043 鼎湖山胡椒中的倍半萜类和生物碱类成分及其对HIV-1整合酶的抑制活性

正交试验优选盐泽泻的炮制生产工艺

目的:优化盐泽泻的炮制工艺,明确其工艺参数,为盐泽泻的规范化生产和质量控制提供实验依据.方法:以环氧泽泻烯,23-乙酰泽泻醇C,泽泻烯醇,泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇B成分总量、醇溶性浸出物质量分数和外观性状评分的综合评分为指标,采用单因素试验和正交试验考察闷润温度、闷润时间、切片厚度和干燥温度及盐炙工艺中的盐浓度、盐水闷润时间、溶液用量、炒制温度和炒制时间对盐泽泻炮制工艺的影响.采用UPLC测定5个指标成分的含量,流动相乙腈-水梯度洗脱,检测波长208 nm.结果:盐泽泻佳炮制工艺为泽泻药材75 ℃闷润1.0h后趁热切4 mm厚片,65℃干燥得到泽泻饮片,每100 kg泽泻饮片加盐水13 kg(溶解了2.0 kg盐),闷润3h,在160℃下炒制8 min.结论:优化的盐泽泻中试生产工艺具有较好的可行性和可控性,适用于盐泽泻的工业化生产.

夜香牛全草的生物活性化学成分研究(Ⅱ)

目的:研究广西产夜香牛生物活性化学成分.方法:用鼠性肾上腺髓质嗜铬细胞瘤PC-12细胞活性跟踪筛选,柱色谱方法分离化合物,谱学方法鉴定化合物结构.结果:分离得到12个化合物,根据谱学数据分析鉴定其结构分别为(一)clovane-2,9-diol(1),caryolane-1,9β-diol(2),洋芹素(3),金圣草素(4),木犀草素(5),金圣草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6),木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(7),槲皮素(8),洋芹素-4'-O-β-D-葡萄糖苷(9),金丝桃苷(10),β-amyrin aceate(11),lupeol acetate(12).结论:化合物1,2,6和10均为首次自该属植物中分离得到.

蚕沙化学成分研究

目的:研究蚕沙中的化学成分.方法:应用色谱技术分离纯化,通过理化性质和波谱学方法鉴定化合物的结构.结果:从95%乙醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为:3S,5R-dihydroxy-6R,7-megstigmadien-9-one(1),3S,5R-dihydroxy-6S,7-megstigmadien-9-one(2),(6R,9R)-3-oxo-α-ionol β-D-glucopyranoside(3),(6R,9S)-3-oxo-αionol-β-D-glucopyranoside(4),blumenol C glucoside(5),byzantionoside B(6),alangionoside L(7),叶黄索(8),哌可啉酸(9),甜菜碱(10),丙氨酸(11),谷氨酸(12),苯丙氨酸(13),亮氨酸(14),异亮氨酸(is).结论:化合物1～15均为首次从蚕沙中分离得到.

国产沉香中的倍半萜类和单萜类化学成分

目的:研究国产沉香的化学成分.方法:通过多种色谱手段,对国产沉香的石油醚及乙醇提取物进行化学成分分离,采用现代波谱技术对化合物的结构进行鉴定.结果:从国产沉香中分离得到9个化合物,分别鉴定为3,3,7-trimethyltri-cycloundecan-8-one(1),longifolene(2),norlongilactone(3),caryophyllenol-Ⅱ(4),humulene diepoxide A(5),kobusone(6),(一)-bornyl ferulate (7),(24R)-24-ethylecholesta-4,22-dien-3-one (8),(24R)-24-3-ono-4-en-sitosterone (9).结论:化合物2～9均为首次从国产沉香中分离得到的化合物.化合物1～6为倍半萜类化合物,化合物7为单萜衍生物,化合物8,9为甾类衍生物.

