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胃愈疡饮协定方联合三联疗法对Hp阳性消化性溃疡患者白细胞介素-17、α-防御素、TGF-β1水平的影响
目的:观察胃愈疡饮协定方联合三联疗法对Hp阳性消化性溃疡患者白细胞介素-17(IL-17)、α-防御素、TGF-β1水平的影响.方法:选取2014年4月至2016年2月秦皇岛港口医院收治的Hp阳性消化性溃疡患者96例,随机分为观察组和对照组,每组48例,对照组给予三联疗法治疗,观察组在对照组的基础上,加服胃愈疡饮协定方.2组均治疗8周(抗生素治疗仅在初始2周).分别在治疗后6、12个月后进行随访.比较2组治疗后创面愈合情况,治疗前后中医症候积分,不良反应,Hp清除率和复发率以及IL-17、α-防御素、TGF-β1水平.结果:研究结果显示,观察组治疗总有效率为87.50％高于对照组的70.83％ (P＜0.05);观察组治疗后腹痛、反酸、嗳气和便溏的中医症候积分均低于对照组(P＜0.05);观察组治疗后6、12个月Hp清除率高于对照组,治疗后6、12复发率低于对照组(P＜0.05);观察组治疗后IL-17和TGF-β1水平低于对照组,α-防御素高于对照组(P＜0.05);2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:胃愈疡饮协定方能有效的调节机体免疫机制,显著提高Hp阳性消化道溃疡的治疗效果,缓解临床症状,提高Hp清除率,降低复发率,安全有效,有较高的临床应用价值.
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潘氏细胞及其抗微生物肽与肠道黏膜免疫
潘氏细胞(Paneth cells,PCs)及其抗微生物肽(antimicrobial peptides,AMPs)与肠道微生物的生态学失衡、肠道炎症、全身感染等病理状况的发生密切相关.肠黏膜屏障与固有免疫功能的损害,常伴随着机体0-防御素等AMPs水平及其他炎症介质水平的改变.研究发现:PCs能在胆碱能兴奋剂、微生物及其抗原成分、肠内营养状态、遗传易感因素等因素的作用下,改变其本身的功能状态及效应分子的释放,诱发炎症性肠病、细菌移位、肠内细菌过度生长、自身免疫耐受损害等疾病及相关改变,对PCs的研究给临床治疗提供了新的靶点和策略.本文对近十年来人们对PCs、AMPs和肠道黏膜屏障及固有免疫之间关系的研究进展作一述评.
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慢性阻塞性肺疾病患者血清和诱导痰中α-防御素1-3水平的变化及意义
目的 测定COPD急性加重期(AECOPD)和稳定期患者血清和诱导痰中?-防御素1-3(HNP1-3)水平,以探讨HNP1-3在COPD发病机制中的作用.方法 2006年10月至2007年9月收集30例AECOPD患者(AECOPD组),21例COPD稳定期患者(COPD稳定期组)及22例健康受试者(健康对照组)的血清和诱导痰,分别进行痰细胞计数和分类,用ELISA法检测血清和诱导痰中HNP1-3和白细胞介素-8(IL-8)水平,并分析HNP1-3水平与中性粒细胞、IL-8、气流阻塞之间的相关性.应用SPSS 11.5软件进行统计学分析,多组数据间比较采用单因素方差分析或卡方检验,采用Pearson或Spearman相关分析进行相关性检验.结果 AECOPD组诱导痰HNP1-3的中位数(四分位间距)[9 652(4 272～12 576)ng/L]明显高于健康对照组[4 194(700～10 505)ng/L]和COPD稳定期组[7 011(6 658～7 319)ng/L],AECOPD组、COPD稳定期组和健康对照组血清HNP1-3的中位数(四分位间距)分别为51(39～173)ng/L、135(113～241)ns/L和130(13?60)ng/L,3组比较差异无统计学意义(x2=5.75,P＞0.05).诱导痰中HNP1-3水平与IL-8、中性粒细胞数及比例呈正相关(r值为0.29～0.53,P均＜0.01),与FEV1占预计值％、FEV1/FVC和PaO2呈负相关(r值为-0.33～-0.44,P均＜0.01).结论 HNP1-3参与COPD的炎症过程.此过程与中性粒细胞和IL-8等炎性因子有关.痰中HNP1-3水平可以作为COPD严重程度的指标.
