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  • 六经头痛片质量标准

    作者:张力;张海;李钦青;阎文斌;刘必旺;刘亚明

    目的:研究六经头痛片以提高其质量标准.方法:采用薄层色谱法对制剂中白芷、葛根进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定制剂中葛根素含量,岛津C18柱(4.6 mm×250mm,5μm),流速1 mL·min-,流动相甲醇-0.025 mol·L-1磷酸溶液(20∶ 80),柱温30℃,检测波长250 nm.结果:在薄层色谱中均可检出白芷、葛根的特征斑点;葛根素在0.042 ~0.378 μg线性关系良好(r =0.999 9),回收率98.368%(RSD 1.87%).结论:方法简便可行、重复性好,能有效控制该制剂的质量.

  • 基于GC-MS的六经头痛片挥发性化学成分研究

    作者:张晓燕;龚苏晓;游飞祥;王月红;韩彦琪;许浚;陈常青;张铁军

    目的 通过GC-MS法分析六经头痛片中挥发性成分.方法 利用水蒸气蒸馏法提取六经头痛片挥发油,运用GC-MS联用技术对提取物进行成分分析,谱库检索结合药材色谱峰归属对六经头痛片挥发油进行定性分析,应用峰面积百分比法计算相对量.结果 从六经头痛片挥发油中共鉴定出102个成分,其中薄荷酮(11.887%)相对量高,另对各色谱峰进行药材归属,其中87个色谱峰已归属至药材,占已鉴定总峰个数的85.3%.结论 通过GC-MS法能够快速有效地分析六经头痛片中的挥发性成分,为六经头痛片药效成分的研究和质量控制提供参考.

  • 六经头痛片中辛夷和细辛GC指纹图谱研究

    作者:张晓燕;龚苏晓;王磊;张洪兵;朱晓丹;韩彦琪;许浚;陈常青;张铁军

    目的 建立六经头痛片原料药材辛夷和细辛的GC指纹图谱,为六经头痛片质量评价提供依据.方法 采用Aglient DB-WAX(20 m×0.18 mm,180 μm)气相色谱柱,优化程序升温条件,测定11批辛夷、细辛原料药材,利用SPSS聚类分析和中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)建立辛夷药材指纹图谱,并通过Agilent 7890A-5975C气-质联用仪对共有峰进行指认.结果 通过11批样品的测定和SPSS聚类分析将10批辛夷药材聚为一类,并建立辛夷药材GC指纹图谱,相似度均在0.9以上,共得22个共有峰,其中归属至全方的成分为14个,药材独有成分8个;将10批细辛药材聚为一类,并建立细辛药材GC指纹图谱,相似度均在0.9以上,共得11个共有峰,其中归属至全方的成分为4个,药材独有成分为7个.结论 本方法专属性强、准确性高、重复性良好,可为辛夷、细辛药材的质量控制提供依据.

  • 基于HPLC-Q-TOF/MS的六经头痛片化学成分分析

    作者:游飞祥;袁雪海;许浚;朱晓丹;张洪兵;李冲冲;韩彦琪;龚苏晓;陈常青;张铁军

    目的 运用高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术(HPLC-Q-TOF/MS),对六经头痛片中的化学成分进行分析鉴定.方法 采用Diarnonsil C18 (250 mm×4.6 μm,5 μm)反相HPLC梯度洗脱法分离各主要成分,电喷雾电离源正负离子模式下对色谱流出物进行高分辨四级杆飞行时间串联质谱检测,对各主要色谱峰进行归属;同时结合化合物准确相对分子质量、质谱碎片离子信息及相关文献数据分析鉴定化合物.结果 通过质谱裂解规律结合自建的8味组方药材的化学成分库信息,共鉴定出95个化合物,主要包括异黄酮类、香豆素类、环烯醚萜类和苯酞类等成分,并对化合物的药材来源进行了归属.结论 采用HPLC-Q-TOF/MS联用技术比较全面地阐明了六经头痛片的化学组成,为其药效物质基础研究和质量控制提供了参考.

