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不同采收期山茱萸总有机酸的含量变化规律研究
山茱萸是山茱萸科植物山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc.)除去果核的干燥成熟果肉[1],主产于我国的河南、浙江、陕西等省,具有补益肝肾、涩精固脱的功效,为常用中药材.现代研究证明:山茱萸中含有多种成分,如环烯醚萜苷类、有机酸类、鞣质类、多糖、氨基酸、维生素及矿质元素等.其中有机酸种类多、含量丰富,如熊果酸、齐墩果酸等[2].目前发现多种有机酸均有生理活性,如齐墩果酸具有清热、保肝、消炎、抑菌、强心、利尿等作用[3].研究不同采收期山茱萸总有机酸含量变化,可以为山茱萸佳采收期提供科学依据.
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赤雹果总有机酸解热作用及其机制
目的:观察赤雹果总有机酸(TOATDF)的解热作用,并探讨其机制.方法:SD大鼠ip内毒素(LPS) 100 μg·kg-1制备大鼠发热模型.将模型大鼠随机分为TOATDF 300,150,75 mg· kg-1剂量组,阿司匹林150 mg·kg-1对照组及模型组,另取10只大鼠作为正常对照.药后每1h测量体温1次,连续6次.采用酶联免疫测定法(ELISA)法测定血清中前列腺素E2(PGE2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素(IL)-1β及脑脊液中PGE2表达水平.结果:TOATDF 300,150 mg·kg-1剂量组大鼠各时间点的平均体温均低于模型组(P ＜0.05或P＜0.01);75 mg·kg-1组大鼠药后2 ～5h体温明显低于模型组(P＜0.05);阿司匹林组药后1～5h体温明显低于模型组.各给药组血清中TNF-α,PGE2,IL-β及脑脊液中PGE2的表达水平均显著低于模型模型组(P＜0.05或P＜0.01),但高于正常对照组(P＜0.05).结论:TOATRF有明显的解热作用,并有一定的剂量-效应关系.其解热作用与抑制致热原诱发的PGE2,TNF-α和IL-β等致热因子的产生或释放有关.
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赤雹果总有机酸对大鼠离体子宫平滑肌的作用及机制研究
目的:观察赤雹果总有机酸(FTDBP)对大鼠离体子宫平滑肌活力的影响.方法:选用8周龄Wistar雌性未孕大鼠,以子宫平滑肌的收缩频率、收缩幅度指标,计算子宫平滑肌活力及FTDBP的半数抑制浓度(IC50).以盐酸普萘洛尔、盐酸苯海拉明、盐酸雷尼替丁、硫酸阿托品为阻断剂,观察FTDBP对子宫平滑肌作用与β,H1,H2,M受体的关系,探讨FTDBP对子宫平滑肌的作用机制.结果:与模型组比较,FTDBP剂量组(0.032,0.064,0.128 g·L-1)和元胡止痛片组对缩宫素所致大鼠离体子宫平滑肌的收缩频率、收缩幅度和活力均有明显的抑制作用(P＜0.05或P＜0.01),IC50为0.100 24 g·L-1；与模型组比较,硫酸阿托品组大鼠子宫平滑肌的收缩频率、幅度和活力差异无统计学意义.结论:FTDBP对大鼠子宫平滑肌活力有明显的抑制作用,其作用是通过抑制M受体实现的,与H1,H2,β受体无关.
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板蓝根提取物中总有机酸和水杨酸含量测定方法研究
目的:建立板蓝根提取物的质量控制方法.方法:采用酸碱滴定法测定总有机酸含量,并用反相高效液相色谱法测定板蓝根提取物中水杨酸的含量.结果:酸碱滴定法测得总有机酸含量为13.0%,RSD 2.0%;HPLC测得提取物中水杨酸的含量为0.22%,RSD 1.6%.结论:该方法能有效控制板蓝根提取物的质量.
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近红外漫反射光谱法直接测定小儿消食片中总有机酸的含量
小儿消食片由鸡内金(炒)、六神曲(炒)、山楂等6味药组成,具有消食化滞,健脾和胃的功效,临床用于脾胃不和,消化不良,食欲不振等.其主要代表成分为有机酸,部颁标准2000年版采用酸碱滴定法测定其中总有机酸含量,其操作过程烦琐,耗时较长,效率低,而且难以满足即时控制的要求.
