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HPLC-MS鉴定塔中栽培肉苁蓉药材的17个成分
目的:通过HPLC-MS对新疆塔中荒漠栽培肉苁蓉Cistanche deserticola药材60％甲醇提取物的色谱图进行鉴定.方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(含0.1％的甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温25℃,进样量10 μL.结果:在相同色谱条件下,通过与已分离得到的对照品的保留时间、相对分子质量以及碎片离子进行比较,对新疆塔中荒漠栽培肉苁蓉药材的16个色谱峰中的17个成分进行了准确的鉴定,分别确定为松柏苷,去甲紫丁香苷,紫丁香苷,松果菊苷,肉苁蓉苷A,类叶升麻苷(管花苷A),肉苁蓉苷B,异类叶升麻苷,2'-乙酰基肉苁蓉苷A,肉苁蓉苷C,异肉苁蓉苷C,2'-乙酰基类叶升麻苷,管花苷B,epimeridinoside A,肉苁蓉苷K,肉苁蓉苷J.结论:该研究方法适用于肉苁蓉60％甲醇提取物色谱峰的鉴定,为全面分析该药材的化学成分提供了一定的科学数据.
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荒漠肉苁蓉和管花肉苁蓉的组织结构比较研究
目的:研究荒漠肉苁蓉和管花肉苁蓉的组织结构差异.方法:利用石蜡切片法、徒手切片法及解离组织等方法对两种植物的茎、叶、花等器官的解剖学特征进行比较,显微观察并照相.结果:管花肉苁蓉与荒漠肉苁蓉在内部构造上存在明显差异.结论:两者在形态结构方面都有抗旱的适应性,荒漠肉苁蓉更能适应干旱环境.
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荒漠肉苁蓉变异类型的探讨
目的:通过药材性状和结构以及有效成分含量等方面的比较研究,进行荒漠肉苁蓉中"油苁蓉"作为变异类型的探讨.方法:药材性状和结构直接观察肉苁蓉新鲜及晒干或阴干的表面颜色和质地,以及横切面颜色、质地、中心髓部大小及维管束排列等;高效液相色谱法测定药材有效成分松果菊苷及毛蕊花糖苷的含量;紫外分光光度法测定药材粗多糖含量.结果:"油苁蓉"与一般荒漠肉苁蓉在新鲜茎的颜色、药材表面颜色和质地以及横切面颜色、质地、中心隧部大小及维管束排列存在明显的不同;"油苁蓉"药材松果菊苷含量是一般荒漠肉苁蓉的2.5倍,毛蕊花糖苷含量是3.8倍;多糖得率是1.6倍,多糖含量是2倍.结论:根据药材性状和结构以及有效成分含量的分析,"油苁蓉"和一般肉苁蓉差异明显,"油苁蓉"是荒漠肉苁蓉一种稳定的变异类型,与生态环境条件和地理分布无关.
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药用肉苁蓉的遗传多样性RAPD分析
目的:荒漠肉苁蓉Cistanche deserticola和管花肉苁蓉Cistanche tubulosa群体遗传多样性的研究.方法:对荒漠肉苁蓉2个野生居群和管花肉苁蓉4个野生居群进行RAPD分析,利用POPGENE1.31版软件分析群体的遗传多样性.结果:荒漠肉苁蓉平均多态位点百分率47.37%,2个居群多态位点分别为39.47%和35.53%,平均Nei,s基因多样性为0.135 8,Shannon's多态性信息指数为0.207 2,基因分化系数Gst=0.254 6.管花肉苁蓉平均多态位点百分率27.59%,各居群多态位点百分率从19.54%到25.29%,其中安迪尔居群的高25.29%,平均Nei's基因多样性为0.082 3,Shannon's多态性信息指数为0.125 8,基因分化系数Gst=0.175 5.结论:荒漠肉苁蓉和管花肉苁蓉在居群间均有一定的分化,荒漠肉苁蓉的遗传多样性明显高于管花肉苁蓉,并已明显分化成2个生态型.
