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金雀异黄素对体外小鼠肢芽软骨发育的影响
植物雌激素在结构上与天然及人工合成的雌激素、抗雌激素相似.人类食物中大豆及其制品中植物雌激素含量较高,尤以异黄酮类占优势,金雀异黄素为其主要成分,而且活性也强.本研究以金雀异黄素与第12天胎鼠肢芽作培养,观察其对软骨生长发育的影响,为深入研究植物雌激素与骨代谢的关系提供依据.
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大豆异黄酮对大鼠内分泌干扰作用研究
目的 探索大豆异黄酮(SIF)经口摄入后,在体内的抗雄激素作用机制和剂量-反应关系.方法 选用4～5周雄性SD大鼠做HERSHBERGER试验,分别经灌胃给与0.2、0.5、1.5和4.5 g/kg BW的SIF,以3.0 mg/kg Bw的氟他胺为阳性对照,0.4 mg/kg睾酮对照(TP组)和空白对照组,除空白对照其余各组均给予睾酮,所有剂量组连续灌胃10天.试验结束称量腹侧前列腺、精囊和凝结腺、肛提肌加球海绵体肌、阴茎头和尿道球腺重量,并测定促黄体激素和睾酮.结果 和TP组比较,大豆异黄酮0.50,1.50和4.5 g/kg BW剂量组的体重和增重明显降低(P<0.05),1.50和4.5 g/kg BW剂量组的阴茎头/肾脏和尿道球腺,肾脏的比值降低(P<0.05),4.5 g/kg BW剂量组的肛提肌/肾脏比值降低(P<0.05),1.5 g/kg BW组的LH/T比值升高(P<0.05).结论 大剂量(1.5 g/kg BW和更高)的大豆异黄酮经口摄入产生抗雄激素作用,这种抗雄激素作用可能是一种间接效应.
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大豆异黄酮加钙复合剂对卵巢切除大鼠骨密度和骨钙含量的影响
利用卵巢切除大鼠模型,研究大豆异黄酮+钙复合剂对骨密度和骨钙含量的影响.卵巢切除大鼠分为3个剂量组,分别灌胃给予6.7 mg/kg BW大豆异黄酮+16.7 mg/kg BW钙(低剂量组)、13.3 mg/kg BW大豆异黄酮+33.3 mg/kg BW钙(中剂量组)和40.0 mg/kg BW大豆异黄酮+100.0 mg/kg BW钙(高剂量组),同时设阴性对照组和假手术组.12周后测定股骨骨密度(MBD)、骨矿含量(BMC)和骨钙含量.结果发现假手术组、中剂量组和高剂量组大鼠股骨干骺端BMD、BMC和股骨钙含量显著高于阴性对照组(P<0.05),表明大豆异黄酮+钙复合剂能增加卵巢切除大鼠的骨密度,对雌激素缺乏所诱发的骨丢失具有抑制作用.
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不同水平的大豆异黄酮拮抗β淀粉样肽介导的大鼠空间学习记忆损伤作用
目的 研究不同剂量大豆异黄酮(SIF)对β淀粉样肤1-42(Aβ1-42)介导的空间学习记忆损伤大鼠的神经保护作用,并探讨其作用机制.方法 按体重将3月龄雄性Wistar大鼠随机分为5组:对照组、Aβ模型组、SIF低剂量组、SIF中剂量组、SIF高剂量组每组12只,SIF灌胃剂量分别为每天每公斤体重40、80和160 mg,对照组和模型组灌胃等量的0.5%CMC-Na,连续灌胃14 d后,模型组和实验组大鼠双侧海马CA1区注射Aβ1-42,制备大鼠学习记忆损伤模型.对照组注射等量生理盐水,于术后7 d,Morris水迷宫检测学习记忆能力;术后14 d,股动脉采血,断头处死,测定血清AOC、MDA、GSH-Px等抗氧化指标和脑矿物元素钙、镁、锰、铁、锌和铜的水平.结果 1.与Aβ模型组比,SIF各剂量组潜伏期和总路程明显缩短,在平台象限距离的百分比明显增高(P<0.05),SIF高剂量组潜伏期比低剂量组缩短明显(P<0.05);2.与Aβ模型组比.SIF各剂量组血清AOC水平和GSH-Px活力显著增高,MDA水平显著降低(P<0.05),SIF中和高剂量组血清AOC水平高于低剂量组,SIF高剂量组MDA水平低于低剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05);3.与邸模型组比,SIF低、中、高剂量组锌含量和铜/锌值差异均有统计学意义(P<0.05),SIF中、高剂量组铜含量显著减少(P<0.05),并且SIF高剂量组铜含量和铜/锌值低于低剂量组.结论 SIF可有效改善大鼠的空间学习记忆能力,可能是通过改善机体氧化还原状态,提高抗氧化水平,调节脑内矿物元素的平衡,进而拮抗Aβ介导的神经毒性,发挥其神经保护作用,并且在一定范围内表现出剂量-反应关系.