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正交法优选板蓝根总有机酸的提取工艺条件
目的:优选并确立板蓝根中总有机酸的佳提取工艺.方法:以总有机酸的溶出率为指标,采用正交设计试验法对提取过程中的板蓝根提取溶剂浓度、溶剂用量、提取次数、提取时间等4个因素进行优选研究,应用直接电位法测定提取物中总有机酸的含量.结果:佳提取条件为乙醇浓度70%,用量为药材7倍量,提取3次,每次1.5 h,在此条件下总有机酸提取率为5.32%.结论:采用此种提取方法不仅能够充分提取板蓝根中总有机酸成分.而且经济可靠,对板蓝根制剂的提取工艺改进有重要意义.
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基于止咳效价评价半夏及其炮制品品质的方法研究
目的 建立半夏及其炮制品清半夏、姜半夏、法半夏和京半夏止咳效价测定的模型与方法,为初步探索生物效价测定法用于评价半夏及其炮制品的质量提供科学依据.方法 基于小鼠浓氨水引咳模型,采用量反应平行线(22)法建立半夏及其炮制品止咳效价的测定方法,测定其效价值,并结合总有机酸定量测定结果,分析总有机酸的量与生物效价二者的相关性.结果 半夏炮制后,止咳效价值均升高;京半夏的止咳效价值大,为2 105.59 U/g;其后依次为法半夏、清半夏、姜半夏;半夏止咳效价值小,为京半夏的1/3.结合总有机酸定量分析,半夏及其炮制品的止咳效价与总有机酸的量相关,其R2为0.692 0～0.917 8,表现为总有机酸的量增加,止咳效价值增大,二者呈显著的正相关.结论 该方法重复性、精密度良好,适用于半夏及其炮制品止咳效价的测定,可作为评价其质量的方法,为完善其质量标准,构建中药质控新模式提供了科学依据.
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基于灰色关联度分析法对半夏及其炮制品总有机酸止咳作用的谱-效关系研究
目的 研究半夏及其炮制品清半夏、姜半夏、法半夏和京半夏总有机酸HPLC指纹图谱与止咳作用的相关性,建立半夏及其炮制品总有机酸与止咳作用的谱-效关系,以阐明止咳作用的物质基础.方法 采用灰色关联度分析法,对半夏及其炮制品总有机酸HPLC指纹图谱的各共有峰峰面积与止咳的3个评价指标(咳嗽潜伏期、3min内咳嗽次数及抑咳率)进行相关性分析,建立半夏及其炮制品总有机酸止咳作用的谱-效关系.结果 半夏及其炮制品总有机酸对浓氨水致小鼠咳嗽有显著的抑制作用,与半夏止咳功效一致.在半夏及其炮制品总有机酸HPLC指纹图谱中,4、6(琥珀酸)、12号色谱峰所代表的化学成分与止咳作用具有较强的相关性,对止咳作用贡献较大,特别是4号色谱峰,峰面积大、关联度强.结论 半夏及其炮制品总有机酸HPLC指纹图谱与其止咳作用具有相关性.通过谱-效关系研究,阐明了半夏及其炮制品止咳作用的物质基础,为其质量控制与评价提供了理论依据.
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物质基础-功效-生物活性多元化的半夏质量评价模式的建立
目的 研究半夏总有机酸量与止咳作用、总有机酸HPLC指纹图谱与止咳作用、总有机酸量与止咳效价的相关性,建立物质基础-功效-生物活性多元化的半夏质量评价模式.方法 通过电位滴定法测定半夏总有机酸含量,采用HPLC建立总有机酸指纹图谱;以浓氨水引咳模型研究止咳作用,并利用灰色关联度分析法建立总有机酸与止咳作用的谱-效关系;基于小鼠浓氨水引咳模型,建立半夏止咳效价的测定方法;通过SPSS 18.0软件分析总有机酸和止咳作用、止咳效价3者之间的相关性.结果 半夏总有机酸对浓氨水致小鼠咳嗽有显著的抑制作用,结合总有机酸含量,随其含量的增加,止咳作用增强.在总有机酸HPLC指纹图谱中,4、6(琥珀酸)、12号色谱峰所代表的化学成分与止咳作用具有较强的相关性,对止咳作用贡献较大.10批半夏的止咳平均效价值为(753.72±58.18) U/g,结合总有机酸定量分析,二者呈显著的正相关,表现为总有机酸的量增加,止咳效价值增大.结论 总有机酸为半夏止咳作用的物质基础之一;总有机酸、止咳作用、生物活性3者之间呈相关性,构建了物质基础-功效-生物活性多元化的半夏质量评价模式.
