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川党参药材质量标准研究
目的：对川党参主要产地的药材样品进行分析研究，建立川党参药材质量标准。方法：HPLC法测定党参炔苷含量，比色法测定党参多糖、川党参总皂苷，原子吸收光谱法测定川党参药材中As、Pb、Hg、Cd、Cu含量，气相色谱法测定BHC、DDT，其余检查项目参照《中国药典》收录方法测定。结果：川党参药材检查项水分、总灰分、酸不溶灰性分、醇溶性浸出物含量范围与均值分别是6.0%~9.4%、7.82%，2.01%~7.72%、4.62%，0.23%~3.65%、1.52%，51.74%~70.02%、61.03%；党参炔苷、党参多糖和党参总皂苷的含量范围与均值分别是0.44~2.4 mg·g-1、1.121 mg·g-1，13.85%~38.14%、21.67%，7.92~28.76 mg·g-1、11.27 mg·g-1。结论：川党参药材的水分不得高于8.7%，总灰分不得过6.5%，酸不溶性灰分不得过2.5%，醇溶性浸出物（热浸法）不得少于55.0%，党参炔苷不少于0.53 mg·g-1，党参多糖不得少于14.7%，党参总皂苷不得少于7.3 mg·g-1；重金属和有害元素不得超过“药用植物及制剂外经贸绿色行业标准（WM/T2-2004）”， BHC和DDT均不得检出。
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施肥对川党参产量和质量的影响研究
目的:研究施肥对川党参产量和质量的影响.方法:采用单因素和正交试验进行田间试验,田间统计产量,HPLC测定党参炔苷含量、UV测定党参多糖含量.结果:在单因素试验中,有机肥以5900kg～7900kg/667m2、尿素28.5kg/667m2、磷肥36kg/～47.5kg/667m2、钾肥21kg～28.5kg/667m2,川党参药材产量高;正交试验以处理组合,氮肥24kg/667m2、磷肥40kg/667m2、钾肥16kg/667m2、栽培密度55560株/667m2产量高,方差分析表明,氮肥、磷肥、钾肥、氮磷互作、氮钾互作及磷钾互作对川党参产量均有显著影响;党参炔苷、党参多糖在施肥水平处理中差异不显著,磷肥能显著提高党参炔苷含量.结论:不同种类肥料之间存在相互作用,合理的配合施肥能提高川党参的产量和质量.
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不同农艺措施对川党参产量的影响
目的:量化和优化川党参高产的农艺措施.方法:通过川党参大田栽培,设置不同的农艺措施,测定其产量.结果:育苗移栽,冬季移栽,密度20cm×6cm,搭架、打叶、摘花的植株调整方式,FM6施肥方式下川党参的产量高.结论:农艺措施对川党参产量影响较大,可进一步量化和优化川党参高产的农艺措施.
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川党参药材质量化学成分多指标综合评价研究
目的:探讨建立川党参药材质量的化学成分多指标评价方法.方法:权重分配按客观赋权法计算.TOPSIS评价川党参多指标的质量.结果:四种赋权方法的评价结果基本一致.结论:多指标综合评价与主成分聚类分析、遗传多样性分析和HPLC指纹图谱分析结果一致,并具有可量化的优点,可用于药材质量多指标评价.
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正交试验优化川党参总核苷的提取工艺
目的:优选川党参中核苷类成分的提取工艺条件,为该有效部位的开发提供基础资料.方法:采用超声波提取川党参中核苷类成分,以胞苷、尿苷、鸟苷、腺苷的总提取量为评价指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察不同因素对川党参中核苷类成分提取量的影响.运用HPLC测定胞苷、尿苷、鸟苷、腺苷的含量,流动相甲醇(A)-水(B)梯度洗脱(0～ 10min,1％ ～5％A;10 ～15 min,5％ ～15％A;15 ～22 min,15％ ～ 17％A;22 ～26 min,17％ ～20％A;26 ～32 min,20％ ～24％A),检测波长260 nm.结果:各因素对核苷类成分提取量的影响顺序为甲醇体积分数＞提取次数＞料液比＞提取时间,佳提取工艺为加10倍量水提取2次,每次30 min,川党参中4种核苷类成分总提取量1.523 mg·g-1.结论:建立的HPLC检测川党参中核苷类成分的含量方法准确可靠.优选的提取工艺稳定可行,具有节约成本、快速、高效等优点.
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HPLC测定不同产地川党参中党参炔苷的含量
目的:分析不同产地的川党参中党参炔苷的含量,为川党参的质量标准建市提供参考.方法:采用高效液相色谱分析,supelco Discovery C18色谱柱(4.6 mmm×250 mm,5μm);乙腈-0.5%醋酸水(20∶80)为流动相,检测波长268 nm.结果:24批不同种与不同产地的党参中党参炔苷含量介于0.040 3～0.9667 mg·g-1.结论:该方法操作简便,结果稳定可靠,可用于川党参的质量评价.
