骨髓间充质干细胞移植治疗炎症性肠病小鼠结肠炎的有效性及安全性分析

目的:探讨骨髓间充质干细胞移植治疗炎症性肠病小鼠结肠炎的有效性及安全性.方法:选择40只SPF级健康雌性3～7周龄小鼠,随机均分为两组,每组20只,观察组行骨髓间充质干细胞移植治疗,对照组不行该治疗,对其治疗效果进行观察比较.结果:在治疗有效率及不良反应发生率的比较结果上观察组较对照组均明显更优(P＜0.05),有统计学意义.结论:炎症性肠病小鼠结肠炎经骨髓间充质干细胞移植治疗后疗效显著,且治疗的安全性较高,值得临床进一步进行人体用药研究.

Micro-dsytrophin基因修饰的骨髓间充质干细胞移植后mdx鼠膈肌病理改变

目的 探讨自体骨髓间充质干细胞(mMSCs)携带外源micro-dystrophin基因移植治疗mdx鼠对膈肌的影响.方法 采用脂质体介导micro-dystrophin基因转染mdx小鼠mMSCs(microdys-mMSCs),通过尾静脉注射移植治疗mdx鼠,对照组移植等量的PBS液.在移植后4周、8周、12周和16周测定受体鼠血清肌酸激酶(CK)值、对膈肌进行HE染色、计数核中心移位纤维(CNF)比率,并用免疫荧光及RT-PCR法检测micro-dystrophin的表达.结果 移植后血清CK值持续下降,各时间点膈肌病理改变较对照组有所改善,CNF比率下降,差异有统计学意义.免疫荧光可以检测到部分肌细胞膜能表达micro-dystrophin蛋白,并随移植时间延长micro-dystrophin阳性肌纤维比率增加,RT-PCR检测micro-dystrophin的mRNA有相同的趋势.结论 microdys-mMSCs移植治疗mdx鼠可以在受体鼠膈肌检测到micro-dystrophin的表达,减轻肌肉损伤并且改善mdx鼠膈肌的病理改变.

经脾脏hMSCs移植对乙酰氨基酚所致小鼠急性肝损伤的治疗作用

目的:评价经脾脏途径行骨髓间充质干细胞(hSMCs)移植对对乙酰氨基酚所致小鼠急性肝损伤的疗效.方法:建立对乙酰氨基酚导致的急性药物性肝损伤动物模型,将SCID小鼠20只.随机分成2组,经脾脏注射组和对照组(n=10),经脾脏途径行hSMCs移植,采用肝功能检查、免疫荧光、荧光显微镜、网状纤维染色等方法观察hMSC移植前后重症联合免疫缺陷病(severecombined immunodeficiency disease,SCID)小鼠肝腺泡结构的恢复与肝功能的改善情况.结果:SCTD小鼠肝功能在经脾脏移植组与对照组相比较呈现显著性改善(28 d时,ALT:26.3U/L vs 50.1 U/L,P<0.01;AST:108.0 U/L vs154.3 U/L,P<0.05;ALB:40.0 g/L vs 31.9 g/L,尸<0.05).免疫荧光显示经脾脏移植的hMSCs在脾脏、肝脏均有较多量定植、分化与增殖.免疫荧光观察到脾脏移植后肝腺泡结构有较明显改善.结论:经脾脏途径行hMSCs移植能改善小鼠急性肝损伤肝功能,hMSCs在小鼠肝内生长良好,是hMSCs移植治疗的有效途径.

间充质干细胞移植对缺血/再灌注大鼠心肌胶原与去甲肾上腺素转运蛋白的影响

目的 观察同种异体骨髓间充质干细胞(BMSCs)心肌内移植对60分钟缺血/再灌注心肌梗死(MI)模型大鼠左心室重塑及心肌去甲肾上腺素转运蛋白(NET)表达的影响,探讨BMSCs移植对心脏交感神经功能以及胶原重塑作用的可能机制.方法 分离、原代培养Wistar大鼠BMSCs,建立缺血/再灌注MI模型,随机分为假手术对照组、MI组、BMSCs移植组.观察BMSCs移植后动物模型血流动力学指标,天狼猩红染色测定MI范围、面积以及扩展指数,结合偏振光分析MI区胶原容积分数和胶原成熟度;免疫组化检测NET表达.结果 ①BMSCs移植可缩小60min缺血/再灌注大鼠MI面积;②BMSCs移植可减轻心肌梗死动物左心室重塑;③BMSCs移植发挥细胞外基质抑制,心肌间质胶原含量、胶原容积分数下降,增加心肌NET表达.结论 BMSCs移植可改善MI后心室重塑、降低心肌胶原、增加心肌NET表达.

