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潜在抗HIV活性内生真菌Epulorhiza sp.的化学成分研究
目的 探讨内生真菌Epulorhiza sp.中抗HIV活性成分.方法 应用微生物培养的方法获得内生真菌菌丝体,再用溶剂提取,各种柱色谱和重结晶的方法分离内生真菌中的化学成分,通过理化常数测定及波谱学方法鉴定化合物的结构.结果 从内生真菌的醋酸乙酯部位分离得到11个单体化合物,分别为吡咯骈(1,2a)-3,6-二酮六氢吡嗪(1)、(3R,8aR)-hexahydro-3-(2一methylpropyl)-pyrrolo(1,2a)-pyrazine-1,4-dione(2)、核黄素(3)、3-羧基吲哚(4)、2-羟基-4-氧-3,4,5,6-四氢嘧啶(5)、腺苷(6)、胸腺嘧啶(7)、尿嘧啶核苷(8)、鸟嘌呤核苷(9)、4,4-二甲基-1,7-庚二酸(10)、α-棕榈精(11).结论 所有化合物皆为首次从该属真菌中分得,其中3-羧基吲哚据文献报道有抗HIV活性.
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福建产金线莲中黄酮苷成分的研究
目的对兰科开唇兰属植物福建产金线莲Ancecotochilus roxburghii提取物中的正丁醇萃取部分进行分离纯化和结构鉴定.方法利用硅胶柱色谱、凝胶LH-20和反相高效液相制备等方法进行分离纯化,使用快原子轰击质谱、核磁共振等现代波谱技术确定其结构.结果从福建产金线莲95%乙醇渗漉提取物正丁醇部分得到5个黄酮苷类化合物,其结构为:槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)、槲皮素-3-O-β-D-芸香糖苷(Ⅱ)、异鼠李素-3,4'-O-β-D-二葡萄糖苷(Ⅲ)、异鼠李素-3,7-O-β-D-二葡萄糖苷(Ⅳ)、异鼠李素-7-O-β-D-二葡萄糖苷(Ⅴ).结论5种化合物均为首次从该植物中分得,除化合物Ⅲ外均为首次从兰科植物中分离得到.从福建产金线莲中得到大量黄酮类化合物,推测黄酮为该植物中主要活性成分.
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金线莲化学成分的研究
目的 研究金线莲Anoectochilus roxburghii的化学成分.方法 利用正相硅胶、D101大孔吸附树脂、聚酰胺树脂、ODS C18、重结晶及制备高效液相色谱进行分离纯化,根据波谱数据及理化性质进行结构鉴定.结果 从金线莲全草中分离得到19个化合物,分别鉴定为(22E,24ζ)-24-异丙烯基-22-脱氢胆甾醇(1)、anoectosterol (2)、豆甾醇(3)、β-谷甾醇(4)、赫尔西酚(5)、moscatin (6)、5,3'-二羟基-3,7,4'-三甲氧基黄酮(7)、亚油酸(8)、8,9-环氧-1,11,14-三烯(9)、香草乙酮(10)、对羟基苯甲醛(11)、对羟基苯乙酮(12)、5-羟基-3',4',7-三甲氧基黄酮醇-3-O-β-D-芸香糖苷(13)、异鼠李素-3-O-刺槐双糖苷(14)、β-腺苷(15)、异鼠李素-3-O-β-龙胆双糖苷(16)、loroglossin (17)、corchoinoside C(18)、对羟基苯甲醇(19).结论 化含物1、16、19为首次从兰科植物中得到,化合物5～7、10、12为首次从开唇兰属植物中得到,化合物9、15、18为首次从该植物中得到.
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RP-HPLC法同时测定福建产金线莲中槲皮素、山柰素、异鼠李素的量
目的 建立同时测定金线莲中槲皮素、山柰素、异鼠李素的方法,为金线莲及其相关产品的质量控制提供科学的方法.方法 采用高效液相色谱法,选用Lanbo-Kromasil-C18色谱柱;以甲醇-0.2％磷酸溶液(50∶50)为流动相;检测波长360 nm,体积流量1.0 mL/min,柱温为30℃.结果 槲皮素在11.0～165.6 ng (r＝1.000 0),山柰素在11.4～170.4 ng (r=0.999 8),异鼠李素在10.4～156.0 ng (r＝0.999 5)内呈良好的线性关系.平均加样回收率槲皮素为97.69％(RSD=2.4％,n=9),山柰素为95.59％ (RSD=1.5％,n=9),异鼠李素为95.86％ (RSD=1.7％,n=9).结论 本法简便、快速、准确、重复性好,可作为金线莲质量控制的理想方法.