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大豆异黄酮和双酚A联合暴露对雌性大鼠不同组织雌激素受体表达的影响
目的 研究大豆异黄酮和双酚A哺乳期联合暴露对sD雌性大鼠的子宫增生效应及其对下丘脑-垂体-卵巢轴雌激素受体(ERn和ERS)表达的影响.方法 将母鼠及其仔鼠随机分至4组,即阴性对照组、大豆异黄酮组(每公斤体重150 mg,i.g.)、双酚A组(每公斤体重150 mg,i.g.)、联合暴露组(每公斤体重150 mg大豆异黄酮+每公斤体重150 mg双酚A,i.g.).母鼠在产后第5至11天给予受试物,仔鼠在出生后5至11 d(PND5-PND11)通过母乳暴露受试物.在PND12处死部分雌性仔鼠.刺余雌性仔鼠观察阴门开口时间和动情周期,并于PND70处死.剥离子宫并称重,病理学检查;利用Western blol方法 测定下丘脑、垂体、卵巢和子宫的ERα和ERβ表达.结果 与阴性对照组比较,PND12时,大豆异黄酮组和双酚A组大鼠子宫体重比显著增加(P<0.05),联合暴露组子宫体重比亦显著增加(P<0.05),但其幅度略低于大豆异黄酮组和双酚A组.PND70时,各组大鼠的子宫体重比差异无统计学意义(P>0.05).大豆异黄酮组、双酚A组和联合暴露组的阴门开口时间和动情周期与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).在PND12和PND70时,大豆异黄酮组、双酚A组和联合暴露组大鼠下丘脑、垂体、卵巢和子宫的ERαERβ表达有部分增强或减弱.结论 哺乳期大鼠大豆异黄酮和双酚A联合暴露时,可促进雌性仔鼠的子宫发育,但两者并未表现出协同作用;这种子宫增生效应在生命后期消失.大豆异黄酮和双酚A的子宫效应可能与对下丘脑-垂体-卵巢轴和子宫组织中ERα和ERβ表达的调节有关.
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金雀异黄素对iNOS表达影响与抑制胃癌细胞增殖作用研究
为研究金雀异黄素对人胃腺癌细胞SGC-7901增殖、DNA合成、一氧化氮产生量、一氧化氮合酶活性及其对诱导型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)基因表达的影响,应用MTT、 3H-TdR掺入、DNA琼脂糖电泳、分光光度法、免疫组化及RT-PCR方法,研究Gen抑制癌细胞生长的机制.结果表明Gen抑制SGC-7901细胞的增殖、DNA合成,诱导细胞凋亡,并可显著诱导 iNOS mRNA转录、增加iNOS蛋白表达,促进一氧化氮产生,提高一氧化氮合酶活性.为将Gen应用于胃腺癌的化学防治提供了实验依据.
