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葡萄籽提取物原花青素的营养保健功能(综述)
葡萄籽提取物原花青素(Grape Seed Extract Proanthocyanidin ,GSPE)是广泛存在于植物界的属于双黄酮衍生物的天然多酚化合物,[1～4]这类化合物是由不同数目的黄烷醇聚合而成,在酸性溶液中加热生成白花色素(leucoanthocyanins)或原花青素(proanthocyanidin),也有称pycnogenols,[5,6]目前研究广的是存在于葡萄籽的由5,7,3',4'-四羟基黄烷-3醇(5,7,3',4'-tetrahydroxyflavan-3-o1),即(+)-儿茶素((+)-catechin)、(-)-表儿茶素((-)-epicatechin)为单位聚合而成的这类化合物,又称leucocyanidins或procyanidins.[7]具有极强的抗氧化特性,一般存在于果实的皮及植物的木实部,其主要作用是保护植物中易氧化的成分.早在50年代法国科学家就发现可以从松树皮中提取大量原花青素,其提取物中可含85%的原花青素.70年代则发现葡萄籽是提取原花青素的更好资源,葡萄籽提取物中原花青素含量可高达95%.
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纳米金对抗氧化剂的催化氧化及其活性的影响
目的:探讨纳米金对抗坏血酸和表儿茶素氧化进程的影响及其生物学效应.方法:合成5 nm左右的金纳米颗粒,通过紫外可见光谱研究金颗粒加入前后两种抗氧化剂的氧化速率,监测反应过程中氧气浓度的变化.采用电子自旋共振光谱研究作用前后抗氧化剂对不同种类自由基的清除能力.结果:加入纳米金后,抗坏血酸及表儿茶素的氧化速率迅速提高,此过程伴随氧气的大量消耗.同时,与纳米金作用后的抗氧化剂清除自由基的能力显著降低.结论:纳米金颗粒能催化氧化不同种类的抗氧化剂,并显著抑制其抗氧化功能.
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润喉清咽合剂中总黄酮含量测定
目的 建立润喉清咽合剂中总黄酮含量测定方法.方法 采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量.结果 测定波长为280nm,表儿茶素在8.08～80.8μg/mL浓度范围内呈良好线性关系,平均回收率为97.61％.结论 方法可行,结果可靠,可作为本品质量控制方法.
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黑面神枝叶中表儿茶素的含量测定及水提工艺优化
目的:测定黑面神枝叶中表儿茶素含量并优化水提取工艺条件.方法:采用HPLC法测定黑面神枝叶中表儿茶素含量,并运用正交试验考察浸泡时间、加水量、提取时间和提取次数对表儿茶素含量的影响.结果:表儿茶素在0.006 6～0.264 0 g·L-1线性关系良好,回归方程Y=59 283X +53.986,r =0.999 9,平均回收率达98.2％,RSD 1.03％.水提佳工艺条件:药材加20倍量水浸泡45 min,80℃温浸提取2次,每次1h.结论:HPLC法测定黑面神枝叶中表儿茶素含量操作简便,专属性强,经正交试验优化后含量有所提高,为黑面神的进一步开发奠定基础.
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鸡血藤提取物的TLC鉴别及儿茶素和表儿茶素的含量测定
目的:建立鸡血藤提取物的薄层色谱法(TLC)鉴别及其有效成分儿茶素和表儿茶索总量的高效液相色谱法(HPLC)测定,为该药材的质量控制提供参考.方法:TLC以0.7％羧甲基纤维素钠硅胶G作为吸附剂,三氯甲烷-丙酮-正丁醇-甲醇-甲酸(67∶ 13∶ 14∶ 3∶3)为展开剂,5％香草醛硫酸溶液为显色剂.儿茶素、表儿茶索总量测定的HPLC采用Kinetex(R)C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.02％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,柱温25℃,进样量5μL,检测波长280 nm.结果:鸡血藤提取物的TLC中,在与儿茶素、表儿茶素对照品相对应的位置上显相同颜色、相同形状的斑点,且斑点清晰、分离度好.在HPLC定量分析中,儿茶索、表儿茶素的线性范围(质量浓度与峰面积积分值)分别为9.9 ～ 198.8,20.6 ～412.4 mg·L-1,相关系数均为0.999 9;儿茶素、表儿茶素的平均回收率分别为98.12％和97.94％,RSD分别为1.7％和1.4％.结论:该研究建立的TLC专属性强、分离度好;建立的测定儿茶素、表儿茶素总量的HPLC准确度高、重复性好,可用于鸡血藤提取物的质量控制.
