梨根的生药鉴定
目的:为藤梨根的生药鉴定和开发利用提供科学依据.方法:应用性状鉴别、显微鉴别和紫外光谱鉴别进行鉴定研究.结果:根横切面中,木栓层夹有1～3条石细胞环带,韧皮部散在有石细胞群及较多粘液腔,粘液腔中含有草酸钙针晶束;侧根横切面中,内皮层细胞呈纺锤形,每个细胞由径向壁分隔成数个类方形小细胞;粉末中石细胞孔沟较深,有的纹孔及层纹明显,淀粉粒、草酸钙针晶较多.结论:这些特征可作为藤梨根生药鉴定的依据.
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抗肿瘤植物药藤梨根
本文介绍藤梨(软枣猕猴桃Actinidia arguta)根的抗癌作用及近年来的临床实验,提出进一步研究及开发前景.
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藤梨根含药血清对肺腺癌A549细胞的抑制作用
目的 研究藤梨根含药血清对人肺癌A549细胞株的增殖抑制作用及其机制.方法 将9只无特定病原体(SPF)级SD大鼠随机分为藤梨根含药血清高、低剂量组和对照组,每组3只,含药血清组分别以12.5、6.25 g/(kg·d)的藤梨根灌胃,对照组予生理盐水灌胃,3 d后取腹主动脉血制备含药血清及对照组血清,3 组血清分别干预体外培养的人肺癌A549细胞24 h,应用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂测定藤梨根含药血清对人肺癌A549细胞的抑制作用,应用DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡,应用蛋白免疫印迹法检测藤梨根含药血清对人肺癌A549细胞表皮生长因子受体(EGFR)、B淋巴细胞瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响.结果 CCK-8法检测结果示,藤梨根含药血清对人肺癌A549 细胞有增殖抑制作用.与对照组比较,含药血清组增殖抑制率明显增高(P<0.01).藤梨根含药血清对A549细胞有诱导细胞凋亡的作用,与对照组比较,低、高剂量组凋亡率增高(P<0.01).蛋白免疫印迹法检测结果显示,与对照组比较,藤梨根含药血清作用人肺癌A549细胞24 h后,肺癌细胞EGFR和Bcl-2蛋白表达水平下降,而Bax蛋白表达水平增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 藤梨根含药血清可抑制人肺癌A549细胞的增殖,诱导A549细胞凋亡,其机制可能与下调EGFR和Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达相关.
关键词： 藤梨根 增殖抑制 凋亡 人肺腺癌A549细胞株 -
HPLC法测定藤梨根中表儿茶素的含量
目的:建立测定藤梨根中表儿茶素含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Kromasil C18,流动相为乙腈-0.2%乙酸溶液(15:85,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为210 nm,柱温为25℃,进样量为10μl.结果:表儿茶素的检测质量浓度线性范围为10.47~167.52μg/ml(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;加样回收率为98.07%~101.71%, RSD=1.39%(n=6).结论:该方法操作简便、结果准确,适用于藤梨根中表儿茶素的含量测定.
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不同来源藤梨根中总黄酮含量的比较
目的 为充分利用和开发藤梨根资源提供科学依据.方法 以芦丁为对照品,用分光光度法测定藤梨根中总黄酮的含量.结果 样品1中总黄酮的含量为6.99％,样品2中总黄酮的含量为8.96％,样品3中总黄酮的含量为1.27％.结论 栽培藤梨根中总黄酮的含量大于野生品,在根中的总黄酮含量远大于地上茎中的含量,市场上藤梨根的地上茎与根同等入药之现状值得进一步商榷.
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六君子汤配伍藤梨根治疗晚期胃癌107例
目的:探讨已无手术指征且不宜化疗的晚期胃癌的中医药治疗.方法:六君子汤配伍藤梨根治疗晚期胃癌,观察近期疗效、Karnofsky评分、CEA、生存率等指标.结果:经过治疗,肿瘤稳定率为79.44%,卡氏评分显著提高,CEA显著下降,3年生存率为44.86%.结论:六君子汤配伍藤梨根治疗晚期胃癌,能改善生活质量,稳定肿瘤病灶,延长生存期.
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藤梨根提取物对裸鼠移植人胃癌SGC-7901细胞瘤p53基因蛋白的影响
目的 研究藤梨根提取物对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响及其部分作用机理.方法 采用免疫组织化学方法检测p53基因表达.结果 藤梨根提取物大、中、小剂量组对人胃癌SGC-7901细胞p53蛋白表达阳性灰度值分别为185.48±1.05,124.05±1.53,95.51±0.19.结论 藤梨根提取物抑制SGC-7901 p53蛋白水平的表达有可能是促进SGC-7901凋亡的作用机制.
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藤梨根毒副作用及预防措施
通过对藤梨根化学及毒性成分、临床表现、产生毒副作用的原因及相应预防措施的分析论述,增强了人们对藤梨根客观、正确、合理的认识.
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藤梨根皮部与木部的显微鉴定及其多糖中单糖的构成分析
目的 目前市场上的藤梨根药材多以木部为主,与传统药用部位不同,因此采用显微鉴别法区别原根的不同部位,并分析其中活性成分多糖的组成,为藤梨根药用部位的正确使用提供参考.方法 通过原根横切面的显微鉴别分析皮部与木部在组织结构上的不同,利用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化HPLC法分析皮部与木部中多糖水解后的单糖产物,采用化学计量学评价藤梨根药材中多糖组成的区别.结果 藤梨根皮部及木部结构差异较大,皮部比木部有更多的细胞后含物,同时两者多糖中单糖的构成也具有显著差异.皮部多糖主要以葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖为构成主体,而木部主要以葡萄糖为构成主体.结论 虽然藤梨根皮部结构疏松、易脱落,但无论是后含物的组成,还是多糖的单糖构成,均显示了与木部的明显差别,为藤梨根药用部位的正确使用提供参考依据.
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藤梨根提取物对人胃癌SGC -7901细胞凋亡及Bcl -2的影响
目的 研究藤梨根提取物对人胃癌SGC - 7901细胞凋亡的影响及其部分作用机理.方法 采用不同浓度的藤梨根提取物作用于人胃癌SGC - 7901细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组织化学方法检测Bcl -2基因表达.结果 藤梨根作用于SGC - 7901,在(8～32) mg/mL时促进该细胞呈不同程度的凋亡；藤梨根提取物大、中、小剂量组对人胃癌SGC - 7901细胞Bcl -2蛋白表达阳性灰度值分别为103.41±1.01,104.05±1.23,90.52±1.09.结论 藤梨根提取物对SGC -7901有明显促凋亡作用；藤梨根提取物抑制SGC - 7901 Bcl -2蛋白水平的表达有可能是促进SGC -7901凋亡的作用机制.
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藤梨根总黄酮提取方法及含量测定研究
目的 筛选藤梨根中总黄酮的提取方法,为进一步研究总黄酮的佳提取工艺,充分利用和开发藤梨根资源提供科学依据.方法 以芦丁为对照品,用分光光度法测定不同方法提取的藤梨根中总黄酮的含量.结果 甲醇索氏提取法所得的总黄酮的含量较高,以芦丁计为7.93%.结论 与甲醇回流提取法和甲醇超声提取法比较,甲醇索氏提取法所得提取物的总黄酮含量高.
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藤梨根研究进展
藤梨根为猕猴桃科软枣猕猴桃Actinidiaarguta(Sieb.etZucc.)Planch的根[1].猕猴桃属全球约54种,分布于马来西亚至西伯利亚东部的广阔地带,我国是主产区.
