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苦豆子减压提取工艺研究
目的：优选苦豆子中生物碱减压动态提取工艺。方法：以苦豆子总碱、氧化苦参碱的含量作为评价指标，采用正交优化试验，考察加水量、提取时间、提取次数3个因素的影响，结合综合评分的方法优选苦豆子生物碱减压提取工艺，并与较为常用的常压回流法、煎煮法提取效果相比较。结果：佳提取工艺为加12倍量水，在温度为60℃条件下动态沸腾减压提取3次，每次1 h。结论：优化的苦豆子生物碱减压提取工艺中总碱及氧化苦参碱的含量均优于常压回流法和煎煮法，且工艺稳定、可行。
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RP-HPLC同时测定莲心总碱中的3种生物碱含量
目的:建立同时测定莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱含量的反相高效液相色谱法.方法:以Hypsil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)为固定相,甲醇-磷酸盐缓冲液(73∶27,pH 9.0)为流动相,检测波长为286 nm及230 nm,流速1 mL·min-1.结果:3种生物碱分离良好,在20～700 μg·mL-1线性关系良好,日内、日间RSD在0.24%～4.83%,3种生物碱的加样回收率分别为97.9%,98.4%,98.1%.利用该方法测定了不同批次不同方法提取的莲心总碱中3种生物碱含量,结果显示莲心总碱的甲醇提取方法优于乙醇提取方法.结论:本法简单、快捷、适合于测定莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱的含量.
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雷公藤综合利用的探讨
雷公藤(Tripterygium Wilfordii Hook.F)系卫矛科雷公藤属植物,临床用于治疗类风湿性关节炎等疾病,疗效肯定.以雷公藤的乙酸乙酯提取物制成的雷公藤片已投产.工艺为:雷公藤乙醇提取醇浸膏加水水层乙酸乙酯提取乙酸乙酯浸膏加辅料压片此外,以雷公藤根皮为原料、提取分离得到的雷公藤内酯醇(triptolide)配成0.002%的软膏(雷酯醇软膏),外用可治疗银屑病,也已投入生产.工艺为:雷公藤根皮乙醇提取醇浸膏加水水层氯仿提取氯仿浸膏柱层析分离雷公藤内酯醇加基质软膏上述两种雷公藤醇浸膏加水后,产生大量的胶状沉淀(约占生药量的10%),一般都作为废渣弃去.我们对沉淀物进行分析发现其中含有较大量的生物碱类成分.药理实验表明,雷公藤总碱有雄性抗生育活性,其作用与棉酚有很大相似之处,有希望成为一种新的男性避孕药.为充分利用资源,降低生产成本,我们制定了从沉淀物中提取雷公藤总碱的工艺,经中试生产,结果满意.
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黑紫藜芦对小鼠小脑和大脑皮层细胞DNA损伤研究
目的 以小白鼠小脑和大脑皮层细胞为对象,观察黑紫藜芦对其DNA损伤的影响,旨在探讨黑紫藜芦的遗传毒性,找到遗传毒性的主要部位.方法 采用单细胞凝胶电泳方法(彗星试验),通过灌胃给药7 d后,检测黑紫藜芦水提物和黑紫藜芦总碱对小鼠小脑和大脑皮层细胞DNA损伤的影响.结果 黑紫藜芦水提物和黑紫藜芦总碱低中高剂量(0.1、1.0、2.0 mg/kg)均可不同程度的使小鼠小脑、大脑皮层脑细胞尾矩增加(P＜0.001),DNA发生断裂.结论 黑紫藜芦水提物和黑紫藜芦总碱都对小鼠小脑和大脑皮层细胞产生DNA损伤,其中黑紫藜芦总碱对DNA破坏强,是藜芦产生遗传毒性的主要部位.
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星点设计-效应面法优化莲心总碱自微乳处方
目的 采用星点设计-效应面法优化莲心总碱自微乳处方.方法 绘制伪三元相图,确定自微乳化区域.以乳化时间、粒径、载药量和多分散指数为指标,星点设计-效应面法优化处方.结果 二次多项式模型拟合效果优于多元线性模型.佳处方为每100 g自微乳含24.57 g油酸乙酯、22.16 g聚氧乙烯蓖麻油、22.16 g吐温-80、23.70 gPEG-400、7.41 g莲心总碱.结论 该方法预测性良好,可用于优化莲心总碱自微乳处方.