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HPLC同时测定布渣叶总黄酮提取物中6种黄酮类成分
目的:建立布渣叶总黄酮提取物中表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷、山柰酚-3-0-芸香糖苷、异鼠李素-3-0-葡萄糖苷和水仙苷等6种黄酮类成的HPLC同时测定方法.方法:采用HPLC法,Agilent HC-C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),甲醇-0.05％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长288 nm,柱温35℃,流速0.8 mL·min-1.结果:表儿茶素、牡荆苷、异牡荆苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷和水仙苷分别在131.200 ～1312.000,149.800～1348.200,131.400 ～1051.200,99.175 ～595.050,109.955～659.730,267.000 ～1348.200 ng呈线性关系,平均回收率分别为98.13％,97.41％,96.93％,98.22％,97.37％,97.82％.结论:该方法准确、可靠,重复性好,可用于布渣叶总黄酮提取物的质量评价与控制.
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山楂饮片的质量评价研究
目的:建立以高效液相色谱指纹图谱与多指标成分定量相结合的山楂质量评价方法.方法:采用高效液相色谱-紫外检测法,以磷酸盐缓冲液(pH 3.0),乙腈梯度洗脱.结果:建立了山楂饮片高效液相色谱指纹图谱,指认了5个色谱峰:绿原酸,表儿茶素,原花青素B2,异槲皮素,及芦丁与金丝桃苷的共洗脱峰;测定了绿原酸与表儿茶素的含量,其中绿原酸含量为0.03%～0.06%;表儿茶素含量为0.09%～0.43%.结论:该方法可为山楂的质量评价研究提供实验数据.
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鸡血藤药材中表儿茶素的含量测定
目的:通过高效液相色谱法、薄层色谱法建立了道地药材鸡血藤中有效成分表儿茶素的含量测定及刺芒柄花素薄层鉴别方法.方法:采用HPLC及TLC法测定.结果:对不同地区市售的药材进行了表儿茶素的含量测定及刺芒柄花素鉴别.结论:为道地药材鸡血藤质量控制方法的建立奠定了基础.
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金荞麦中表儿茶素提取工艺的研究
以表儿茶素为考察指标,以正交实验设计法为依据,重点考察提取溶剂乙醇的浓度、提取次数和提取时间3个因素,每个因素3个水平,按L9(34)正交表设计实验,采用高效液相法测定其含量.实验证明,佳提取工艺条件为45％的乙醇回流提取3次,每次1h.本优选工艺稳定可行,提取率高,重现性好.
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高效液相色谱-电化学检测法测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量
目的:建立可测定金荞麦饮片中表儿茶素含量的高效液相色谱-电化学检测法.方法:采用Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm ,5μm)柱,流动相甲醇-0.1 mol·L-1磷酸盐缓冲液(1:3,pH2.5),流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,参比电极ISAAC(in-situ silver/silver chloride),工作电极玻碳电极,检测电位+600 mV.结果:表儿茶素的线性范围为0.004 875～1.56μg,r=0.999 9;平均回收率为100.7%,RSD 1.9%(n=5).9批不同市售来源的金荞麦饮片中表儿茶素的含量存在差异.结论:该方法重复性好,可以用来测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量.