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荒漠肉苁蓉花及木质化茎的化学成分定性分析
荒漠肉苁蓉为著名补益类中药肉苁蓉的2种基原植物之一,为寄生植物.一般在其出土前挖取带鳞片的肉质茎作为药用,而出土、开花后的木质化茎和花一般被丢弃.为了探讨这些非传统药用部位的药用价值,该文利用高效液相色谱-离子阱-飞行时间质谱技术(HPLC-IT-TOF-MS)对荒漠肉苁蓉花及木质化茎的化学成分进行深入的定性分析.样品粉末经50％甲醇-水超声提取后,采用Capcell core ADME色谱柱,乙腈-0.1％甲酸水系统梯度洗脱;正/负离子自动多级质谱模式采集高分辨质谱数据;利用对照品推导主要化学类型的质谱裂解规律并指认部分信号,结合对比文献数据以及解析高分辨质谱数据,共对发现的62个信号中的39个进行了结构注释,主要成分包括苯乙醇苷类、环烯醚萜苷类、木质素苷类、糖类等.荒漠肉苁蓉花及木质化茎与肉质茎的化学成分轮廓差异较大,不能等同使用,但其含有较为丰富的木质素和环烯醚萜苷类成分,具有一定的开发利用价值.
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塔中栽培荒漠肉苁蓉中4个新的顺式苯乙醇苷类成分
对新疆塔中栽培荒漠肉苁蓉Cistanche deserticola干燥肉质茎的化学成分进行研究.采用正相硅胶、凝胶Sephadex LH-20、MCI、ODS以及半制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,运用NMR,MS等波谱方法以及结合文献数据对分离得到的化合物进行结构鉴定.从塔中栽培荒漠肉苁蓉干燥肉质茎85％乙醇提取物中分离得到4个化合物,其结构鉴定为顺式管花苷B(1)、顺式肉苁蓉苷K(2)、顺式肉苁蓉苷J(3)、顺式异肉苁蓉苷C(4).化合物1～4为新的顺式苯乙醇苷类化合物,该文为首次报道4个新化合物的1 H-NMR和13C-NMR波谱数据,为全面分析本种栽培品的化学成分提供了一定的科学数据.
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塔中栽培荒漠肉苁蓉中的木脂素类成分
对新疆塔中栽培荒漠肉苁蓉Cistanche deserticola干燥肉质茎的化学成分进行研究.采用多种色谱技术(正相硅胶、凝胶Sephadex LH-20,MCI,ODS以及半制备高效液相色谱等)进行分离纯化,运用NMR、MS等波谱方法以及结合文献数据对分离得到的化合物进行结构鉴定.结果从塔中栽培荒漠肉苁蓉干燥肉质茎85％乙醇提取物中分离得到11个木脂素类化合物,其结构分别鉴定为:(+)-丁香脂素-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1),(+)-isoeucommin A (2),(+)-麦奥迪脂素4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3),(+)-松脂素单甲基醚-β-D-葡萄糖苷(4),落叶松脂醇-4’-O-β-D-葡萄糖苷(5),落叶松脂醇4-Oβ-D-葡萄糖苷(6),conicaoside(7),dehydrodiconiferyl alcohol 4-O-β-D-glucopyranoside(8),dehydrodiconiferyl alcohol γ’-O-β-D-glucoside(9),橙皮素A(10),阿拉善苷A(11).其中化合物1,3～7,10,11为首次从该属植物中分离得到,化合物2,8,9为首次从该植物中分离得到.
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塔中栽培荒漠肉苁蓉化学成分研究
对新疆塔中栽培荒漠肉苁蓉Cistanche deserticolaY.C.Ma干燥肉质茎的化学成分进行研究.采用正相硅胶、凝胶Sephadex LH-20,MCI,ODS以及半制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,运用NMR,MS等波谱方法以及理化性质结合文献数据对分离得到的化合物进行结构鉴定.结果从塔中栽培荒漠肉苁蓉干燥肉质茎85％乙醇提取物中分离得到17个化合物,其结构鉴定为salsaside B(1)、紫丁香苷(2)、去甲基紫丁香苷(3)、松柏苷(4)、(2E,6E)-3,7-dimethyl-8-hydroxyoctadien-1-O-β-D-glucoside(5)、(+)-丁香脂素(6)、2S,3S,4S-trihydroxy-pentanoic acid (7)、panaxytriol(8)、β-谷甾醇-3-O哥D-吡喃木糖苷(9)、草夹竹桃苷(10)、3-methyl-but-2-en-1-yl-β-D-glucopyranoside(11)、苄基葡萄糖苷(12)、4-羟基苄基-β-D-葡萄糖苷(13)、烟酰胺(14)、对羟基苯甲酸(15)、对羟基苯乙醇(16)、半乳糖醇(17).化合物3,6～13为首次从该属植物中分离得到,化合物1,4,5为首次从该种植物中分离得到.