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金雀异黄素诱导人胃癌细胞凋亡的形态学研究
为研究金雀异黄素对人胃癌细胞凋亡的诱导作用，采用光镜、电镜观察金雀异黄素(Genistein,Gen)抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖的形态学改变。结果显示：经Gen 10 μg/mL作用48 h后，SGC-7901细胞出现典型的凋亡形态。相差显微镜下表现为细胞变圆、体积缩小；荧光显微镜观察凋亡细胞多为核亮染呈致密斑块、碎片状；电镜下可见染色质浓集、核固缩。结果证实：Gen具有诱导人胃癌细胞凋亡的作用。
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紫外分光光度法测定大豆总异黄酮的含量
为建立一种检测食物中大豆异黄酮含量的快速分析方法,以大豆中的活性成分金雀异黄素为标准品,在其紫外大吸收峰259 nm处测定大孔吸附树脂法配合溶剂法提取制得的大豆异黄酮试样的含量,大豆异黄酮试样中总异黄酮的含量以金雀异黄素计算为38.7%.平均加样回收率为99.86%,相对标准偏差为2.6%,方法简便,重现性好,可作为检测大豆异黄酮含量的一种手段.
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大豆异黄酮复合物缓解体力疲劳作用的实验研究
目的研究大豆异黄酮复合物缓解体力疲劳的作用.方法雄性ICR小鼠160只,体重18～22 g,按体重随机分成对照组和0.13、0.27、0.40 g/kg BW 3个剂量组,每组40只.小鼠经口灌胃给予大豆异黄酮复合物30 d后,分别测定负重游泳时间、血清尿素氮、血乳酸及肝糖原含量.结果大豆异黄酮复合物低、中、高剂量组小鼠负重游泳时间(4.31、4.41、4.86 min)与对照组(2.98 min)相比均明显延长,小鼠游泳前后血乳酸测定曲线下的面积(21 815.9、22 266.2、20 572.4)明显低于对照组(24 699.2),中剂量组血清尿素氮含量(7.46 mmol/L)低于对照组(8.76 mmol/L),中、高剂量组小鼠静息状态肝糖原水平(30.0、30.7 mg/g)明显高于对照组(23.3 mg/g).结论大豆异黄酮复合物具有缓解体力疲劳的作用.
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HPLC法测定食品中金雀异黄素
为保证保健食品的质量,建立了测定食品中金雀异黄素的HPLC方法.试样以乙醚脱脂,甲醇+水(80+20,体积分数)超声提取30 min,定容后过0.45 μm滤膜,上250.0 mm×4.6 mm、粒径10 μm的C18柱,甲醇+醋酸铵(0.050 mol/L,pH 4.6)作流动相,二极管阵列检测器测定.染料木苷、黄豆苷、黄豆苷元对测定不产生干扰.方法回收率85%～110%,相对标准偏差2%～8%,低检出限为0.10 μg.本方法适用于保健食品中金雀异黄素的测定.
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大豆异黄酮对不同发育期雌性大鼠生殖系统毒性作用的研究
为研究不同发育期雌性大鼠暴露于大豆异黄酮(soy isoflavones,SIF)对生殖系统的影响,并确定敏感期及有害作用剂量,在孕鼠妊娠第12～18天灌胃给予SIF(胎儿期暴露),母鼠分别在仔鼠出生后第5～10天和第15～20天灌胃给予SIF(新生儿期暴露和婴儿期暴露),仔鼠在出生后第25～30天灌胃给予SIF(青春前期暴露).SIF的剂量分别为0(对照)、10、50、150、150、200 mg/kg BW.观察雌性仔鼠生殖系统发育指标的近期和远期(出生后70 d)改变.对近期的影响:(1)胎儿期暴露:100、150、200 mg/kg BW SIF组肛殖距(anogenital distance,AGD)显著增大,200 mg/kg BW SIF组阴门开张时间(Vaginal opening,VO)提前,150、200 mg/kg BW SIF组出生后第14天的卵巢/体重比显著增加;(2)新生儿期暴露:150、200 mg/kg BW SIF组出生后第11天的子宫/体重比和卵巢/体重比显著增加,200 mg/kg BW SIF组动情周期延长;(3)婴儿期和青春前期暴露于SIF对生殖系统发育各指标无明显影响.对远期的影响:胎儿期、新生儿期、婴儿期和青春前期暴露于SIF对出生后70天的各指标亦无明显影响.150 mg/kg BW SIF可对仔代雌性大鼠表现出明显的不良作用,胎儿期和新生儿期是大豆异黄酮生殖毒性的两个敏感期.