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金线莲RAPD-SCAR标记的开发和种质遗传多样性评价
目的 研究不同种质资源金线莲Anoectochilus roxburghii的遗传进化关系,开发高效、实用的分子标记方法.方法在20个不同产地金线莲种质资源的基础上开发RAPD标记,并将其换成特异SCAR标记.结果 从100条RAPD随机引物中筛选出28条具有显著多态性的引物,扩增得到135条多态性位点.RAPD聚类分析显示,当20个金线莲种质资源平均遗传距离为0.748时,可以聚为6类,同一区域起源金线莲基本归为一类,表明不同区域金线莲种质资源存在着显著遗传差异.在此基础上,从多态性RAPD条带中挑选出5个特异位点转换为SCAR标记,并在不同金线莲种质资源中进行验证,结果 显示5条SCAR标记具有显著的种质资源特异性和扩增模式.结论 所筛选的特异RAPD-SCAR标记为加快金线莲优良品种选育进程奠定坚实基础.
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林下仿生态种植金线莲的质量标准研究
目的 对林下仿生态种植金线莲的质量标准进行研究.方法 建立林下仿生态种植金线莲的性状、显微特征、薄层鉴别及含量测定方法,并按《中国药典》2015年版有关规定对水分、灰分和酸不溶性灰分等项目进行了测定.结果 林下仿生态种植金线莲在性状、显微特征和薄层色谱方面均具有专属性特征,经测定5个基地的金线莲水分平均为8.69％,总灰分平均为11.93％,酸不溶性成分平均为3.27％;含量测定结果槲皮素平均质量分数为0.021 0％,异鼠李素平均质量分数为0.024 7％,山柰素平均质量分数为0.027 3％.结论 上述方法简便、专属性好,重现性好,可为林下仿生态种植金线莲质量标准的制定提供依据.
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不同种质金线莲氨基酸和矿物质元素量的比较
目的 比较不同种质金线莲中氨基酸和矿物质元素的差异.方法 采用全自动氨基酸分析仪和原子吸收光谱仪测定11个不同种质金线莲中氨基酸和矿物质元素的量.结果 不同种质金线莲必需氨基酸为2.81％～4.47％,总氨基酸量为11.38％～17.06％,其中天门冬氨酸、谷氨酸和精氨酸的量明显高于其他氨基酸组分.矿物质元素中钾元素的量高,其顺序为K＞Ca＞Mg＞Fe＞Mn＞Zn＞Cr＞Cu＞Pb＞Cd.主成分分析表明丙氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸为金线莲的特征性氨基酸,Fe、Zn、Mn、Ca、Cr、Mg为金线莲的特征性元素.结论 金线莲中氨基酸和矿物质元素量存在地域性差异.
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金线莲丛生芽培养及有效物质生产研究
目的 探明3种因素对金线莲Anoectochilus roxburghii丛生芽生物量和有效物质积累的影响以及在反应器内通过大量培养丛生芽生产有效物质的可行性,为金线莲产品开发提供一种新的材料来源.方法以 金线莲丛生芽为材料,研究外植体长度、BA质量浓度和光条件对金线莲丛生芽的影响,观察利用气升式生物反应器培养金线莲从生芽对生物量和有效物质积累的影响.结果 外植体大小为5mm时丛生芽增殖效果显著好于1 mm.BA质量浓度为2.5 mg/L时生物量高,但丛生芽中多糖、黄酮和总酚等有效物质的生产量在BA质量浓度为2.0 mg/L时出现高值.明培养比睛培养更适于生物量和有效物质的积累.反应器培养的丛生芽生物量,多糖,黄酮和酚类物质的生产量(678.3、12.2、17.8 mg/L)明显高于固体培养.结论 外植体长度为5mm、BA质量浓度为2.0 mg/L、在明培养条件下,利于从生芽的生长,可生产较多的多糖、黄酮和酚类物质.在短时间内通过气升式生物反应器可得到大量丛生芽,反应器培养比固体培养能获得更多的生物和有效物质.