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阳离子交换树脂法不同洗脱剂纯化苦参总碱的工艺研究
目的 考察阳离子交换树脂法中不同洗脱荆对苦参总碱的纯化效果,优选佳纯化工艺.方法 以苦参碱、氧化苦参碱和总生物碱的洗脱率作为考察指标,分别考察洗脱剂(氨水、氨性乙醇、盐酸、氯化钠溶液)对苦参总碱纯化精制的影响,并优选佳工艺参数.结果 四种洗脱荆对苦参总碱的纯化效果差异较大:3 mol·L-1氯化钠溶液效果优,盐酸溶液次之,氨性乙醇溶液居中,氨水溶液差.结论 以氯化钠溶液作为洗脱剂纯化苦参总碱时效率较高,简便、快捷,可用于苦参总碱的纯化.
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苦参饮片炮制质量初探
苦参性味苦寒,具有清热燥湿、杀虫、利尿的功能,是中医临床常用中药.苦参含生物碱类成分,为苦参中主要有效成分,主要包括苦参碱和氧化苦参碱.
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广东4种钩藤中毛钩藤碱及总碱含量的HPLC、UV测定
目的 建立UV、HPLC测定广东4种钩藤植物的总碱以及毛钩藤碱含量的方法,比较不同物种、不同部位间有效成分的含量变化.方法 采用HPLC梯度洗脱法测定毛钩藤碱含量,以Hypersil ODS C18(4.6 mm×200 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-水(含0.50％三乙胺,冰乙酸调pH 5.35)为流动相,梯度洗脱,进样体积10.00μl,柱温为40.00C,245 nm波长下检测分析;以UV测定总碱含量,检测波长为245 nm.结果 毛钩藤碱在0.02 ～0.40 μg范围内线性关系良好,r=0.999 5,平均回收率分别为96.830％,RSD=1.600％;总碱含量在不同物种、不同部位里存在差异性,其线性范围为2.00～ 10.00 μg/ml,r =0.998 4.结论 该法准确,操作简便、快速,重复性较好,精密度较高,可用于对钩藤属植物不同物种、不同部位的总碱以及有效成分毛钩藤碱合量测定.
关键词： 总碱 毛钩藤碱 高效液相色谱法 紫外-可见分光光度法 -
广东钩藤属4种植物生物碱含量的UV、HPLC测定
目的:建立UV、HPLC测定广东钩藤属4种植物的总碱以及钩藤碱、异钩藤碱含量的方法,比较其不同品种、不同部位间有效成分的含量变化.方法:以UV测定总碱含量,检测波长为242 nm；以HPLC测定钩藤碱、异钩藤碱含量,采用Hypersil ODS C18(4.6mm×200 mm,5μm)色谱柱,甲醇-水(含0.50％三乙胺,冰乙酸调pH 6.33)=63:37为流动相,流速为0.80 mL/min,进样量5.00 μL,柱温为室温,245nm波长下检测分析.结果:钩藤碱、异钩藤碱在0.02～5.00 μg范围内线性关系良好,钩藤碱的r1=0.9999,异钩藤碱的r2=1.0000,平均回收率分别为.98.52％、99.12％ (RSD1 =2.05％,RSD2 =2.17％)；总碱含量在不同品种、不同部位里存在差异性,其线性范围为6.00～14.00 μg/mL,r =0.9989.结论:该法准确,操作简便、快速,重复性较好,精密度较高,可用于对广东钩藤属植物不同品种、不同部位的总碱以及钩藤碱、异钩藤碱含量测定.
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GC-MS对钩吻提取物成分的分析研究
目的:用气相色谱-质谱法(GC-MS)对钩吻提取物中各成分进行研究.方法:采用加热回流提取与氯仿萃取相结合提取钩吻总碱,然后经毛细管色谱柱进行分离,用归一化法计算含量.色谱条件:DB-17弹性石英毛细管柱(30m ×0.25mmID),柱温条件:起始温度80℃,1min后以15℃/min升至200℃,再以20℃/min升至240℃,保持40min,MS检测器,进样量1μl,载气He(1.2 ml/min).质谱分析条件:电离方式为EI,电子能量70 ev.结果:钩吻提取物中鉴定出3个主要成分,占峰面积的83.89%以上.结论:本法可靠,可用于鉴定钩吻提取物中的成分.
