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  • SFOD-LPME-HPLC测定金线莲中对羟基苯乙酮和香草乙酮

    作者:杨晓灵;廖小英;黄媛;潘清清;黄丽英

    目的:建立漂浮有机液滴凝固液相微萃取-高效液相色谱(SFOD-LPME-HPLC)法测定金线莲中对羟基苯乙酮和香草乙酮含量的方法.方法:利用SFOD-LPME技术对中药材金线莲中低峰度组分对羟基苯乙酮和香草乙酮进行富集,后运用HPLC进行分析.优化后的萃取实验条件:60μL的十二醇为萃取溶剂,1 000 μL的四氢呋喃为分散溶剂,15 mL样液加入氯化钠4.50 g,pH为4.0,40℃水浴,以1 500 r·min-1转速搅拌萃取40 min.色谱条件:色谱柱:Agilent TC-C18 (4.6 mm×250mm,5 μn);流动相:甲醇-0.1%乙酸(25∶75);流速:1.0 mL·min-1;柱温:31.5℃;检测波长:275nm.结果:对羟基苯乙酮和香草乙酮的线性范围均为2~24ng·mL-1,检测限分别为0.06 ng·mL-1和0.17 ng·mL-1,富集倍数分别为166和140,测得福建南靖组培金线莲中对羟基苯乙酮和香草乙酮的含量分别为1.69 μg·g-1和0.72μg·g-1,回收率在95.29%~104.30%之间.结论:该法具有集富集、净化于一体的特点,可成为简单、可靠、快速的中药质量控制前处理和测定方法.

  • 金线莲中腺嘌呤的提取与分析

    作者:吴萍萍;黄丽英;黄丽萍;王美华;陈晓兰

    目的:应用超声-微波协同萃取技术提取金线莲中的腺嘌呤,高效液相色谱法-电喷雾电离/离子阱质谱法(HPLC-ESI/MS)对提取物中腺嘌呤进行测定和鉴别.方法:色谱条件为Agilent TC-Clx色谱柱(5μm,4.6mm×250 mm),流动相为甲醇:0.02 mol·L-1醋酸-醋酸铵缓冲溶液(5:95,pH 4.6),流速1.0 mL·min-1,检测波长260 nm,柱温:30℃.结果:表明腺嘌呤浓度在0.5~60.0μg·mL-1范围内呈良好线性关系,相关系数为0.999 9,回收率在95.4%~96.2%之间,相对标准偏差为0.45%,测得金线莲(产于广西)提取物中腺嘌呤含量为10.64 μg·g-1,结论:该法方法操作简便,灵敏快速.迄今为止,首次报道金线莲中含有重要药理活性的物质腺嘌呤,为金线莲的药理和临床试验研究提供物质基础.

  • 金线莲多糖苯酚-硫酸法测定条件的优化

    作者:张锦雀;吴晓珊;朱善岚;黄丽英

    目的:从金线莲中提取多糖,并建立金线莲多糖含量测定方法.方法:用超声法提取金线莲多糖,以苯酚-硫酸法进行含量测定,以葡萄糖为对照品,检测波长为490 nm,用L_9 (3~4)正交试验设计优选测定条件.结果:1.0mL样液,加5%苯酚液0.6 mL、硫酸6.0 mL,100℃水浴保温15 min结果佳,测得金线莲超声提取物中粗多糖含量为12.09%.结论:优化后的苯酚-硫酸法测定金线莲多糖,方法简单,重复性好,结果准确.

  • 金线莲多糖的分离纯化与含量测定

    作者:林丽清;黄丽英;钟添华;林小燕

    目的:从金线莲中分离纯化多糖,并建立金线莲多糖含量测定方法.方法:用水提醇沉法提取金线莲多糖,用Sephadex G-100凝胶柱色谱纯化多糖;并用改良的苯酚-硫酸法测定多糖含量.结果:测得金线莲粗多糖生药量为37.45%,精制金线莲多糖(AFPS)含量为72.84%,AFPS生药量为27.14%,测定平均回收率为100.4%.结论:金线莲中多糖含量较高,具有开发利用价值.