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大孔吸附树脂分离纯化金银花中总有机酸的研究
目的 研究大孔吸附树脂富集、纯化金银花中总有机酸的工艺条件参数.方法 以静态饱和吸附量、静态洗脱率为考察指标,比较了6种大孔吸附树脂分离、纯化金银花总有机酸的工艺.以总有机酸收率和质量分数为指标,对佳树脂吸附工艺条件进行了筛选.结果 在考察的6种树脂中,HPD100型树脂具有佳的吸附及洗脱参数.结论 本实验所筛选出的HPD100型树脂综合性能较好,适于金银花总有机酸的分离纯化.
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阴离子交换树脂分离纯化赤雹果中的总有机酸
目的:筛选适合分离纯化赤雹果中总有机酸的阴离子交换树脂,并确定其工艺条件及参数.方法:以总有机酸的收率和质量百分含量为指标,筛选分离纯化赤雹果总有机酸佳的阴离子交换树脂、上样药液pH值、洗脱剂浓度及洗脱流速.结果与结论:717阴离子交换树脂对赤雹果中总有机酸的交换能力强.佳工艺条件为上样药液pH值为10,洗脱剂为30%乙醇,洗脱流速为2.0ml/min.
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鹅不食草总有机酸的提取与分析
目的:比较不同方法提取鹅不食草中的总有机酸,同时采用分光光度法对其含量进行测定方法:采用有机溶剂加酸水直接提取法、碱提酸沉法、超声提取法及酸沉后有机溶剂萃取法等几种方法对鹅不食草中的总有机酸进行提取,同时采用分光光度法测定其含量结果:有机溶剂加酸水直接提取法提取总有机酸的含量为49.4％,碱提酸沉法提取总有机酸的含量为69.4％,超声提取法提取总有机酸的含量为25.1％,酸沉后有机溶剂萃取法提取总有机酸的含量为54.7％.结论:采用碱提酸沉法提取鹅不食草中的总有机酸并采用分光光度法测定其含量是相对更佳的方法.
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金银花总有机酸纯化工艺的优化
目的 优化金银花总有机酸纯化工艺.方法 比较6种大孔树脂的吸附率和解吸率后,分别考察上样液质量浓度、pH、乙醇体积分数对吸附量、吸附率、解吸率的影响.结果 佳条件为选择HPD600型大孔树脂,以含7.56 mg/mL总有机酸、pH 2的提取液为上样液.先用2 BV去离子水洗掉蛋白质和糖类,再用4 BV 10％乙醇去除一部分杂质,后用50％乙醇洗脱4 BV.纯化后,总有机酸含有量达76.08％.结论 HPD600型大孔树脂可有效富集纯化金银花总有机酸.
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宣木瓜总有机酸的提取和纯化工艺优化
目的 建立提取、纯化宣木瓜总有机酸的佳工艺.方法 以可滴定总有机酸质量分数为指标,运用正交试验优化宣木瓜总有机酸提取工艺;通过单因素试验,考察上样溶液质量浓度、pH、HCl洗脱液浓度和体积流量对强碱型阴离子交换树脂纯化总有机酸的影响.结果 佳提取工艺是料液比1∶8,75％乙醇,提取时间2h,提取次数2次;佳纯化工艺是上样溶液质量浓度1 g/mL,样品液pH为10,HCl洗脱液浓度为0.3 mol/L,体积流量为3 mL/min.此工艺下所得宣木瓜总有机酸质量分数可达67.66％.结论 本方法可有效提取、纯化宣木瓜总有机酸,工艺稳定、可行,易于实施,.
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食用土当归总有机酸的抗炎镇痛作用
目的 比较食用土当归Aralia cordata Thunb.的总有机酸与醇提取物的抗炎和镇痛作用.方法 采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、鸡蛋清致大鼠足跖肿胀法观察抗炎作用;采用热刺激致小鼠疼痛法、醋酸致小鼠扭体法观察镇痛作用.结果 食用土当归总有机酸对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、鸡蛋清致大鼠足跖肿胀具有良好的抑制作用;并能减少醋酸致小鼠扭体的次数,提高热致痛小鼠的痛阈;与醇提取物相比无显著性差异.结论 食用土当归总有机酸也是抗炎镇痛的有效部位.
