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桂皮醛诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡及相关分子机制的探讨
目的：探讨桂皮醛对人胃癌BGC-823细胞增殖、凋亡及其相关分子机制。方法：采用MTT法检测桂皮醛对人胃癌BGC-823细胞增殖的影响；采用流式细胞仪检测桂皮醛诱导的凋亡，Hoechst 33342染色法观察凋亡形态的变化；RT-PCR法检测桂皮醛对人胃癌BGC-823细胞相关凋亡基因的影响；Western Bolt方法检测桂皮醛对人胃癌BGC-823细胞相关凋亡蛋白的影响。结果：与对照组相比，桂皮醛有抑制人胃癌BGC-823细胞增殖的作用（P<0.01）；桂皮醛能诱导凋亡的产生；桂皮醛能下调凋亡相关基因Bcl-2、Bcl-xL、Survivin，上调凋亡相关基因Bax、Bak；桂皮醛能下调凋亡相关蛋白Bcl-2、Procaspase-3，上调凋亡相关蛋白Bax。结论：桂皮醛对人胃癌细胞BGC-823的增殖具有抑制作用并能诱导凋亡，可能与内源性凋亡途径的激活有关。
关键词： 桂皮醛 人胃癌BGC-823细胞 细胞增殖 细胞凋亡 -
熊果酸增强人胃癌BGC-823细胞对紫杉醇敏感性的研究
目的 探讨熊果酸(ursolic acid,UA)增强人胃癌BGC-823细胞对紫杉醇(paclitaxel)敏感性的调控作用及可能的机制,为紫杉醇寻求临床辅助化疗药物提供参考.方法 将人胃癌BGC-823细胞分为空白对照组,紫杉醇单药组,熊果酸预处理+紫杉醇组(紫杉醇刺激细胞前,先用熊果酸预处理24 h).采用CCK-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测各组细胞对药物的敏感性;荧光定量PCR(realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR)法检测紫杉醇组和熊果酸预处理+紫杉醇组P-gp mRNA和Akt1 mRNA基因的表达;蛋白印迹(Western Blot)法检测紫杉醇单药组与熊果酸预处理+紫杉醇组P-gp、p-Akt和Akt、caspase-3蛋白表达量的变化.结果 单药熊果酸和紫杉醇可抑制人胃癌BGC-823细胞增殖,随着药物浓度的增加,细胞抑制率增强.人胃癌BGC-823细胞用2.5μM的熊果酸(UA)预处理24 h后,对紫杉醇的敏感性增加,紫杉醇对BGC-823细胞的半数抑制浓度(IC50)由0.04μM下降至0.007μM.荧光定量PCR所示,熊果酸预处理+紫杉醇组Akt1、P-gp mRNA的表达较紫杉醇单药组下降(P<0.01);蛋白质印迹实验提示,熊果酸预处理+紫杉醇组,Akt、P-gp和caspase-3蛋白表达较紫杉醇组降低(P<0.01);熊果酸预处理+紫杉醇组p-Akt蛋白表达较紫杉醇单药组下调,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 熊果酸预处理后能增强紫杉醇对人胃癌BGC-823细胞的敏感性,可能与熊果酸预处理后抑制PI3K/Akt信号通路,降低P-gp的表达有关.
关键词： 熊果酸 紫杉醇 增敏 抗肿瘤 人胃癌BGC-823细胞 -
ω-3多不饱和脂肪酸对人胃癌BGC-823细胞周期及凋亡的影响
目的利用人胃癌BGC-823细胞体外培养实验,观察不同浓度ω-3多不饱和脂肪酸(EPA、DHA)对肿瘤细胞周期及凋亡的影响.方法采用MTT法、凋亡形态学检查和流式细胞检测肿瘤细胞周期及凋亡情况.结果30和45μg/ml的EPA或DHA可显著降低肿瘤细胞存活率(P＜0.001);Hoechst33258染色和透射电镜可见细胞凋亡现象;流式细胞检测bcl-2基因蛋白表达明显下降(P＜0.05),G0/G1细胞明显增加,G2/M和S期细胞明显减少(P＜0.05).结论ω-3多不饱和脂肪酸可诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡和阻滞细胞在G0/G1期,细胞增殖受到抑制.