骨髓间充质干细胞移植对肺气肿大鼠氧化应激与细胞凋亡的影响

异基因骨髓间充质干细胞移植治疗小鼠前列腺癌的实验研究

目的 观察非清髓性异基因骨髓间充质千细胞移植对小鼠前列腺移植瘤的治疗效果.方法 应用全骨髓培养法培养BALB/c小鼠骨髓间充质干细胞,通过流式细胞术检测第四代细胞中CD44阳性细胞率,并通过油红染色鉴定由骨髓间充质干细胞分化的脂肪细胞.应用C57小鼠源性前列腺癌株RM-1(2×106/只)制成C57BL小鼠皮下移植瘤模型,分为对照组和异基因骨髓间充质干细胞移植组,每组10只.应用FC方案(氟达拉滨30mg/m2,-d1-5;环磷酰胺300mg/m2,-d1-3)对非对照组小鼠进行非清髓性预处理.异基因干细胞移植组小鼠经尾静脉注入骨髓间充质干细胞1×106个/只.记录并比较两组小鼠的肿瘤体积及生存时间.结果 全骨髓培养法培养的第四代细胞中CD44阳性率为84.29%,油红染色证实由骨髓间充质干细胞自然分化的脂肪细胞存在.与对照组相比,异基因骨髓间充质干细胞移植显著的抑制了小鼠前列腺癌的生长(P=0.047),并明显延长了异基因骨髓间充质干细胞移植组小鼠的生存时间(P=0.00001).结论 异基因骨髓间充质干细胞移植显著的抑制了小鼠前列腺癌的生长,延长了受体小鼠的生存时间,预示了将骨髓间充质干细胞作为抑癌基因栽体的良好前景.

骨髓间充质干细胞移植加干细胞动员在重症急性胰腺炎肺脏保护中的作用

急性肺损伤是重症急性胰腺炎(severe acute pancreatifis,SAP)常见且严重的胰外并发症.本研究拟观察大鼠骨髓间充质干细胞(mesenehymal stem cells,MSCs)对SAP肺脏的保护作用.

骨髓间充质干细胞移植对肺动脉高压大鼠模型肺组织超微结构的影响

肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是一类以肺血管阻力进行性增高为主要特征,终导致右心衰竭甚至死亡的疾病.肺血管重建是PAH的核心病理机制~([1]).近年来,随着干细胞治疗技术在临床的逐步应用,使用干细胞修复损伤的肺动脉或使其再生,有可能达到根治PAH的效果.本研究通过建立野百合碱(monocrotaline)诱导的大鼠PAH肺血管重构模型,观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)移植对肺组织超微结构的影响,探讨MSC移植逆转肺血管重构的机制.

间充质干细胞移植治疗小儿脑瘫疗效分析

目的：分析间充质干细胞移植（MSCs）治疗小儿脑瘫的疗效。方法选取2014年7月至2015年5月我院收治的18例脑瘫患儿作为研究对象，所有患儿均接受骨髓间充质干细胞移植治疗，比较治疗前后综合功能进步程度。结果治疗后患儿综合功能进步程度与治疗前进行比较，差异具有明显的统计学意义（P ＜0.05）。结论小儿脑瘫采用骨髓间充质干细胞移植方法进行治疗，疗效显著，值得临床选择和推广。