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海南地不容总碱的镇痛抗炎作用及毒性观察
目的 研究海南地不容总生物碱的镇痛抗炎作用及急性毒性.方法 采用小鼠热板法、扭体法及甲醛测痛试验观察镇痛作用;采用二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性、棉球诱导小鼠肉芽组织增生试验模型观察抗炎作用,通过胸腔白细胞游走试验研究其对炎症渗出液中白细胞数量的影响,应用交叉菜胶致足肿胀试验测定爽性组织中前列腺素E2(PGE2)含量并初步探讨其抗炎机理,急性毒性试验采用改良寇氏法测定LD50.结果 海南地不容总碱能明显延长小鼠舔后足时间,减少扭体次数,降低甲醛测痛试验第一、二时相的疼痛强度;减轻小鼠耳肿胀,抑制毛细血管通透性增高及肉芽组织增生,有效抑制白细胞游走,并能明显减少大鼠炎症组织申PGE2含量.其LD50为0.569g·kg-1,95%可信限为0.519～0.623g·kg-1.结论 海南地不容总碱镇痛、抗炎作用显著,其机理可能与抑制PGE2的产生与释放有关.
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广西益母草中总碱的提取研究
目的:探究超声波法和普通回流法提取广西益母草中总碱的效益.方法:超声波法和普通回流法.结果:在提取益母草总碱时,超声波提取法较回流提取法有省时、节能、提出率高等优点.结论:用超声波法提取益母草中的总碱优于用普通回流法,超声波法提取益母草总碱的佳条件为超声波频率为80 kHz,超声处理40 min,以75％乙醇为溶剂.
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薏苡叶总碱抗氧化研究
目的:研究广西薏苡叶总碱的抗氧化性,为薏苡叶的开发利用提供参考依据.方法:以75％乙醇为溶剂提取薏苡叶中的总碱类物质,采取比色法测定薏苡叶总碱对DPPH·、O2-和·OH 3三种自由基的清除作用以及对Fe3+还原能力.结果:薏苡叶有较强的清除作用及还原Fe3+能力.结论:清除率与浓度存在明显的量效关系,当总碱浓度为0.50 mg/ml时,其清除率O2-·为43.5％,DPPH·为69.2％,·OH为11.2％;还原Fe3+能力随总碱的浓度增加而增强.
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清香桂提取物对胃肠功能影响的实验研究
目的:评价清香桂提取成分对胃肠道平滑肌的作用和对急性胃溃疡的防治作用.方法:采用豚鼠离体回肠、大鼠离体胃底条和十二指肠实验,活性碳法观察对小鼠的肠推进作用,应用盐酸-乙醇致小鼠实验性胃溃疡模型,观察清香桂正丁醇部分和总碱对胃肠道平滑肌收缩功能和对急性胃溃疡的防治作用.结果:清香桂正丁醇部分和总碱对乙酰胆碱和组胺引起的豚鼠离体回肠平滑肌强烈收缩无明显抑制作用,而药物本身可引起回肠平滑肌收缩,并呈浓度依赖性,EC50分别为9.9×10-6和7.3×10-6g/L;对离体大鼠胃肌条亦有明显的收缩作用,其ECs0分别为1.65×10-5和4.3×10-6g/L;此外,清香桂总碱尚能增加十二指肠平滑肌的自发收缩幅度,对收缩频率无明显影响;而正丁醇提取物对十二指肠平滑肌的自发收缩幅度和频率均无明显影响.清香桂正丁醇部分和总碱均明显促进小鼠肠蠕动,而对盐酸-乙醇致小鼠实验性胃溃疡无明显的保护作用.结论:提示清香桂提取成分对胃肠道平滑肌有明显的兴奋作用,促进胃肠蠕动,所含甾体生物碱可能是其主要的活性成分.
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HPLC法测定苦参总碱中苦参碱与氧化苦参碱的含量
目的:采用高效液相色谱法测定苦参总碱中苦参碱和氧化苦参碱的含量.方法:采用Elite Hypersil NH2柱(5 μm,250mm×4.6 mm),乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液(81:10:9)为流动相,流速:1.0 mL·min-1,检测波长220 nm,柱温:25℃,进样量:10 μL.结果:苦参碱、氧化苦参碱的线性范围分别为5.32～53.2 μg·mL-1(r=0.9997),65.7～525.6 μg·mL-1(r=0.9995).苦参碱平均加样回收率为99.5%,RSD=1.0%(n=6);氧化苦参碱的平均加样回收率为99.7%,RSD=0.6%(n=6).结论:本方法操作简便、快速、可靠,可用于控制苦参总碱质量.