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金线莲HPLC指纹图谱研究
目的 研究金线莲Anoectochilus candidus的HPLC指纹图谱.方法 以Agilent TC-C18 (250 mm×4.6 mm,5μrn)为色谱柱,甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长为260 nm,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃.结果 在色谱指纹图谱中,确定了22个共有峰,建立了金线莲的共有模式,并利用高分辨LC-MS/MS方法对22个共有峰中的7个色谱峰进行了定性鉴别.采用该方法测定10批不同产地的金线莲药材,其相似度均在0.9以上.同时也对该指纹图谱检测方法进行了验证.结论 该方法结果准确、重复性好,为全面评价金线莲药材的质量提供了依据.
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三安胶囊质量标准的研究
三安胶囊是由海马、叶下珠、茯苓、金线莲等中药组成,具有扶正固本,清热解毒,消肿之功效.用于肠癌,肺癌等多种肿瘤疾病.为控制三安胶囊的质量[1～6],进行如下研究.
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金线莲RNA提取方法的改进
目的有效提取金线莲RNA,为研究内生真菌促进其生长机制奠定基础.方法CTAB法制备RNA,1%琼脂糖凝胶电泳,凝胶成像仪照相.结果提取的RNAA 260/A230为2.054,A260/A280为1.818,产量达154.35μg/g.电泳条带清晰,RNA完整性好.结论用该方法能高质高量地制备富含多糖和酚类化合物的药用植物RNA.
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珍稀中草药金线莲的RAPD研究
为了鉴别金线莲的品种,探索同属植物之间的亲缘关系及同种植物不同产地的遗传变异,并制定正品金线莲的DNA指纹图谱,采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对兰科开唇兰属植物花叶开唇兰Anoectochilus roxburghii(Wal l.).Lindl.、台湾开唇兰A.formosanus Hay.进行了鉴定,结果选择的7个引物对3个品种共扩增出98个位点,其中3个引物为高特异性引物.结论RAPD术不仅能鉴别种间差异,而且能揭示同种不同产地植物的遗传变异.
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三种内生真菌对铁皮石斛、金线莲生长影响的研究
目的研究开唇兰小菇、石斛小菇、兰小菇等3种小菇属内生真菌对兰科濒危药用植物铁皮石斛、金线莲生长的促进作用.方法采用植物无菌原球茎及试管苗与真菌进行双重培养,观测原球茎增殖及苗的生长情况.结果接种3种内生真菌后,铁皮石斛苗的生长量高于对照3～5倍,石斛小菇、兰小菇对铁皮石斛原球茎增殖也有明显促进作用(P＜0.05);接种3种真菌的金线莲苗,侧芽及侧根数均显著高于对照.结论3种小菇属内生真菌能够促进铁皮石斛幼苗生长,促进金线莲侧芽及侧根的萌发,对铁皮石斛、金线莲的成功栽培具有实际应用价值.
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金线莲的化学成分、药理活性及临床应用研究进展
金线莲属于兰科植物,主要分布于我国的浙江、广西、江西、贵州、福建、广东、云南等地区,又被称为金石松、鸟人参、金线入骨消、金蚕、树草莲、金线虎头蕉,具备黄酮类、生物碱、甾体、多糖类、挥发油、萜类等多种化学成分,药理活性包括抗肿瘤、保肝、降血压、降血糖、抗氧化等,临床中可用于2型糖尿病、病毒性肝炎、老年高尿酸血症等疾病的治疗,通过整理相关文献和报道,对金线莲的化学成分及其药理活性类型进行综述,并对其临床应用进展进行分析,从而为进一步科学开发并有效运用金线莲提供参考,也对其开发和应用进行深入研究提供方向.
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金线莲对肥胖大鼠血清IL-2、CRP、SOD的影响及意义
目的 观察金线莲(Anoectochilus Formosanus,AF)对肥胖大鼠血清白介素-2(IL-2)、C反应蛋白(CRP)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响,并分析其意义.方法 高脂饲料喂养建立Wistar大鼠肥胖动物模型.造模成功后将肥胖大鼠随机分为实验组和对照组,每组15只.实验组给予AF水煎剂、对照组给予等量生理盐水分别进行灌胃,每日2次,共4周.给药过程中每周测量两组动物体重.实验结束后处死大鼠,比较两组动物重量;检测两组大鼠血清IL-2、CRP、SOD水平.结果 实验组大鼠重量低于对照组,差异有统计学意义(=4.44,P＜0.05).实验组动物血清IL-2、CRP水平低于对照组,而血清SOD水平则明显高于对照组,差异均有统计学意义(t=-3.920、-3.461、2.280,P＜0.05).结论 AF对于控制肥胖大鼠的体重有良好作用,其中部分机理可能与AF降低大鼠血清炎症因子,同时提高SOD水平有关.