关键词： 豆科 异黄酮类 大鼠 Sprague-Dawley 毒性试验 -
大豆异黄酮抗大鼠T细胞衰老及抗氧化作用研究
为研究大豆异黄酮抗大鼠T细胞衰老和抗氧化作用,选用老龄SD大鼠,观察大豆异黄酮对T细胞CD28表达水平及肝脏氧化应激水平的影响.实验设立青年对照组、老龄对照组和大豆异黄酮0.33、0.99 g/kg BW剂量组,其中剂量组按剂量灌胃给予大豆异黄酮,对照组灌胃给予等量纯净水.4周后,分别制备肝细胞匀浆和肝单细胞悬液,用硫代巴比妥酸(TBA)比色法测定肝匀浆中丙二醛(MDA)含量,分光光度法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力,用流式细胞仪结合双氢罗丹明123(Rh123)和双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(H2DCFDA)染色法分别检测肝细胞线粒体膜电位(MMP)及活性氧(ROS)水平;另取外周血测定T淋巴细胞表面CD8/CD28表达情况. 结果显示:青年对照组及大豆异黄酮剂量组的肝组织MDA含量均较老年对照组低,而SOD活力及肝细胞MMP水平均较老年对照组高(P<0.05);大豆异黄酮剂量组肝细胞内的ROS水平较老年对照组低(P<0.01).老年对照组大鼠外周血CD28+和CD28+/CD8+T细胞比例低于青年对照组,而CD28-/CD8+T细胞比例高于青年对照组,给予大豆异黄酮样品组三者比例均介于两对照组之间.提示衰老大鼠外周血T细胞CD28表达降低,肝细胞线粒体膜稳定性下降,氧自由基清除能力下降,过氧化脂质分解的终产物增多;大豆异黄酮可提高老龄大鼠T细胞CD28表达水平,增加肝细胞抗氧化酶活性,稳定线粒体膜电位,减少活性氧产生.
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发酵豆粕中大豆异黄酮的超声波提取工艺
为提高大豆异黄酮的提取率,以发酵豆粕为原料,采用超声波提取技术,通过单因素实验及正交实验对大豆异黄酮提取工艺中提取溶剂、料液比、时间、次数等因素进行探讨.结果表明:采用80%乙醇为提取剂,料液比1 g∶15ml,提取时间20 min,提取2次,大豆异黄酮提取率高,可达到0.548%.超声波提取发酵豆粕中大豆异黄酮是一种较为理想的方法.
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生物提取物防治骨质疏松的研究进展
骨质疏松是老年人和绝经妇女的常见病和多发病.近年来许多研究发现多种动物、植物体内的提取物(乳源活性肽、大豆异黄酮、白藜芦醇和海洋鱼寡肽等)可以起到防止骨丢失的功效,为此对近期生物提取物的研究进展进行了综述.
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雌激素和大豆异黄酮在细胞水平上对钙代谢的调节
为了解雌激素和大豆异黄酮对钙代谢的影响,对雌激素和大豆异黄酮对小肠细胞钙吸收的影响和对成骨细胞、破骨细胞钙利用的影响等方面进行了综述.
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让你精力旺盛的好食物③
(接上期)11.黑豆中医的许多典籍中都记载黑豆可以驻颜、明目、乌发.而现代医学分析指出,黑豆含有蛋白质、膳食纤维、维生素B族、维生素E、钙、磷、铁、异黄酮类、大豆皂苷、花青素及多种不饱和脂肪酸等营养素,其中异黄酮类的含量甚至比黄豆还高.