关键词： ω-3多不饱和脂肪酸 人胃癌BGC-823细胞 凋亡 细胞周期 细胞培养 流式细胞 -
活性炭纳米粒子对人胃癌BGC-823细胞作用的体外实验研究
目的:探讨活性炭纳米粒子(activated carbon nanoparticles,ACNP)对人胃癌BGC-823细胞的作用.方法:将ACNP以不同浓度和时间作用于BGC-823细胞,通过MTT试验观察ACNP对细胞增殖的抑制作用;测定培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性,判断细胞损伤状况;用甲基绿-派洛宁染色法及透射电镜观察细胞凋亡形态;用流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期.结果:ACNP能明显抑制BGC-823细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性,作用24,48,72 h后的半数抑制浓度(IC50)分别是1.57,1.18,0.87 g/L.低浓度ACNP(0.1,0.2 g/L)作用24 h后,LDH漏出量与对照组相比没有显著差异.0.1 g/L的ACNP作用24 h后,细胞出现凋亡特征的形态学改变.0.1,0.2 g/L的ACNP作用24 h后,细胞凋亡率分别为(5.01 ± 1.16)%、(8.21 ± 1.63)%,与对照组(2.48 ± 0.58)%比较均有显著性差异;ACNP作用组的S期细胞所占比例明显增高.结论:ACNP抑制BGC-823细胞的增殖,可使细胞阻滞于S期,诱导细胞凋亡.
关键词： 活性炭纳米粒子 人胃癌BGC-823细胞 增殖 凋亡 -
ω-3脂肪酸对人胃癌细胞凋亡信号传导的影响
目的:观察EPA和DHA对人胃癌BGC-823细胞凋亡信号传导的影响.方法:采用MTT法测定肿瘤细胞抑制率,流式细胞检测肿瘤细胞凋亡率和bcl-2、Cα、PKCβⅡ基因蛋白的表达.结果:45μg/ml和48h时间点的EPA或DHA可显著抑制肿瘤细胞的生长(P＜0.001),凋亡率明显升高(P＜0.001),bcl-2基因蛋白表达下降(P＜0.05),Gα和PKCβⅡ基因蛋白表达明显下降(P＜0.001).结论:ω-3脂肪酸可诱导人胃癌BGC-823细胞发生凋亡,信号传导途径Gα-PKCβⅡ的改变在细胞凋亡中起到重要的作用.
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ω-3多不饱和脂肪酸对人胃癌BGC-823细胞PGE2、SOD和MDA的影响
目的:观察不同浓度ω-3多不饱和脂肪酸(EPA、DHA)对人胃癌BGC-823细胞存活情况、PGE2和脂质过氧化的影响.方法:采用MTT法测定肿瘤细胞存活率,酶联免疫吸附竞争法测定PGE2浓度,黄嘌吟氧化酶法测定总SOD活力,TBA法测定MDA含量.结果:30μg/ml和45μg/ml的EPA或DHA可显著降低肿瘤细胞存活率(P＜0.001),细胞PGE2浓度和总SOD活力明显下降(P＜0.05)、而MDA含量明显升高(P＜0.05).结论:ω-3多不饱和脂肪酸可通过PGE2代谢和脂质过氧化作用抑制人胃癌BGC-823细胞的生长.
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白藜芦醇对裸鼠胃癌移植瘤中PDCD5蛋白表达及细胞凋亡的影响
目的 探讨白藜芦醇(Res)对裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡相关基因PDCD5 蛋白表达及细胞凋亡的影响.方法 将BGC-823细胞复苏后,通过右前肢腋部皮下移植构建裸鼠胃癌移植瘤模型.建模成功后的荷瘤裸鼠随机分为空白对照组、Res组、顺铂组和联合用药组(白藜芦醇+顺铂),各组分别在成瘤部位皮下注射0.2ml相应的药物,每日1次,治疗1周.停药后将裸鼠处死,剥离肿瘤组织.采用免疫组织化学方法检测移植瘤组织中PDCD5 蛋白表达,采用原位末端标记法(TUNEL)检测移植瘤组织中细胞凋亡情况.结果 Res组中PDCD5 蛋白表达水平明显高于空白对照组,但低于顺铂组和联合用药组,上述各组两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05).TUNEL法检测到胃癌移植瘤中凋亡细胞核呈棕褐色,染色深浅不一,染色质分布不均,空白对照组中仅见到少数凋亡细胞,Res组、顺铂组和联合用药组凋亡细胞数依次增加,上述各组两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 白藜芦醇可上调裸鼠胃癌移植瘤细胞中PDCD5的蛋白表达,表明其可能通过上调PDCD5的表达进而诱导细胞凋亡.