  • 六经头痛片治疗大鼠偏头痛的作用及机制研究

    作者:胡金芳;付合明;袁雪海;霍璇;安梦培;冯玥;申秀萍

    目的 探讨六经头痛片治疗偏头痛的作用及可能的机制.方法 通过SC硝酸甘油复制大鼠偏头痛模型,观察大鼠搔头次数和搔头反应潜伏期;采用酶联免疫实验(ELISA)检测脑组织中5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)水平及血清中β-内啡肽(β-EP)、降钙素基因相关肽(CGRP)、内皮素(ET)的量,采用生化法测定血清中一氧化氮(NO)量及一氧化氮合酶(NOS)活性.结果 模型组大鼠在sc硝酸甘油后1~3 min即出现搔头,且次数频繁.与模型组比较,六经头痛片1.4、0.7 g/kg组可显著减少偏头痛模型大鼠的搔头次数(P<0.001),并呈剂量相关性,能够明显延长大鼠搔头反应的潜伏期(P<0.01);六经头痛片1.4、0.7 g/kg组可显著升高模型大鼠血清β-EP、ET及脑内DA的量,显著降低血清CGRP的量和NOS活性,六经头痛片1.4 g/kg组可明显降低血清NO的量,对脑内5-HT、NE的量基本无影响.结论 六经头痛片有显著的治疗偏头痛作用,可以升高血清β-EP、ET、DA的量,降低CGRP、NO的量及NOS活性,其作用机制与收缩血管及中枢镇痛有关.

  • 六经头痛片HPLC指纹图谱建立及多指标成分定量测定研究

    作者:王月红;游飞祥;王磊;许浚;袁雪海;龚苏晓;朱晓丹;韩彦琪;张洪兵;张铁军;陈常青

    目的 建立六经头痛片(LTT) HPLC指纹图谱,并采用波长切换技术同时定量测定3'-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、特女贞苷和大豆苷元,为评价UT质量提供依据.方法 采用HPLC法,以Diamonsil C18(250 rnm× 4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水为流动相,分别建立LTT高极性和低极性部分指纹图谱,并采用波长切换技术同时测定LTT中3'-羟基葛根素、葛根素、大豆苷、特女贞苷和大豆苷元5种指标性成分量.结果 分别建立了11批LTT高、低极性部分指纹图谱,其相似度均大于0.90;低极性指纹谱确定了16个共有峰,对其中12个共有峰进行了归属,11、12、13号峰来源于白芷,1、2、3、7号峰来源于葛根,8号峰来源于女贞子,5、6号峰来源于川芎,15号峰来源于藁本,4号峰为川芎和藁本的共有峰,对其中7个共有峰经对照品指认,分别为葛根素(1号峰)、3'-甲氧基葛根素(2号峰)、大豆苷(3号峰)、阿魏酸(4号峰)、大豆苷元(7号峰)、欧前胡素(11号峰)和异欧前胡素(13号峰);高极性指纹图谱确定了10个共有峰,其中2~9号峰来源于葛根,1、10号峰来源于女贞子,对其中5个共有峰经对照品指认,分别为3L羟基葛根素(2号峰)、葛根素(3号峰)、3'-甲氧基葛根素(4号峰)、大豆苷(7号峰)和特女贞苷(10号峰).多成分定量测定中,3'-羟基葛根素在71.60~716.00 ng (r=0.999 1)、葛根素在407.78~4 077.80 ng (r=0.999 4)、大豆苷在90.72~907.20 ng (r=0.999 9)、特女贞苷在95.80~958.00 ng (r=0.999 1)、大豆苷元在21.98~219.80 ng (r=0.999 9)线性关系良好,平均加样回收率和相应的RSD分别为101.1%、1.38%,97.8%、0.72%,99.1%、0.75%,97.8%、2.75%,98.7%、0.70%;10批样品中3'-羟基葛根素量为3.08~3.84 mg/mL、葛根素17.71~21.24 mg/mL、大豆苷3.51~4.71 mg/mL、特女贞苷1.40~5.69 mg/mL、大豆苷元0.66~0.86 mg/mL.结论 该法稳定可靠、重复性好,通过HPLC指纹图谱结合多指标定量测定方法较全面地反映了LTT内在质量,为其质量控制提供了可靠的科学依据.