关键词： 高效液相色谱-电化学检测法 金荞麦 表儿茶素 -
表儿茶素对牛磺酸脱氧胆酸诱导Huh7细胞凋亡的作用
目的:探索表儿茶素对牛磺酸脱氧胆酸诱导Huh7细胞凋亡的抑制作用及其作用机制.方法:对牛磺酸脱氧胆酸(TDCA)400μmol·L~(-1)和表儿茶素干预培养48 h的Huh7细胞,应用MTF法检测细胞活力,荧光探针测定细胞内活性氧(ROS)生成量,荧光caspase-3/7分析法探测细胞凋亡,免疫蛋白印迹测定促凋亡蛋白 Bax,细胞色素C和磷酸化p38蛋白激酶含量.结果:TDCA孵育可诱导Huh7细胞凋亡,存活率下降(54.24±2.20)%,细胞经表儿茶素与TDCA共孵育后,细胞存活率提高到(85.64±0.84)%;表儿茶素能显著抑制TDCA引起的Huh7细胞ROS生成,caspase-3/7蛋白酶活性升高.ROS生成下降54.2%,caspase-3/7活性下降52.3%(P<0.01).表儿茶素抑制TDCA诱导Huh7细胞凋亡随剂量增加抑制作用加强.表儿茶素抑制TDCA诱导促凋亡蛋白Bax表达,细胞色素C释放及p38蛋白激酶磷酸化.结论:表儿茶素抑制TDCA诱导Huh7细胞线粒体损伤而导致的细胞凋亡.其作用机制是通过减少细胞内活性氧和促凋亡蛋白Bax生成,抑制细胞色素c释放及p38蛋白激酶磷酸化.
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反相高效液相色谱法测定鸡血藤中儿茶素类成分的含量
目的:建立鸡血藤中儿茶素类化合物的含量测定方法.方法:以没食子儿茶素(gallocatechin),儿茶素(catechin),表儿茶素(epicatechin)为对照品,反相C18柱,流动相甲醇-冰醋酸-水系统,梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1,检测波长270 nm.结果:3种对照品分别在0.397～1.986,0.404～2.019,0.405～2.024μg有良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.2%,100.8%,98.8%;RSD分别为1.7%,2.4%,2.4%(n=5).结论:本法操作简便、快捷,适用于鸡血藤中儿茶素类化合物含量的测定.
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血三七化学成分的研究
目的:对民间药材血三七的化学成分进行研究.方法:用硅胶、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20等手段进行分离纯化,通过IR,~1H-NMR,~(13)C-NMR,MS等波谱鉴定结构.结果:分离鉴定了8个化合物,分别为木栓酮(friedelin,1),β-谷甾醇(β-sitosterol,2),西米杜鹃酮(simiarenone,3),白芷内酯(angelicin,4),补骨脂内酯(psoralen,5),棕榈酸(palmitic acid,6),表儿茶素[(-)-epicatechin,7]和槲皮素(quercetin,8).结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到,除化合物2,7,8外,其他5个化合物均为首次从该属植物中分离得到.
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鸡血藤有效成分研究
目的:研究鸡血藤原植物密花豆Spatholobus suberectus的有效成分.方法:利用各种色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和各种波谱技术进行结构鉴定.结果:分离鉴定了8个化合物,分别为芒柄花苷(ononin,1),樱黄素(prunetin,2),没食子儿茶素(gallocatechin,3),儿茶素(catechin,4),表儿茶素(epicatechin,5),丁香酸(syringic acid,6),香草酸(vanillic acid,7),胡萝卜苷(daucosterol,8).结论:化合物3,4,6,7为首次从密花豆属中分离得到.其中化合物4对骨髓抑制小鼠造血祖细胞的增殖有刺激活性.
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反相高效液相色谱法测定拳参中儿茶素的含量
拳参收载于<中国药典>2005年版一部,具有清热解毒、消肿、止血的功能.根据文献报道,拳参中含没食子酸、儿茶素、表儿茶素等成分[1],其中儿茶素的含量较高,近年来的研究表明,儿茶素具有强抗氧化能力、能抑止肿瘤生长[2],具抗菌消毒[3]等多种药理功效.因此控制本品中儿茶素的含量对保证本品质量具有特别重要的作用.本实验采用高效液相色谱法和梯度洗脱方式测定中药拳参中儿茶素的含量.结果显示该法分离效果好、专属性强.