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川党参元素含量特征及影响因素分析
目的:研究川党参元素含量特征和影响元素含量的因素.方法:元素含量测定和统计分析相结合.结果:川党参植物元素含量的RSD低于其土壤中相应元素含量的RSD,不同产地川党参植物元素含量的RSD均小于50%.元素在川党参植物体内分布存在差异.结论:川党参对营养元素的吸收与土壤养分含量、状态以及气候条件等因素有关,对元素的吸收存在元素间的协同或拮抗作用.
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川党参种子发芽检验规程的研究
目的:探讨温度、光照、发芽床等因素对川党参种子发芽的影响.方法:常规发芽试验方法进行试验.结果与结论:川党参种子发芽适温度为25℃,需光照,发芽床选纸上或纸间均可,发芽初次计数时间为置床后第10天,末次计数时间为置床后第18天.以赤霉素处理可显著提高川党参种子的发芽率.
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利用SRAP和ISSR标记分析川党参的遗传多样性
目的:川党参Codonopsis tangshen的遗传多样性研究.方法:对18个不同来源地的川党参种质进行SRAP(sequence-related amplified polymorphism),ISSR (inter simple sequence repeat)分析.利用TREECONW软件分析遗传相似系数,UPGMA方法构建亲缘关系系统图.结果:29条SRAP引物组合共得到329条扩增条带,其中有266条呈现多态性,占80.85%,平均遗传相似系数为0.712 1.21条ISSR引物共得到223条扩增条带,其中有166条呈现多态性,占74.44%,平均遗传相似系数为0.778 1.2种标记均表明川党参具有较高的遗传多样性.聚类结果显示川党参种质亲缘关系与地理分布相关性不显著.2种标记系统得到了相似但并不完全相同的聚类图,2种标记方法间存在显著相关性(r=0.802,P＜0.01).结论:川党参种质的遗传多样性水平较高.SRAP与ISSR标记均适用于川党参种质的遗传多样性分析.
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不同产地川党参药材的HPLC指纹图谱
目的:建立川党参的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价和有效控制其质量提供可靠的方法.方法:用HPLC-DAD方法测定了29产地川党参药材样品,采用药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A进行评价,建立了共有模式,以相关度评价图谱的相似性,以共有峰与对照峰的比值对各产地川党参药材进行聚类分析.结果:29产地川党参药材的色谱指纹图谱有7个共有峰,高效液相色谱指纹图谱的相似度都在0.8以上,23产地川党参药材可通过系统聚类归为一类,不同产地川党参质量相似性较好.结论:本方法可用于川党参药材质量评价.
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川党参的高效液相色谱指纹图谱研究
目的 利用HPLC-DAD方法,研究川党参药材的HPLC色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法.方法 色谱条件 Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);乙腈-0.5%醋酸水溶液为流动相进行二元梯度洗脱;柱温30℃;检测波长268 nm;流速1 mL·min-1.以党参炔苷为参照物分析了19批不同产地的川党参,采用药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A进行评价,建立了共有模式,并以相关系数评价指纹的相似性.结果 19批川党参样品HPLC指纹图谱的相似度都在80%以上,精密度、稳定性、重复性实验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均＜3%,可以明显区别川党参跟药典收载其他品种.结论 本方法操作简便,结果稳定可靠,该法可以作为川党参药材的鉴别和质量控制.
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响应面法优化川党参多糖的提取工艺研究
[目的]采用响应面法(RSM)优化川党参中多糖的提取工艺.[方法]在单因素实验基础上,以提取温度、提取次数、提取时间3个因素为自变量,多糖提取率为响应值,采用三因素三水平的响应面分析各因素对响应值的影响.[结果]多糖的佳工艺条件为提取温度80 ℃,提取次数5次,提取时间5h,多糖实际提取率可达22.31％.[结论]应用响应面法优选出的提取工艺稳定、合理、可行.
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UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用快速分析川党参的化学成分
目的 采用UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪在正、负离子模式下分离鉴定川党参Codonopsis tangshen药材的化学成分.方法 Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)分离,以乙腈(A)-0.1％甲酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,质谱采用正、负离子监测模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描功能,对川党参药材的化学成分进行快速分离和鉴定.结果 根据高分辨质谱数据从川党参50％甲醇提取物中共鉴定出36个化合物,包括生物碱类7个、苯丙素类7个、多炔类3个、己醇苷与己烯醇苷6个、有机酸类8个、氨基酸类3个、核苷类1个、倍半萜类1个;其中9个成分经与对照品比对而准确鉴定,19个成分在该植物中首次发现,1个成分为潜在的新化合物.结论 该方法可快速分离鉴定川党参的化学成分,为其质量控制和药效物质基础研究提供理论依据.