宽叶金粟兰中具抗乳腺癌转移活性的倍半萜类化学成分研究

利用多种色谱分离方法和波谱学鉴定方法对宽叶金粟兰乙酸乙酯部位的化学成分进行了分离鉴定,并借助药理学方法对其中得到的部分化合物进行了抗乳腺癌转移活性的初步筛选.总共从宽叶金粟兰乙酸乙酯部位中分离得到15个倍半萜及其二聚体类化合物,分别鉴定为zedoarofuran(1),chlorajapolide D(2),4β,8β-dihydroxy-5α (H)-eudesm-7(11)-en-8,12-olide(3),curcolonol(4),lasianthuslactone A(5),chlomultin C(6),(1E,4Z)-8-hydroxy-6-oxogermacra-1 (10),4,7(11)-trieno-12,8-lactone (7),shizukanolide E(8),shizukanolide F (9),9α-hydroxycurcolonol(10),shizukaol B(11),shizukaol C(12),cycloshizukaol A(13),sarcandrolide B(14),henriol A(15).其中化合物2,8～10为首次从该属植物中分离得到,化合物2,5,8～10,12,14为首次从该植物中分得.并对所分得量较大的5个化合物进行了抗乳腺癌转移活性筛选,其中化合物4,11,12表现出较强的活性.

HPLC-ELSD测定鞘蕊苏中异佛斯可林的含量

鞘蕊苏药材来源于唇形科植物毛喉鞘蕊花Co-leus forskohlii Briq.的干燥全草,具有降压、止咳、平喘之功效[1].鞘蕊苏含有倍半萜类、二萜类、三萜类、黄酮类和甾体类等多种成分.异佛斯可林(二萜类)为其主要活性成分之一,具有降压、抑制血小板聚集和抗肿瘤等作用[2-4].文献采用高效液相色谱法测定异佛斯可林的含量[5].由于异佛斯可林具有较弱的末端吸收,采用紫外检测时,基线不平稳,杂质峰干扰严重,且出峰时间长.本研究采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定鞘蕊苏中异佛斯可林的含量.该方法准确可靠,测定时间短,峰形尖锐,重现性好.

主产地泽泻的对比研究

泽泻为泽泻科植物泽泻Alisma orientalis(Sam.)Juzep.的干燥块茎,具有利水渗湿、泄热通淋之功效[1].泽泻化学成分以萜类为主,主要含有原萜烷型三萜和愈创木烷型倍半萜类,另外还有脂肪酸、挥发油、少量生物碱、树脂、蛋白质以及大量淀粉(23%左右)等[2-4].

血管生成抑制剂TNP-470与细胞毒药物Gemcitabine的抗胰腺癌生长和转移作用的比较研究

目的探讨血管生成抑制剂(TNP-470)和细胞毒药物(Gemcitabine)对胰腺癌裸鼠原位移植模型(SOI)生长、转移的抑制作用及其作用机制.方法把胰腺癌细胞株SW1990皮下种植生长的癌组织移植于裸鼠胰腺尾部,制备胰腺癌SOI模型;24只SOI模型随机分为TNP组(TNP-470 30 mg/kg,皮下注射,隔日一次,疗程8周)、GEM组(Gemcitabine 100 mg/kg,腹腔内注射,术后第0、3、6、9天给药)和对照组,术后第10周处死裸鼠.结果Gemcitabine侧重于抗胰腺癌生长,TNP-470则侧重抑制胰腺癌转移,两者均无显著的预后改善作用;TNP组的微血管密度(MVD)显著低于GEM组和对照组,GEM组的肿瘤增殖指数(PI)显著低于TNP组和对照组(均P＜0.05).结论血管生成抑制剂和细胞毒药物在抗肿瘤生长和转移的侧重点和作用机制方面均存在显著差异.