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基于ITS序列位点特异性PCR的肉苁蓉与其混伪品的鉴别研究
研究荒漠肉苁蓉、锁阳和黄花列当之间的DNA分子鉴别方法,采集不同产地的30份荒漠肉苁蓉,13份锁阳以及8份黄花列当,所有样品进行总DNA提取,通过对其ITS片段进行扩增,测序.再进行同源比对后根据其变异位点设计特异性鉴别引物,并对位点特异性PCR的反应条件进行了优化;另外,对位点特异性PCR法与DNA序列分析法的鉴别进行了比较.结果显示,该研究设计的位点特异引物在同一PCR反应中,荒漠肉苁蓉能扩增出331 bp的条带,而混伪品锁阳和黄花列当不能扩增出条带,从而实现了正伪品的鉴别.该文通过位点特异PCR的方法可以实现荒漠肉苁蓉与混伪品锁阳、黄花列当的快速、准确鉴别.
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新疆野生荒漠肉苁蓉粗多糖皮下免疫对流感病毒疫苗的免疫效果
目的 探讨新疆野生荒漠肉苁蓉粗多糖(wild Cistanche deserticola Y.C.Ma crude poly-saccharides,WCDCP)配伍流感病毒疫苗(influenza virus vaccine,IVV)的免疫增强作用.方法 将低、中、高3个剂量的WCDCP分别与0.5μg的IVV配伍,皮下免疫ICR小鼠,以0.9%NaCl为空白对照组,单独免疫0.5μg的IVV为无佐剂对照组,铝佐剂(Alum)为阳性对照组.免疫2次,初免后14 d加强免疫,观察小鼠生长状况.间接ELISA法检测IgG抗体滴度及抗体分型IgG1和IgG2a,MTT法检测淋巴细胞增殖,流式细胞术检测CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD44+和CD8+CD44+T细胞的表达水平.结果 WCDCP对各组小鼠生长状况无显著影响(P>0.05);各剂量组均可以提高IgG抗体水平(P<0.05),且中剂量组为优剂量组,与铝佐剂组相当;可以提高IgG1和IgG2a的抗体水平(P<0.05);增强淋巴细胞增殖(P<0.05);显著提高CD3+CD4+和CD3+CD8+T细胞的表达水平(P<0.01);显著提高CD4+CD44+和CD8+CD44+T细胞的表达水平(P<0.01).结论 WCDCP可以显著提高流感病毒疫苗的体液免疫应答和细胞免疫应答,尤其可以提高T细胞的免疫水平,且具有一定的安全性.
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新疆野生与栽培荒漠肉苁蓉粗多糖免疫增强活性比较
目的 比较新疆野生与栽培荒漠肉苁蓉粗多糖(wild/cultivate Cistanehe deserticola Po-lysaccharids,WCDPS/CCDPS)的免疫增强效果.方法 不同剂量(低、中、高)的WCDPS和CCDPS与卵清蛋白(ovalbumin,OVA)皮下共免疫 ICR小鼠,ELISA法检测 OVA特异性抗体 IgG及抗体亚型IgG1和IgG2a,MTT法检测OVA特异性的淋巴细胞增殖活性,流式细胞术检测CD4+T细胞和CD8+T细胞的表达水平.结果 WCDPS和CCDPS均能够显著提高OVA特异性抗体IgG及抗体分型IgG1和IgG2a的表达水平(P<0.05),且WCDPS和CCDPS相同剂量之间差异无统计学意义(P>0.05);WCDPS和CCDPS能显著促进OVA特异性的淋巴细胞增殖,且相同剂量之间差异无统计学意义(P>0.05);WCDPS和CCDPS也能显著提高CD4+T和CD8+T细胞的百分含量(P<0.05),且相同剂量之间差异无统计学意义(P>0.05),WCDPS和CCDPS对免疫后的小鼠体重没有影响.结论 WCDSP和CCDPS均能显著增强OVA特异性的体液和细胞免疫应答,两者之间差异无统计学意义,并具有较好的安全性.