异基因骨髓间充质干细胞移植治疗克罗恩病一例

患者男,27岁,腹痛、腹泻半年.大便稀,略带脓血,5～7次/d,多达10次/d.下腹部疼痛,便后痛减,有眼炎、强直性脊柱炎史.结肠镜检查:回肠末端及全结肠黏膜粗糙,充血、水肿明显,有点片状糜烂及较深大溃疡,并可见黏膜增生样改变,以回肠末端、盲肠、升结肠为主,占管腔1周,表面有黏液附着(图1);黏膜活检组织学检查:(回肠末端、回盲部)黏膜组织慢性炎伴坏死、炎性渗出和肉芽组织增生.结合病史及多灶病变,诊为克罗恩病活动期.经口服泼尼松(25mg/d)、柳氮磺吡啶(4.0 g/d)、甲氨蝶呤(MTX)和环磷酰胺(CTX)治疗半年后,病情仍无缓解,克罗恩病活动性指数(CDAI)为237.在获得患者知情同意后,行异基因骨髓间充质干细胞移植(MSCT)治疗.

21例病灶清除植骨联合干细胞移植病人的循证护理

股骨头坏死(osteonecrosis of the femeral head,ONFH)是由于各种原因引起的股骨头血液供应破坏所造成的骨小梁和骨髓破坏为特征的一种疾病[1],其发病率高、病程长、致残率高,严重影响病人的生活质量,且治疗方法有限,终需行人工关节置换术[2]。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs )是20世纪70年代发现的一类成纤维集落生成细胞,能分泌多种成骨活性因子[3],可促进新骨生成,防止股骨头塌陷。而病灶清除植骨联合 BMSCs 移植术不仅可减轻股骨头内高压力,打破股骨头缺血的恶性循环,且操作简便安全、排异反应风险低。但作为一项临床新技术,围术期护理有其特殊性,使护理人员面临新挑战。循证护理(evidence based nurs-ing,EBN)作为一种解决临床实际问题的思维方法,强调的是科学的证据、护士个人经验和病人价值的有机结合,可以使护士熟练、准确地将所收集到的证据运用于临床,进而指导护理工作[4]。本研究将循证护理应用于病灶清除植骨联合 BMSCs 移植术围术期护理中,取得了较好的效果。现报告如下。

骨髓间充质干细胞移植脑梗死大鼠：神经功能恢复与突触素的表达

背景：在脑缺血后神经功能的恢复过程中，突触素可以发挥出至关重要的作用。目的：分析骨髓间充质干细胞移植后脑梗死大鼠神经功能改变以及与突触素表达的关系。方法：60只大鼠随机分为4组，每组15只，分别设为假手术组和对照组、模型组、干细胞治疗组。对照组、模型组、干细胞治疗组均制备脑梗死模型，假手术组实施假手术操作。造模后1 d，干细胞治疗组侧脑室移植骨髓间充质干细胞治疗，对照组注射相同剂量的PBS。治疗后1，7，14 d分别对各组动物进行平衡木行走实验、转棒上行走实验、网屏实验评分和RT-PCR检测以及免疫组织化学检测突触素表达。结果与结论：①治疗后7 d和14 d，干细胞治疗组平衡木行走实验、转棒上行走实验、网屏实验评分均显著低于对照组和模型组(均P<0.05)，对照组、模型组之间比较差异无显著性意义(P>0.05)；②治疗后1 d，假手术组的突触素mRNA表达和突触素阳性细胞数均显著高于其他3组(均P<0.05)，治疗后7 d和14 d，干细胞治疗组的突触素 mRNA表达和突触素阳性细胞数均显著高于其他3组(均P<0.05)，且假手术组的突触素 mRNA表达和突触素阳性细胞数均显著低于模型组和对照组(均P<0.05)；③结果提示，骨髓间充质干细胞移植治疗可以有效促进脑梗死大鼠神经功能的恢复，并促进局部突触素的生成。