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加味四妙丸中总有机酸总量测定及分离纯化研究
目的:为研究治疗痛风加味四妙丸的质量标准及药效物质基础,对该处方中有机酸部位进行总量测定及分离纯化研究.方法:建立电位滴定法测定加味四妙丸中有机酸含量.比较用强碱型阴离子交换树脂法、石-硫法及大孔树脂法分离纯化有机酸提取物的方法.结果:用电位滴定法测定该处方有机酸含量较准确,平均加样回收率101.5%,处方药中有机酸含量为0.23%.结论:用强碱型阴离子交换树脂法分离纯化有机酸部位的方法好,提取物纯度为88.9%,纯化得率为89.1%.
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清半夏饮片质量标准研究
目的:建立清半夏饮片的质量控制标准.方法:采用饮片性状、显微特征研究方法、薄层色谱法、水分测定法、灰分测定法、浸出物测定法、白矾残留量测定法及总有机酸滴定法.结果:全国不同地区饮片生产企业共10批次清半夏饮片有相似的性状和显微特征,但质量有明显差异,测得各指标平均值为:水分11.28%;总灰分2.79%;白矾残留量7.86%;水溶性浸出物8.49%;醇溶性浸出物1.5856;总有机酸含量0.403%.结论:建立了清半夏饮片的客观、量化质控标准.建议清半夏饮片质量标准暂定为:水分不高于13.0%;总灰分不高于5.0%;白矾残留量小高于8.0%;水溶性浸出物不低于6.0%;醇溶性浸出物小低于1.2%;总有机酸含量不低于0.3%.
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感冒安颗粒总有机酸含量测定方法的建立及应用
目的:建立电位滴定方法测定感冒安颗粒中总有机酸含量.方法:以无水乙醇为溶剂,对感冒安颗粒进行加热回流提取2 h.采用TLC法和MS法对提取液中的没食子酸进行鉴别.用电位滴定法测定感冒安颗粒中总有机酸的含量. 结果:感冒安颗粒的乙醇提取液中含有没食子酸.以没食子酸计,感冒安中总有机酸测定的加样回收率为(98.96±3.31)%,RSD为3.34%(n=9).3个批号感冒安颗粒总有机酸的含量分别为(3.72±0.08)、(6.82±0.40)和(5.22±0.22) mg/g.结论:本研究所建立的电位滴定方法适合于感冒安颗粒中总有机酸的含量测定.
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赤雹果总有机酸镇痛作用研究
目的:观察赤雹果总有机酸的镇痛作用,探讨赤雹果镇痛作用的有效部位.方法:实验动物随机分为生理盐水组,赤雹果总有机酸高、中、低剂量组,阿司匹林组和吗啡组.采用腹腔注射酒石酸锑钾致小鼠扭体法、48℃和55℃热板法及大鼠福尔马林炎性组织疼痛法,评价赤雹果总有机酸的镇痛活性.结果:与生理盐水组比较,赤雹果总有机酸可明显降低小鼠扭体次数;与药前痛阈比较,赤雹果总有机酸可明显提升48℃热板法小鼠药后痛阈;仅赤雹果总有机酸高剂量组及吗啡组可使55℃热板法小鼠药后痛阈较药前明显提高;赤雹果总有机酸可使炎性组织疼痛大鼠不同时相的足疼痛反应积分较生理盐水组明显降低.三种实验法中赤雹果总有机酸中、高剂量作用效果均优于阿司匹林.结论:赤雹果总有机酸有显著的镇痛作用,其镇痛的主要部位应在外周.
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儿宝颗粒剂中苍术与山楂共煎的正交实验
目的确定苍术与山楂共煎的佳工艺条件.方法以总有机酸提取率和浸膏得率为指标,考查加水量、浸泡时间和煎煮时间对总有机酸提取效果的影响.结果佳提取条件为:药材加(9+7)倍水、浸泡0.5 h、煎煮(2+2)h.结论该佳工艺是稳定可行的.