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大豆异黄酮对骨质疏松症动物模型骨代谢及形态学的影响
目的 研究大豆异黄酮(SI)对骨质疏松症动物模型骨代谢及形态学的影响.方法 70只雌性SD大鼠按血清总胆固醇(TC)水平用随机数字表法分为7组:高脂组、雌激素组、SI低、中、高剂量组,假手术与正常对照组,前5组摘除双侧卵巢.除正常对照组外,其余各组给予高脂饲料饲养.每周称重1次,灌胃给予受试物,干预周期为12周,分别于去卵巢、给药4、8周、处死前抽取尾静脉血,实验结束后取内脏及骨骼标本,分别测定血清碱性磷酸酶(AKP)活性及骨密度等指标,共63只大鼠完成实验.结果 去卵巢后雌激素与SI干预可恢复AKP活性,高剂量SI干预对维持大鼠骨密度的作用与雌激素相似并能缓解因去卵巢造成骨丢失的显微镜像、维护心肌细胞肌微丝与线粒体超微结构的完整性,全视野下以雌激素组、高剂量干预组与正常组结构为接近,高脂组显微结构损坏明显.结论 SI对去卵巢大鼠的骨代谢及形态学存在一定影响,高剂量干预可使去卵巢大鼠血清AKP酶活性恢复、逆转因去势造成的骨密度下降、维持血清钙、磷水平,低剂量效果不显著.
关键词： 异黄酮类 骨密度 大鼠 Sprague-Dawley -
叶酸配伍大豆异黄酮对大鼠神经管畸形的影响
目的研究不同剂量叶酸配伍大豆异黄酮对神经管畸形孕鼠体内过氧化状态的影响.方法采用正交设计方案来观察叶酸和大豆异黄酮在不同的配伍干预下对环磷酰胺致神经管畸形(脑膨出为主)的孕鼠体内重要的抗氧化物质谷胱甘肽及其酶以及一些与抗氧化相关元素水平的影响.将100只鼠龄2.5～3个月的孕鼠随机分为对照组、模型组、配伍干预组和单独干预组.孕20 d时,处理孕鼠并进行血中谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶及元素硒、锰、铁抗氧化相关指标的检测;剖腹取出胎鼠,统计其畸形发生率.结果叶酸配伍大豆异黄酮的交互作用对血中谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶及元素硒、锰、铁等抗氧化相关指标的水平均产生了影响,且两者之间的配伍关系对抗氧化相关指标的影响随配伍的不同而表现不同.研究结果显示,叶酸0.7 mg/kg配伍大豆异黄酮160 mg/kg的干预效果佳;与叶酸或大豆异黄酮的2倍剂量(叶酸1.4 mg/kg、大豆异黄酮320 mg/kg)进行单独干预比较,结果显示配伍干预效果要优于单独干预效果.结论叶酸是预防神经管畸形发生的主要因素,而大豆异黄酮加强了体内抗氧化能力,有可能增强叶酸的保护作用而使神经管畸形的发生率下降,而增强效果的发挥依赖于佳配伍的选择.