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α-防御素对假体周围关节感染的诊断价值:meta分析
背景:目前α-防御素对假体周围关节感染的诊断价值不确定.目的:通过meta分析评价α-防御素对假体周围关节感染的诊断价值.方法:计算机检索PUBMED、EMBASE、Cochrane图书馆、中国知网(CNKI)和万方数据库等数据库,手工检索相关期刊及学位论文,检索年限均从建库至2017年10月,无语言限制.采用Meta-Disc 1.4软件进行meta分析:计算合并敏感性、特异性、阳性似然比、阴性似然比和诊断比值比.结果:纳入6篇文献进行meta分析,共604例患者.α-防御素在诊断假体周围关节感染的合并敏感性为0.96(95％CI:0.92～0.99),合并特异性为0.97(95％CI:0.95～0.98),合并阳性似然比和阴性似然比分别为23.56(95％CI:14.58～38.08)和0.05(95％CI:0.02～0.12),SROC下面积为0.9908,Q值为0.9603,诊断比值比为552.65(95％CI:166.27～1836.93).结论:在诊断假体周围关节感染中,α-防御素具有较高的敏感性和特异性,可作为诊断假体周围关节感染的一种辅助手段.
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慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰中α-防御素1-3含量与病情程度的相关性研究
目的 探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者治疗前后诱导痰中α-防御素1-3(HNP1-3)含量、中性粒细胞比例(N％)与肺功能及血气分析结果的相关性,以探讨HNP1-3在COPD发病机制中的可能作用.方法 收集AECOPD患者42例(根据肺功能检测结果分为轻度组11例、中度组13例、重度组18例)治疗前后及20例急性支气管炎痊愈者(对照组)的诱导痰,分别进行痰中性粒细胞计数并计算其百分比,用ELISA方法检测诱导痰中HNP1-3的含量;测定各观察对象治疗前后的血气分析及肺功能,分析HNP1-3含量与N％、肺功能和血气分析的相关性.结果 COPD患者诱导痰中HNP1-3水平、N％、PaCO2随病情严重程度的增加而增高(P＜0.01),并明显高于对照组(P＜0.01),FEV1％ pred、FEV1/FVC、PaO2随病情严重程度的增加而降低(P＜0.01),明显低于对照组(P＜0.01).三组患者诱导痰中HNP1-3含量分别与N％呈显著正相关(r=0.887～0.973,P值均＜0.01),与FEV1％pred、FEV1/FVC、PaO2分别呈显著负相关(r=-0.721～-0.973,P值均＜0.01).经治疗一周后,轻度、中度、重度患者FEV1％ pred、FEV1/FVC、PaO2明显增高,诱导痰中HNP1-3含量、N％明显降低.结论 HNP1-3参与了COPD炎症的过程,此过程与中性粒细胞有关.痰中HNP1-3含量可作为COPD患者病情严重程度的指标,并有助于判断预后.
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α-防御素基因和β-防御素基因在外周血白细胞中的不同表达
目的观察健康人外周血白细胞中α-防御素和β-防御素基因表达的阳性率及外周血白细胞中α-防御素和β-防御素两大家族基因表达的特征,探讨其在感染免疫中的作用.方法51名献血员被随机纳入研究中,在体外用100 ng/ml内毒素刺激其外周血白细胞,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定0、1、3、6、12、24 h时白细胞防御素信使RNA(mRNA)的水平,DNA印迹分析和序列测定法证实核苷酸扩增产物的特异性.结果在无刺激时,所有研究对象的外周血白细胞均检测到α-防御素1-3 mRNA的转录,而无β-防御素mRNA的转录.内毒素刺激3 h后,88.2%研究对象的外周血可检测到β-防御素1 mRNA的转录,39.2%β-防御素2 mRNA表达阳性,并于刺激6 h时β-防御素1和2mRNA水平达到峰值,而α-防御素1-3 mRNA的水平并无显著性改变.α-防御素1-3基因在外周血白细胞中呈持续性表达,而β-防御素1-2呈可诱导性表达,β-防御素1和2基因的可诱导性表达存在个体间差异.结论α-防御素和β-防御素的不同表达特征与其基因调控顺式作用成分不同有关,提示两大类防御素在感染免疫中具有不同的作用.