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川党参的基因组DNA提取与ISSR引物筛选
目的 筛选适党参基因组DNA的提取方法及ISSR (inter-simple sequence repeat)引物,为研究党参种植资源遗传多样性及DNA鉴定奠定基础.方法 以党参嫩叶作为材料,采用常规SDS法、改良CTAB法和试剂盒法3种提取方法基因组DNA,用优化的ISSR-PCR反应对100条引物进行筛选.结果 以党参嫩叶为材料提取基因组DNA,改良CTAB法效果佳.从公布的100条ISSR引物中筛选出10条引物,能扩增条带清晰、稳定性好、多态性高的DNA条带.结论 以党参嫩叶为材料提取基因组DNA进行ISSR分子标志研究遗传多样性时应采用改良CTAB法,筛选出合适的引物在ISSR分子标志中很重要.
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川党参锈病防治技术
川党参为桔梗科植物Codonopsis tangshen Oliv 的根,以根供药用,具有补中益气、健脾益肺之功效;治脾肺虚弱、气短心悸、虚喘咳嗽、内热消渴等症.川党参除配方用药外,是很好的成药原料和食用保健材料,近年来食用和保健用量比药用量还大.
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川党参GAP生产操作规程(SOP)(试行)
1 规程编写依据及适用范围本生产标准操作规程按国家药品监督管理局颁布的《中药材生产质量管理规范》(试行,简称GAP),结合产地科学研究及巫山川党参产区综合示范,制定了重庆市巫山县川党参规范化生产的规范技术要求.本规程适用于巫山县及周边区县川党参药材生产.
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川党参中的1个木脂素类成分
目的:对川党参Codonopsis tangshen的化学成分进行研究.方法:采用现代色谱方法进行分离、纯化,通过现代波谱技术对化合物进行结构鉴定.结果:从川党参中分离得到1个木脂素化合物,其结构鉴定分别为去氢双松柏醇[1].结论:该化合物为首次从党参属植物中分离得到.
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川党参品质形成及影响因素研究
目的 研究川党参品质变化规律和影响品质变化的因素.方法田间移栽、定期取样及室内处理分析相结合.结果 川党参根的生物量积累主要集中在4月下旬至7月上旬,6月20日后基本趋于稳定;地上部生长与地下部相关显著;水分和温度及其相互作用对川党参化学成分有显著影响.结论 川党参的品质易受环境因素的影响.
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鄂西北野生党参的质量鉴定
目的:确定鄂西北野生党参基源及其品质.方法:定期观察鄂西北野生党参的植物形态,并与中国植物志比对确定其基源;建立高效液相色谱(HPLC)法测定党参炔苷的含量.色谱柱为Dionex Acclaim C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)),流动相乙腈:水(20:80),流速为1.0 mL·min-1,检测波长:267 nm;柱温35℃.结果:鄂西北野生党参属于川党参,党参炔苷平均含量高达1.5696 mg·g-1.结论:鄂西北野生川党参中党参炔苷含量高,质量好,可进一步野生驯化推广种植.
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不同产地川党参药材品质差异初步分析
目的:比较重庆云阳江口镇、奉节兴隆镇、巫溪巫龙乡、巫山庙宇镇以及湖北利川市几个主产川党参地区的川党参中总皂苷、炔苷、总多糖、重金属、水溶物以及醇溶物的含量差异,并将结果与其他地区进行比较.方法:用比色法对总皂苷以及总多糖进行测定;用RP-HPLC法对川党参中炔苷进行测定;原子吸收分光光度法测定川党参中Cu、As、Cd、Pb、Hg五种重金属的含量;川党参中的水溶物以及醇溶物的测定方法均参造《中国药典》收录的方法测定.结果:重庆云阳江口镇、奉节、巫山、巫溪以及湖北利川产地川党参的总皂苷含量范围及均值依次为9.340～13.375mg·g1、11.040mg·g1,37.640～39.260mg·g-1、38.60mg· g-l,19.970～20.850mg·g-1、20.280mg· g-l,26.070～48.380mg· g-1、34.950mg·g-1,34.510～36.020mg·g-1、35.300mg·g-1;总多糖含量范围及均值依次为20.241～21.94％、21.093％,19.42～20.768％、占21.34％,21.027～21.644％、21.336％,19.537～23.118％、21.328％,17.308～18.765％、18.36％,炔苷含量范围及均值依次为8.750～9.571mg·g-1、9.160mg·g-1,0.361～0.378mg·g-1、0.369mg· g-1,0.508～0.518mg· g-1、0.513mg·g-1,3.043～3.086mg· g-l、3.065mg·g-1,0.525～0.556mg·g-1、0.540mg·g-1.结论:五个主要产地川党参的总皂苷含量均不低于7.3mg· g-1,总多糖含量都高于14.7％,其中奉节、巫山、巫溪三个产地川党参炔苷含量低于0.53mg·g-1,云阳江口镇及巫溪川党参醇溶物低于55％,重金属含量部分不超过WM/T2-2004中的范围(药用植物及制剂外经贸绿色行业标准).