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荒漠肉苁蓉的药食两用历史述要
笔者对荒漠肉苁蓉的传统采制、质量认定、炮制方法、食用方法等方面进行详细的阐述.荒漠肉苁蓉具有悠久的药食两用历史,在产地加工方面,古代多阴干,现代栽培基地多晒干或烘干;药材以内质、条粗长、肥大、棕褐色、柔嫩滋润者质量为佳;饮片炮制历代炮制辅料为酒,包括酒蒸或酒炖等.
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荒漠肉苁蓉石油醚提取物化学成分及其细胞周期抑制活性
肉苁蓉Cistanche deserticola Y.C.Ma又名荒漠肉苁蓉,为列当科肉苁蓉属植物,其带鳞叶的干燥肉质茎作为中药肉苁蓉使用,是<中华人民共和国药典>收载的正品.肉苁蓉味甘、性温,具有"补肾阴益精血,润肠通便"之功效,可用于治疗男子阳痿、女子不孕、腰膝冷痛、血枯便秘等[1].
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肉苁蓉组织培养研究进展及应用前景
肉苁蓉由于采挖过度而濒临灭绝,组织培养是合理利用肉苁蓉,防止其资源枯竭的有效方法.组织培养研究较多的是荒漠肉苁蓉和盐生肉苁蓉,分别对这两种肉苁蓉愈伤组织的诱导、培养基的优化和药用成分的诱导条件等方面的研究进行综述,介绍了应用组织培养生产肉苁蓉药用成分的经济价值和生态效益,以及利用组织培养进行肉苁蓉快速繁殖的实践意义,浅析了肉苁蓉大规模细胞培养的产业化前景.
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采籽前后荒漠肉苁蓉不同部位中有效成分含量测定
目的:考察采籽前后荒漠肉苁蓉不同部位中松果菊苷、毛蕊花糖苷含量.方法:采用RP-HPLC 法,Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)；流动相:甲醇(A)-0.1％甲酸水溶液(B),梯度洗脱:0～37min,26.5％A; 37～40min,26.5％～29.5％A; 40～65min,29.5％A;检测波长:334nm;流速:1mL/min;柱温:35℃.结果:松果菊苷在0.0284～0.6320μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为101.56％,RSD为1.82％(n=6),毛蕊花糖苷在0.0320～0.7100 μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为98.22％,RSD为0.97％(n=6).采籽前随机抽取的7根药材,其头部及根部中松果菊苷、毛蕊花糖苷总量均大于0.30％,符合《中华人民共和国药典》规定,其中2根药材头部两成分总量大于根部；采籽后药材中只有1号根部两成分总量符合《中华人民共和国药典》规定,其余均不符合.结论:采籽后药材中有效成分松果菊苷、毛蕊花糖苷总量明显低于采籽前,药材的头部与根部存在较大差别,但其个体差异较大,未显示一致性.
