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  • 针刺血清对高嗜酸粒细胞血症大鼠外周血嗜酸粒细胞数目的影响

    作者:马淑兰;杨永清;崔龙苹;张英英;王宇

    目的:明确肾上腺切除大鼠哮喘模型注射针刺治疗后的血清对高嗜酸粒细胞血症大鼠外周血嗜酸粒细胞数目的影响,为证明该种针刺血清中存在影响嗜酸粒细胞数目的非皮质激素类活性因子提供实验依据.方法:将稀释后的针刺血清以2.5 mL/kg经尾静脉注入模型大鼠,连续3天,同时连续10天测定该种针刺血清对高嗜酸粒细胞血症大鼠外周血嗜酸粒细胞计数的影响.结果:与空白血清和普通哮喘针刺血清相比较,该种针刺血清在尾静脉注射后第3~10天能明显降低高嗜酸粒细胞血症大鼠的外周血嗜酸粒细胞计数(P=0.012,0.000,0.000,0.000,0.000,0.000,0.000,0.000).结论:肾上腺切除大鼠哮喘模型注射针刺治疗后的血清能明显降低高嗜酸粒细胞血症大鼠外周血嗜酸粒细胞数目,提示该针刺血清中存在影响嗜酸粒细胞数目的非皮质激素类活性因子.

  • 针刺血清对培养心肌细胞线粒体功能影响的观察

    作者:罗明富;李翠红;张金玲;郭莹;陈淑萍;高永辉;刘俊岭;李瑞午

    线粒体是细胞能量代谢的中心.在心肌细胞丰富的肌浆内线粒体特别多.以适应心肌持续节律性收缩的特点.同时线粒体也有摄取和释放Ca2+的作用,它对Ca2+的亲和力很高,释放率很低,因此可贮存大量钙,参与细胞内钙的活动.在心肌缺血-再灌注Ca2+超载的状况下,心肌缺血区细胞线粒体出现积聚、肿胀、嵴断裂等损伤.电针"内关"穴后,可使实验性缺血心肌细胞线粒体损伤减轻,从而减轻心肌损伤[1],表明针刺治疗对心肌细胞内线粒体有保护作用.

  • 肾上腺切除哮喘大鼠针刺血清的抗哮喘作用研究

    作者:杨永清;崔龙苹;马淑兰;陈汉平;王宇;金明明

    在证明针刺对肾上腺切除(ADX)和普通大鼠哮喘模型具有明显抗哮喘作用的基础上,进一步研究了ADX哮喘大鼠经针刺治疗后的血清(针刺血清)对上述两种大鼠哮喘模型的作用.结果表明,ADX哮喘大鼠经针刺治疗后的血清可明显降低ADX和普通哮喘大鼠的气道阻力与外周血嗜酸粒细胞计数,针刺血清注射与针刺治疗的作用之间无明显差别,提示针刺血清具有与针刺类似的抗哮喘作用.但针刺血清明显降低两种哮喘大鼠的肺顺应性,而针刺则增加其肺顺应性,这种作用方式上的一些差异有待进一步研究.