血管形成抑制剂TNP-470对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的观察血管形成抑制剂TNP-470(简称TNP)对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响.方法对30只裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型,共分为5组:对照组(皮内及腹腔注射无菌生理盐水)、溶剂组(皮内注射1%乙醇及5%阿拉伯糖混合液)、TNP组(皮内注射TNP)、环磷酰胺(CTX)组(腹腔注射CTX)、TNP+CTX组(皮内注射TNP,同时腹腔注射CTX).观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况、裸鼠体重的变化,计算抑瘤率,并进行病理学检查.结果溶剂组抑瘤率为7.9%,对照组为0%,两组比较,差异无显著性(P>0.05);TNP组抑瘤率为26.1%,CTX组为33.9%,两组比较,差异无显著性(P>0.05);TNP+CTX组抑瘤率高达70.5%,有极明显的抑瘤效应,与对照组比较,差异有极显著性(P<0.005).TNP+CTX组移植瘤镜下可见肿瘤细胞核浆比例明显小于对照组,核异形性明显少于对照组.结论 TNP对卵巢癌有一定的治疗作用;TNP与化学药物联合应用,抑瘤作用增强.

含笑内酯对卵巢上皮性癌细胞的作用及其机制

目的：探讨含笑内酯对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞的作用及其可能的机制。方法（1）不同浓度（分别为0.25、0.5、1、2.5、5、10、20、50μmol/L）含笑内酯作用卵巢癌细胞系HeyA8、SKOV3细胞及卵巢癌顺铂耐药细胞系A2780/DDP细胞72 h后，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测3种卵巢癌细胞的生长情况，选择抑制作用为显著的卵巢癌细胞（即HeyA8细胞）用于后续实验。（2）不同浓度（分别为5、10、20μmol/L）含笑内酯作用24 h后，流式细胞仪检测HeyA8细胞的凋亡情况，实时荧光定量PCR技术检测HeyA8细胞中RelA mRNA的表达，蛋白印迹（western blot）法检测HeyA8细胞中核因子κB（NF-κB）信号通路相关蛋白RelA和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9（caspase-9）的表达。结果（1）不同浓度含笑内酯作用72 h后，HeyA8、SKOV3及A2780/DDP细胞的生长均受到明显抑制，且均呈显著的浓度依赖性（P<0.05）；其50％抑制浓度（IC50）分别为（9.8±2.2）、（12.0±2.1）、（12.8±1.8）μmol/L。选用抑制效果佳的HeyA8细胞进行后续实验。（2）不同浓度含笑内酯作用24 h后，随着含笑内酯浓度的增高，HeyA8细胞的细胞凋亡比例增高，细胞存活比例下降，细胞中RelA mRNA的表达水平下降，当含笑内酯浓度为20μmol/L时，上述指标分别与其对照（仅加入溶剂者）比较，差异均有统计学意义（P<0.01）；HeyA8细胞中RelA蛋白的表达强度逐渐减弱，而活化caspase-9蛋白的表达强度逐渐增强。结论含笑内酯对卵巢癌HeyA8、SKOV3及A2780/DDP细胞均有显著的抑制作用，且对HeyA8细胞的抑制作用明显；其作用机制可能是通过抑制NF-кB信号通路、诱导活化caspase-9蛋白的表达来促进卵巢癌HeyA8细胞的凋亡。

石杉碱甲改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤和智能缺陷的实验研究

目的探讨胆碱酯酶抑制剂--石杉碱甲对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage, HIBD)智能缺陷的改善和保护作用.方法将HIBD模型鼠随机分为安慰剂组(n=11)、小剂量石杉碱甲组(0.05 mg/kg, n=12)、大剂量石杉碱甲组(0.1 mg/kg,n=12)和对照组(n=10,为假手术组动物).以Morris水迷宫成绩判断大鼠学习、记忆功能变化;以结扎侧纹状体、皮层、海马损失面积和海马CA1区锥体细胞密度变化及乙酰胆碱酯酶组化染色判定脑组织损伤程度.结果 HIBD后5周安慰剂组大鼠的学习、记忆功能受损严重,水迷宫实验潜伏期(找到平台时间)较对照组延长(44 s与30 s, P＜0.05),平台撤除象限搜索时间缩短(14 s与40 s,P＜0.01),脑组织损失面积重;而与安慰剂组相比大剂量石杉碱甲治疗明显减轻大鼠的学习、记忆功能障碍(潜伏期:34 s与44 s, P＜0.05;搜索时间:35 s与14 s,P＜0.01), 脑组织损失面积较轻,小剂量石杉碱甲治疗组大鼠学习、记忆功能改善不明显(潜伏期:45 s 与 44 s, P＞0.05; 空间搜索时间:17 s与14 s,P＞0.05),脑组织损失面积也较重;大鼠学习、记忆功能缺陷与海马CA1区锥体细胞密度呈显著相关(r=0.777, P＜0.01).结论胆碱酯酶抑制剂--石杉碱甲可减轻HIBD程度,并可改善新生鼠缺氧缺血后智能缺陷.