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定性分析不同产地荒漠肉苁蓉苯乙醇苷类及多糖类成分
目的:UPLC分析不同产地荒漠肉苁蓉苯乙醇苷类成分,MALLS测定肉苁蓉粗多糖分子量分布,离子色谱测定单糖组成,全面比较不同产地荒漠肉苁蓉内在品质的差异,为荒漠肉苁蓉的综合评价提供方法依据和数据参考.方法:UPLC色谱条件:色谱柱:Waters Acquity UPLC(R) BEH C18(2.1mm×100 mm,1.7 μm);流动相:乙腈(A)-0.1％甲酸水(B),梯度洗脱条件:(～8 min,2％A;8～16 min,12％A;16～19 min,16％A;19～22 min,16％～22％A;22～25 min,19％ A;25～30 min,19％～25％ A;30～32 min,25％ A;32～35 min,25％～30％ A;35～38 min,30％～40％ A;38～40 min,40％～50％A.离子色谱分离条件:色谱柱:Carbo PacTMPA20(3mm×150 mm)Analytical;梯度洗脱条件:A为水,B为250 mmol·L-1的氢氧化钠,C为1 mol·L-1的醋酸钠;0～20 min,94％A,6％B,0C;20～20.1 min,89％A,6％ B,5％ C;20.1～35 min,74％ A,6％ B,20％ C;35.1～45 min,20％ A,80％ B,0 C;45.1～55 min,94％ A,6％ B,0 C.MALLS测定条件:色谱柱:TSK Gel G4000PWxl;流动相:0.1 mol·L-1氯化钠溶液;流速:0.5 mg·min-1;进样量:200μL;样品浓度:1 mg·mL-1.结果:通过对不同产地荒漠肉苁蓉UPLC图峰面积进行积分,得到5种苯乙醇苷类峰面积,并进行相对比较;MALLS检测得到不同产地荒漠肉苁蓉粗多糖的分子量及分布,同时离子色谱法检测到其均有7种单糖组成.结论:UPLC测定结果显示,不同产地荒漠肉苁蓉苯乙醇苷类成分相对含量差别较大,人工栽培肉苁蓉在秋季采收时含量较高;MALLS检测结果显示,不同产地荒漠肉苁蓉的多糖分子量大小、分布及单糖组成差异明显.
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荒漠肉苁蓉化学成分的研究
目的研究荒漠肉苁蓉的化学成分,为阐明其有效成分打下基础.方法采用硅胶柱、Sephadex LH-20柱及高效液相色谱分离化学成分,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构.结果分离得到8种化合物,分别是6-去氧梓醇(1),巴尔蒂苷(2),格鲁苷(3),红景天苷(4),丁香苷(5),次黄嘌呤核苷(6),2'-脱氧腺苷(7),2'-甲氧腺苷(8).结论化合物6、7、8系首次从此种植物中分离得到.
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肉苁蓉药材中6种苯乙醇苷类成分含量的一测多评法测定
目的 建立肉苁蓉一测多评含量测定方法,同时测定管花肉苁蓉和荒漠肉苁蓉药材中6种苯乙醇苷类成分.方法 采用HPLC-DAD,以松果菊苷为参照物峰,建立其与毛蕊花糖苷、肉苁蓉苷C、肉苁蓉苷A、2-乙酰毛蕊花糖苷、6-乙酰毛蕊花糖苷的相对校正因子,分别以外标法和一测多评法计算6种苯乙醇苷类成分的含量,比较计算值和外标法实测值之间的差异.结果 经过方法 学考察和样品测定,肉苁蓉中各成分相对松果菊苷的校正因子分别为毛蕊花糖苷/k松果菊苷=1.008,f肉苁蓉苷C/f松果菊苷=1.871,f肉苁蓉苷A/f松果菊苷=0.809,f2-乙酰毛蕊花糖苷/f松果菊苷=0.611,f-乙酰毛蕊花糖苷/f松果菊苷=0.603.在不同实验条件下相对校正因子重复性好,与外标法相比无显著性差异.结论 该方法 准确、简便,重复性好,能同时对肉苁蓉药材中多种有效成分进行定性定量分析,为肉苁蓉药材的质量控制提供实验方法.
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神奇的沙漠植物
肉苁蓉是一种寄生植物,本身无根,也无叶绿体,不能进行光合作用,主要靠吸取寄主植物的养分生活.我国共有肉苁蓉属植物4种1个变种.不同的种类,其寄生植物不同,生长在内蒙古西部和新疆北部的肉苁蓉为荒漠肉苁蓉,其寄生植物为梭梭.
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HPLC测定肉苁蓉中的尿囊素
目的 采用HPLC法测定不同品种肉苁蓉中的尿囊素.方法 色谱柱为Hypersil ODS-2柱(250 mm × 4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-7.5%二氧六环水溶液(1;99),流速0.5 ml·min-1,柱温25℃,检测波长224 nm.结果 尿囊素进样量0.648～6.480 μg与峰面积的线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为100.56%,RSD=2.37%(n=5).结论 所建方法 操作简便快速,灵敏准确,可用于肉苁蓉药材的的质量控制.