  • 针刺血清调控内质网应激反应对无镁诱导培养大鼠海马神经元惊厥性损伤的保护作用

    作者:张慧;杨帆;吴旭;沈德凯;陈浩;吴生兵;昂文平;宋小鸽;解明月

    目的:观察针刺血清对无镁诱导惊厥样放电海马神经元凋亡数及内质网应激伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP 78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)和半胱氨酸蛋白酶蛋白-12(Caspase-12)表达的影响,探讨针刺血清对海马神经元惊厥性损伤的保护机制.方法:SD大鼠腹腔注射戊四唑诱发急性惊厥后分为针刺组及对照组.针刺组取“百会”“大椎”针刺,每日1次,共7d.末次针刺后,针刺组大鼠取血清作为针刺血清,对照组取血清作为非针刺血清.以无镁诱导惊厥样放电的原代培养胎鼠海马神经元为模型,根据对培养10 d海马神经元的不同处理分为正常细胞外液组(简称正常组)、无镁细胞外液组(简称无镁组)、针刺血清组和非针刺血清组.正常组将无血清培养液换成细胞外液培养3h后换液培养,其他各组用无镁细胞外液培养3h后换液培养.4组分别于换液培养2、12、48h3个时间点采用TUNEL法和Western blot法分别检测海马神经元凋亡情况及GRP78、CHOP和Caspase-12蛋白表达情况.结果:正常组仅见少量凋亡海马神经元;无镁组3个时间点凋亡海马神经元数均较正常组明显增加(P<0.01);针刺血清组3个时间点凋亡海马神经元数与无镁组比较明显减少(P<0.05,P<0.01),与非针刺血清组12、48 h比较凋亡海马神经元数明显减少(P<0.01).与正常组比较,无镁组3个时间点海马神经元CHOP和Caspase-12蛋白表达均明显增强(P<0.05,P<0.01),2h时间点海马神经元GRP 78蛋白表达明显增强(P<0.05);与无镁组比较,针刺血清组3个时间点神经元GRP 78蛋白表达均明显增强(P<0.01,P<0.05),12、48 h时间点海马神经元CHOP蛋白表达明显减少(P<0.05,P<0.01),3个时间点神经元Caspase-12蛋白表达均显著减少(P<0.05,P<0.01);与非针刺血清组相比,针刺血清组2、12h时间点海马神经元GRP 78蛋白表达均明显增强(P<0.01,P<0.05),12、48 h时间点海马神经元CHOP蛋白表达明显减少(P<0.05),3个时间点海马神经元Caspase-12蛋白表达均明显减少(P<0.01,P<0.05).结论:针刺血清能明显减少海马神经元凋亡数,上调GRP 78蛋白表达,下调CHOP和Caspase-12蛋白表达,发挥维持内质网稳定性的重要作用.

  • 针刺血清对缺血再灌注模型大鼠海马神经元钙超载的保护作用

    作者:张金铃;郭莹;李瑞午;李翠红;罗明富

    目的:观察针刺血清对体外模拟缺血再灌注后大鼠海马细胞内钙离子的影响,以探讨针灸治疗的体液因素.方法:取新生SD大鼠海马细胞进行原代培养,9~11 d后应用荧光分子探针Fluo-3 AM染色,激光共聚焦扫描显微镜动态扫描观察加入正常大鼠血清和电针"百会""足三里""曲池""三阴交"2周后的血清对海马细胞内钙离子的影响.结果:加入正常血清,钙离子荧光值由461±96变为697±113;加入针刺血清,钙离子荧光值由673±108变为584±103.说明加入针刺血清后,可以降低升高的细胞内钙离子的浓度.结论:针刺血清中存在着某种活性物质可以明显地降低缺血再灌注后细胞内钙离子浓度,从而为针灸治疗疾病作用中体液因素的存在提供了直接依据.

  • 针刺血清配合复方丹参注射液诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化

    作者:马勇;周信;郭杨;顾一煌;王建伟;张亚峰

    目的:探讨针刺血清配合丹参注射液对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和诱导其向软骨细胞分化的影响.方法:20只SD大鼠电针7d,颈总动脉取血制备血清.30只4周龄SD大鼠骨髓中分离BMSCs,取第3代BMSCs分为空白对照组、针刺血清组、丹参注射液组及针药组,给予相应的诱导条件.结果:MTT显示丹参组及针药组均能促进BMSCs增殖(P<0.05),尤以针药组为明显,而针刺组与对照组相比差异无显著性(P>0.05).GAG含量及Ⅱ型胶原免疫组化均显示针药组有显著表达,且较丹参组明显,而针刺组与对照组相比不显著.结论:针刺血清配合复方丹参注射液能有效促进BMSCs增殖和诱导其向软骨细胞分化.

  • 针刺血清对脑源性神经干细胞分化的影响

    作者:王素娥;彭争荣;钟广伟;李炜

    目的:探讨针刺血清对脑源性神经干细胞分化的调控机制.方法:将实验大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、模型针刺血清组,制备各组血清培养脑源性神经干细胞,然后用免疫荧光显微镜观察其分化情况,计数各类分化细胞的百分率.结果:模型对照组神经元分化率较正常对照组显著下降(P<0.05).模型针刺血清组神经元分化率较模型对照组显著提高(P<0.05),与正常对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05).结论:针刺处理可上调脑源性神经干细胞向神经元的分化,促进脑损伤组织的康复.