三七皂苷联合骨髓间充质干细胞移植促进急性脑损伤的恢复

背景：研究证明，三七皂苷治疗脑缺血损伤有着广泛的药理基础，骨髓间充质干细胞移植治疗脑损伤动物模型的实验研究也已广泛开展，但二者联用鲜有报道。
　　目的：观察三七皂苷联合骨髓间充质干细胞移植促进大鼠急性脑损伤的恢复作用。
　　方法：采用液压冲击法建立SD大鼠脑损伤模型，将60只SD大鼠随机分为脑损伤组、骨髓间充质干细胞移植组及骨髓间充质干细胞+三七皂苷联合治疗组。治疗后采用Bederson神经缺损评分评估神经功能恢复情况，Western blot法检测脑组织中神经生长因子蛋白表达变化，苏木精-伊红染色观察脑组织形态学变化，TUNEL法检测皮质神经元凋亡情况。
　　结果与结论：①Bederson评分：脑损伤组>骨髓间充质干细胞移植组>联合治疗组，各组间比较差异有显著性意义(P<0.05)；②神经生长因子蛋白表达：联合治疗组>骨髓间充质干细胞移植组>脑损伤组，各组间比较差异有显著性意义(P<0.05)；③与脑损伤组及骨髓间充质干细胞移植组比较，联合治疗组脑组织炎症浸润细胞明显减少，水肿程度明显减轻；④与脑损伤组及骨髓间充质干细胞移植组比较，联合治疗组神经元凋亡细胞显著减少；⑤结果表明，三七皂苷联合骨髓间充质干细胞移植能够促进大鼠急性脑损伤后的神经功能恢复，其可能与促进神经生长因子表达及减少神经元细胞凋亡有关。

骨髓间充质干细胞移植联合川芎嗪膝关节腔注射治疗兔膝关节骨关节炎

背景:单纯应用骨髓间充质干细胞或单纯应用川芎嗪治疗骨关节炎疗效有限.骨髓间充质干细胞移植复合川芎嗪是否能起到更好的效果未见报道.目的:了解川芎嗪对骨髓间充质干细胞成软骨分化及软骨再生的作用.方法:分离出新西兰白兔(1周龄,广西医科大学动物实验中心提供)骨髓间充质干细胞,培养传至第3代.将健康新西兰大白兔(五六个月龄,广西医科大学动物实验中心提供)40只随机分成4组进行实验:除空白对照组外,其余3组应用伸直位石膏固定法建立兔膝关节骨关节炎模型,所有建模部位均为右侧后肢.造模成功后第2天,空白对照组兔膝关节腔注射生理盐水0.3mL,每周1次,共4次;单纯川芎嗪组兔膝关节腔注射川芎嗪0.3 mL,每周1次,共4次;单纯干细胞移植组兔膝关节腔内一次性注射骨髓间充质干细胞0.3 mL(细胞浓度为3×108 L-1),同时膝关节腔内注射生理盐水0.3 mL,每周1次;干细胞移植联合川芎嗪组兔膝关节腔内一次性注射骨髓间充质干细胞0.3 mL(细胞浓度为3×108 L-1),同时膝关节腔内注射川芎嗪0.3 mL,每周1次,共4次;干预后第6,12周采集各组兔膝关节液.结果与结论:①空白对照组膝关节软骨无明显磨损,周围滑膜无明显增生及炎性改变;单纯川芎嗪组膝关节磨损较为严重,软骨破坏达到3级,但并未暴露软骨下骨,周围滑膜增生明显;单纯干细胞移植组、干细胞移植联合川芎嗪组膝关节轻度磨损,1级或2级,周围滑膜增生及炎性改变不明显,两组在大体观下无法辨别磨损严重程度的差异;②单纯川芎嗪组、干细胞移植联合川芎嗪组兔关节液中白细胞介素1β及白细胞介素6水平明显低于单纯干细胞移植组(P＜0.05).在第6周时,也就是兔膝关节骨关节炎初期,软骨破坏不明显的时候,单纯川芎嗪组兔膝关节液炎症因子水平低;在第12周时,干细胞移植联合川芎嗪组兔关节液炎症因子水平低;③结果表明,川芎嗪对骨髓间充质干细胞成软骨分化及软骨再生的促进作用不明显,但是川芎嗪能明显降低膝关节骨关节炎的炎症水平,可以用来缓解膝关节骨关节炎患者的临床症状.