  • 六经头痛片的二次开发研究

    作者:张铁军;申秀萍;王磊;许浚;胡金芳;袁雪海;龚苏晓;韩彦琪;张洪兵

    中药大品种二次开发研究是中药创新研究的重要内容,是继承和发展中医药理论,突破制约中医药理论和中药产业发展瓶颈的重要路径.以六经头痛片为研究对象,进行系统的二次开发研究,通过药材、成品以及口服入血成分的辨识和表征,阐释了六经头痛片的化学物质组,进一步通过G-蛋白偶联受体结合实验以及网络药理学分析,筛选和明确了主要药效物质基础;通过与头痛相关的整体及动物模型、离体器官、细胞、相关功能受体以及网络药理学研究,揭示六经头痛片的作用机制;通过拆方研究并与同类中药以及化学药比较,阐释该药的组方特点和配伍规律,提炼和发现其作用特点、比较优势和临床核心价值;通过从化学物质组的辨识与指认、成品质量信息的各原料药材的来源与归属、多指标成分的定量测定、指纹图谱共有模式的建立以及多批样品测定等方面进行系统研究,建立六经头痛片的药材与成品的质量控制体系,对原有的质量标准进行了全面的提升,保证产品的质量均一、稳定、可控.为该品种的临床推广应用和指导临床实践提供了重要的理论和实验依据,并为其他中药大品种的二次开发研究提供了可参考的思路与模式.

  • 六经头痛片对离体大鼠主动脉收缩及三叉神经降钙素基因相关肽表达的影响

    作者:邸志权;安梦培;朱晓丹;冯玥;霍璇;付合明;胡金芳;申秀萍

    目的 观察六经头痛片对大鼠离体血管平滑肌收缩活动及三叉神经降钙素基因相关肽(CGRP)表达的影响.方法 制备大鼠离体主动脉血管环,采用麦氏浴槽法观察六经头痛片对血管平滑肌收缩活动的影响;培养三叉神经节组织,观察六经头痛片对三叉神经节CGRP表达的影响.结果 六经头痛片可以减弱KC1及去甲肾上腺素(NE)引起的胸主动脉环收缩反应,对KCI收缩的半数抑制浓度(IC50)为0.97 mg/mL,对NE收缩的IC50为0.55 mg/mL.而且,六经头痛片在1.4、0.14mg/mL时可明显减少离体培养24、48 h后三叉神经节CGRP阳性细胞的数量(P<0.05).结论 六经头痛片既可以对抗血管平滑肌的收缩,又可以降低三叉神经具有扩张血管作用的CGRP的量,说明六经头痛片具有稳定血管舒缩的作用.

  • 基于网络药理学的六经头痛片治疗偏头痛的作用机制探讨

    作者:董亚楠;韩彦琪;王磊;许浚;袁雪海;龚苏晓;张洪兵;朱晓丹;张铁军

    目的 对六经头痛片进行网络药理学研究,探究其治疗偏头痛的作用机制.方法 选取六经头痛片中的18个入血及活性成分为研究对象,依据反向药效团匹配方法预测化合物的作用靶点,借助MAS 3.0生物分子功能软件及京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库获取相关通路并进行关联分析,后利用Cytoscape软件构建六经头痛片“化合物-靶点-通路-疾病”的网络药理图.结果 实验表明,18个化合物可通过72个作用靶标作用于88条通路,其中36个蛋白靶点和22条通路与偏头痛相关.结论 六经头痛片可能通过干预与血管内稳态、炎症、神经中枢、免疫及激素调节等相关通路,起到疏风活络、利窍止痛的作用从而治疗偏头痛.