  • 金线莲研究进展及其在感染性疾病治疗方面的应用概况

    作者:王玉海;周文;官升灿;刘小龙;李芹

    金线莲是一种多年生珍贵的中药材,为兰科开唇兰植物花叶属草本植物.目前在我国23种左右兰科开唇属植物中在民间有部分种全草用以入药,统称为金线莲.本文就金线莲研究进展及其在治疗感染性疾病方面的应用综述如下,以期为本品的开发提供有价值的参考.1一般特征金线莲属于阴性植物,自然生态条件独特,适宜生长于天气凉爽、光照不强、湿度较高且具有一定海拔高度(300~1200m)疏松、透气、湿润的腐殖土、红壤或黄壤土壤类型的环境中,通常存在于深山中或溪涧旁潮湿草丛中或竹林下,特别是阔叶林下的阴湿地带,一般呈零星分布.大部分的金线莲生长于亚洲的热带、亚热带或大洋洲地区,在中国境内金线莲主产地为东南沿海地区,以福建、台湾、广东和浙江等省较多[1-4].

  • 金线莲甲醇提取物降脂作用研究

    作者:王慧群;杨博;罗增伟;韩师师;张扬;薛永波;姚广民;张勇慧

    目的 研究金线莲甲醇提取物对高血脂大鼠血脂及肝酯水平的影响.方法 采用高脂饲料喂养致大鼠高脂血症模型,给予不同剂量的金线莲甲醇提取物给药后治疗,实验设正常组,模型组,辛伐他汀组,非诺贝特组和金线莲总膏高、中、低剂量(l 000、500、250mg·kg-1)组,分别测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和肝脏组织匀浆中TC和TG的含量,并做肝脏病理学观察.结果 金线莲总膏500、1 000mg·kg-1剂量组可明显降低大鼠血清TC、TG和LDL-C的水平,并能显著提高血清HDL-C含量,其中高剂量组效果好.另外高剂量组可显著降低肝脏TC和TG的水平.结论 金线莲甲醇提取物在高血脂大鼠模型中具有显著地降血脂和肝脂作用.

  • 金线莲化学成分的研究

    作者:蔡金艳;宫立孟;张勇慧;阮汉利;皮慧芳;吴继洲

    目的:对金线莲(Anoectochilus roxburghii)的化学成分进行系统研究.方法:利用硅胶柱色谱、大孔吸附树脂柱色谱及Sephadex LH-20柱色谱进行分离纯化,通过理化常数和波谱分析技术进行结构鉴定.结果:分离得到了10个化合物,分别为:3(R)-β-D-吡喃葡萄糖氧基-丁酸(γ)内酯(Ⅰ),硬脂酸(Ⅱ),软脂酸(Ⅲ),β-谷甾醇(Ⅳ),琥珀酸(Ⅴ),对羟基苯甲醛(Ⅵ),胡萝卜苷(Ⅶ),4-β-D-吡喃葡萄糖氧基-丁酸甲酯(Ⅷ),对羟基桂皮酸(Ⅸ),邻苯二酚(Ⅹ).结论:化合物Ⅰ、Ⅷ、Ⅹ为首次从该种植物中分离得到.

    关键词: 金线莲 化学成分
  • 金线莲化学成分的研究

    作者:杨秀伟;韩美华;靳彦平

    目的:对金线莲Herba Anoectochili全草的化学成分进行研究.方法:采用柱色谱方法进行分离、纯化,IR、NMR和MS等方法进行结构鉴定.结果:从金线莲全草中得到14个化合物,鉴定了其中10个化合物的结构,分别为β-谷甾醇(2)、阿魏酸(3)、齐墩果酸(6)、羊毛甾醇(7)、对羟基苯甲醛(8)、3-甲氧基-对羟基苯甲醛(9)、胡萝卜苷(10)、3′,4′,7-三甲氧基-3,5-二羟基黄酮(11)、异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷(12)和芦丁(13).结论:化合物6、7、9和11为首次从开唇兰属植物中分离得到.

  • 金线莲总生物碱的提取方法及条件的优化

    作者:林丽清;黄丽英;张亚锋;林小燕

    目的:优化金线莲总生物碱提取条件.方法:采用正交试验L9(34)法对金线莲总生物碱的提取条件进行优化设计,以酸性染料比色法对总生物碱含量进行测定.结果:金线莲总生物碱的佳提取条件为A1B1C2D3的组合,超声时间是提取生物碱的关键影响因素.结论:通过本文建立的优化方法进行验证试验,确认此方法合理,对日后金线莲生物碱的开发利用提供参考.

  • 文山野生金线莲的RAPD鉴别

    作者:张铁;李洪超;刘伟

    目的:对金线莲DNA分子标记进行研究.方法:以文山地区药用金线莲原植物滇越金线兰及3种叶面特征不同的花叶开唇兰为材料提取基因组DNA,选择适合的随机引物和PCR反应体系,扩增分析金线莲的带谱.结果:16条引物共得到108条带谱,其中有95条多态性谱带,多态百分比为87.96%,且4种材料都具特异性条带.结论:实验材料之间遗传差异性较大,花叶开唇兰可能已经形成了新的变型或变种.获得的特异性条带可用于区分干燥的金线莲药材.