榄香烯抑制人晶状体上皮细胞增殖的蛋白质组研究

目的 探讨中药单体榄香烯对碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导的人晶状体上皮细胞(HLE-B3)增殖的抑制作用及其蛋白质组学规律.方法 实验研究.共分为3组:正常组、rhbFGF组及榄香烯组.正常组为培养的HLE-B3,rhbFGF组加入终浓度为10 μg/L rhbFGF,榄香烯组加入终浓度为10μg/L rhbFGF和80 mg/L榄香烯.24 h后四甲基偶氮唑蓝法检测榄香烯对HLE-B3增殖的抑制作用;蛋白质芯片联合表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术检测分析榄香烯作用于HLE-B3后蛋白质表达谱的改变、寻求差异蛋白.采用单因素方差分析,并通过Dunnett-t检验进行正常组、rhbFGF组、榄香烯组吸光度值的两两比较;对每个质荷比峰值做Kruskal-Wallis秩和检验,采用Nemenyi检验对正常组、rhbFGF组、榄香烯组中每个特定质荷比的蛋白质峰值进行两两比较.结果 (1)四甲基偶氮唑蓝法检测显示:rhbFGF组HLE-B3吸光度A值(0.599±0.053)比正常组(0.409±0.042)显著升高,榄香烯组HLE-B3吸光度A值(0.450±0.061)比rhbFGF组显著降低,抑制率达24.90%,差异有统计学意义(F=28.886,P=0.000).(2)用rhbFGF诱导HLE-B3增殖后,出现了5个差异表达的蛋白点,其中质荷比为8093和9516的2个蛋白点表达上调,质荷比为5361、9666及13 767的3个蛋白点表达下调;榄香烯作用于增殖的HLE-B3后,出现10个差异表达的蛋白点,其中质荷比为2487、4392、8566及11 600的4个蛋白点表达上调,质荷比为3679、4826、6861、9516、9557和9672的6个蛋白点表达下调.结论 榄香烯能有效抑制rhbFGF诱导的HLE-B3增殖,质荷比为9516的蛋白点可能是榄香烯抑制rhbFGF诱导的HLE-B3增殖的作用靶点.

旋覆花属植物化学成分及生物活性的研究进展

近几年来,从旋覆花属植物中相继又发现许多新化合物,有倍半萜及其内酯、二萜、三萜类及黄酮苷等,并对其中某些成分的生物活性进行了研究,如抗肿瘤、降血糖、抗菌、抗炎和保肝作用等.本文对此进行详细归纳和综述.

芜菁还阳参中倍半萜类成分的分离和鉴定

目的对芜菁还阳参(Crepis napifera (Franch) Babc.)根的化学成分进行研究.方法采用溶剂分配及各种色谱方法进行分离纯化.得到2个化合物,用1HNMR,13CNMR,DEPT,1H-1H COSY,HMQC,HMBC,ROESY,MS和UV光谱技术进行鉴定.结果得到2个萜类化合物,分别是Δ4,9-二烯-重排桉烷-13,15-二羧酸-15-β-D-葡糖苷,命名为还阳参酸苷(napiferoside, I)和蒲公英醋酸酯(acetate taraxasterol, II).结论化合物I为一新的重排桉烷型倍半萜苷类化合物.