  • 针刺血清对成骨细胞OPG、RANKL mRNA表达的影响

    作者:王亚军;浪万英;宋亚文;张来举;宋凯

    目的 研究电针刺对去卵巢骨质疏松模型大鼠全身骨密度(BMD)和骨矿物含量(BMC)及其血清对体外培养成骨细胞的骨形成因子骨钙素(OPG)和骨吸收因子(RANKL) mRNA表达的影响.方法 选取SPF级2月龄SD雌性大鼠48只,随机分为药物组、针刺组、模型组和空白组,每组12只.其中空白组不做任何处理,其余36只采用手术方法切除双侧卵巢.各组大鼠于SPF级实验室饲养3个月后,双能x射线骨密度仪检测全身BMD和BMC,确定造模成功.药物组大鼠灌胃服用戊酸雌二醇3个疗程,针刺组大鼠采用针刺后通电治疗3个疗程并服用药物组相同体积的蒸馏水,模型组服用相应体积的蒸馏水,空白组不做任何刺激,常规饲养.随后,水合氯醛麻醉各组大鼠,心脏采血,各组血液分别经滤网过滤、56℃水浴处理后加入体外培养的大鼠成骨细胞培养液中,处理3天后多聚甲醛固定成骨细胞,采用原位杂交法检测成骨细胞内OPG、RANKLmRNA的表达量.结果 与空白组相比,模型组大鼠全身BMD,BMC显著降低,服用药物或针刺处理后,BMD和BMC显著增高,与模型组相比具有显著性差异(P<0.01).各组大鼠血清处理成骨细胞后,空白组骨形成指标OPG mRNA表达量高,模型组低,药物组和针刺组OPG mRNA表达量显著高于模型组(P<0.01).此外,空白组骨吸收指标RANKL mRNA表达量低,模型组高,药物组和针刺组RANKL mRNA表达量显著低于模型组(P<0.01).结论 针刺能有效升高大鼠全身BMD和BMC,同时针刺处理后的大鼠血清具有很好的促进骨形成和抑制骨吸收的能力.

  • 缓慢性心律失常大鼠针刺血清对心肌细胞内Ca2+浓度影响的研究

    作者:张小卿;韩涛;马贤德;荆秦;田国伟

    目的:观察缓慢性心律失常大鼠针剌血清对乳鼠心肌细胞内Ca2+浓度的影响,以探讨针刺治疗心律失常的离子通道机制.方法:取新生SD大鼠心肌细胞进行原代培养,5d后应用荧光分子探针Fluo-3AM染色,应用激光共聚焦技术观察乳鼠心肌细胞加入不同类型血清后Ca2+浓度变化情况.血清制备方法是将SD大鼠随机分为正常组、模型组(注射维拉帕米造模)、针刺组(维拉帕米模型加电针“内关”穴).结果:与空白对照组相比,模型血清组和针刺血清组Ca2+平均荧光强度值均降低,差异有统计学意义(P<0.01);与模型血清组相比,针刺血清组Ca2+平均荧光强度值升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论:针刺可以治疗大鼠缓慢性心律失常,其机制为针刺血清中有某种活性物质可以升高维拉帕米致心律失常大鼠心肌细胞内Ca2+浓度.

  • 快速性心律失常大鼠针刺血清对心肌细胞内Ca2+浓度影响的研究

    作者:马贤德;韩涛;田国伟;荆秦;张小卿

    目的:观察快速性心律失常大鼠针刺血清对乳鼠心肌细胞内Ca2+的影响,以探讨针刺治疗心律失常的离子通道机制.方法:取新生SD大鼠心肌细胞进行原代培养,5d后应用荧光分子探针Fluo-3AM染色,应用激光共聚焦技术分别观察正常大鼠血清、模型大鼠血清和针刺大鼠血清对乳鼠心肌细胞Ca2+浓度变化的影响.结果:与空白对照组相比,模型血清组和针刺血清组Ca2+平均荧光强度值均增加,差异有统计学意义(P<0.01);与模型血清组相比,针刺血清组Ca2+平均荧光强度值降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:快速性心律失常大鼠血清中有某种活性物质可以增加心肌细胞内Ca2+浓度;而针刺降低了血清中该物质含量,从而起到治疗快速性心律失常的作用.