髓芯减压联合自体骨髓间充质干细胞移植治疗股骨头坏死:安全和有效性的Meta分析

背景:股骨头坏死是一种多因素疾病,寻求一种安全有效的治疗方法对减轻患者痛苦及社会经济负担具有重大意义.骨髓间充质干细胞已运用于股骨头坏死的临床实践,但其有效性存在争议.目的:运用Meta分析的方法评价髓芯减压联合自体骨髓间充质干细胞移植与单纯髓芯减压比较治疗股骨头坏死的安全性和有效性.方法:计算机检索PubMed、The Cochrane Library (2017年第5期)、Embase、CNKI、CBM、VIP及Wan-Fang数据库中有关髓芯减压联合自体骨髓间充质干细胞与单纯髓芯减压比较治疗股骨头坏死的临床随机对照试验,检索时限为各数据库建库至2017年6月20日.提取文献资料并行文献质量评价后,运用RevMan5.3软件进行Meta分析.结果与结论:①8个临床随机对照试验符合纳入标准,合计股骨头坏死患者323例395髋,其中髓芯减压联合自体骨髓间充质干细胞组193髋,髓芯减压组202髋,短随访时间为12个月,长为60个月,总体为中等质量研究;②Meta分析发现,与单纯髓芯减压比较,髓芯减压联合自体骨髓间充质干细胞移植能减轻患者髋关节疼痛[目测类比评分MD=-0.39,95%CI (-0.76,-0.01)]、增强患者髋关节功能[Harris评分:12个月:MD=7.16,95%CI (3.88,10.44);24个月:MD=11.16,95%CI (8.32,14.00)]、降低病情进展率[OR=0.23, 95%CI (0.09,0.55)],并有降低患者终全髋关节置换率趋势,但两组差异无显著性意义[RR=0.44,95%CI (0.19,1.03)].在干细胞治疗过程中,未见明显并发症发生;③上述结果表明,在髓芯减压基础上进行自体骨髓间充质干细胞移植治疗股骨头坏死是一种安全、有效的方法.

骨髓间充质干细胞移植与电针刺激联合治疗对大鼠脑出血后生长相关蛋白mRNA表达的影响

目的:探讨电针刺激对骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗脑出血大鼠神经生长相关蛋白(GAP-43)mRNA表达的影响.方法:将培养的 BMSCs和生理盐水分别移植入脑出血大鼠纹状体内,移植BMSCs的大鼠,其中一半再接受电针刺激百会穴和大椎穴,行H-E染色和GAP-43原位杂交检测.结果:从移植后3d起,BMSCs组脑组织病理改变较生理盐水组改善明显,联合电针后又较BMSCs组改善明显.GAP-43原位杂交检测显示,各组阳性细胞在移植后1d开始增多,7d达高峰,随后下降.BMSCs组阳性细胞较NS组多,联合电针后在5～14d,又较单纯BMSCs组多.结论:电针刺激上调BMSCs移植治疗脑出血大鼠GAP-43mRNA的表达,为电针联合BMSCs移植治疗脑出血的神经保护机制提供实验依据.

骨髓间充质干细胞移植降低缺血-再灌注肠黏膜通透性的实验研究

目的: 观察骨髓间充质干细胞移植对缺血-再灌注损伤的肠黏膜通透性变化的影响. 方法: 体外分离、培养和扩增雄性SD大鼠骨髓间充质干细胞,将雌性SD大鼠随机分为三组,A组为假手术组,仅行剖腹,不夹闭肠系膜上动脉;B组大鼠行肠系膜上动脉夹闭45 min后开放,取培养至第三代的骨髓间充质干细胞直接肠黏膜下注射移植;C组大鼠夹闭肠系膜上动脉45 min后开放,黏膜下注射等量的等渗盐水.术后第3和第6天行乳果糖/甘露醇(L/M)灌胃,6 h后收集尿液测定尿L/M比值.取回肠组织行Y染色体原位杂交检测供鼠来源的细胞.测定血浆D-乳酸水平. 结果: 移植的骨髓间充质干细胞能向缺血-再灌注损伤的肠黏膜归巢,细胞移植的大鼠肠黏膜通透性较C组明显降低(P<0.05). 结论: 骨髓间充质干细胞移植可抑制缺血-再灌注损伤后肠黏膜通透性的升高,维护肠黏膜机械屏障的完整性.