橐吾中倍半萜对二氢吡啶类受体的作用研究

目的：观察8个倍半萜类化合物对二氢吡啶类受体结合的作用和对离体血管张力的影响。方法：用［3 H］-尼群地平对猪心室肌微粒体膜受体结合方法和家兔离体血管条实验对化合物的体外作用进行研究。结果：化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对尼群地平与受体结合有明显抑制作用，其IC50分别为2.0×10-5 mol*L-1，2.7×10-5 mol*L-1和3.9×10-5 mol*L-1，其余化合物作用较弱。这些化合物抑制受体结合的作用强度与结构中母核与取代基的改变有关，而取代基的变化对活性的影响更重要。化合物Ⅱ、Ⅲ对高K+引起的兔胸主动脉收缩有剂量依赖性的抑制作用。结论：这类化合物有钙拮抗作用，作用机制可能与影响二氢吡啶类受体有关；它们作用有量效关系和构效关系，提示有以此为先导进行深入结构改造和构效关系研究的价值。

石斛属植物生物碱研究进展

石斛属(Dendrobium Sw.)为兰科大属之一,共有1500多种[1],广泛分布于亚洲、欧洲及大洋洲等热带及亚热带地区.我国约有80多种,主要分布于西南、华东及华南地区.在我国传统医学中,石斛为常用贵重药材,它具有滋阴清热、益胃生津,润肺止咳等功效,常用于热病伤津、口干烦渴、病后虚热等多种病症[2].现代药理研究证明石斛具有抗衰老、抗肿瘤、降低血糖等作用,在治疗胃肠道疾病、白内障、关节炎、血栓闭塞性脉管炎及慢性咽炎等疾病有很好的疗效[3～5] .几十年来,中外学者对石斛属植物的化学成分和药理作用进行了大量的研究,发现石斛属植物中化学成分多种多样,其主要有效成分为生物碱及石斛类多糖,另外还有酚类、菲类、芪类、笏酮类、倍半萜类、甾体类及香豆素等.本文仅就国内外对石斛类植物生物碱的研究进展作一项较全面的介绍.

倍半萜类化合物生物活性研究进展

倍半萜广泛存在于植物、海洋生物及某些昆虫、菌类中.虽然骨架仅有15个碳原子,但由于生物体内微妙的代谢过程而生成形形色色的基本骨架的化合物,并有复杂的立体结构,具有抗肿瘤、抗炎、抗菌消炎、抗神经毒性、抗虫活性和昆虫拒食作用,还有免疫抑制活性、抗病毒、保肝、强心活性、抑制组胺和乙酰胆碱、降血脂和调节植物生长作用.作者以国内外文献为依据,从植物来源、生物活性方面综述倍半萜类化合物及衍生物的研究进展.

狭瓣鹰爪花的倍半萜类成分研究

狭瓣鹰爪花Artabotrys hainanensis R.E.Fries为番荔枝科鹰爪花属植物,是海南特有植物.在民间,海南狭瓣鹰爪花作药用植物已有很长历史,具有清热解毒、消炎止痛的作用,常用作治疗疟疾和头颈部淋巴结核.梁晓天等[1,2]从鹰爪花A.uncinatus根中分离得到倍半萜类化合物鹰爪甲素和鹰爪乙素对鼠疟原虫有强抑制作用,Zhang等[3]也从同种植物的根中分离得到鹰爪丙素和丁素.

黔产金钗石斛中1个新的杜松烷型倍半萜

目的 研究贵州道地药材金钗石斛Dendrobium nobile的化学成分.方法 采用硅胶、MCI柱色谱及制备液相色谱等方法进行分离纯化,经质谱和核磁共振等波谱技术进行结构鉴定.结果 从贵州道地药材金钗石斛茎的乙醇提取物中分离得到1个新的倍半萜类化合物,鉴定为δ-杜松萜烯-12,14-二醇(1).结论 化合物1为新化合物.