  • 针刺血清对培养海马神经元内质网活性的上调作用

    作者:张金铃;李瑞午;郭莹;孙海舒;青雪梅;李翠红;罗明富

    目的:通过采用D-273内质网荧光分子探针来观察针刺血清调节内质网活性的作用,从而探讨针刺作用的细胞分子水平机理.方法:选用原代培养的9~11天的新生SD大鼠海马细胞,应用激光共聚焦显微镜动态扫描观察加入正常大鼠血清和电针“百会”、“足三里”、“曲池”、“三阴交”2周后的血清对培养的正常和模拟缺血缺氧海马神经元内质网活性的影响.结果:加入正常血清后对照和模型组海马神经元内质网荧光值均下降,而加入针刺血清后下降的荧光强度变化值减小.结论:针刺血清阻抑了神经元内质网活性的下降,显示针刺血清可能有提高海马神经元的内质网活性效应.

  • 针刺抗哮喘大鼠血清差异组份的色谱分析

    作者:王宇;马淑兰;崔建美;杨永清;金明明

    目的 探索针刺抗哮喘大鼠血清差异组份研究方法.方法 用色谱技术进行针刺抗哮喘大鼠血清的组份差异分析.结果 表明针刺血清中存在特异性成份.结论 色谱技术可用于针刺血清中特异成份的初步筛选.

    关键词: 哮喘 针刺血清 色谱
  • 针灸血清作用的研究概况

    作者:赵英侠;王静;秦逸人;余安胜

    目的综述自1998年针灸学者提出针灸血清的概念至今7年来有关针刺血清和艾灸血清的研究概况.方法对针刺血清抗哮喘作用和体液调节功能、针刺血清和艾灸血清调节免疫功能,以及艾灸血清抗衰老作用等的研究加以综合分析.结果针刺血清具有抗哮喘和降低神经细胞内钙离子浓度的作用,针刺血清和艾灸血清可以调节免疫功能,艾灸血清具有抗衰老作用.结论针灸血清具有与针灸相似的作用,其作用机理有待进一步探讨.

  • 过敏性哮喘大鼠针刺血清的抗哮喘作用

    作者:杨永清;崔龙萍;马淑兰;陈汉平;王宇;金明明

    目的和方法研究了过敏性哮喘大鼠经针刺治疗后的血清(针刺血清)的抗哮喘作用.结果过敏性哮喘大鼠经针刺治疗后的血清可明显降低大鼠和肾上腺切除大鼠过敏性哮喘模型的气道阻力与外周血嗜酸粒细胞计数,针刺血清注射与针刺治疗的作用之间无明显差别.结论针刺血清具有与针刺类似的抗哮喘作用.但针刺血清对肺顺应性的影响与针刺治疗存在某些差异.

  • 足阳明经穴针刺血清对家兔离体胃窦平滑肌细胞内钙离子浓度影响的实验研究

    作者:邓元江;易受乡;严洁;林亚平;郭晖;刘卫英;向志勇;吴芳

    目的:观察足阳明经穴针刺血清对家兔离体胃窦平滑肌细胞内钙离子(Ca2+)浓度的影响.方法:将45只家兔随机分为5组各9只.生理盐水组,耳缘静脉滴注0.9%NaCl溶液;阿托品模型组,耳缘静脉滴注以生理盐水配制的2.5mg/100ml的阿托品;足阳明经穴组,造模并电针双侧足三里、天枢、梁门、四白穴;足少阳经穴组,造模并电针双侧阳陵泉、带脉、日月、阳白穴;足太阳经穴组,造模并电针双侧承筋、背下点、背上点、攒竹穴.分组处理后,颈动脉采血制备血清.另取正常家兔10只,制备正常兔胃窦平滑肌细胞悬液.取各组1:2稀释的血清与同体积的正常兔胃窦平滑肌细胞悬液作用,以荧光分光光度计测定细胞内Ca2+浓度.结果:阿托品模型组Ca2+浓度低于生理盐水组,差异有显著性意义(P<0.05);足阳明经穴组Ca2+浓度明显高于生理盐水组、阿托品模型组、足少阳经穴组、足太阳经穴组,差异均有非常显著性意义(P<0.01);足少阳经穴组与足太阳经穴组比较,差异无显著性意义(P>0.05).结论:足阳明经穴针刺血清使离体胃窦平滑肌细胞内Ca2+浓度升高具有经脉的相对特异性.

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