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Hp阳性消化性溃疡患者血清TGF-β1、α-防御素和IL-17表达的临床研究
目的 探讨幽门螺旋杆菌(Hp)检测阳性的消化性溃疡患者血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-防御素和白细胞介素-17(IL-17)的表达水平变化的临床意义.方法 选取Hp阳性消化性溃疡患者45例为消化性溃疡组,同期体检无消化系统疾病者45例为健康对照组.检测2组血清中TGF-β1、α-防御素和IL-17水平.结果 与健康对照组相比,消化性溃疡组血清TGF-β1和IL-17的水平显著升高(P＜0.05或P＜0.01),α-防御素水平显著下降(P＜0.01).根据消化性溃疡部位分组,复合型溃疡组血清IL-17的水平较胃溃疡组和十二指肠溃疡高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 TGF-β1、α-防御素和IL-17均参与Hp阳性消化性溃疡炎症反应,不同部位消化性溃疡患者血清IL-17表达水平不同.
关键词： 消化性溃疡 幽门螺旋杆菌 血清转化生长因子-β1 白细胞介素-17 α-防御素 -
人α-防御素与艾滋病治疗
新近发现人α-防御素对人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)有直接抑制作用,为艾滋病的治疗开辟了新视点.本文简要介绍了人α-防御素的组织分布、分子结构及其抗微生物活性,重点阐述了人α-防御素在艾滋病治疗领域的研究现状.
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平溃方治疗溃疡性结肠炎疗效观察及对相关因子水平影响
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是以持续或反复出现腹泻、黏液脓血便、腹痛以及里急后重为主要症状,以直肠、结肠黏膜及黏膜下层的炎症和溃疡形成为病理特点的慢性非特异性肠道疾病.近来研究显示IL-17/IL-23轴在炎症性肠病中起了重要作用[1],而α-防御素(HNP1-3)与UC有着十分密切的关系[2].中医药治疗UC具有多途径,多层次,多靶点,副作用少,可以长期维持治疗等优势.我们通过研究平溃方干预前后相关IL-6、IL-17及α-防御素在辨证为脾虚湿热型的轻-中度UC中的变化,为进一步阐释UC发病机制及平溃方的治疗机制提供参考,也为临床应用平溃方提供理论依据.
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HP感染与消化性溃疡患者细胞因子、α-防御素水平变化的关系
目的 探讨幽门螺杆菌(HP)感染与消化性溃疡患者血清炎症细胞因子、α-防御素水平变化的关系.方法 选取我院确诊的160例消化性溃疡患者(病例组)、健康研究对象80例(对照组),收集时间为2016年1月至2017年5月,对比两组血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、IL-2、IL-17、转化生长因子β1(TGF-β1)、α-防御素的水平,并根据消化性溃疡的具体部位、HP感染的情况进行亚组分析.结果 病例组的血清IL-6、IL-8、IL-2、IL-17、TGF-β1显著的高于对照组(P<0.05),病例组血清α-防御素水平显著低于对照组(P<0.05);十二指肠球部溃疡患者的血清IL-8、IL-2、IL-17、TGF-β1显著的高于胃溃疡患者(P<0.05),但二者的IL-6、α-防御素水平差异无统计学意义(P>0.05);HP感染阳性的消化道溃疡患者的血清IL-6、IL-8、IL-2、IL-17、TGF-β1显著的高于HP感染阴性的消化道溃疡患者(P<0.05),而前者的α-防御素水显著低于后者(P<0.05).结论 消化道溃疡患者的血清炎性因子水平显著升高、α-防御素水平显著降低,HP感染、十二指肠球部溃疡会进一步升高患者血清炎症因子及降低α-防御素水平.