自体骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性心肌病的临床研究

目的 评价缺血性心肌病患者经静脉自体骨髓间充质干细胞移植治疗的疗效.方法 缺血性心肌病患者46例,其中24例作为试验组,行常规药物治疗联合自体骨髓间质干细胞移植治疗;另22例作为对照组,行常规药物治疗.治疗前以及治疗后3个月和6个月时进行心脏彩色多普勒超声检查,通过心脏形态、心脏射血分数及左心室心腔大小等指标来评价自体骨髓间质干细胞移植治疗效果.结果 与对照组相比,试验组患者3个月和6个月时左心室射血分数明显增加(P<0.05),6个月时左心室大小明显减小(P<0.05);与自体骨髓间质干细胞移植治疗前相比,试验组患者3个月和6个月时心脏左心室射血分数均明显增加(P<0.05),6个月时左心室大小明显减小(P<0.05).结论 自体骨髓间质干细胞移植治疗对改善缺血性心肌病患者的心功能有效.

骨髓间充质干细胞移植对慢阻肺大鼠肺气肿程度的影响

目的：探讨骨髓间充质干细胞移植对慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠肺气肿程度的影响。方法培养大鼠骨髓间充质干细胞,制作慢阻肺大鼠40只,将大鼠随机分为干细胞移植组和对照组。主要观察指标为治疗前后两组大鼠肺气肿程度。结果与对照组比较,干细胞移植组大鼠治疗后二氧化碳分压显著降低(38．8±5．65 vs 45．6±6．78mmHg, P =0．017)；氧分压显著增高(80．67±9．31 vs 68．85±8．42mmHg,P<0．001)；内衬间隔显著降低(55．90±12．45 vs 83．20±11．32μm/个, P<0．001)；平均肺泡数显著增多(350．21±54．21 vs 198．32±23．45, P<0．001)。干细胞移植组大鼠前后对比显示治疗后二氧化碳分压显著降低(38．8±5．65 vs 44．9±6．35mmHg, P =0．021)；氧分压显著增高(80．67±9．31 vs 70．11±6．47mmHg,P=0．005)。结论骨髓间充质干细胞可改善慢阻肺大鼠通气状况和肺气肿程度。

颈外动脉骨髓间充质干细胞移植对脑外伤大鼠神经功能和学习记忆的影响

目的 观察颈外动脉移植骨髓间充质干细胞( BMSC)对脑挫伤大鼠神经功能恢复及学习记忆的影响.方法 10只SD大鼠随机数字表法分为外伤性颅脑损伤(TBI)组和BMSC移植组.采用自由落体制作大鼠皮质运动区脑挫伤模型,将培养纯化并鉴定的BMSC于术后当天经颈外动脉移植人体内；术后1d、3d、7d、15d行改良神经功能缺失(NSS)评分,并于15d进行水迷宫测试以观察动物学习记忆能力.15d时取脑组织用免疫荧光技术检测hochest标记的移植BMSC在体内存活、迁移情况.结果 脑外伤组大鼠损伤后即出现不同程度抽搐、瘫痪、平衡功能缺失,神经功能缺损评分明显升高.而BMSC移植组的NSS评分至第7天后[(6.5±1.19)分]与单纯手术组(TBI)[ (8.75 ±0.68)分]比较明显减少(P＜0.01).第15天进行水迷宫测试发现BMSC移植组逃避潜伏期[(20.48±2.29)s]显著优于TBI组[(85.93±47.48)s,P＜0.01].BMSC组在目标象限停留时间百分比[(28.62±1.72)％]和路程百分比[(29.05±3.08)％]明显高于TBI组[(19.37±2.81)％,(21.78±3.06)％],均差异有统计学意义(P＜0.01).BMSC组穿越站台次数[(8.00±2.45)次]和TBI组[(2.00±1.87)次]相比,差异也有统计学意义(P＜0.01).免疫荧光检测显示,移植BMSC能在宿主脑组织存活,并向四周迁移.结论 颈外动脉移植BMSC能在挫伤脑组织存活、迁移,并改善脑挫伤大鼠神经功能和学习记忆能力.