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金线莲抗癌活性成分及抗癌作用机制的研究进展
金线莲被视为名贵中药材,素有“鸟人参”“金草”“神草”“药王”等美称.近年来大量实验研究表明其还有降血糖、保肝、抗癌等作用,其抗癌主要活性成分为多糖类、有机酸类、甾醇类、挥发油类等,其抗癌作用机制主要有干扰细胞周期、多途径促进肝癌细胞凋亡、免疫调节、细胞毒作用.本文主要总结了近几年金线莲抗癌活性成分及抗癌作用机制的研究现状,以期为进一步的基础研究提供有用的线索.
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金线莲水提物抗炎镇痛作用研究
本文采用小鼠热板实验和小鼠醋酸扭体实验研究金线莲水提物镇痛作用；二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和醋酸致小鼠毛细血管通透性实验研究金线莲水提物抗炎作用。研究发现，金线莲水提物能提高小鼠痛阈值，显著减少小鼠扭体次数，减少小鼠耳廓肿胀度，明显抑制醋酸致小鼠腹腔毛细血管的增高，结果表明金线莲水提物具有一定的抗炎镇痛作用。
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开唇兰属植物的种间蛋白质组差异
目的:通过差异蛋白峰的比较和指纹图谱的对照,分析开唇兰属五种金线莲的种间蛋白质组差异,初步探索了这种差异在品种鉴定中的应用并推断出品种之间的亲疏关系.方法:采用SELDI-TOF-MS方法研究了开唇兰属五种金线莲的种间蛋白质组差异.结果:通过SELDI-TOF-MS方法对开唇兰属五种金线莲种间蛋白质组谱图进行的分析结果表明,属内种间存在蛋白质组差异和特征蛋白质峰,据此建立了属内五种植物的蛋白质组指纹图谱,并依据蛋白质组的差异推测了属内五种金线莲的亲疏关系.结论:依据SELDI-TOF-MS鉴定结果,找到了开唇兰属五个物种间的蛋白差异,并基于差异蛋白数据分析了品种遗传变异性,结果表明地域和气候会对品种的变异产生一定的影响.
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金线莲组织培养苗降血糖作用的研究
目的 研究金线莲组织培养苗提取物(TCAE)对糖尿病小鼠的降血糖作用.方法 观察TCAE对正常小鼠血糖的影响,并分别采用肾上腺素的四氧嘧啶制备高血糖小鼠模型.对肾上腺素所致高血糖小鼠和四氧嘧啶所致高血糖模型小鼠均灌予TCAE,TCAE大剂量组(4g/kg)、TCAE小剂量组(2g/kg),分别测定各组小鼠血糖.结果 TCAE大剂量组可显著降低肾上腺素高血糖小鼠血糖的含量;TCAE小剂量组即可明显降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠的血糖含量,而TCAE大剂量组及TCAE小剂量组对正常小鼠血糖均无显著影响.结论 TCAE对四氧嘧啶致糖尿病小鼠及肾上腺素高血糖小鼠具有明显的降血糖作用.
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金线莲抗肿瘤活性部位的体外筛选及对LoVo细胞凋亡的影响
目的 体外筛选出金线莲抗肿瘤作用的佳活性部位,并检测其对肿瘤细胞凋亡的影响.方法 采用MTT实验检测金线莲不同极性部位对人宫颈癌HeLa细胞、人体黑色素瘤A375细胞、人喉癌Hep-2细胞和人结肠癌LoVo细胞增殖抑制作用,从而筛选出活性佳部位及对应细胞系.HE和AO/EB染色法观察佳活性部位处理后细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡.结果 MTT实验结果显示,石油醚部位对各肿瘤细胞的生长增殖具有较强的抑制作用,其中对LoVo细胞的抑制效果明显,作用48 h后其IC50为(45.51±1.66) μg/mL.HE染色和AO/EB荧光染色结果都显示石油醚部位作用于LoVo细胞后,出现了典型的凋亡形态学特征.流式细胞术检测经不同浓度石油醚部位作用后,LoVo细胞凋亡率和坏死率随浓度的增大逐渐上升.结论 金线莲石油醚部对肿瘤细胞具有较强的抑制作用,其作用方式可能是通过诱导细胞凋亡来实现的.