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RNAi沉默survivin和HIF-1α基因对胃癌BGC-823细胞体外增殖和凋亡的影响
目的:应用RNA干扰(RNAi)技术抑制胃癌BGC-823细胞中survivin和HIF-1α基因的表达,探讨其对胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响.方法:分别设计并合成经过化学修饰的靶向survivin和HIF1αmRNA的小干扰RNA(siRNAs),同时合成错义RNA(SCR),采用HifectinⅡ真核体外转染胃癌BGC-823细胞,将转染siRNA-survivin、siRNA-HIF-1α和SCR的各组细胞分别命名为sis组、siH组和SCR组,同时设空白对照组(无血清培养基),RT-PCR法检测各组细胞中survivin和HIF-1αmRNA表达水平.将胃癌BGC-823细胞分为单干扰组(survivin-siRNA,sis组)、联合干扰组(survivin-siRNA+HIF1α-siRNA,sis+siH组)、非靶向特异性组(SCR组)和空白对照组(无血清培养基),MTT法检测各组细胞增殖活性,Western blotting法检测各组细胞中survivin和HIF-1α蛋白表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果:与空白对照组比较,sis组细胞中survivin mRNA表达水平和siH组细胞中HIF-1αmRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01).与空白对照组比较,SCR组细胞增殖活性无明显变化(P>0.05),sis组和sis+siH组细胞增殖活性明显降低(P<0.05);与sis组比较,sis+siH组细胞增殖活性明显降低(P<0.05).与空白对照组比较,sis+siH组细胞中surviving和HIF-1α蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01).结论:联合靶向沉默survivin和HIF-1α基因可下调靶基因的表达,抑制胃癌BGC-823细胞增殖,促进细胞凋亡,RNAi基因沉默技术有望成为治疗胃癌的新方法.
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华蟾素抑制人胃癌BGC-823细胞体外侵袭、迁移的机理
目的 探讨华蟾素(Cinobufacin)体外抑制人胃癌BGC-823细胞侵袭的作用及其机制.方法 以0.156 mg/L和0.313 mg/L华蟾素体外作用人胃癌BGC-823细胞,采用MTT法检测华蟾素对BCG-823细胞生长的抑制效果,Transwell小室法检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot法检测BGC-823细胞中NF-κB p56、MMP-9蛋白的表达量.结果 华蟾素可浓度依赖性抑制体外BGC-823细胞增殖、迁移和侵袭,同时下调BGC-823细胞中NF-κB和MMP-9蛋白表达.结论 华蟾素体外可抑制胃癌的转移,该作用可能通过下调NF-κB、MMP-9的表达相关.
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酸浆水煎液抑制人胃癌BGC-823细胞增殖
目的:观察酸浆水煎液对胃癌BGC-823细胞增殖的影响并探讨其机制.方法:将对数生长期的BGC-823细胞随机分为对照组、1.562 5、3.125、6.25、12.5、25 g/L实验组,分别用空白培养基和对应浓度酸浆水煎液培养24,48,72 h,倒置显微镜观察各组细胞生长状况和形态;MTT法检测各组细胞增殖活性;分别用3.125,6.25,12.5 g/L酸浆水煎液培养BGC-823细胞24,48 h,采用流式细胞术分析各组细胞周期.结果:对照组细胞排列紧密、形态规则,随酸浆水煎液浓度增加和作用时间延长,实验组BGC-823细胞逐渐出现接触松散,变圆变小,数量减少等生长抑制现象,12.5,25 g/L实验组变化明显;与对照组相比,不同浓度酸浆水煎液组细胞存活率明显降低(P＜0.05);3.125,6.25,12.5g/L酸浆水煎液作用细胞24,48 h后,G2期细胞比例较对照组明显升高(P＜0.05),且呈时间和浓度依赖性.结论:酸浆水煎液抑制胃癌BGC-823细胞增殖,且呈时间和浓度依赖性,其机制可能与细胞周期阻滞于G2/M期有关.