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α-防御素检测在消化性溃疡炎症评估中的作用
目的 探讨α-防御素(DEFA)评估消化性溃疡炎症情况的可行性.方法 收集胃十二指肠溃疡活动期患者20例,愈合期患者20例,瘢痕期患者22例,健康对照组31例,用ELISA法检测血清DEFA,用RT-PCR法检测DEFA基因的相对表达量,用比色法检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A1(ApoA1)和载脂蛋白B(ApoB)水平;用染色后激光扫描法检测全血白细胞(WBC)及中性粒细胞(NEU).结果 与健康对照组相比,胃十二指肠溃疡活动期的WBC、NEU、TG和DEFA基因的相对表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01),而TC、HDL-C、LDL-C、ApoA1、ApoB和DEFA水平均显著下降(P<0.05,P<0.01);与活动期相比,愈合期的TG和DEFA基因的相对表达水平均显著下降(P<0.05,P<0.01),HDL-C和血清DEFA水平均显著升高(P<0.05);与愈合期相比,瘢痕期中各检测项目的 检测水平均差异无统计学意义(P>0.05).胃十二指肠溃疡各期患者的TG水平与DEFA基因的相对表达量呈正相关(r=0.547 0,P<0.000 1),而TC、HDL-C和LDL-C水平均与血清DEFA水平呈正相关(r=0.367 0,P=0.025 5;r=0.014 8,P=0.929 7;r=0.408 1,P=0.011 0).结论 用DEFA评估消化性溃疡炎症情况具有可行性.
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HNP对肺炎克雷伯杆菌粘附呼吸道上皮细胞的影响
目的:探讨呼吸道抗感染防御机制,观察人中性粒细胞α￣防御素(HNP)对肺炎克雷伯杆菌粘附呼吸道上皮细胞的影响.方法:从人中性粒细胞分离纯化HNP.A549细胞与HNP(20μg·ml-1)及两株肺炎克雷伯杆菌临床分离株共同孵育4小时,用平板培养菌落计数法测定与细胞粘附的活菌数.结果:在HNP存在的情况下,Kp03'83株细菌对肺上皮细胞的粘附提高了12倍(P<0.01),Kp03116株细菌对上皮细胞的粘附提高了5倍(p<0.01)结论:HNP显著增强肺炎克雷伯杆菌粘附于呼吸道上皮细胞,可能有利于呼吸道清除细菌.
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用于酵母双杂交的α-防御素HNP-1成熟肽重组诱饵载体的构建和鉴定
目的:构建和转化人α-防御素HNP-1成熟肽的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究其相互作用蛋白分子打下基础.方法:用RT-PCR扩增HNP-1成熟肽基因,将该基因片断与腺病毒载体pBluescript-SK-Ⅱ定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;回收目的片断,将其连接入酵母表达载体pGBKT7,构建重组诱饵表达质粒pGBKT7-HNP-1,测序鉴定.缺陷培养方法检测重组诱饵载体有无毒性和自激活作用.结果序列分析表明HNP-1成熟肽重组诱饵表达质粒构建成功,重组诱饵表达质粒对酵母细胞无毒性作用,无自激活效应发生.结论构建用于酵母双杂交的α-防御素HNP-1成熟肽重组诱饵载体,为找出与人α-防御素HNP-1成熟肽相互作用蛋白分子打下了基础.
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α-防御素保护小鼠抵抗肺炎克雷伯杆菌肺部感染的实验观察
目的:探讨人中性粒细胞α-防御素对小鼠感染肺炎克雷伯杆茵肺炎模型动物的保护作用.方法:①用克雷伯肺炎杆菌临床分离株K4与不同浓度α-防御素在37℃孵育两小时,平板培养茵落计数法计数活细菌数.②用K4和α-防御素混合经肺部感染昆明种小鼠,观察小鼠生存率.结果:①K4与α-防御素共孵育的茵落数和PB?对照组菌落数比较没有显著性差异.②肺部注入肺炎克雷伯杆菌混合α-防御素组小鼠的死亡率低于单纯注入肺炎克雷伯杆菌的对照组,且生存时间延长(P＜0.05).结论:α-防御素可以保护小鼠抵抗细菌性肺炎,保护机制可能不是α-防御素的直接杀菌,而可能是通过增强上皮细胞天然免疫功能.
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Paneth细胞分泌的α-防御素的免疫印迹鉴定
帕内特(Paneth)细胞(肠内的嗜酸性细胞)可合成、分泌具有广谱高效抗微生物活性的阳离子抗菌肽,α-防御素(α-defensin)为其中的一类,它是构成机体的天然免疫系统第一道防线的组成成分之一[1].小肠黏膜中的α-防御素分子量小、含量微,对其提纯和鉴定的难度较大.Selsted等[2]将其分离纯化后,对其纯度及分子量的鉴定采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)和质谱法(MS),但对其终定性还需进行氨基酸序列分析,整个过程极其复杂,不适合于大量样品的分析.
关键词： Paneth细胞 α-防御素 Western blot