    关键词: 文山 金线莲 鉴别 RAPD
  • LC-MS法分析野生、种植和组培3种金线莲药材中的核苷类物质

    作者:郑丽红;黄丽英;陈瑜;林守二;黄冰兰

    目的:采用HPLC-ESI/MS法对野生、种植和组培3种金线莲中的核苷及碱基类成分进行分析,为金线莲的质量标准提供参考.方法:采用Welch Ultimate XB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以甲醇(A)-20 mmol/L乙酸铵水溶液(B)为流动相梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;检测波长:260 nm;柱温:30℃;进样量:20 μL.结果:野生、种植、组培3种金线莲药材中均含有胞嘧啶、尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、β-胸苷和腺苷,三者中核苷及其碱基类成分的总含量分别为1.6639、1.8568和2.2013 mg/g.结论:不同生长方式的金线莲药材中核苷及其碱基类成分的含量不同,其总含量由高到低依次为:组培>种植>野生.该研究为金线莲的进一步临床研究与开发提供了理论依据.

    关键词: 金线莲 核苷 碱基
  • 金线莲种子诱导成苗的研究

    作者:黄慧莲;刘贤旺;吴祥松;赖学文;张寿文

    诱导金线莲Anoectochilus roxburghii 种子萌发成原球茎的适宜培养基是Knudson C,萌发率约60%;促使原球茎分化成苗的适宜培养基是 Knudson C+6-BA0.5 mg/L+马铃薯提取物20%,成苗率可达51%.

  • 不同培养方式对金线莲主要化学成分的影响

    作者:肖开前;赖荣才;林仁穗;吴国虹;郑伟榕;吴德峰

    目的:测定在不同培养条件下,金线莲主要化学成分含量的变化,以确定人工种植的佳培养方式,为金线莲规模化种植提供实验依据.方法:通过改变光质、光照周期以及诱导期来调控金线莲的主要化学成分.结果:对总黄酮、槲皮素、异鼠李素和山柰酚的促成作用均表现为蓝光大于黄光,红光效果差;光照周期在14 h/d的时候其总黄酮、山柰酚、异鼠李素的含量均为高值;接种1个月后进行诱导,其总黄酮及3个黄酮苷元的含量高.结论:在金线莲组培过程中,接种1个月后采用蓝光诱导15d,光照周期为14 h/d,其总黄酮、槲皮素、异鼠李素和山柰酚的含量高.

  • 广东金线莲大棚春季种植对不同生长光强的响应

    作者:邵玲;梁廉;段志芳;李燕纯;林琳

    目的:为探究肇庆地区金线莲大棚春季种植所需的佳光照设置,更好地保护与开发利用地域特色药材金线莲.方法:以肇庆种质金线莲组培苗为材料,根据野生金线莲的自然生长习性,用遮阳网设置3种光照梯度(I.1 200~3 500 Lux,Ⅱ.500~2 000 Lux,Ⅲ.200~1 000 Lux)培养条件,研究栽培周期为3~7月份的金线莲生长情况.结果:历经春夏季90 d的栽培过程,金线莲的叶质量指标(叶数、叶面积及叶鲜重)和植株生长质量指标(株高、茎粗、单株鲜重及干重),均以光照强度Ⅲ(200~1 000 Lux)处理的植株显著优于其他两个光照处理(P<0.05或P<0.01).叶组织结构在光照强度Ⅲ的生长发育好,栅栏组织中叶绿体分布浓密,金红色的叶脉网纹细胞结构发育明显,海绵组织细胞花色素苷积累丰富.总酚、类黄酮与花色素苷等次生物质的含量呈现光照强度Ⅲ>光照强度Ⅱ>光照强度I的趋势,低光照量更有利于金线莲有效物质的积累.结论:在广东肇庆地区3~7月份人工种植金线莲时,建议覆盖2~3层遮阳网(透光率15% ~25%)进行严格遮阴,使其生长环境的光照强度维持在200~1 000Lux范围,以促进金线莲健壮生长,提高植株品质的道地性.