关键词： 人胃癌BGC-823细胞 酸浆水煎液 增殖抑制 -
戊地昔布对人胃癌细胞生长的抑制作用
目的探讨选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂戊地昔布对人胃癌BGC-823细胞的作用及其作用机制.方法用MTT法检测戊地昔布对人胃癌BGC-823细胞生长的作用,用流氏细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布,用激光共聚焦显微镜、透射电镜和DNA片段进一步检测细胞凋亡,用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定BGC-823细胞的LDH含量.结果戊地昔布 (25～400 μmol*L-1)可时间和浓度依赖性抑制人胃癌BGC-823细胞的生长,作用72 h后,对细胞生长抑制率可达24.0%～92.0%,凋亡率由(2.6±0.7)%增加到(7.6±1.5)%～(16.5±1.5)%.100～400 μmol*L-1也降低增殖指数,减少细胞周期S期细胞,增加G0/G1期细胞.随浓度增加,戊地昔布引起的LDH释放率有增加趋势,但只有400 μmol*L-1戊地昔布可显著增加LDH释放率.结论戊地昔布可通过诱导凋亡和细胞周期停滞而抑制人胃癌BGC-823细胞生长,400 μmol*L-1戊地昔布抑制BGC-823细胞生长作用与细胞坏死有关.
关键词： 戊地昔布 环氧化酶-2 人胃癌BGC-823细胞 凋亡 -
小归芍超临界提取物对人胃癌BGC-823细胞Bcl-2、PCNA基因表达的影响
目的:研究小归芍超临界提取物对人胃癌BGC-823细胞Bcl-2、PCNA基因表达的影响.方法:通过培养人胃癌 BGC-823细胞方法,采用Western Blotting分别检测Bcl-2和PCNA基因蛋白的表达量.结果:小归芍超临界提取物单用体外作用48h能够明显抑制人胃癌细胞BGC-823细胞Bcl-2及PCNA的表达,可能是其抑制肿瘤细胞增殖的机制之一.
关键词： 小归芍超临界提取物 人胃癌BGC-823细胞 Bel-2 PCNA 免疫印迹 -
小檗碱对人胃癌细胞株BGC-823诱导凋亡的研究
目的:研究小檗碱对人胃癌BGC-823细胞诱导凋亡的作用.方法:应用荧光显微镜、透射电镜、流式细胞仪和TUNEL染色研究小檗碱对人胃癌BGC-823细胞诱导凋亡的作用.结果:小檗碱作用人胃癌BGC-823细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化,细胞核固缩、染色质凝集成新月状紧贴于核膜周边,核碎裂、染色质片断化、凋亡小体形成等.流式细胞仪上出现典型的亚二倍体凋亡峰.TUNEL染色显示,随小檗碱浓度增加和作用时间延长,细胞凋亡率增加.结论:小檗碱对人胃癌BGC-823细胞有诱导凋亡作用.
关键词： 小檗碱 人胃癌BGC-823细胞 细胞凋亡 -
半夏泻心方及其配伍药组含药血清对人胃癌BGC-823细胞生长抑制作用及p53表达的影响
目的:研究半夏泻心方不同配伍药组含药血清对BGC-823细胞的生长抑制作用及对p53表达的影响.方法:采用MTT法观察半夏泻心方配伍药组含药血清对BGC-823细胞生长的影响,S-P免疫组化法检测凋亡相关基因p53的表达.结果:半夏泻心方配伍中辛开组、苦降组和由其组成的辛苦组可明显抑制BGC-823细胞的生长,显著高于辛甘组、苦甘组、甘补组和全方组(P<0.05),呈剂量-效应关系,可使 p53基因表达下调.结论:半夏泻心方中辛开、苦降的配伍形式能抑制BGC-823细胞增殖,其诱导细胞凋亡作用与下调p53有关.辛开、苦降配伍后(辛苦)有显著的协同增效趋势,提示辛开苦降法可能是中医药防治胃癌的主要治则治法之一.
关键词： 半夏泻心方 人胃癌BGC-823细胞 细胞生长 p53表达 -
半夏泻心方及配伍药组含药血清抑制人胃癌BGC-823细胞增殖的实验研究
目的:研究半夏泻心方及其配伍药组对体外人胃癌BGC-823细胞增殖的影响.方法:采用血清药理学方法和MTT法及台盼兰染色法观察半夏泻心方及其配伍药组对体外人胃癌BGC-823细胞的敏感性及生长抑制作用.结果:辛苦组对人胃癌BGC-823细胞的生长抑制作用强,显著高于辛开组、苦降组、辛甘组、苦甘组、甘补组(P＜0.05).结论:半夏泻心方中对BGC-823细胞增殖起主要抑制作用的药组为辛开、苦降的配伍形式.辛开、苦降配伍后(辛苦)有显著的协同增效趋势,而其他配伍药群可能存在拮抗作用.提示辛开苦降法可能是中医药防治胃癌的治则治法之一.
关键词： 半夏泻心方 人胃癌BGC-823细胞 配伍 生长抑制