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地榆鞣质与皂苷组分配伍对儿茶素、表儿茶素和地榆皂苷Ⅰ在大鼠体内药动学参数的影响
采用药代动力学相关技术和方法,研究地榆鞣质和皂苷不同比例配伍[鞣质-皂苷(1∶1)和鞣质-皂苷(8∶1)]大鼠灌胃(50 mg·kg-1)给药后,儿茶素、表儿茶素和地榆皂苷Ⅰ在大鼠体内的药动学行为的变化.并采用Kinetica 5.0软件计算药动学参数.结果显示,所建分析检测方法的专属性、线性、回收率、精密度及稳定性均符合试验要求;地榆鞣质与皂苷1∶1配伍时,儿茶素和表儿茶素Vd和CL显著增大(P＜0.05),MRT显著缩短(P＜0.05),Cmax和AUC显著减小(P＜0.05).而8∶1配伍时,儿茶素和表儿茶素的Vd和CL显著减小(P＜0.05),MRT显著延长(P＜0.05),Cmax和AUC显著增大(P＜0.05);而地榆鞣质与皂苷配伍且随着鞣制比例的增加,地榆皂苷Ⅰ在大鼠体内的Cmax和AUC显著增大(P＜0.05),Vd和CL显著减小(P＜0.05),Tmax明显滞后,MRT也显著延长(P＜0.05).结果表明,地榆鞣质与皂苷组分8∶1配伍时儿茶素、表儿茶素和地榆皂苷Ⅰ在大鼠体内均表现出良好药动学行为,可作为地榆鞣质和地榆皂苷组分配伍比例的参考.
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葡萄籽原花青素预防兔实验性动脉粥样硬化研究
葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidin,GSP)是从葡萄籽中提取的一类多酚化合物,重要的组成单元是黄烷-3-醇,大多数为(+)-儿茶素和(-)-表儿茶素.近年研究证实,GSP有极强的抗氧化活性,且毒副作用极低.本研究探讨了GSP抗动脉粥样硬化作用及其机制.
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HPLC法测定七厘散中儿茶素和表儿茶素的含量
目的 建立七厘散中儿茶素和表儿茶素的含量测定方法.方法 HPLC法,采用Prevail Select C18(150 mm ×4.6mm,5 μm)色谱柱,柱温:35℃；以乙腈-水-磷酸(100∶900∶1)为流动相；流速:1ml/min;检测波长:278 nm.结果 儿茶素、表儿茶素线性浓度范围分别为30.08 ～150.4 μg/ml,r=0.9999;12.24～61.20 μg/ml,r=0.9999;回收率分别为99.1％和97.4％,RSD分别为1.1％和1.2％.结论 本方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于七厘散中儿茶素和表儿茶素的含量测定.
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高效液相色谱法测定茶黄酊中儿茶素和表儿茶素的含量
目的 建立高效液相色谱法测定茶黄酊中儿茶素和表儿茶素含量的方法.方法 色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(150mm×4.6mm,4.6μm).乙腈-0.5%三乙胺溶液(10∶ 90)(磷酸调pH值至3.0)为流动相,流速:1 ml/min,检测波长280nm.结果 以峰面积(X)对进样浓度(Y)线性回归,儿茶素、表儿茶素回归方程分别为:Y=0.156 7X-0.832 0、Y=0.163 9X+0.120 4,线性范围分别为33.44～200.6、6.960～41.76μg · ml-1,r均为0.999 9;回收率分别为97.9%、101.1%,RSD分别为1.6%、1.9%.结论 方法精密度、准确度好,操作简便,可用于茶黄酊中儿茶素和表儿茶素的含量测定.
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HPLC法测定茅莓根中表儿茶素的含量
目的:建立高效液相色谱法测定茅莓根中表儿茶素的含量.方法:采用HPLC法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水溶液(12∶88),等度洗脱;柱温为25℃;检测波长为280 nm.结果:表儿茶素浓度在0.01 ～0.6mg·mL-1(r=1)范围内与其峰面积线性关系良好.平均回收率(n=9)为97.9％,RSD为1.92％.结论:本方法简便准确,快速可靠,可用于茅莓根药材的质量控制.