  • Box-Behnken设计优化金线莲总生物碱提取工艺研究

    作者:赖曼娜;林汝秀;钟鸣

    目的:研究金线莲总生物碱的佳提取工艺.方法:以金线莲总生物碱含量为评价指标,提取时间、提取溶剂浓度和提取温度为考察对象,在单因素基础上采用Box-Behnken法进行试验设计,并对试验得到的响应曲面进行分析、处理,确定金线莲总生物碱的佳提取工艺.结果:金线莲总生物碱佳提取工艺为:提取时间4.1h,乙醇浓度为62%,提取温度为62℃,该工艺总生物碱得率为0.04638%,与拟合回归方程理论预测值0.04651%具有一致性.结论:Box-Behnken响应面法能较为准确优选金线莲总生物碱提取工艺,并具有较好的预测性,提取工艺方法可靠且精密度高,适用于扩大生产.

  • 金线莲乙酸乙酯提取物降血糖作用的研究

    作者:刘青;刘珍伶;肖兵;叶静

    目的 探讨金线莲乙酸乙酯提取物的降血糖作用及其机制.方法 将正常和糖尿病小鼠随机分为5组,14 d后,测定各实验组小鼠肝糖原、血糖等指标.结果 金线莲乙酸乙酯提取物能显著降低糖尿病小鼠的血糖,使糖尿病小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性升高,丙二醛(MDA)、三酰甘油 (TG)、总胆固醇(TC)的含量显著降低,小鼠肝糖原含量明显增加.结论 金线莲乙酸乙酯提取物有降血糖作用,其降糖机制可能与其调节血脂水平、增加外周组织对葡萄糖的利用及提高糖尿病小鼠的抗氧化能力有关.

  • 金线莲与灰岩金线莲的性状与显微鉴别研究

    作者:屈信成;严克俭;罗小珍;胡琦敏

    目的:为鉴别金线莲 Anoectochilus roburghii(Wall.)Lindl.及其主要混淆品灰岩金线莲 Anoectochilus calcareus Aver.提供科学依据。方法采用性状及显微鉴定方法。结果金线莲在性状和显微鉴别方面与灰岩金线莲具有明显的区分特征。结论该研究结果可作为金线莲与灰岩金线莲的鉴别依据。

  • 金线莲挥发油成分的提取及其体外抗肿瘤作用研究

    作者:陈焰;陈新峰;阙万才;杨菁

    目的 采用水蒸气蒸馏法提取金线莲挥发油成分,并探讨其体外抗肿瘤活性.方法 分别应用水蒸气蒸馏法和气相色谱-质谱联用法提取并定性分析金线莲中挥发油成分;以四甲基偶氮唑盐(MYT)比色法测定金线莲中挥发油成分对人肺癌细胞NCI-H446细胞的抑制作用.结果 水蒸气蒸馏法挥发油成分提取率为0.06%,应用气相色谱一质谱联用技术对中药材金线莲挥发油成分进行定性分析,可以检测出78个化合物,共鉴定了37个化合物,占挥发油总量的96.26%.挥发油成分中以十六羧酸甲酯(47.98%)、棕榈酸(20.57%)为主.金线莲挥发油时人肺癌细胞NCI-H446有生长抑制作用,并呈浓度依赖性.结论 采用水蒸气蒸馏法提取的金线莲挥发油具有体外抗人肺癌细胞NCI-H446的作用.

  • 野生金线莲中两个丁酸苷类化合物的PTP1B抑制活性

    作者:蔡金艳;张锦文;唐菲;张小琼;徐江涛;张勇慧

    目的:对金线莲(Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl.)中分离到的两个丁酸苷类化合物进行PTP1B抑制活性研究.方法:采用比色法间接测定游离磷酸根的量,来评价PTP1B的去磷酸化活性.结果:体外PTP1B抑制活性筛选结果表明化合物I(kinsenoside)对PTP1B有显著的抑制作用,抑制活性明显强于阳性对照和化合物II(methyl 4-β-D-glucopyranosyl-butanoate).结论:kinsenoside有望作为潜在的PTP1B抑制剂或活性先导化合物,用于治疗II型糖尿病和肥胖症,值得进一步研究和开发.

  • 不同干燥方法对金线莲多糖含量的影响

    作者:张赛男

    目的:通过热泵干燥与传统的自然晒干和热风干燥比较,筛选出金线莲佳的干燥方法.方法:采用苯酚-硫酸法测定金线莲多糖含量.结果:采用热泵干燥的金线莲多糖得率高,经分离纯化后多糖含量达10.24%,且外观品质好,干燥时间短.结论:采用热泵干燥具有较为明显的优势,更适合于在金线莲生产中应用.

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