  • 六经头痛片镇痛作用特点与比较优势研究

    作者:冯玥;朱振娜;王磊;安梦培;胡金芳;申秀萍

    目的 通过不同镇痛药效学模型、实验性偏头痛模型及气滞血瘀模型,与同类药正天丸对比,探讨六经头痛片的镇痛作用特点及优势.方法 通过小鼠热板实验、醋酸扭体实验,观察六经头痛片对温热刺激、化学刺激引起疼痛的影响;采用硝酸甘油诱发实验性大鼠偏头痛模型,观察其对搔头反应潜伏期及搔头次数的影响,检测大鼠血清一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及β-内啡肽(β-EP)水平;采用sc盐酸肾上腺素联合冰水浴的方法制备气滞血瘀模型,观察其对脑血流速率及血液流变学指旨标的影响.结果 六经头痛片可显著增加热板实验小鼠痛阈值,减少醋酸引起的小鼠扭体次数;显著延长偏头痛模型大鼠搔头反应的潜伏期,减少搔头次数,显著降低偏头痛大鼠血清NO、NOS水平,升高β-EP水平;可显著升高气滞血瘀模型大鼠脑血流速率,降低全血黏度及血浆黏度.结论 六经头痛片对中枢疼痛、炎性疼痛及实验性偏头痛模型具有显著的镇痛作用,对气滞血瘀模型具有显著的活血化瘀作用,具有起效早,药效持续时间长的特点.与同类药正天丸比较,镇痛作用相当,但起效快,多靶点.

  • 基于HPLC-Q/TOF-MS的六经头痛片血中移行成分研究

    作者:王月红;王磊;张洪兵;许浚;袁雪海;韩彦琪;龚苏晓;张铁军

    目的 对中药复方制剂六经头痛片进行血清药物化学研究,为确定六经头痛片药效物质成分奠定基础.方法 采用HPLC-Q/TOF-MS技术,对ig给予六经头痛片后的大鼠血浆进行分析.结果 综合分析六经头痛片体外样品、给药组血浆、空白组血浆的总离子流图、提取离子流图及质谱图等信息,鉴定了含药血浆中出现的46个移行成分,包括葛根素等24个吸收原型成分及22个代谢产物.结论 血浆中检测到的吸收原型成分和代谢产物,可能是六经头痛片的真正活性成分,为明确六经头痛片药效物质基础提供了科学依据.

  • HPLC法测定六经头痛片中的胡薄荷酮

    作者:周军;赵晨;王杰

    目的:建立测定六经头痛片中胡薄荷酮的高效液相色谱法。方法采用Agilent Zorbax SB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈–0.05%磷酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱;检测波长256 nm;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;进样量10μL。结果胡薄荷酮在0.4423~1105.8 ng与峰面积线性良好(r=0.9999),平均回收率为97.59%,RSD值为1.54%(n=6)。结论建立的方法专属性强、准确、快速,可有效地控制六经头痛片的质量。

  • 固相萃取-高效液相色谱法测定六经头痛片中马兜铃酸Ⅰ的含量

    作者:黄可婧;祝小静

    目的:建立六经头痛片中马兜铃酸Ⅰ的限量检查法.方法:通过提取、固相萃取对制剂中马兜铃酸Ⅰ进行提取纯化,应用高效液相色谱法对其进行检测.色谱条件:采用Phenomenex C18(250 mm× 4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-1%冰醋酸(38: 62),检测波长为250 nm.结果:马兜铃酸Ⅰ在0.199 6~0.997 9μg/ml范围内线性关系良好(r =0.999 7).检测限为0.997 9 ng、定量限为1.996 ng;平均回收率为99.18%,RSD为1.47%.结论:所建立的方法简便快捷,结果准确可靠,可作为控制六经头痛片安全性的检测方法.

  • HPLC法同时测定六经头痛片中4种成分

    作者:董虹玲;李钦青;柴金苗;贺文彬;李秀英

    目的 建立HPLC法同时测定六经头痛片(白芷、辛夷、藁本等)中4种成分的含有量.方法 该药物30%乙醇提取液的分析采用Waters C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-4%乙酸为流动相,梯度洗脱;检测波长320 nm;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃.结果 葛根素、阿魏酸、欧前胡素、异欧前胡素分别在60.6~303 μg/mL(r =0.999 9)、1.59~7.95 μg/mL (r=0.9999)、1.57~7.85 μg/mL (r=0.999 9)、0.752 5~3.762 5 μg/mL (r=0.999 7)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率(RSD)分别为97.75%(1.7%)、97.68%(2.3%)、97.94%(1.0%)、98.29%(1.6%).结论 该方法稳定可靠,可用于六经头痛片的质量控制.

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