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大豆异黄酮对动脉粥样硬化去卵巢大鼠ATP结合盒A1基因表达的影响
目的 探讨不同剂量大豆异黄酮(SI)对动脉粥样硬化去卵巢SD大鼠ATP结合盒A1(ATP binding cassette A1,ABCA1)表达的影响.方法 50只12周龄SPF级雌性SD大鼠,经普通饲料适应喂养1周后,行卵巢切除术.按体重分层随机抽样,选取10只作为基础对照组(A组),全程喂基础饲料;另40只喂高脂饲料,4周后再按血脂水平分层随机分为4组,每组10只,分别为高脂模型组(B组),继续喂高脂饲料;低剂量SI组(高脂饲料+30 mg/kg SI,C组);中剂量SI组(高脂饲料+90 mg/kg SI,D组);高剂量SI组(高脂饲料+270 mg/kg SI,E组).分组后继续喂22周,处死动物,观察主动脉形态学变化,real-time PCR检测主动脉血管壁ABCA1基因的表达,Western blotting测定ABCA1蛋白在肝脏、主动脉血管壁以及小肠组织的表达情况.结果 各组血脂水平:A、B、C、D、E组总胆固醇水平分别为(6.82±0.22)、(15.73±1.51)、(10.77±1.12)、(9.95±1.18)、(9.11±1.12)mmol/L(F=72.882,P<0.01);甘油三酯水平分别为(2.49±0.24)、(0.78±0.13)、(0.39±0.08)、(0.29±0.09)、(0.24±0.09)mmol/L(F=378.515,P<0.01);低密度脂蛋白胆固醇水平分别为(1.29±0.08)、(14.76±1.23)、(8.18±0.80)、(7.85±0.72)、(7.16±0.64)mmol/L(F=320.936,P<0.01);高密度脂蛋白胆固醇水平分别为(1.94±0.18)、(1.04±0.10)、(1.55±0.14)、(1.88±0.17)、(2.11±0.22)mmol/L(F=49.450,P<0.01).各组ABCA1蛋白在小肠、肝脏、血管壁内表达水平:A、B、C、E组ABCA1蛋白在小肠内表达水平(灰度值)为96.577±9.743、5.218±2.048、18.060±5.179、54.725±8.960(F=172.272,P<0.01);在肝脏内表达水平为13.657±2.397、1.361±0.266、7.069±2.264、11.793±2.515(F=37.383,P<0.01);在血管壁中表达水平为6.756±1.310、0.027±0.006、0.035±0.002、7.479±1.520(F=91.999,P<0.01).B组主动脉可见动脉粥样硬化斑块,而饲料中添加SI能有效避免动脉粥样硬化斑块的形成.结论 SI可能是通过降血脂,提高ABCA1表达水平发挥其抗动脉粥样硬化功能.
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绝经妇女补充大豆异黄酮和钙后骨密度的改变及与ER基因Px单倍型的关系
目的 探讨绝经妇女补充大豆异黄酮和钙1年后骨密度(BMD)的改变及与雌激素受体(ER)基因Px单倍型的关系.方法 应用多聚酶链反应.限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测691名汉族45～65岁绝经妇女的ER-α的PvuⅡ和Xba Ⅰ酶切位点多态性,从497名Pvu Ⅱ-Xba Ⅰ单倍体确定者中抽取93名进行为期1年的随机对照干预实验.根据基线时BMD测定结果,将T＜-1.5者纳入干预组(共52名),其余的作为观察组(共29名).将干预组对象随机分为2组:补钙+维生素D(VD)组和补钙+VD+大豆异黄酮组.给予的剂量分别为:钙440 mg/d;VD 100 IU/d;大豆异黄酮100 mg/d,正常观察组不给予任何特殊处理,干预期为12个月.采用双能X线吸收仪(DXEA)测量测定基线和终期腰椎及髋部的BMD.结果 试验结束后,观察组的绝经后妇女,全身、腰椎及股骨颈的BMD较基线时降低,变化率分别为-1.88%,-3.31%,-3.09%.ER-α的Px基因型全身BMD较基线时性降低2.44%,而non-Px基因型则无显著性改变.补钙组和补钙+大豆异黄酮组,全身及股骨颈的BMD都较基线时降低,但组间的变化率差异并无统计学意义;而腰椎、大转子的BMD较基线未有显著性的改变,甚至有略微升高.补钙和补大豆异黄酮对BMD的影响与ER-α的基因型无关.结论 妇女绝经后骨量开始丢失,丢失速率似乎与ER基因Px单倍型有相关性.已出现骨量减少的绝经后妇女补钙1年能降低骨量的丢失速率,但补充大豆异黄酮1年尚未观察到对BMD保护的作用.补钙及大豆异黄酮对BMD的干预效果与ER-α基因多态性无关.
